免疫组化法与RNAscope原位杂交法检测宫颈鳞状细胞癌组织中PD⁃1和PD⁃L1表达一致性研究

目的研究免疫组化法与RNAscope原位杂交法检测宫颈鳞状细胞癌组织中程序性死亡分子1(PD⁃1)和程序性死亡分子1配体(PD⁃L1)表达一致性。方法回顾性分析2019年3月至2021年2月被江阴市中医院病理科诊断为宫颈鳞状细胞癌的80例患者石蜡组织标本。采用免疫组化法与RNAscope原位杂交法测定宫颈鳞状细胞癌组织中PD⁃1和PD⁃L1表达情况,分析此2种方法检测癌组织中PD⁃1和PD⁃L1表达一致性。分析RNAscope原位杂交法检测癌组织中PD⁃1mRNA、PD⁃L1mRNA表达与其临床病理特征的关系。随访1年,记录所有患者总生存时间。结果免疫组化法结果显示,80例宫颈鳞状细胞癌组织标本中PD⁃1蛋白阳性52例,阳性率为65.00%;PD⁃L1蛋白阳性60例,阳性率为75.00%。RNAscope原位杂交法结果显示,80例宫颈鳞状细胞癌组织标本中PD⁃1蛋白阳性49例,阳性率为61.25%;PD⁃L1蛋白阳性57例,阳性率为71.25%。免疫组化法与RNAscope原位杂交法检测PD⁃1表达一致性良好(Kappa值=0.847,P>0.05);免疫组化法与RNA⁃scope原位杂交法检测PD⁃L1表达一致性良好(Kappa值=0.861,P>0.05)。PD⁃1mRNA、PD⁃L1mRNA表达与患者年龄、脉管侵犯、淋巴结转移、神经侵犯、肿瘤分期(TNM)、肿瘤直径无关(P>0.05)。随访1年,PD⁃1mRNA阳性表达与PD⁃1mRNA阴性表达的总生存曲线比较差异无统计学意义(P>0.05);PD⁃L1mRNA阳性表达与PD⁃L1mRNA阴性表达的总生存曲线比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论免疫组化法与RNAscope原位杂交法检测宫颈鳞状细胞癌组织中PD⁃1和PD⁃L1表达一致性较好,且PD⁃1mRNA、PD⁃L1mRNA表达与患者总生存时间无关。

免疫组化法用于肿瘤患者病理诊断及对阳性率的影响

目的分析免疫组化法用于肿瘤患者病理诊断及对阳性率的影响。方法选取2018年12月至2020年12月本院收治的120例肿瘤患者作为研究对象,按照随机数字表法分为两组,每组60例。参照组采用常规活检穿刺诊断,观察组采用免疫组化法诊断,比较两组诊断阳性率、诊断体验评分。结果观察组阳性率(96.67%)高于参照组(83.33%),漏诊率(11.67%)低于参照组(1.67%),差异有统计学意义(P<0.05);两组误诊率比较差异无统计学意义。观察组信服力指数高于参照组,抵触评分、恐惧心理评分均低于参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论免疫组化法可提高肿瘤患者诊断阳性率,减轻抵触、恐惧等消极心理,提高信服力,具有较高临床应用价值。

利用组织微阵列结合免疫组化法研究PTEN、P16、P21、P53在肺癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的:肺癌的发生与PTEN、p16、p21和p53突变或失表达有关。利用组织微阵列技术研究PTEN、P16、P21、P53在肺癌中表达报道较少见。本研究目的是检测肺癌中PTEN、P16、P21和P53蛋白表达及其与肺癌侵袭、转移、临床病理特征的关系。方法:利用组织微阵列技术结合免疫组化法检测PTEN、P16、P21和P53蛋白在100例肺癌组织和相应的癌旁组织中的表达。结果:肺癌组织中PTEN、P16、P21和P53蛋白的阳性率分别为31%(31/100)、38%(38/100)、42%(42/100)、53%(53/100),其癌旁组织中的阳性率分别为85%(85/100)、75%(75/100)、80%(80/100)、23%(23/100)。肺癌组织中PTEN、P16和P21蛋白阳性率显著低于其相应癌旁组织,而P53蛋白在癌组织中呈高表达,但癌旁组织呈低表达(P<0.05,P<0.01)。肺癌组织中PTEN与P21两者呈共同低表达(P<0.05)。PTEN、P16、P21和P53的表达与肺癌临床分期以及肺鳞癌和腺癌的病理分级有关(P<0.05,P<0.01)。有淋巴结转移者PTEN、P16和P21呈低表达而P53高表达(P<0.05,P<0.01)。结论:肺癌中存在PTEN、P16、P21蛋白的共同低表达和突变型P53蛋白高表达;PTEN、P16和P21低表达和突变型P53蛋白高表达与肺癌侵袭、转移有关。

间接免疫组化法检测鸭疫里默氏杆菌感染和抗原定位

应用鸭源血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)作为抗原,免疫兔制备兔抗RA的IgG,建立了检测雏鸭感染鸭疫里默氏杆菌的间接免疫酶组织化学法。该法检测大肠杆菌(O1、O8、O79、O138)、鸭沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌(5∶A)感染发病死亡雏鸭组织,不出现阳性反应,而检测RA感染发病死亡雏鸭组织出现特异性阳性反应;检测RA人工发病死亡雏鸭,可在心脏、肝脏、肺脏、肾脏、十二指肠、盲肠、直肠、脾脏、法氏囊、胸腺、胰脏、脑和腺胃检测到RA抗原,RA抗原分布于细胞浆、组织间隙和血液;检测RA人工感染病例与RA肝脏分离符合率为100%,检测临床可疑病例的血清1型RA的阳性率(92.96%)比细菌分离率(75.12%)高。该法具有特异、直观和敏感的特点,可用于雏鸭RA人工感染和临床感染的诊断、检测及RA抗原定位和RA致病机理的研究。

钩端螺旋体赖株豚鼠感染模型的建立和免疫组化法对钩体抗原的检测

目的 建立钩端螺旋体赖型赖株感染豚鼠的动物模型 ,并用免疫组化法检测钩端螺旋体抗原在组织中的分布。方法 不同剂量钩端螺旋体赖株通过腹腔内注射感染豚鼠 ,观察豚鼠发病情况 ,及时解剖死亡豚鼠 ,HE染色观察肝、肾、肺等器官病变 ,EnVision二步法染色检测肝、肾、肺组织中钩体抗原。结果 感染后豚鼠发病 ,死亡与感染的钩端螺旋体剂量明显相关 ,大体标本及HE染色光镜下均出现典型钩体病病变。免疫组化显示在肝、肾、肺组织中均存在钩体抗原。结论 通过钩端螺旋体赖株腹腔注射的方法成功地建立了豚鼠动物模型。应用EnVision二步法染色 ,可有效显示组织中的钩体抗原。为进一步研究钩端螺旋体发病机制奠定了基础。

免疫组化法检测NSCLC患者EGFR突变的相关研究

背景与目的存在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者对EGFR酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)治疗有良好反应。与检测EGFR突变的分子水平手段相比,免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)价格低廉,操作简便、迅速,易开展。本研究旨在探索免疫组化法检测EGFR突变的准确性。方法选取97例NSCLC患者的手术或组织活检标本行EGFR特异性抗体的免疫组化染色,分析染色阳性标本的临床病理特征,并继续接受液相芯片检测验证是否存在突变;新收集40例被证实为EGFR突变的手术标本接受免疫组化染色,计算免疫组化法检出突变灵敏度。结果97例NSCLC标本,17例染色阳性,染色阳性标本好发于女性、腺癌、不吸烟患者中,其染色阳性标本中,76.9%实际存在突变。40例EGFR突变标本中,免疫组化法检出突变的灵敏度为40%。结论免疫组化法染色评分为强阳性的标本结果准确,但该方法灵敏度不甚理想,不同研究者所得结果差异较大,临床推广是否可行仍有待进一步探讨。

免疫组化法检测美国青蛙组织中的蛙虹彩病毒

分不同时间 ,收集经人工感染了蛙病毒的样蛙 ,取其心、肺、肾、肠、脾、肝六种组织 ,并通过免疫组化方法进行检测。结果分别在感染了病毒 3d、9d、1 1d后的幼蛙这六种组织中 ,由表及里观察到了深色的阳性信号 ,从而测定了病毒在入侵组织中的存在部位。其中 ,肺和肠组织中阳性信号最强 ,呈灶性分布 ,其余四种组织中的阳性信号则呈散在分布。在未注射病毒的幼蛙阴性对照组六种组织中没有检测到阳性信号。

免疫组化法鉴别感觉与运动神经纤维

实验用新西兰大白兔6只,取脊神经根,神经干、肌支和皮支,即刻作冰冻切片。切片与抗体液孵育20min;然后再与酶联A蛋白液孵育20min;最后将切片与二氨基联苯胺成色反应5min。光镜下观察,感觉神经纤维呈深染的阳性反应,而运动神经纤维和其它神经组织以及对照组均为阴性反应。结果表明,免疫染色技术可准确、快速地显示神经干中的感觉神经纤维。

免疫组化法检测非小细胞肺癌EGFR突变的进展

近些年来,人们越来越认识到,存在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者对靶向药物EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)的治疗有良好反应。目前,检测EGFR突变应用最多且较为可靠的是以DNA分子为基础的检测(如DNA测序)方法,但此法操作繁琐,耗时长,花费高,对样本要求严格。相比之下,免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)则充分弥补了上述缺陷,可作为EGFR突变筛查的辅助手段。但影响其结果的因素较多,如不同的免疫组化染色方法、不同抗原修复液的选择及不同的结果评判标准等,因此此法尚未广泛应用于临床,仅处于研究阶段。本文通过检索不同研究者应用免疫组化法对NSCLC患者进行EGFR突变检测的相关文献,进一步讨论如何合理应用免疫组化法检测EGFR突变可发挥其临床应用的最大价值。

免疫组化法和RT-PCR法检测胃癌淋巴结微转移

目的 :应用免疫组化方法和RT PCR方法检测常规病理检查淋巴结阴性胃癌之淋巴结微转移 ,比较两种检测方法的敏感性同时探讨检测胃癌淋巴结微转移的临床意义。方法 :采用CEA单克隆抗体免疫组织化学方法和CEAmRNART PCR方法分别检测 11例常规病理检查淋巴结阴性胃癌的 2 0 5枚淋巴结。结果 :CEA单克隆抗体免疫组织化学法检出 18枚 (8.8% )微转移淋巴结 ,而CEAmRNART PCR法共检出 46枚 (2 2 .4% )微转移淋巴结 ,两者比较差异显著 (P <0 .0 1)。 11例患者中有 6例存在淋巴结微转移 ,此 6例患者的重新TNM分期均有所上升。随访中发现有 2例微转移阳性患者分别于根治术后第 6、9个月出现复发。结论 :应用CEA单克隆抗体免疫组织化学方法或CEAmRNART PCR法可以检测出常规病理检查遗漏的胃癌淋巴结微转移灶。而且RT PCR法检测胃癌淋巴结微转移较免疫组织化学法更为敏感。检测常规病理检查淋巴结阴性胃癌的淋巴结微转移 ,有助于临床准确分期 ,判断预后及指导治疗。

用酶标抗体免疫组化法测定性交后阴道内容物中精子的ABO血型

应用间接酶标抗体免疫组化法测出了53例新鲜精液、5例陈旧精斑及40例阴道分泌液中的精子与阴道脱落上皮细胞的ABO血型,30例精子与不同血型分泌型阴道分泌液孵育,未发现精子吸附阴道液中血型物质的现象,同时发现人类睾丸曲精细管中部份生精细胞、精子细胞,精子;直细精管部份上皮细胞、精液、精子;睾丸网大部份上皮细胞及副睾管中的精液与精子均含ABH抗原,故认为精子上的ABH抗原主要是精子固有抗原,13例性交后阴道内容物中精子的ABO型测定结果:7例与供者血型吻合,6例不吻合。6例中5例从O型精子中测出了女方分泌型阴道分泌液中的A或AB物质,1例B型精子未测出B及H抗原,文中对这种现象进行了讨论。

抗ssDNA单抗免疫组化法用于检测肿瘤细胞株对化疗药物敏感性的研究

目的 :应用本室制备的抗单链DNA (ssDNA)单克隆抗体(mAb) ,检测多种化疗药物对不同肿瘤细胞株凋亡的诱导作用 ,并根据凋亡率判断肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。方法 :用血浆峰值浓度 (PPC)的 9种化疗药物 ,分别诱导肿瘤细胞株K5 6 2和Hep 2的凋亡。用抗ssDNAmAb免疫组化染色法 ,检测肿瘤细胞株的凋亡并计算调亡率。结果 :以抗ssDNAmAb建立的检测细胞凋亡的免疫组化法 ,能够区分凋亡细胞和非凋亡细胞。该法检测证明 ,化疗药物可诱导敏感肿瘤细胞株凋亡 ,但不同化疗药物诱导同一肿瘤细胞株或不同肿瘤细胞株凋亡的程度不同。结论 :抗ssDNAmAb免疫组化法 ,可用于检测肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。

M_(G7)免疫组化法早期诊断胃癌的意义

对273例胃粘膜活检标本行单克隆抗体(McAb)M_(G7)PAP法免疫组化染色,部分标本同时行免疫电镜及粘液组化染色。结果:76例胃癌中69例M_(G7)阳性(90.8％),96例良性病伴不典型增生和/或肠化中17例M_(G7)阳性(17.7％),良性病中Ⅱb型肠化的M_(G7)阳性率(53.3％)高于Ⅱa型肠化(15.4％)。免疫电镜显示M_(G7)阳性物质分布于癌细胞膜、胞浆及个别良性病细胞微绒毛上。1年内随访7例良性病M_(G7)阳性者,2例发展为高度疑癌。本文结果提示:对胃癌癌前病变行McAb M_(G7)免疫组化染色,有助于筛选高危人群。最终可能发现早期胃癌。

同位素标记探针原位杂交与免疫组化法结合——在肝石蜡切片上同时检测HBV-DNA和HBsAg

原位分子杂交法是近年来发展较快的又一新技术,已被广泛地应用于检测细胞或组织切片中病毒基因和肿瘤基因.1984年Blum等首次报道了把原位杂交技术与免疫组织化学方法相结合应用~3H标记探针在肝石蜡切片上同时检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)和乙型肝炎核心抗原(NBcAg).从而使在同一组织切片上观察病毒及其表达产物的定位和分布关系成为可能.目前尚未见到其它类似的报道.

用混合切片的免疫组化法直接筛选抗人结肠癌细胞的McAb

本文报道用混合切片的免疫组化法直接筛选抗人结肠癌细胞的McAb。结果表明,本法在一个切片上可同时观察到肿瘤及正常两类性质不同组织的抗原与McAb的反应性。单次即可筛选出只与肿瘤反应而不与正常组织反应的McAb。这对尽早决定被检杂交瘤细胞的取舍颇为重要。而且此结果的阴、阳性明确,易于判定和准确可靠,既省力、省物、省时。本法不仅可以用于肿瘤McAb的筛选,而且在一般的免疫组化实验中也有实际应用的参考价值。

胶体金-酶联雌二醇法、酶联雌二醇法和单克隆抗体免疫组化法的比较

目的 :进一步验证作者自行设计的胶体金 -辣根过氧化物酶 -雌二醇 (CG- HRP- E2 )标记组织内雌激素受体技术的可靠性和准确性。方法 :采用 CG- HRP- E2 与酶联雌二醇 (E2 - HRP)法、单克隆抗体免疫组化法 ,通过电子显微镜在细胞超微结构水平上研究了子宫内膜组织内的雌激素受体。结果 :3种方法标记的雌激素受体主要分布在细胞核内 ,少部分分布在胞质中 ,其结果完全是一致的。

免疫组化法和qPCR技术检测FBP1在结直肠腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-bisphosphatase 1,FBP1)基因在结直肠腺癌的表达水平及其与临床病理特征的联系。方法:q PCR技术检测川北医学院附属医院2014年9月至2016年2月新鲜结直肠腺癌组织及癌旁正常组织46例中FBP1基因的表达水平。免疫组化方法检测川北医学院附属医院2015年7月至2016年6月结直肠腺癌及癌旁对照组织的蜡块标本30例中FBP1的表达及分布情况。结果:q PCR技术检测结果表明,FBP1基因在结直肠腺癌组织中的表达水平低于在癌旁正常组织中的表达水平(t=2.934,P=0.006);FBP1基因在结直肠腺癌组织中的表达水平随着结直肠腺癌肿瘤的恶性程度的增加(F=13.267,P=0.000)、Duke’s分期的增加(F=15.864,P=0.000)、远处淋巴结的转移(t=14.285,P=0.000)而降低;FBP1基因在男性患者的结直肠腺癌组织中的表达水平高于其在女性患者的表达水平,但差异无统计学意义(t=1.294,P=0.165)。免疫组化结果显示FBP1在结直肠腺癌组织中低表达甚至缺失,而在癌旁正常组织中高表达,二者差异具有统计学意义(χ~2=19.461,P=0.000)。结论:FBP1基因及蛋白质的低表达可能在结直肠腺癌的发生发展中有着重要的作用,是其潜在的治疗靶标。

免疫组化法检测死胎肾脏组织中HBcAg表达的初步探讨

目的 观察乙型肝炎病毒通过产妇传播在胎儿肾脏组织中表达的情况。方法 采集 40例乙型肝炎产妇产下的死胎 ,常规尸检 ,取肾脏组织 ,免疫组化法检测HBcAg ,回访产妇产前静脉血HBV的检测结果 ;取百分率行u检验。结果 HBcAg阳性颗粒在死胎的肾实质细胞 (近、远曲小管上皮细胞和肾血管球毛细血管内皮细胞 ,球内、外系膜细胞 ,球旁细胞 ,足细胞 )浆 ,肾脏血管中点、灶状分布 ,肾实质细胞核不着色。HBV呈单项阳性、(HBsAg +、HBeAb +、HB cAb +)、(HBsAg+、HBeAg+、HBcAb +)的产妇分娩的死胎肾脏组织中的HBcAg阳性率比较 ,差异不显著 (P >0 .0 5)。结论 死胎肾脏组织中HBcAg阳性率与孕妇HBV静脉中HBV标志无关 ;