不同运动强度与骨关节炎发病风险的效应分析

背景:越来越多的证据表明不同运动强度与骨关节炎风险之间存在关联,但这可能受到混杂和反向因果关系的影响,结论尚未统一。目的:应用孟德尔随机化探索不同运动强度与骨关节炎的因果关联。方法:选取与不同运动强度相关联的全基因组关联研究数据,以阈值P<5×10-8筛选工具变量,采用孟德尔随机化5种分析方法评估暴露与结局风险的因果关系,以逆方差加权法作为主要分析方法。使用选定的工具变量来评估不同运动强度与骨关节炎的因果关联,并进行敏感性分析与反向孟德尔随机化分析。结果与结论:①逆方差加权法分析结果显示,低强度运动对膝骨关节炎的保护效应显著(OR=0.14,95%CI:0.06-0.32,P<0.001),久坐行为(例如电视观看)是膝骨关节炎和髋骨关节炎的危险因素(OR=2.24,95%CI:1.74-2.88,P<0.001;OR=1.34,95%CI:1.01-1.78,P=0.04)。对于骨关节炎与不同运动强度的反向孟德尔随机化分析发现,骨关节炎与低强度运动呈负相关性,与电视观看呈正相关。②分析结果显示,不同运动强度与骨关节炎风险存在双向因果关系。

免疫细胞与膝骨关节炎之间因果作用:一项两样本双向孟德尔随机化分析

背景:膝骨关节炎是一种常见的关节软骨及周围组织损伤的慢性炎症性疾病,而免疫细胞在膝骨关节炎免疫炎症反应中起到重要作用,但其中的具体机制仍有待深入研究。目的:采用孟德尔随机化方法来评估731种免疫细胞表型与膝骨关节炎风险之间的潜在因果关系。方法:使用全基因组关联分析(GWAS)目录中公开获取731种免疫细胞表型的全基因组关联分析统计数据(从GCST0001391到GCST0002121)和IEUGWAS数据库中膝骨关节炎的全基因组关联分析数据(ebi-a-GCST007090)。采用逆方差加权法、MR-Egger回归法、加权中位数法、加权模型法和简单模型法来研究免疫细胞与膝骨关节炎之间的因果关系。敏感性分析用于检验孟德尔随机化分析结果是否可靠,然后以同样方法进行反向孟德尔随机化分析。结果与结论:①正向分析结果表明,共有4种免疫细胞表型与膝骨关节炎有显著的因果关系(FDR<0.20),其中B细胞中的CD27 on CD24+CD27+(OR=1.026,P=0.00026,Pfdr=0.18)、髓系细胞中的CD33 on CD33dim HLA DR-(OR=1.014,P=0.00050,Pfdr=0.18)以及Treg细胞中的CD45RA+CD28-CD8br%CD8br(OR=1.001,P=0.00078,Pfdr=0.18)与膝骨关节炎风险呈直接的正向因果关联;单核细胞中PDL-1 on monocyte(OR=0.952,P=0.00098,Pfdr=0.18)与膝骨关节炎风险呈直接的负向因果关联。②反向分析结果表明,当膝骨关节炎作为暴露数据时,与731种免疫细胞表型均不具有显著因果关系(FDR<0.20)。③敏感性分析结果显示:双向孟德尔随机化的Cochran’s Q检验和MR-Egger回归法结果P值均大于0.05,表明免疫细胞表型与膝骨关节炎之间的因果效应分析不存在显著的异质性和多效性。④上述结果证实,CD27 on CD24+CD27+,CD33 on CD33dim HLA DR-,CD45RA+CD28-CD8br%CD8br以及PDL-1 on monocyte免疫细胞表型与膝骨关节炎之间可能具有较为显著的潜在因果关系,这为研究膝骨关节炎的生物学机制及探索膝骨关节炎的早期防治提供有价值的线索,也为干预性药物的开发提供了新的方向。

透骨消痛胶囊异病同治关节炎:网络药理学、分子对接及分子动力学模拟分析

背景:课题组前期研究发现透骨消痛胶囊在临床上不仅可用于治疗骨关节炎,对类风湿性关节炎及痛风性关节炎也有较好的疗效,但目前对其“异病同治”3种骨关节疾病的具体作用机制尚不清楚。目的:通过整合网络药理学、分子对接技术及分子动力学模拟探讨透骨消痛胶囊“异病同治”骨关节炎、类风湿性关节炎及痛风性关节炎的作用及机制。方法:通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)、Swiss Target Prediction数据库检索透骨消痛胶囊活性化学成分及其对应的靶点;借助GeneCards和OMIM数据库获得骨关节炎、类风湿性关节炎及痛风性关节炎的疾病基因;使用Cytoscape3.7.2软件构建药物-成分-疾病-靶点网络图及蛋白互作网络,利用Daivd数据库进行GO分析和KEGG通路富集分析;使用CB-DOCK2网站进行分子对接模拟,并使用GROMACS2020.6软件进行分子动力学模拟。结果与结论:(1)筛选出透骨消痛胶囊活性成分50个,潜在靶点184个,与3种骨关节疾病的交集靶点29个;(2)根据交集靶点的GO富集分析发现透骨消痛胶囊治疗3种骨关节疾病的关键基因功能为细胞对脂多糖的反应、炎症反应、细胞外基质、蛋白质结合、锌离子结合等;(3)KEGG分析关键通路为白细胞介素17信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、NOD样受体和Toll样受体信号通路;(4)根据PPI网络确定6个核心靶点(白细胞介素6、白细胞介素1β、前列腺素内过氧化物合酶1、前列腺素内过氧化物合酶2、细胞色素P4501A2、C-X-C趋化因子配体8);(5)分子对接结果证实(+)-儿茶素、β-谷甾醇、山奈酚、杨梅酮、川芎内酯等具有良好的构效关系,分子动力学模拟进一步证实CYP1A2与川芎内酯能稳定结合,佐证了网络药理学及分子对接结果。提示透骨消痛胶囊可能通过作用于白细胞介素1β、前列腺素内过氧化物合酶1、前列腺素内过氧化物合酶2、CYP1A2等靶点,调控白细胞介素17信号通路、肿瘤坏死因子信号通路等对骨关节炎、类风湿性关节炎及痛风性关节炎发挥“异病同治”的作用。

成纤维细胞生长因子受体1 抑制剂对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响

背景:课题组前期的研究表明靶向成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)可能是治疗类风湿性关节炎的有效靶点。目的:探讨FGFR1抑制剂(PD173074)对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响。方法:将25只雌性SD大鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、甲氨蝶呤组、PD173074低剂量组、PD173074高剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠建立Ⅱ型胶原诱导关节炎模型。造模成功后正常组及模型组大鼠腹腔注射无菌PBS,甲氨蝶呤组药物注射剂量为1.04 mg/kg,PD173074低剂量组和高剂量组药物注射剂量分别为5,20 mg/kg,1次/周。给药4周后取材,观察大鼠临床症状以及关节肿胀情况,踝关节Micro-CT三维重建及分析,观察踝关节病理变化,检测关节周围血管生成情况及核因子κB受体活化因子配体的表达,检测关节滑膜中p-FGFR1、血管内皮生长因子A、抗酒石酸酸性磷酸酶的表达,观察肝、脾、肾病理变化并计算肝、脾、肾指数。结果与结论:①PD173074能够减轻模型大鼠踝关节临床症状及关节肿胀,延缓骨质丢失,改善骨结构,减轻关节滑膜侵袭以及软骨骨侵蚀,降低关节周围破骨细胞数量,抑制关节滑膜组织中的血管生成,降低核因子κB受体活化因子配体的表达,抑制FGFR1磷酸化蛋白、抗酒石酸酸性磷酸酶和血管内皮生长因子A的蛋白表达。②大鼠肝、脾、肾病理观察表明经过PD173074治疗后无明显的毒副作用。③研究证明了FGFR1抑制剂能够延缓Ⅱ型胶原诱导关节炎模型大鼠关节炎症及骨破坏的进展,并抑制血管的生成。初步验证了PD173074在Ⅱ型胶原诱导关节炎模型中的治疗作用,其可能是通过抑制FGFR1磷酸化发挥作用,为寻找类风湿性关节炎新的治疗靶点提供了方向。

针刀治疗膝骨关节炎大鼠的转录组测序及实验验证

背景:针刀治疗膝骨关节炎临床疗效确切,但针刀干预膝骨关节炎在转录组水平上的调节机制仍未明确。目的:通过针刀干预骨关节炎大鼠,对软骨样本进行转录组测序和生物信息学分析并加以验证,揭示针刀干预骨关节炎大鼠的作用机制。方法:采用随机数字表法将48只SD大鼠随机分为针刀组、模型组和假手术组,每组16只。针刀组、模型组采用内侧半月板失稳术建立骨关节炎模型,造模6周后针刀组大鼠每周进行1次针刀治疗,共治疗4周。治疗4周后,对各组大鼠膝关节进行Micro CT扫描,对关节软骨进行苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色及Mankin评分,采用Elisa法检测血清炎症因子水平,对软骨样本进行转录组测序,采用R软件进行差异基因生物信息学分析,采用蛋白互作网络和Cytoscape软件筛选核心靶点并进行RT-qPCR验证。结果与结论:①相较于假手术组,模型组大鼠关节软骨表面粗糙不平、关节间隙狭窄,关节表层结构破坏,Mankin评分升高,血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶13水平显著上升(P<0.05);与模型组相比,针刀组大鼠关节软骨表面较为光滑,关节间隙增宽,关节表面轻微不规则,Mankin评分降低,血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶13水平显著降低(P<0.05)。②基因本体论及京都基因组和基因组百科全书分析涉及蛋白分解代谢、自噬、丝裂原活化蛋白激酶、核因子kB及Wnt信号通路等,蛋白互作网络及Cytoscape筛选出共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子4个关键基因。③模型组大鼠关节软骨中共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子mRNA表达均低于假手术组(P<0.05),针刀组大鼠关节软骨中共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子mRNA表达均高于模型组(P<0.05)。④针刀干预可能作用于丝裂原活化蛋白激酶、核因子kB及Wnt等信号通路来促进软骨修复,并与共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子基因的表达密切相关。

外泌体来源非编码RNA对骨关节炎微环境的作用及临床应用进展

背景:骨关节炎是一种常见的关节退行性疾病,其发生发展的病因学机制尚不清楚。早期骨关节炎的及时诊治十分重要,目前尚无确切有效的方法。外泌体来源广泛,其中包含非编码RNA(Non-coding RNAs,ncRNAs),如微小RNAs、环状RNAs和长链非编码RNAs。外泌体ncRNAs可直接从原始细胞递送至邻近或远程细胞,通过细胞间通讯调节细胞活性,在重塑骨关节微环境中具有重要的调控作用。目的:总结外泌体来源ncRNAs对骨关节炎关节内微环境的干预作用,以及在临床应用中取得的进展,阐明其在骨关节炎诊治方面的潜力。方法:以“exosomes,non-coding RNA,osteoarthritis,application,signal pathway,synovial fluid,cartilage cells,cartilage matrix,subchondral bone,mechanism”为检索词在PubMed数据库中进行检索,最终纳入66篇相关文献进行综述分析。结果与结论:①外泌体来源ncRNAs在骨关节炎的发病过程中对关节内微环境具有重要调控作用,主要体现在外泌体ncRNAs调控关节内炎症反应、软骨细胞及软骨基质的退化,软骨下骨重塑和细胞间通讯。②外泌体中的ncRNAs可以作为骨关节炎的生物标志物,帮助骨关节炎的早期诊断和监测疾病进展与预后。③外泌体ncRNAs可作为骨关节炎的治疗靶点,外泌体携带miRNAs递送到关节的软骨细胞及软骨基质,发挥调控作用。④外泌体ncRNAs可以通过调控基因表达、促进细胞间通讯,提高软骨组织工程的效果,修复或再生受损软骨。⑤未来研究者应继续发掘外泌体来源ncRNAs对骨关节炎的干预机制,并可结合最新软骨组织工程的研究成果应用到临床之中,这将有效帮助解决骨关节炎患者的病痛。

三七治疗骨关节炎机制:基于UHPLC-QE-MS、网络药理学及分子动力学模拟

背景:课题组前期研究发现三七能够修复骨细胞的形态结构,对于治疗骨关节炎具有良好的应用前景,但目前对于三七的具体作用机制尚不清楚。目的:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-Q exactive-mass spectrometry,UHPLC-QE-MS)技术鉴定三七的主要成分,并结合网络药理学、分子对接和分子动力学模拟探究三七治疗骨关节炎的作用机制。方法:利用UHPLC-QE-MS技术鉴定三七的主要成分后,运用TCMSP数据库筛选活性成分,通过TCMSP和Uniprot数据库查找活性成分靶点,通过疾病数据库筛选骨关节炎靶点。在药物靶点与疾病靶点取交集后,导入STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作网络筛选关键靶点,通过“活性成分-作用靶点”网络筛选关键活性成分。再对关键靶点进行富集分析,并对关键活性成分和关键靶点进行分子对接验证,最后选取结合能最低的结果进行分子动力学模拟。结果与结论:①在三七溶液中共鉴定出57种活性成分,成分靶点与疾病靶点交集50个,关键活性成分5个(槲皮素、熊脱氧胆酸、山奈酚、柚皮素和红藻氨酸),关键靶点5个(白细胞介素6、基质金属蛋白酶9、白细胞介素1β、白蛋白和趋化因子配体2);②基因本体功能富集642个条目,其中620个条目代表生物过程,21个条目代表分子功能,1个条目代表细胞成分;京都基因与基因组百科全书通路分析63条通路,主要涉及雌激素信号通路、白细胞介素17信号通路和高糖基化终末产物-高糖基化终末产物受体信号通路;③分子对接显示关键活性成分和关键靶点结合活性良好,分子动力学模拟提示槲皮素和基质金属蛋白酶9间的相互作用稳定;④对三七成分进行了较全面研究,初步阐明了其药效物质基础,预测三七可通过多组分、多靶点、多途径和多通路发挥抗炎、软骨保护和免疫调节作用来治疗骨关节炎。

脱细胞软骨细胞外基质匀浆联合氧化苦参碱治疗大鼠骨关节炎

背景:脱细胞软骨细胞外基质治疗骨关节炎具有一定的效果,但其单独应用时的治疗效果有限。氧化苦参碱可缓解白细胞介素1β诱导的软骨细胞凋亡和细胞外基质降解。目的:观察不同剂量氧化苦参碱与脱细胞软骨细胞外基质联合膝关节腔注射对大鼠骨关节炎的治疗作用。方法:获取SD大鼠股骨软骨,采用物理、化学与酶相结合的方法制备脱细胞软骨细胞外基质。取50只SD大鼠,利用随机数字表法分为假手术组、骨关节炎组、单纯材料组、低剂量药物组、高剂量药物组,每组10只,后4组采用改良Hulth法建立大鼠骨关节炎模型。造模成功后,单纯材料组大鼠膝关节腔注射脱细胞软骨细胞外基质匀浆,低剂量药物组、高剂量药物组膝关节腔分别注射含50,100μg氧化苦参碱的脱细胞软骨细胞外基质匀浆。注射4周后取材进行相关检测。结果与结论:①与假手术组比较,骨关节炎组关节腔积液中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子ɑ、丙二醛水平升高(P<0.05),超氧化物歧化酶水平降低(P<0.05);与骨关节炎组比较,低剂量药物组、高剂量药物组关节腔积液中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子ɑ、丙二醛水平降低(P<0.05),超氧化物歧化酶水平升高(P<0.05),其中高剂量药物组变化更显著。②Tunel染色显示,与假手术组相比,骨关节炎组凋亡软骨细胞增多;与骨关节炎组相比,单纯材料组、低剂量药物组、高剂量药物组凋亡软骨细胞减少,其中高剂量药物组减少更显著。③苏木精-伊红与免疫组化染色显示,骨关节炎组大鼠膝关节软骨严重退变,软骨组织中Ⅱ型胶原表达降低(P<0.05)、基质金属蛋白酶9表达升高(P<0.05);与骨关节炎组相比,单纯材料组、低剂量药物组、高剂量药物组大鼠膝关节软骨退变明显改善,软骨组织中Ⅱ型胶原表达升高(P<0.05)、基质金属蛋白酶9表达降低(P<0.05),其中高剂量药物组改善最显著。④Western blot检测显示,与假手术组相比,骨关节炎组软骨组织中Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-9、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与骨关节炎组相比,低剂量药物组、高剂量药物组Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-9、Bax蛋白表达降低(P<0.05),其中高剂量药物组改善更显著。⑤结果表明,膝关节腔内联合注射脱细胞软骨细胞外基质与氧化苦参碱可通过促进细胞外基质的合成、抑制炎症与氧化应激反应、抑制软骨细胞凋亡发挥骨关节炎治疗作用,该治疗作用可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。

免疫细胞介导不同脂质与膝骨关节炎的相关性:欧洲个体全基因组关联分析

背景:观察性研究发现脂质与免疫细胞对于骨关节炎进展具有双重影响,但其具体作用机制尚不清楚。目的:探究脂质与膝骨关节炎的因果关系是否受免疫细胞调控。方法:179种脂质来源于Linda Ottensman数据库,从Open GWAS上获取到了731种免疫细胞相关的单核苷酸多态性作为工具变量,膝骨关节炎的全基因组关联研究数据来自于骨关节炎遗传学联盟。首先采用双样本孟德尔随机化方法从遗传学角度分别探讨脂质与膝骨关节炎、免疫细胞与膝骨关节炎、脂质与免疫细胞的因果关系。另外采用贝叶斯加权孟德尔随机化验证脂质与膝骨关节炎的因果关系,反向孟德尔随机化和Steiger方向性检验评估正向关系。随后进行敏感性分析,包括Cochran’s Q检验消除异质性,MR-PRESSO全局检验和MR-Egger截距排除水平多效性,留一法评估单个单核苷酸多态性驱动因素对随机估计的影响。最后,通过两步孟德尔随机化方法确定特定免疫细胞性状在脂质与膝骨关节炎因果关系中的中介效应。结果与结论:①逆方差加权法和贝叶斯加权算法共同确定8种与膝骨关节炎存在因果关系的脂质种类;②Cochran’s Q、MR-PRESSO和MR-Egger截距结果均无统计学意义(P<0.05);③同时共计算得出了3组中介关系,介导比例最低为11.85%,最高为45.48%;④提示免疫细胞水平在脂质与膝骨关节炎的调节进程中发挥潜在作用,这一发现能为深入探索膝骨关节炎的作用机制提供新的视角。

蒜氨酸靶向调控表皮生长因子受体和犬尿氨酸酶治疗类风湿性关节炎的分子机制

背景:蒜氨酸作为大蒜中的主要活性成分具有抗炎和抗氧化作用,但蒜氨酸改善类风湿性关节炎的作用和机制仍不清楚。目的:利用基因表达数据分析类风湿性关节炎的差异表达基因,探讨蒜氨酸在类风湿性关节炎中的调控作用。方法:从GSE45291和GSE93777数据集中收集类风湿性关节炎的基因表达数据,进行差异表达分析。对两套数据中的共同差异表达基因进行共表达网络分析,识别与类风湿性关节炎相关性最高的模块基因,进行功能富集分析。通过SwissTargetPrediction数据库预测蒜氨酸的靶向调控基因,并与差异表达基因行交集分析,计算差异表达靶基因的受试者工作特征曲线下面积。将人永生化类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞接种于孔板内培养24 h后分5组处理:对照组不进行任何处理,阳性药组加入甲氨蝶呤,蒜氨酸低、中、高质量浓度组分别加入20,80,160μg/mL的蒜氨酸,处理48 h后,CCK-8法检测细胞活性,TUNEL法检测细胞凋亡,ELISA法检测氧化应激和炎症因子水平,JC-1法检测线粒体膜电位变化,RT-qPCR和Western Blot检测靶基因及相关信号通路的表达。结果与结论:(1)在GSE45291和GSE93777数据集中共鉴定出6 487个共同的差异表达基因,并获得了12个共表达模块,magenta模块与类风湿性关节炎的相关性最高,模块基因主要富集于磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路。(2)通过数据库预测发现7个差异表达基因被蒜氨酸靶向调控,其中表皮生长因子受体在GSE45291数据集中的受试者工作特征曲线下面积值最大,犬尿氨酸酶在GSE93777数据集中的受试者工作特征曲线下面积值最大。(3)与对照组比较,其他4组类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞活性降低,细胞凋亡数量增加,活性氧、丙二醛、白细胞介素6、白细胞介素1β水平均降低,线粒体膜电位均升高,表皮生长因子受体、犬尿氨酸酶、线粒体动力相关蛋白1mRNA与蛋白表达均降低,线粒体融合蛋白2 mRNA与蛋白表达均升高,p-AKT、p-PI3K蛋白表达均升高。(4)结果表明,蒜氨酸通过调控表皮生长因子受体和犬尿氨酸酶等靶基因发挥潜在的类风湿性关节炎治疗作用。

“以痛为腧”推拿对膝骨关节炎患者步态及足底压力的影响研究

目的观察“以痛为腧”推拿手法对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者步态及足底压力平衡分布的影响。方法选取2023年3月—2023年10月上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院推拿科就诊的KOA患者50例,将其随机分为观察组和对照组,各25例。观察组给予推拿干预,对照组给予宣教干预。对比2组干预前后西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)评分、步态相关参数(步速、步幅、步长、双侧支撑相、单支撑相)及足底压力。结果2组均未出现严重安全问题及不良事件,50例患者均完成研究。干预后,观察组WOMAC总分、疼痛评分、活动程度评分均较干预前降低,且低于对照组干预后(P<0.05)。观察组干预前后僵硬评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。干预后,观察组步速、步幅、双侧支撑相、单支撑相均较干预前改善,且优于对照组(P<0.05)。观察组干预前后步长比较差异无统计学意义(P>0.05)。干预后,观察组前足内部区压力较干预前升高,且高于对照组(P<0.05)。观察组干预前后其他区压力比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论基于“以痛为腧”推拿能显著提高患者的步行能力及前足内部压力,有助于恢复步态的稳定性。

超声半定量评分和剪切波弹性成像参数诊断重度膝骨关节炎的临床价值

目的分析膝骨关节炎患者超声半定量评分和剪切波弹性成像(SWE)参数与西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎(WOMAC OA)指数的关系,探讨二者诊断重度膝骨关节炎的临床价值。方法选取我院收治的膝骨关节炎患者90例,根据Kellgren-Lawrence分级标准分为轻度组(Ⅰ~Ⅱ级,26例)和重度组(Ⅲ~Ⅳ级,64例),均行超声、SWE检查获得超声半定量评分、股四头肌(股直肌、股中间肌、股内侧肌、股外侧肌)及其肌腱剪切波速度(SWV);评估患者WOMAC OA指数。比较两组上述参数的差异;分析超声半定量评分和SWE参数与WOMAC OA指数的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估超声半定量评分和SWE参数对重度膝骨关节炎的诊断效能。结果轻度组超声半定量评分、股外侧肌SWV、WOMAC OA指数均低于重度组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。相关性分析显示,超声半定量评分、股外侧肌SWV与WOMAC OA指数均呈正相关(r=0.550、0.553,均P<0.001)。ROC曲线分析显示,超声半定量评分和股外侧肌SWV诊断重度膝骨关节炎的曲线下面积分别为0.984、0.789(均P<0.05),对应的截断值分别为6分和4.9 m/s。结论超声半定量评分和股外侧肌SWV均与WOMAC OA指数呈正相关,二者可较准确地评估膝骨关节炎患者的关节损伤程度,在诊断重度膝骨关节炎中有较好的临床价值。

腕踝针联合火龙罐对类风湿性关节炎患者急性疼痛的改善效果分析

目的观察腕踝针联合火龙罐对类风湿性关节炎(RA)患者急性疼痛的改善效果。方法选取2022年6月至2023年5月收治的80例RA患者为研究对象,按照随机数字表法分为观察组(40例)、对照组(40例)。对照组予甲氨蝶呤片口服治疗,观察组在对照组基础上加用腕踝针联合火龙罐治疗。2组均治疗3 d后统计疗效,比较2组治疗前及治疗1、2、3 d后临床症状28个关节疾病活动度-血沉评分系统(DAS28-ESR)评分、疼痛程度视觉模拟评分法(VAS)评分变化情况,比较2组治疗前及治疗3 d后血清五羟色胺(5-HT)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)水平变化情况。结果2组治疗1、2、3 d后临床症状DAS28-ESR评分均较治疗前下降(P<0.05),且观察组治疗后同期下降更明显(P<0.05)。2组治疗1、2、3 d后疼痛VAS均较治疗前下降(P<0.05),且观察组治疗后同期下降更明显(P<0.05)。2组治疗3 d后血清5-HT、IL-6、CRP水平均较治疗前降低(P<0.05),且观察组治疗3 d后下降水平更明显(P<0.05)。观察组总有效率90.00%(36/40),对照组总有效率67.50%(27/40),治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。结论腕踝针联合火龙罐治疗RA临床效果显著,可明显改善患者急性疼痛,控制病情。

温阳补气法在膝骨关节炎治疗中的理论探讨

膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)是以膝关节软骨退行性病变为基础的疾病,以膝关节疼痛、负重后加重为主要临床表现,多发于中老年人。该病病因复杂,病情易反复,病程长,久之可引起膝关节僵硬、畸形。KOA属中医学“骨痹”范畴,以气血不足为本,风寒湿邪为标。中老年人多阳气虚弱,抗邪无力,易感受风、寒、湿等邪气痹阻膝骨关节,导致关节疼痛、肿胀,甚至屈伸不利。温阳补气法是以辨证论治为指导,以补肾药与活血药配伍为基础。针对膝关节疼痛、肿胀、僵直三大主症,以“温阳补气治其本,祛风除湿治其标”为治则。从温阳补气法出发,阐述其是治疗KOA脾肾阳虚证的重要法则,以期为临床诊治该病提供思路。

接骨丹联合关节镜下微骨折术治疗膝骨性关节炎的临床疗效观察

目的观察接骨丹联合关节镜下微骨折术治疗膝骨性关节炎(KOA)的临床疗效。方法纳入2019年1月至2023年6月漳州市中医院骨科共计60例KOA患者,分组方法:随机数字表法,分为30例对照组和30例试验组。对照组采用关节镜下微骨折术治疗KOA,试验组术后在对照组基础上加用接骨丹治疗。手术前、术后1个月、术后6个月,比较两组患者VAS评分、Lysholm评分、HSS评分情况。结果两组VAS评分、Lysholm评分、HSS评分治疗前比较无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组各项评分均优于治疗前,且试验组优于对照组(P<0.05)。结论接骨丹联合关节镜下微骨折术治疗KOA临床疗效显著,可有效减轻疼痛、促进膝关节功能恢复。

季德胜蛇药片治疗急性痛风性关节炎大鼠的机制研究

目的探究季德胜蛇药片治疗急性痛风性关节炎(AGA)大鼠的可能机制。方法2022年10月至2023年2月,选取60只雄性SD大鼠为研究对象,采用随机数字表法分为空白对照组、模型组、季德胜蛇药片组和依托考昔组,除空白对照组外其他大鼠均通过关节腔注射尿酸钠溶液构建AGA大鼠模型,造模成功后12 h,季德胜蛇药片组灌胃季德胜蛇药片2.4 g·kg^(−1)·d^(-1),依托考昔组灌胃依托考昔3.125 mg·kg^(−1)·d^(-1),均持续干预7 d,测量各组大鼠关节肿胀程度、步态行为学分级,并于末次干预12 h后腹主动脉取血采用酶联免疫吸附法测量血清白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10及肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;麻醉处死大鼠后分离踝关节滑膜组织固定后制成切片HE染色观察病理形态学特征,蛋白质印迹法检测滑膜组织中核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组造模后1、2、3 d时关节肿胀度均升高,且步态行为学分级程度也升高(P<0.05),与模型组比较,季德胜蛇药片组与依托考昔组大鼠关节肿胀度均降低,步态行为学分级程度也有改善(P<0.05)。HE染色结果显示,模型组大鼠可见明显滑膜组织增生,充血水肿并伴有大量中性粒细胞及单核细胞等炎症细胞浸润,季德胜蛇药片干预后滑膜层细胞基本正常,轻微充血水肿,炎症细胞浸润程度降低,与依托考昔干预后情况基本一致。模型组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平[(45.15±8.76)ng/L、(54.26±8.29)ng/L、(229.54±31.18)ng/L]均高于空白对照组大鼠[(10.41±3.25)ng/L、(16.52±4.13)ng/L、(108.94±21.26)ng/L,P<0.05],滑膜组织中p-NF-κB p65/NF-κB p65、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达(1.98±0.32、1.34±0.12、1.20±0.18、1.30±0.11)均高于空白对照组大鼠(0.32±0.07、0.18±0.03、0.28±0.05、0.24±0.04,P<0.05),血清、滑膜组织IL-10水平和蛋白表达[(21.06±4.39)ng/L、0.72±0.09]均低于空白对照组大鼠[(43.15±7.24)ng/L、1.45±0.12,P<0.05]。与模型组大鼠比较,季德胜蛇药片组、依托考昔组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平[季德胜蛇药片组分别为(21.62±3.95)ng/L、(24.37±5.26)ng/L、(135.31±22.47)ng/L,依托考昔组分别为(22.42±4.39)ng/L、(26.08±5.41)ng/L、(139.42±21.35)ng/L]及滑膜组织中p-NF-κB p65/NF-κB p65、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达均降低(季德胜蛇药片组分别为0.72±0.14、0.64±0.09、0.73±0.10、0.56±0.07,依托考昔组分别为0.69±0.13、0.57±0.07、0.68±0.13、0.58±0.08,均P<0.05),血清IL-10水平和滑膜组织IL-10蛋白表达升高[季德胜蛇药片组分别为(38.15±5.25)ng/L、1.08±0.11,依托考昔组分别为(36.97±6.12)ng/L、1.10±0.13,均P<0.05],季德胜蛇药片组与依托考昔组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论季德胜蛇药片能够明显改善急性痛风性大鼠关节症状,下调关节炎症反应,可能与抑制NF-κB信号通路活化有关。

类风湿关节炎合并肺间质性病变患者肠道菌群特征及影响因素分析

探讨类风湿关节炎(RA)合并肺间质性病变(ILD)患者的肠道菌群特征及其影响因素。方法 选取2023年1月至2024年12月本院收治的80例为类风湿关节炎患者,根据观察组中患者是否发生肺间质性病变,分为RA-ILD组(n=24)和NO-ILD组(n=56)。并取同期于本院进行健康体检的24例健康人员设为健康组,分析RA-ILD组患者与健康组患者肠道菌群特征。通过单因素及多因素Logistic回归分析RA-ILD组和NO-ILD组,探讨类风湿关节炎患者发生肺间质性病变的影响因素。结果 RA-ILD组的RF水平显著高于健康组,同时,RA-ILD组中双歧杆菌与类杆菌的数量均低于健康组(P<0.05)。然而,在乳杆菌、梭菌、肠杆菌以及肠球菌的数量上,两组之间并未观察到显著差异(P>0.05)。相较于NO-ILD组,RA-ILD组的平均年龄更高,同时其DAS28、CEA、CA125、RF、ACCP及CRP的水平也显著更高(P<0.05)。然而,在性别分布、病程长短、吸烟史、受教育程度以及PLT、NLR、PLR和ESR等指标上,两组之间并未发现显著的统计学差异(P>0.05)。RA患者发生ILD与年龄、类风湿关节炎活动度评分具有相关性(P<0.05)。结论 RA合并ILD患者的肠道菌群特征与健康人群存在显著差异,且其发生ILD的风险与年龄和类风湿关节炎活动度密切相关。

不同月龄豚鼠自发膝骨关节炎过程中全膝关节的病理变化

背景:豚鼠因具有与人类相似的膝关节结构和接近的组织病理学特征,被认为是最有助于评估人类原发性骨关节炎的自发模型。目的:通过对1-18月龄豚鼠的全膝关节组织病理学分析,探讨豚鼠自发膝骨关节炎的病理过程。方法:选取健康1,6,10,14,16,18月龄Hartley雌性豚鼠各8只,将股四头肌进行苏木精-伊红染色,整体膝关节进行苏木精-伊红染色和甲苯胺蓝染色,在光镜下观察软骨、软骨下骨、滑膜、半月板、肌肉的组织病理学情况,进行关节软骨Mankin评分和滑膜炎评分,并进行二者的相关性分析。结果与结论:(1)随着豚鼠月龄的增长,关节软骨Mankin评分越高(P<0.05),滑膜炎病理评分也逐渐增高(P<0.05),且二者之间存在显著正相关(r=0.641,P<0.001);(2)18月龄豚鼠软骨下骨骨髓病变发病率达50%,半月板损伤发生率达37.5%;且出现不同程度的骨赘和关节间隙变窄等病变,仅有少数豚鼠出现股四头肌肉炎症;(3)结果说明豚鼠随着年龄增长,出现明显的软骨缺损、滑膜炎症、软骨下骨病变、半月板损伤、骨赘形成和关节间隙变窄等,均与人类原发性膝骨关节炎的病理过程相似,是理想的自发性膝骨关节炎模型。

Compound 3k治疗骨关节炎:调控氧化应激通路改善软骨细胞糖酵解的作用机制

背景:骨关节炎现已被认为是一种代谢性疾病,既往研究表明糖酵解在骨关节炎的发生发展中起重要作用。Compound 3k作为一种新型糖酵解小分子抑制剂,具有抗炎及抗肿瘤等功效,因此可靶向糖酵解,有望为骨关节炎治疗提供新的思路。目的:基于缺氧诱导因子1α/活性氧的氧化应激通路探究Compound 3k在糖酵解过度活跃所导致的骨关节炎中的作用机制。方法:取对数生长期的ATDC5成软骨细胞,用10 ng/mL白细胞介素1β作用24 h诱导骨关节炎体外细胞模型,以CCK-8法检测不同浓度(0.25,0.5,1,2.5,5,10,15μmol/L)Compound 3k的细胞毒性,选出合适浓度进行后续实验。将软骨细胞随机分为对照组、模型组、治疗组,模型组以10 ng/mL的白细胞介素1β诱导,治疗组以Compound 3k预刺激2 h后与白细胞介素1β共培养,用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;用ELISA试剂盒检测各组细胞炎症水平;用试剂盒检测各组细胞活性氧、细胞外乳酸脱氢酶及葡萄糖含量;qRT-PCR及Western blot检测相关炎症因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α及糖酵解相关基因葡萄糖转运蛋白1、甘油醛3-磷酸脱氢酶、单羧酸转运蛋白1和缺氧诱导因子1α的表达水平。结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞增殖活性下降、糖酵解水平活跃,表现为细胞外乳酸脱氢酶含量增加(P<0.001),葡萄糖含量减少(P<0.001),相关炎症因子白细胞介素6(P<0.0001)及肿瘤坏死因子α(P<0.001),糖酵解相关基因葡萄糖转运蛋白1(P<0.001)、甘油醛3-磷酸脱氢酶(P<0.001)、单羧酸转运蛋白1(P<0.001)及缺氧诱导因子1α(P<0.001)的表达水平均上调,并伴随氧化应激,活性氧过量产生。②与模型组相比,Compound 3k的治疗有效提高细胞增殖活性,抑制过度活跃的糖酵解水平的同时,抑制了骨关节炎软骨细胞炎症(P<0.001)及糖酵解相关基因的表达(P<0.001),且抑制氧化应激,缺氧诱导因子1α的表达水平下调(P<0.0001),活性氧水平下降。③上述结果证实,Compound 3k抑制了白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症,其机制可能与糖酵解及缺氧诱导因子1α/活性氧介导的氧化应激有关。

骨关节炎的氧化应激相关基因和免疫浸润分析

背景:目前对于骨关节炎的发病机制尚不清楚,缺乏有效控制疾病的手段,且研究多集中在免疫领域,对氧化应激领域研究较少。目的:探索氧化应激与免疫浸润在骨关节炎中的作用,并预测相关miRNA和治疗药物。方法:从GEO数据库中获取GSE55235数据集(10例骨关节炎样本和10例健康对照样本)和GSE55457数据集(10例骨关节炎样本和10例健康对照样本)进行合并,获取差异表达基因,并结合氧化应激基因得到差异表达氧化应激基因。对差异表达氧化应激基因进行KEGG、GO富集分析,并使用GSEA富集分析评价骨关节炎通路和生物过程。使用STRING在线平台和Cytoscape软件建立了蛋白质相互作用网络,运行Degree算法得到关键基因,从GEO数据库中获取GSE1919作为验证数据集,对关键基因进行差异分析及受试者工作特征曲线分析,得到核心基因。此外,用CIBERSORT对免疫浸润进行评估,并探索核心基因与免疫细胞的相关性,使用TargetScan对核心基因进行miRNA预测及使用DSigDB数据库对靶点药物进行预测。结果与结论:①确定了65个差异表达氧化应激基因和5个核心基因(IL1B、CXCL8、MYC、NFKBIA、JUN);②富集分析结果显示,差异表达氧化应激基因的主要聚焦点包括氧化应激、白细胞介素17、破骨细胞分化、流体剪切应力以及动脉粥样硬化等通路;③5个核心基因的受试者工作特征曲线下面积均>0.85,说明对诊断骨关节具有良好的特异性和敏感性,且与免疫细胞密切关联;④miRNA的预测结果是hsa-miR-3937,治疗小分子药物包括二甲双胍、离子霉素和塞来昔布等。结果表明:骨关节炎中存在氧化应激与免疫浸润,且免疫浸润参与激活氧化应激。核心基因及预测的miRNA可作为诊断骨关节炎的新型标志物,预测的小分子药物可治疗骨关节炎。