基于连接酶链式反应的EML4-ALK融合基因分型检测

针对棘皮动物微管相关蛋白样4-间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因变异体V1、V2、V3a、V3b设计引物、探针,优化连接探针长度及其浓度,建立基于连接酶链式反应的qPCR法检测方案,并对该方案的特异性、检出限、抗干扰性进行验证。结果表明:基于连接酶链式反应的qPCR法能对EML4-ALK融合基因进行有效分型;连接探针长度在30 nt(nucleotide)时检测灵敏度、特异性最高;连接探针终浓度在0.1~1.0 nmol/L较为合适;设计的引物、探针特异性好,只扩增靶RNA,对其他RNA无扩增;对EML4-ALK融合基因变异体V1、V2的检出限为10 copies/μL,变异体V3a、V3b的检出限为100 copies/μL;在EML4-ALK融合基因RNA标准品检测过程中加入100 ng的肺癌样本RNA作为干扰,检测结果未受到明显干扰。

高危型人乳头状瘤病毒分型检测在子宫颈癌及癌前病变筛查中的效果

评价研究高危型人乳头状瘤病毒分型检测在子宫颈癌及癌前病变筛查中使用高危型人乳头状瘤病毒分型检测的效果。方法 选择120例高危型人乳头状瘤病毒分型检测患者;按照宫颈细胞改变情况分组;癌前病变组100例;宫颈癌组20例;同期选择120例健康体检人群纳入对照组中。使用聚合酶链反应(PCR)技术开展进行高危型人乳头状瘤病毒分型检测过程中使用聚合酶链反应(PCR)技术;对高危型HPV感染状况进行分析。结果 对比癌前病变组以及对照组;子宫颈癌组的高危率明显更高;P<0.05。使用高危型人乳头状瘤病毒分型检测子宫颈癌及癌前病变的准确率较高阳性率、敏感性以及特异性均较高;在93.33%(112/120)。在HPV阳性患者中;主要是HPV16。结论 使用高危型人乳头状瘤病毒分型检测在子宫颈癌及癌前病变筛查中使用高危型人乳头状瘤病毒分型检测的效果理想具有很好的临床推广价值。

探讨三家国产试剂盒(qRT-PCR试剂盒、流式荧光法与反向斑点杂交法检验)在HPV分型检测中的差异性

分析对比三家国产试剂盒HPV分型检测结果的差异性。方法 我院从2021年3月-2022年4月中,选择80例样本,随机分为三组,分别行qRT-PCR 试剂盒、流式荧光法与反向斑点杂交法检验,对比检测结果。结果 在检测结果上,qRT-PCR 试剂盒、流式荧光法之间,有差异性(P<0.05),但与反向斑点杂交法,不存在显著差异(P>0.05),三组的检测结果都在90%以上,且在15 种高危型 HPV检测上,三组检测方式都比较高。结论 在HPV分型的检测中,通过对其结果的具体性分析,发现qRT-PCR 法与反向斑点杂交法,结果 上,存在一致性,反向斑点杂交法和HPV DNA检测序,在符合率上有非常高的差异性,可以通过对不同试剂盒检测结果的分析,选择分型检测方法。

TCT筛查联合HPV分型检测及宫颈活检在宫颈癌筛查中的临床价值分析

分析宫颈癌筛查采取HPV分型与TCT检测及宫颈活检的效果。方法 选取我院6253名TCT筛查出的242例(ASC-US)临床资料,对其分别开展HPV分型、宫颈活检检查,根据检查结果进行诊断,并将单一诊断结果与联合诊断结果进行对比,分析上述诊断方法的筛查效果。结果 接受宫颈病理活检的患者中≥CINⅠ96例(39.66%),良性炎症146例(60.33%);另外HPV检出率为52.06%,TCT 的检出率为81.40%;两者联合诊断的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值、诊断符合率均最高(P<0.05)。结论 HPV分型、TCT、宫颈活检均在临床广泛应用于宫颈癌的筛查当中,单一诊断的效果相对较低,采取联合诊断的准确性更高,其在灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值等方面的诊断效果更高,能够对宫颈癌的诊断产生较好的效果,对减少误诊、漏诊有较为明显的作用,能够避免筛查遗漏对患者病情诊治的影响,值得关注。

HPV拓展分型检测在宫颈癌检查中的临床意义

探究HPV拓展分型检测在宫颈癌检查中的临床意义。方法 收集2022年1月-2022年12月苍梧县妇幼保健院收治的2836例宫颈癌患者的临床资料,所有患者均接受HPV拓展分型检测,评估诊断阳性率并与传统的宫颈细胞学检查进行比较,分析HPV拓展分型检测的灵敏度、特异度、准确度等。结果 2836例宫颈癌检查患者中,通过HPV拓展分型检测阳性率为17.98%(510/2836),且较传统的颈细胞学检查,HPV拓展分型检测具较高的灵敏度、特异度和准确度。结论 HPV拓展分型检测在宫颈癌检查中展现了其重要的临床意义,与传统的宫颈细胞学检查相比,它能够更准确地评估患者的宫颈癌风险,值得应用推广。

人乳头瘤病毒基因分型检测在绝经后妇女HPV感染中的应用价值

目的探究人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测在绝经后妇女HPV感染中的应用价值。方法选择80名接受HPV筛查的绝经后妇女为研究对象,采集其宫颈脱落细胞标本,采用聚合酶链式反应(PCR)-反向杂交法进行检测。以柱提法提取样本DNA,将提取液及阴、阳性对照品同时在天隆PCR扩增仪上进行扩增,在安必平杂交仪上进行杂交。分析阳性率、危险分型情况、阳性样本与感染样本分型情况及不同年龄段妇女HPV感染阳性率。结果在80名绝经后妇女中,HPV阳性检出率为15.00%(12/80)。其中,HPV-16型2例,占比16.67%;HPV-52型2例,占比16.67%;HPV-58型1例,占比8.33%;HPV-53型1例,占比8.33%;HPV-68型1例,占比8.33%;HPV-33型1例,占比8.33%;HPV-11型1例,占比8.33%;HPV-18型1例,占比8.33%;HPV-cp8304型1例,占比8.33%;HPV-66型1例,占比8.33%。在12例HPV阳性样本中,多重感染样本3例,占比25.00%;单一感染样本9例,占比75.00%。不同年龄组HPV感染阳性例数分布数据差异不明显(P>0.05)。结论绝经后不同年龄段妇女HPV阳性率无明显分布,感染以单一感染为主,HPV基因分型检测有着较高的检验诊断价值,值得推广。

RTSWE联合HPV分型检测对宫颈癌及癌前病变的筛查价值

目的探讨实时剪切波弹性成像(RTSWE)联合人乳头瘤病毒(HPV)分型检测对子宫颈癌癌前病变及宫颈癌的筛查价值。方法回顾性选取确诊的120例宫颈癌及子宫颈癌前病变患者作为研究对象,其中包括宫颈上皮内瘤变组73例,宫颈癌组47例,另选取同期在医院进行宫颈癌及子宫颈癌前病变体检的40例检查正常已婚女性作为对照组,入组对象均接受RTSWE检查、HPV分型检测及病理学检查。以病理活检作为诊断“金标准”,比较RTSWE、HPV分型检测及RTSWE联合HPV分型检测诊断宫颈癌的准确性。结果RTSWE和HPV分型检测联合应用宫颈癌诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度均高于各单项检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论RTSWE联合HPV分型检测为子宫颈癌癌前病变及宫颈癌的筛查提供新思路,可以提高诊断准确率,为疾病后续治疗提供参考方向。

HPV拓展分型检测在宫颈癌筛查中的临床意义

目的探讨除HPV16/18外的HPV拓展分型检测对宫颈高级别上皮内病变和宫颈癌的筛查意义。方法回顾性研究分析,选取2018年1月—2020年12月在上海市第六人民医院(临港院区)就诊的1200名HPV分型检测阳性的女性,并对同期因各种指征转诊阴道镜且行活组织病理检查的868例妇女,按照是否发生宫颈高级别上皮内病变和宫颈癌分为观察组和对照组,对不同年龄段、以及各亚型HPV感染的结果进行统计学分析,并计算TCT和高危亚型HPV及各亚型组合对宫颈高级别上皮内病变和宫颈癌的预测效能。结果(1)1200名HPV感染的女性中,感染率前三位的亚型依次为HPV52、HPV16、HPV58,60岁以上女性多重感染率更高(χ^(2)=5.56,P=0.022);(2)HPV16、HPV31、HPV33亚型感染与HSIL和宫颈癌的发生有关,Logistic回归分析显示这三种亚型感染均是独立危险因素;(3)60岁及以上的患者HSIL和宫颈癌的检出率最高,差异有统计学意义(χ^(2)=8.322,P=0.004);(4)预测HSIL和宫颈癌的因子中,HPV16/31/33对HSIL和宫颈癌的预测约登指数最高。结论本地区除HPV16/18亚型,对其他高危亚型如HPV31、HPV33、HPV52、HPV58等亚型的拓展分型检测有助于避免HSIL和宫颈癌的漏诊;各年龄段的妇女对大多数高危亚型HPV的易感性无明显差异,应加强本地区60岁以上妇女的宫颈癌筛查及随访,提倡个体化筛查和随访方案。

不同丙型肝炎病毒基因分型检测方法学的比较

目的通过丙型肝炎基因分型检测方法学的比较,为实验室选择提供依据。方法选取宁夏回族自治区人民医院2019年1月至2021年12月丙型肝炎确诊患者血清样本148份,使用PCR-荧光探针法、PCR-反向点杂交法及Sanger测序法进行丙型肝炎病毒基因分型检测,并采用卡方检验、Kappa检验对这三种检测方法进行比较分析。结果PCR-荧光探针法检出136例,检出率91.89%,共检出4种基因型,分别为1b、2+、3+和6+。PCR-反向点杂交法检出135例,检出率为91.22%,共检出5种基因型,分别为1b、2a、3a、3b和6a。Sanger测序法检出148例,检出率100%,共检出7种基因型,分别为1b、2a、3a、3b、6a、1g和6xa。PCR-荧光探针法未检出的12例样本中,Sanger测序法均已检出,其中包括1例6xa型,1例1g型。两种方法的检出率比较差异无统计学意义(χ^(2)=7.565,P>0.05)。两种方法比较一致性较高(k=0.871,P<0.001)。PCR-反向点杂交法未能测出的13例样本,Sanger测序法均已检出,其中包括1例1g型。PCR-反向点杂交法检出1例3b型,Sanger测序法检出为6xa型。两种方法的检出率比较差异无统计学意义(χ^(2)=8.696,P>0.05)。PCR-反向点杂交法与Sanger测序法一致性高(k=0.609,P<0.05)。结论PCR-荧光探针法和PCR-反向点杂交法操作简单,适合临床推广,Sanger测序法准确性高,可对其他方法进行补充,实验室可结合自身情况进行选择。

HPV分型检测联合TCT检查在早期宫颈癌筛查中的价值

目的研究分析早期宫颈癌筛查中联合应用人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)分型检测与液基薄层细胞学(thinprep cytologic test,TCT)检查的临床价值。方法选取2021年8月—2022年8月在邳州市中医院行宫颈癌筛查女性125例为研究对象,均给予HPV分型检测、TCT检查,以病理组织活检为金标准,统计比较HPV分型检测、TCT检查及两者联合检查的诊断结果。结果与单独应用HPV分型检测诊断比较,联合检查诊断的灵敏度(100.0%)更高,差异有统计学意义(χ^(2)=4.762,P=0.029);与单独应用TCT检查诊断比较,联合检查诊断的灵敏度更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论早期宫颈癌筛查中联合应用HPV分型检测与TCT检查的临床价值更高,可显著提高筛查准确性,为病理分型提供可靠的参考依据。

宫颈癌前病变筛查中HPV分型检测的应用价值及检出率分析

分析宫颈癌前病变筛查中HPV分型检测的应用价值及检出率。 方法 在近一年时间内到本院进行宫颈病变检查的患者中选择156例进行研究,所有患者均接受HPV分型检测,并与病理学检测结果进行对比,分析HPV分型检测使用价值以及疾病检出情况。 结果 对所有患者进行检测之后发现宫颈炎阳性率为44.0%,CINⅠ型、Ⅱ型与Ⅲ型阳性率分别为71.4%、80.0%、87.5%,宫颈癌阳性率100%,各类病症的阳性率对比,差异明显,p<0.05。在所有阳性患者当中,高危型相对较为常见,且各类疾病分型中高危型检出率差异明显;大多检测结果为阳性的患者患者属于单一性感染。 结论 患者是否出现HPV感染与其出现宫颈癌前病变之间的关联性相对交稿,采用HPV分型检测方法将能够实现对宫颈癌疾病的有效预防与治疗,筛查患者是否出现宫颈癌前病变的价值相对较高。

HPV-DNA分型检测联合液基薄层细胞学检查在宫颈癌筛查中的价值研究

目的观察人乳头瘤病毒-DNA(HPV-DNA)分型检测联合液基薄层细胞学检查(TCT)在宫颈癌筛查中的价值。方法选取3000例接受宫颈癌筛查的受检女性作为研究对象,均采取HPV-DNA分型检测、TCT检查,对HPV-DNA分型高危型(+)、TCT(+)或两种检测双(+)者行阴道镜活检组织病理学检查,比较各项检测结果。结果3000例受检者TCT检测、HPV-DNA检测阳性率分别为4.50%(135/3000)、21.67%(650/3000),TCT检测炎性或正常、意义不明的非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、鳞状上皮高度病变(HSIL)及鳞状细胞癌(SCC)患者HPV-DNA阳性检出率,呈逐渐升高趋势;以阴道镜活检组织病理学检查结果为金标准,宫颈上皮内瘤变(CIN)1级、CIN2级、CIN3级组中,两种检测方法协同检测阳性检出率均显著高于单一方法,差异均有统计学意义(P<0.05);CIN3级、SCC组的两种检测方法协同检测阳性检出率均高于CIN1级组与CIN2级组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论HPV-DNA分型检测、TCT检测、阴道镜活检组织病理学检查各有优缺点,合理的联合筛查可相互弥补不足。

TCT、高危HPV分型检测联合阴道镜检查在宫颈癌筛查中的应用价值分析

目的探讨TCT、高危HPV分型检测联合阴道镜检查在宫颈癌筛查中的应用。方法回顾性选取2019年3月~2022年3月盐城市妇幼保健院进行宫颈癌筛查的女性350例,所有研究对象进行TCT、HPV-DNA、阴道镜活检组织病理学检测检查。对TCT检测与HPV-DNA检测的结果,阴道镜活检与TCT联合HPV-DNA检测的结果,TCT联合HPV-DNA分型检测与TCT、HPV-DNA分型联合阴道镜及病理学检测的结果进行对比分析。结果350例女性经TCT检测后,诊断为正常以及炎症148例,意义不明确的不典型鳞状上皮(ASCUS)90例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)60例、高度鳞状上皮内病变(HSIL)45例以及鳞状细胞癌(SCC)7例。同时经HPV-DNA检测,其中HSIL组、SCC组的HPV-DNA检测阳性率较高,而正常以及炎症组的HPV-DNA检测阳性率最低。经阴道镜活检检测后,诊断为正常以及炎症124例,CINⅠ100例,CINⅡ85例,CINⅢ34例,SCC 7例;同时经TCT联合HPVDNA检测的检出率81.14%。与TCT联合HPV-DNA分型检测相比,重度、中度、轻度不典型性增生患者经TCT、HPV-DNA分型联合阴道镜检测的检出率较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TCT、HPV-DNA分型联合阴道镜检测可以提高临床上对于宫颈癌的诊断检出率,具有更高的筛查检出率,可作为临床上用于筛查宫颈癌的重要手段。

一体化核酸工作站在HPV分型检测中的应用评价

目的评价一体化核酸工作站在人乳头瘤病毒(HPV)分型检测中的临床应用价值。方法收集2021年4月至2021年8月于该院门诊进行宫颈癌筛查的241例患者的宫颈脱落细胞样本,每例样本均同步采用一体化工作站和分步式PCR流程检测HPV分型,一体化核酸工作站组为试验组,分步式PCR检测作为标准对照组,统计两种检测方法HPV分型的检测结果。结果一体化核酸工作站与标准PCR检验阳性符合率为99.26%,阴性符合率95.28%,总符合率97.51%;Kappa检验显示二者检测结果一致性良好(Kappa值0.949);器械重复性及稳定性较好;对10^(3)copies/mL以上水平28种HPV亚型能准确检出。结论一体化核酸工作站对HPV分型检测具有较高的准确率与灵敏度,诊断结果与分步式PCR检测检测结果一致性较好,证明一体化核酸工作站能够满足预期用途及HPV筛查的临床应用需求。

人乳头瘤病毒-DNA分型检测在早期宫颈癌筛查中的应用研究

目的:探究分析在早期宫颈癌筛查中应用人乳头瘤病毒-DNA分型检测的价值。方法:从2021年4月至2022年3月本院早期宫颈癌筛查女性中抽选2500例作为本次研究对象,所有女性均接受人乳头瘤病毒-DNA分型检测,统计分析早期筛查结果。结果:本次所选的2500接受早期宫颈癌筛查人群中,188例确定感染人乳头瘤病毒感染,占比为7.52%,在感染人群中,20岁到29岁占比最高,占比为42.55%。在人乳头瘤病毒阳性感染者中通过人乳头瘤病毒-DNA分型检查,结果显示人乳头瘤病毒-58占比为13.83%,为最高;其次为人乳头瘤病毒-16占比为12.77%;后续占比由高到低分别为人乳头瘤病毒-18占比为12.23%、人乳头瘤病毒-56占比为11.17%、人乳头瘤病毒-59占比为11.17%、人乳头瘤病毒-14占比为7.45%、人乳头瘤病毒-31占比为6.38%、人乳头瘤病毒-33占比为6.38%、人乳头瘤病毒-35占比为5.85%。结论:在早期宫颈癌筛查中应用人乳头瘤病毒-DNA分型检测可以高效出筛早期HPV感染患者,并且对人乳头瘤病毒-DNA进行分型,更好地确定感染病毒类型,结合TCT结果从而制定针对性的干预方案,为临床诊疗提供精准方案。

HPV基因分型检测在妇科宫颈癌筛查中的应用分析

宫颈癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤,发病率在女性恶性肿瘤中居世界第二位,在一些发展中国家和地区居第一位。人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈癌密切相关,研究发现99%以上的宫颈癌有HPV感染,HPV是宫颈癌的主要致病因子。为进一步研究HPV感染与宫颈病变的相关性,以期为宫颈癌的筛查防治提供可靠依据。

HPV-DNA基因分型检测在高危型人乳头瘤病毒中的诊断效果及检出率分析

分析HPV-DNA 基因分型检测对高危型人乳头瘤病毒(缩:HPV)的诊断作用。方法 纳入的是门诊+住院患者共计5296例,分别予以HPV-DNA 基因分型测定以及宫颈液基薄层细胞学(缩:TCT)检查,对比诊断的具体效果。结果 5296例门诊与住院患者中,高危型HPV的阳性率为25.94%。且高危型HPV亚型中,HPV52、HPV53、HPV16占比最高。感染情况分析可见,单一感染占比最高,为70.06%,其次为2重感染,占比21.02%。2324例接受TCT病理检查,最终确认的HPV阳性是524例。以此为金标准,HPV-DNA 基因分型的准确性统计为94.54%,敏感度统计为99.01%,特异度统计为93.59%,阳性预测值统计为76.53%,阴性预测值统计为99.78%,漏诊率统计为0.99%,误诊率统计为6.41%。结论 HPV-DNA 基因分型对于高危型HPV的诊断精准度比较高,和TCT检查相比并无明显的差异,而且具有典型的基因分型分布特征,利于疾病的后续治疗方案拟定。

汗潜指印的STR分型检测

目的探索汗潜指印的荧光STR复合扩增检测的方法。方法采用Chelex-100和Microco-100浓缩柱,提取汗潜指印中DNA,STR复合扩增荧光电泳检测。结果 105例汗潜指纹STR分型可明确判读5个以上基因座的占30.3％,个体之间的差异、捺印指印时用力大小以及指印遗留在客体上时间的长短均影响检测成功率。结论该汗潜指印的DNA提取方法步骤简单,方法较为稳定,使单枚汗潜指印可望获得DNA分型。

APTIMA HPV E6/E7 mRNA和MALDI-TOF-MS HPV基因分型检测宫颈高度病变效果评价

目的：以HC-Ⅱ法HPV DNA为对照,评价APTIMA法HPV E6/E7 mRNA检测（A-HPV）和MALDI-TOF-MS HPV分型检测技术（M-HPV）用于宫颈癌与癌前病变筛查的临床价值。方法：深圳市25-59岁、3年内未行宫颈癌筛查、未接受过子宫切除和盆腔放疗的2095例未孕妇女参加了本次筛查。医生于患者宫颈外口处直接收集2份宫颈脱落细胞标本,一份用于液基细胞学检查,一份用于HC-Ⅱ、A-HPV和M-HPV检测。宫颈细胞学≥ASCUS及3种方法 HPV检测任一阳性结果者均回叫行阴道镜下定点或四象限活检及宫颈管诊刮（ECC）。以病理诊断为标准评价各种HPV检测方法用于宫颈癌筛查的价值。结果：2095例研究对象中各项检测数据齐全者1970例。1970例患者的平均年龄为（35.89±7.655）岁。细胞学≥ASCUS者占6.4%（127/1970）,CINⅡ＋者占1.3%（26/1970）,CINⅢ＋者占0.76%（15/1970）。HC-Ⅱ、A-HPV和M-HPV总的HPV阳性率分别是19.4%、12.1%和14.8%,差异有统计学意义（P〈0.05）。HC-Ⅱ、A-HPV和M-HPV对检出CINⅡ＋病变的敏感性分别为88.5%（95%CI为68.7-97.0）、100%（95%CI为84.0-100）和92.3%（95%CI为73.4-98.7）,特异性分别为81.5（95%CI为79.7-83.2）、89.1%（95%CI为87.6-90.4）和86.3%（95%CI为84.6-87.8）;A-HPV与HC-Ⅱ相比敏感性稍高（P〈0.05）,M-HPV敏感性和HC-Ⅱ相同（P〉0.05）,三者比较有统计学意义（P〈0.05）。结论：A-HPV和M-HPV用于宫颈癌筛查都有很好的敏感性和准确性,两者活检率明显低于HC-Ⅱ,可减少医疗负担和花费。HPV亚型分型和HPV E6/E7 mRNA结合有更好地预测宫颈癌患病风险的作用。

HPV分型检测对宫颈高度病变的筛查作用

目的观察HPV分型检测在宫颈高度病变筛查中的作用。方法对460例行液基细胞学及HPV分型检测患者资料进行回顾性分析,其中细胞学结果≥ASCUS的患者行宫颈病理学活检。结果 257例HPV检测阳性(阳性率为55.87%),其中分型检测感染频度前6位分别为16、58、52、18、68、53型。208例宫颈细胞学异常,确诊宫颈高度病变62例,其中高危型HPV+与HPV-者分别为58例和4例(P<0.01);145例ASCUS,活检确诊宫颈高度病变39例,其中高危型HPV+与HPV-者分别为37例和2例(P<0.01);45例LSIL,确诊宫颈高度病变12例,其中高危型HPV+与HPV-者分别为11例和1例(P<0.05);18例HSIL,确诊宫颈高度病变11例,其中高危型HPV+与HPV-者分别为10例和1例(P<0.01)。结论随着宫颈细胞学和组织病理学病变级别的升高,高危型HPV感染的阳性率呈上升趋势(P<0.05)。HPV分型检测对细胞学异常者宫颈高度病变筛查有重要意义。