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分离纯化重组解脂耶氏酵母发酵液中虫草素的研究
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作者 宋丽萍 段希宇 +2 位作者 王翀 卢向阳 田云 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期26-31,共6页
多项研究证明以解脂耶氏酵母作为虫草素生物合成的细胞工厂,是获得虫草素的有效途径。为获得下游虫草素分离纯化工艺,该研究采用不同规格的大孔吸附树脂对重组解脂耶氏酵母发酵液中的虫草素进行静态、动态纯化。结果显示,以NKA-Ⅱ大孔... 多项研究证明以解脂耶氏酵母作为虫草素生物合成的细胞工厂,是获得虫草素的有效途径。为获得下游虫草素分离纯化工艺,该研究采用不同规格的大孔吸附树脂对重组解脂耶氏酵母发酵液中的虫草素进行静态、动态纯化。结果显示,以NKA-Ⅱ大孔吸附树脂作为吸附材料,在虫草素质量浓度为3 mg/mL、pH值为9的上样液以上样流速为3 BV/h、上样体积为10 BV、洗杂流速为2 BV/h、洗杂体积为3 BV、洗脱剂为体积分数为30%乙醇、洗脱流速为3 BV/h、洗脱体积为15 BV时,发酵液中虫草素回收率可达到87.67%,纯度达65.82%。该研究为今后利用重组解脂耶氏酵母大规模生产制备虫草素提供数据参考。 展开更多
关键词 虫草素 解脂耶氏酵母 分离纯化 大孔吸附树脂 甘蔗糖蜜
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鳖蛋黄血管紧张素转化酶抑制肽分离纯化及活性分析
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作者 刘华宇 廖彭莹 +5 位作者 张天丰 张新锐 邓纭宁 李耀华 韦金锐 陈俊 《食品科学》 EI CAS 北大核心 2025年第1期40-48,共9页
为从鳖蛋黄酶解物中筛选具有血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性的肽段,以ACE抑制活性为评价指标,采用超滤和凝胶过滤色谱技术进行分离纯化。采用液相色谱-串联质谱技术对活性组分进行肽段鉴定,借助生物信息... 为从鳖蛋黄酶解物中筛选具有血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性的肽段,以ACE抑制活性为评价指标,采用超滤和凝胶过滤色谱技术进行分离纯化。采用液相色谱-串联质谱技术对活性组分进行肽段鉴定,借助生物信息学工具进行活性评估。优选预测活性较高的肽段进行合成和活性验证,并用分子对接工具分析活性肽与ACE的相互作用。结果表明,鳖蛋黄菠萝蛋白酶酶解物的水解度为(17.70±0.34)%,抑制ACE的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值为(0.210±0.019)mg/mL。对酶解产物进行分离纯化,从活性组分F3中鉴定出36条肽段,选择6条活性评分较高的肽段进行合成,其中肽段YNGIWPRD和ASDILPKK的IC_(50)值分别为(0.019 00±0.000 36)、(0.170 0±0.001 3)mg/mL。分子对接结果表明,二者均通过多条氢键与ACE紧密结合。综上,从鳖蛋黄中筛选出2条新的ACE抑制活性肽。 展开更多
关键词 鳖蛋黄 血管紧张素转化酶抑制肽 分离纯化 生物信息学 分子对接
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青刺尖总黄酮提取、分离纯化工艺优化
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作者 夏海梅 张娅 +4 位作者 王莉 饶晓尧 陆中云 宋娜丽 蒲亚萍 《山西农业科学》 2025年第1期173-180,共8页
青刺尖是滇西北特色生物资源,其含有黄酮类成分,但提取率、纯度均较低。为高效提取、纯化青刺尖总黄酮,以青刺尖总黄酮提取率为考察指标,利用正交设计优化超声波辅助提取法提取青刺尖总黄酮的工艺参数,筛选纯化青刺尖总黄酮的理想树脂... 青刺尖是滇西北特色生物资源,其含有黄酮类成分,但提取率、纯度均较低。为高效提取、纯化青刺尖总黄酮,以青刺尖总黄酮提取率为考察指标,利用正交设计优化超声波辅助提取法提取青刺尖总黄酮的工艺参数,筛选纯化青刺尖总黄酮的理想树脂及纯化条件;然后采用大孔树脂联合聚酰胺柱色谱法进一步纯化,并计算青刺尖总黄酮纯度。结果表明,超声波辅助提取法提取青刺尖总黄酮的最佳工艺为:乙醇为60%、料液比1∶60 g/mL、提取时间70 min,该条件下青刺尖总黄酮提取率为7.97%。其中,各因素对青刺尖总黄酮提取率的影响由大到小依次为乙醇体积分数>料液比>提取时间。分离纯化青刺尖总黄酮的理想树脂为HPD-500树脂,通过绘制静态吸附/解吸曲线获得静态吸附饱和时间为240 min,静态解吸平衡时间为120 min。最佳纯化工艺参数为:上样液pH值为4,上样液质量浓度为1.30 mg/mL,洗脱剂用量为4 BV,洗脱液为60%的乙醇;该条件下纯化青刺尖总黄酮,纯度为33.19%。大孔树脂联合聚酰胺纯化获得的青刺尖总黄酮纯度为62.48%,较大孔树脂纯化后纯度增加29.29%,较纯化前纯度增加54.51%。 展开更多
关键词 青刺尖 总黄酮 超声波辅助提取法 大孔树脂联合聚酰胺柱色谱法 分离纯化
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蛹虫草可溶性β-葡聚糖的分离纯化、结构表征及降血糖活性
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作者 林烨欣 阎光宇 +3 位作者 王雅茹 方华 陈晖 洪专 《食品工业科技》 北大核心 2025年第2期55-63,共9页
菌菇来源可溶性β-葡聚糖具有良好的生物活性,为开发利用蛹虫草中的β-葡聚糖(CMBG),本研究以蛹虫草子实体为原料,采用蛋白酶酶解、大孔树脂吸附、DEAE离子交换柱层析进行纯化,以脱色率及β-葡聚糖保留率进行加权评分,摸索建立最佳纯化... 菌菇来源可溶性β-葡聚糖具有良好的生物活性,为开发利用蛹虫草中的β-葡聚糖(CMBG),本研究以蛹虫草子实体为原料,采用蛋白酶酶解、大孔树脂吸附、DEAE离子交换柱层析进行纯化,以脱色率及β-葡聚糖保留率进行加权评分,摸索建立最佳纯化工艺条件。对获得的β-葡聚糖进行结构分析,并研究其体外降血糖活性。结果显示:大孔树脂HPD-750具有最佳的吸附效果,其吸附最优条件为:上样流速5 mL/min、上样浓度4 mg/mL、上样体积400 mL、树脂质量40 g。利用DEAE-FF纤维素交换柱分离出两个β-葡聚糖组分CMBG-1和CMBG-2,相对分子量分别为13.57×10^(4)Da和14.36×10^(4)Da;两者均由Gal、Glc、Man三种单糖组成,其摩尔比分别为1.28:5.27:1.01和0.71:4.43:0.80。通过刚果红分析得出CMBG-1具有三螺旋结构,而CMBG-2不具备三螺旋结构,二者对α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制率都与样品的浓度呈正相关,其对α-淀粉酶抑制的IC50分别为2.68和4.32 mg/mL,对α-葡萄糖苷酶抑制的IC50分别为2.37和3.01 mg/mL,拥有三螺旋结构的CMBG-1的降血糖活性明显高于不具备三螺旋结构的CMBG-2,在功能食品开发方面具有良好的前景。 展开更多
关键词 蛹虫草β-葡聚糖 分离纯化 结构分析 降血糖活性
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食用菌姬松茸多糖的分离纯化及结构分析 被引量:1
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作者 耿敏 李晓婧 +3 位作者 王嘉怿 张春玉 周义发 张梦珊 《东北师大学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第1期115-124,共10页
采用热水煮提、乙醇沉淀和离子交换-凝胶组合柱层析的方法,从食用菌姬松茸中提取分离纯化出了两种电荷和相对分子质量分布均一的姬松茸多糖级分WABM-N-a和WABM-A-b,对两种均一级分的结构进行了研究.结果表明:WABM-N-a级分以1,6-Galp构... 采用热水煮提、乙醇沉淀和离子交换-凝胶组合柱层析的方法,从食用菌姬松茸中提取分离纯化出了两种电荷和相对分子质量分布均一的姬松茸多糖级分WABM-N-a和WABM-A-b,对两种均一级分的结构进行了研究.结果表明:WABM-N-a级分以1,6-Galp构成主链骨架结构,同时存在较多的1,6-Glcp 1,3-Fucp结构和少量的1,4-Glcp,1,3-Glcp结构连接在Gal的O-3和/或O-4位上,且侧链上的Glc在O-3位上存在少量的分支.WABM-A-b级分为1,6-Glcp连接的葡聚糖结构,Glc在O-2,O-3和/或O-4位上可能均有分支,侧链结构可能为1,3-Glcp,1,4-Glcp,T-Glcp和1,6-Galp. 展开更多
关键词 食用菌 姬松茸多糖 分离纯化 结构分析
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澳洲坚果抗菌肽分离纯化及其肽段鉴定与分析
6
作者 郭刚军 胡小静 +5 位作者 马尚玄 付镓榕 缪福俊 肖县田 黄克昌 贺熙勇 《食品研究与开发》 CAS 2024年第8期159-166,共8页
以液压压榨澳洲坚果粕为原料,采用碱性蛋白酶水解制备澳洲坚果多肽(macadamia nut peptide⁃0,MNP⁃0),以对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌活性为跟踪指标,通过超滤、DA201⁃C型大孔吸附树脂、交联葡聚糖凝胶Sephadex G⁃25对其进行逐级... 以液压压榨澳洲坚果粕为原料,采用碱性蛋白酶水解制备澳洲坚果多肽(macadamia nut peptide⁃0,MNP⁃0),以对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌活性为跟踪指标,通过超滤、DA201⁃C型大孔吸附树脂、交联葡聚糖凝胶Sephadex G⁃25对其进行逐级分离纯化,获得抑菌活性较强的抗菌肽,并运用液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC⁃MS/MS)技术对其进行肽段组成与氨基酸序列分析。结果表明:超滤分离的不同分子量澳洲坚果多肽在所有多肽中所占质量分数不同,抑菌活性也有所差异。其中,澳洲坚果多肽组分MNP⁃4占比最高,为29.55%;抑菌活性也最强,对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌圈直径分别为10.01 mm与9.41 mm。大孔吸附树脂纯化多肽组分MNP⁃4的技术条件为75%乙醇溶液为解吸剂,静态吸附3 h,动态洗脱体积60 mL。经大孔吸附树脂与交联葡聚糖凝胶Sephadex G⁃25分离纯化,获得3个澳洲坚果纯化多肽(macadamia nut purified peptide,MPP)组分,其中组分MPP⁃2的抑菌活性最强,对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌圈直径分别为18.67 mm与16.83 mm,优于多肽MNP⁃0与超滤分离多肽组分。分离纯化的澳洲坚果抗菌活性多肽MPP⁃2含有DDLTDPAPA、VLL、WDY、VPV、WDL、LLW、LWL、FDW 8个肽段,经预测分析,属于抗菌肽的肽段为WDL与FDW,其概率得分a(1.00≥a≥0.50)均为1.00,疏水率均为66.67%,均带有1个负电荷,等电点分别为0.69与0.67,并具有较好的溶解性。研究结果表明澳洲坚果可通过酶法制备具有抗菌活性的肽类成分。 展开更多
关键词 澳洲坚果 抗菌肽 分离纯化 肽段 鉴定 氨基酸序列 分析
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混菌发酵茶籽抗氧化肽的分离纯化及其功能活性研究
7
作者 赵世光 储欣颖 +2 位作者 黎玮 张宇 薛正莲 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期87-93,110,共8页
为促进茶叶籽资源的深度开发利用,采用不同截留分子质量的超滤膜对混菌发酵茶籽多肽产物进行分级分离,比较茶籽多肽的抗氧化活性与其分子质量的对应关系;利用凝胶过滤色谱技术对茶籽多肽逐级纯化,获得特征性茶籽抗氧化肽,对其二级结构... 为促进茶叶籽资源的深度开发利用,采用不同截留分子质量的超滤膜对混菌发酵茶籽多肽产物进行分级分离,比较茶籽多肽的抗氧化活性与其分子质量的对应关系;利用凝胶过滤色谱技术对茶籽多肽逐级纯化,获得特征性茶籽抗氧化肽,对其二级结构组成及相对含量进行分析,并考察其热稳定性和抗消化稳定性;以H_(2)O_(2)诱导小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)建立氧化损伤模型,评价茶籽抗氧化肽的细胞氧化损伤保护功能。结果表明:经超滤分级后,茶籽多肽的抗氧化活性与其分子质量呈负相关,分子质量小于1 kDa的TSP4组分具有最高的自由基清除能力;TSP4分子质量分布范围在90~849 Da之间,凝胶过滤色谱纯化得到的TSP4-b亚组分平均分子质量为446 Da,其二级结构中的β-折叠的相对含量从未发酵茶叶籽的16.59%上升至44.43%,α-螺旋则由未发酵茶叶籽的37.61%降至17.57%;TSP4-b经20~60℃热处理以及模拟胃肠消化后,自由基相对清除率仍可分别保持在90%及80%以上,具备良好的热稳定性及抗消化能力;中(0.5 mg/mL)、高(5.0 mg/mL)剂量的TSP4-b的介入可使H_(2)O_(2)诱导的MEF细胞存活率分别达到73.8%、82.4%。综上,所分离的茶籽抗氧化肽具有较强的抗氧化活性,对H_(2)O_(2)诱导的细胞损伤具有保护作用,在医药、保健食品等领域具有良好的发展潜力。 展开更多
关键词 茶籽多肽 分离纯化 功能活性 细胞氧化损伤
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虚拟模板MIPs-SPE联用技术对茶叶粗提物中咖啡因的分离纯化研究
8
作者 何倩 孙亚坤 +2 位作者 程煜凤 杨建 王超 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第7期1014-1018,共5页
目的 采用儿茶素作为虚拟模板制备分子印迹聚合物(Molecular imprintingpolymers,MIPs)结合固相萃取(Solid phase extraction,SPE)技术对茶叶粗提物中的咖啡因进行分离纯化。方法 以儿茶素为虚拟模板,4-乙烯基吡啶为功能单体,乙二醇二... 目的 采用儿茶素作为虚拟模板制备分子印迹聚合物(Molecular imprintingpolymers,MIPs)结合固相萃取(Solid phase extraction,SPE)技术对茶叶粗提物中的咖啡因进行分离纯化。方法 以儿茶素为虚拟模板,4-乙烯基吡啶为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,聚苯乙烯为大分子拥挤试剂,以原位聚合的方式制备虚拟模板分子印迹聚合物。测定该分子印迹聚合物的保留性能、形貌特征和孔径分布等性能,以该分子印迹聚合物作为固相萃取吸附剂,对茶叶粗提物中的咖啡因进行分离纯化。结果 所制备儿茶素分子印迹聚合物对咖啡因的最优印迹因子为4.57。对茶叶粗提物中的咖啡因进行分离纯化后,在咖啡因纯度高于95%的条件下,咖啡因的回收率可达85%以上。结论 以儿茶素为虚拟模板合成的分子印迹聚合物,可以用于茶叶粗提物中咖啡因的分离纯化。 展开更多
关键词 虚拟模板 分子印迹聚合物 固相萃取 儿茶素 咖啡因 分离纯化
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一株产凝乳酶变色栓菌鉴定及其凝乳酶的分离纯化与酶学性质研究
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作者 黄武营 李云 +1 位作者 朱慧 周飞 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期243-250,I0008,共9页
微生物凝乳酶具有生产周期短和易于发酵生产的优点,是传统小牛皱胃酶的经济高效替代选择之一。为了筛选新的凝乳酶产生菌,该研究以从传统发酵腐乳分离的霉菌为出发菌株,筛选具有高凝乳活性和低蛋白水解活性的霉菌菌株。采用内源转录区... 微生物凝乳酶具有生产周期短和易于发酵生产的优点,是传统小牛皱胃酶的经济高效替代选择之一。为了筛选新的凝乳酶产生菌,该研究以从传统发酵腐乳分离的霉菌为出发菌株,筛选具有高凝乳活性和低蛋白水解活性的霉菌菌株。采用内源转录区间隔区结合线粒体小亚基核糖体DNA扩增测序的方法对菌株进行了分子鉴定。通过硫酸铵分级盐析沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱、Sephadex G100凝胶过滤层析法对酶进行了纯化,并研究了凝乳酶酶学特性。筛选出菌株CQ3具有良好的凝乳活性和低蛋白水解活性,该菌株鉴定为变色栓菌(Trametes versicolor)。CQ3凝乳酶纯化后经SDS-PAGE分析呈现出分子质量为61 kDa的唯一条带。该酶作用的最适温度为45℃,最适pH值为6.5,Ca^(2+)对酶活力有显著的促进作用。该酶在pH值为4.5~7.0和温度低于50℃条件下有良好的稳定性。蛋白酶抑制剂试验表明,该酶为一种天冬氨酸蛋白酶。该研究结果报道了一种新的产凝乳酶菌种资源,为丰富凝乳酶产生菌株资源,进一步评价栓菌凝乳酶在干酪加工适用性的研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 凝乳酶 变色栓菌 酶的分离纯化 内源转录间隔区 线粒体小亚基核糖体DNA
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高粱多酚提取、分离纯化及组分分析
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作者 卢智 王春艳 +2 位作者 薛娅婧 石宏宇 朱俊玲 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期87-95,共9页
高粱中的多酚对人体健康具有积极作用,通过单因素和响应面优化超声辅助乙醇提取高粱总多酚的工艺,得到超声提取高梁多酚的最佳工艺条件为:超声时间58 min,温度57℃,超声功率450 W,料液比1∶17,在此条件下高粱多酚的得率为1.362%。通过对... 高粱中的多酚对人体健康具有积极作用,通过单因素和响应面优化超声辅助乙醇提取高粱总多酚的工艺,得到超声提取高梁多酚的最佳工艺条件为:超声时间58 min,温度57℃,超声功率450 W,料液比1∶17,在此条件下高粱多酚的得率为1.362%。通过对5种大孔树脂的静态吸附及解吸附性能比较,确定HPD-300型树脂为分离纯化高粱多酚的最佳树脂,通过对上样浓度、上样pH、上样速度、洗脱溶剂、洗脱速度的单因素实验,得到最佳纯化条件为样品质量浓度1.33 mg/mL,上样pH 4,动态吸附速度2 mL/min,乙醇洗脱剂体积分数60%,洗脱速度1.5 mL/min。经过纯化后冻干的高粱多酚粉纯度提高50.42%,是纯化前的3.3倍。通过化学定性分析、红外光谱、紫外-可见吸收光谱及液相色谱-质谱联用法检测分析,得到高粱多酚中有19种酚酸类物质,5种丹宁类物质,其中儿茶素、原儿茶酸、苯丙氨酸、咖啡酸、没食子儿茶素的含量较高。 展开更多
关键词 高粱 多酚 分离纯化 组分分析
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植物乳杆菌LP21源纳米硒的分离纯化研究
11
作者 王丽红 王文斌 孔阳 《陕西科技大学学报》 北大核心 2024年第4期63-69,93,共8页
植物乳杆菌LP21 (Lactobacillus plantarum LP21)合成的纳米硒易黏附于菌体表面,不易分离提取.本研究在保持细胞结构完整的前提下,对附着在菌体上的纳米硒进行分散处理.通过单因素实验探究超声波、有机溶剂及表面活性剂对纳米硒分散的影... 植物乳杆菌LP21 (Lactobacillus plantarum LP21)合成的纳米硒易黏附于菌体表面,不易分离提取.本研究在保持细胞结构完整的前提下,对附着在菌体上的纳米硒进行分散处理.通过单因素实验探究超声波、有机溶剂及表面活性剂对纳米硒分散的影响,进而采用正交试验确定最佳分散条件,最后利用蔗糖密度梯度离心与微孔滤膜过滤的方法对纳米硒进行分离纯化.单因素结果表明:超声波、有机溶剂及表面活性剂均有分散作用,其中表面活性剂SDS效果最好;采用正交方法确定的最适分散条件为加入2.5%SDS、1.5%正己醇,超声处理时间25 min;分离纯化采用50%、60%、70%蔗糖密度梯度离心后用0.22μm的水性微孔滤膜过滤,可得到纯净的纳米硒.纳米硒颗粒分布均匀,平均粒径为165.88±35.35 nm.本研究为微生物来源纳米硒的分离制备提供参考依据. 展开更多
关键词 植物乳杆菌 纳米硒 分离纯化
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水杨酸分子印迹聚合物在蛋白质分离纯化中的应用
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作者 王岩 何启贤 +1 位作者 雷玉办 莫江敏 《化纤与纺织技术》 CAS 2024年第4期16-18,共3页
水杨酸分子印迹聚合物由于其高选择性、速效性、低成本的分离优势,在蛋白质分离纯化领域展现出广阔的应用前景。计算方法优化和实验参数精细控制是获得高效分离产物的关键。当前研究主要集中在低分子量模型蛋白的分离,很少转化为复杂样... 水杨酸分子印迹聚合物由于其高选择性、速效性、低成本的分离优势,在蛋白质分离纯化领域展现出广阔的应用前景。计算方法优化和实验参数精细控制是获得高效分离产物的关键。当前研究主要集中在低分子量模型蛋白的分离,很少转化为复杂样品的检测。文章从水杨酸分子印迹聚合物的来源及特点出发,指出传统蛋白质分离方法存在的局限性和挑战,并就水杨酸分子印迹聚合物在蛋白质分离纯化中的应用和实践进行综述,以期为蛋白质分离技术的发展提供参考。 展开更多
关键词 水杨酸 分子印迹聚合物 蛋白质 分离纯化
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高职药物分离纯化技术课程思政的探索与实践
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作者 倪敏 《海峡药学》 2024年第4期51-53,共3页
课程思政是当代高校大学生思想政治教育的新理念和新模式,即将教学内容蕴含的思想政治教育元素和承载的思想政治教育功能融入到各门专业课中。药物分离纯化技术是高职高专药品生产技术专业的核心课程,在药品生产技术专业人才培养中占据... 课程思政是当代高校大学生思想政治教育的新理念和新模式,即将教学内容蕴含的思想政治教育元素和承载的思想政治教育功能融入到各门专业课中。药物分离纯化技术是高职高专药品生产技术专业的核心课程,在药品生产技术专业人才培养中占据重要的地位。本文通过分析课程开展思政教育的必要性,结合时代特征、时事热点,深入挖掘专业思想政治教育元素,对该课程思政进行初步的探索与实践,从而在开展专业教学的同时实现立德树人。 展开更多
关键词 高职 药物分离纯化技术 课程思政
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澳洲坚果抗氧化肽的分离纯化及肽段鉴定 被引量:3
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作者 付镓榕 马尚玄 +3 位作者 魏元苗 徐文婷 郭刚军 贺熙勇 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第6期91-99,共9页
为研究澳洲坚果抗氧化肽的抗氧化活性和氨基酸组成,以复配蛋白酶水解澳洲坚果粕制备粗多肽,利用超滤、大孔树脂纯化技术制备了抗氧化活性最佳的分子量小于1000 Da的多肽,采用Sephadex G-15凝胶对其分离并评价各组分对DPPH、羟基、ABTS+... 为研究澳洲坚果抗氧化肽的抗氧化活性和氨基酸组成,以复配蛋白酶水解澳洲坚果粕制备粗多肽,利用超滤、大孔树脂纯化技术制备了抗氧化活性最佳的分子量小于1000 Da的多肽,采用Sephadex G-15凝胶对其分离并评价各组分对DPPH、羟基、ABTS+自由基的清除能力与还原能力,筛选出抗氧化活性最强组分,利用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography and tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行鉴定并分析。结果表明,葡聚糖凝胶柱层析分离出G1、G2、G3组分,其中G3具有最佳的抗氧化活性,其羟基自由基清除能力半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))6.18 mg/mL与还原能力IC_(50)2.19 mg/mL优于谷胱甘肽,DPPH自由基清除能力IC_(50)0.50 mg/mL,ABTS+自由基清除能力IC_(50)0.02 mg/mL;通过液相色谱-串联质谱鉴定G3含有46个肽段,肽段长度均小于10个氨基酸,匹配得分大于200分的9条肽段分子量为631~920 Da,均无毒性;筛选获得高抗氧化活性肽HLLPK、KEFFP、KEFFPA,其分子量分别为606.84、666.83、737.92 Da。本研究初步揭示了澳洲坚果抗氧化肽组成,深化了澳洲坚果抗氧化肽的研究,为澳洲坚果抗氧化肽的开发利用提供了理论参考。 展开更多
关键词 澳洲坚果 抗氧化肽 抗氧化活性 分离纯化 肽段鉴定
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刺五加新品种‘紫加1号’多糖分离纯化及抗氧化活性分析 被引量:1
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作者 周锦燕 张芸 +3 位作者 刘良燕 张慧 阮流洋 曾千春 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期362-372,共11页
‘紫加1号’为该课题组选育的刺五加(Acanthopanax senticosus)新品种,嫩茎叶灰紫色且味甘。为分离纯化‘紫加1号’嫩茎叶多糖,并测定各组分的单糖组成和分子量大小、评价各组分的抗氧化活性。该研究以‘紫加1号’嫩茎叶为材料,采用水... ‘紫加1号’为该课题组选育的刺五加(Acanthopanax senticosus)新品种,嫩茎叶灰紫色且味甘。为分离纯化‘紫加1号’嫩茎叶多糖,并测定各组分的单糖组成和分子量大小、评价各组分的抗氧化活性。该研究以‘紫加1号’嫩茎叶为材料,采用水提醇沉工艺,经大孔树脂吸附法除杂脱色得到粗多糖(A.polysaccharides,ASPS);通过DEAE-Cellulose 52离子柱和Sephadex G-100凝胶柱分离纯化得多糖组分;采用离子色谱和凝胶色谱-示差-多角度激光光散射色谱,测定各均一组分的单糖组成和分子量;通过测定均一组分清除羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_(2)^(-·))、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)的能力,分析其体外抗氧化活性强弱。结果表明:ASPS经分离纯化得到4种多糖组分,即酸性多糖ASPA-1-1、ASPA-2-1、ASPA-3-1和中性多糖ASPN-1,其分子量依次为8.10、26.15、0.91、0.89 kDa,主要是由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、核糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等按不同比例组成的杂多糖。ASPA-1-1、ASPA-2-1、ASPA-3-1、ASPN-1均具有明显的抗氧化活性,其中ASPA-2-1清除·OH、DPPH的能力高于ASPA-1-1、ASPA-3-1、ASPN-1,而ASPA-3-1清除O_(2)^(-·)的能力最强。综上认为,从‘紫加1号’中分离纯化得到的多糖具有较好的抗氧化活性。该研究结果为‘紫加1号’作为天然抗氧化剂的深度研究和进一步开发与利用提供了一定的科学理论依据。 展开更多
关键词 紫加1号 嫩茎叶 多糖 分离纯化 单糖组成 分子量 抗氧化活性
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科研项目融入生物分离纯化技术教育的探索与实践
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作者 孙静 《现代商贸工业》 2024年第8期262-264,共3页
生物分离纯化技术是生物制药技术专业的专业核心课,与生产实践联系紧密,为提高高职生物制药技术专业学生的职业素养,培养高素质技术技能人才,将科研项目融入课堂教学,采用混合式教学、案例教学等教学方法,丰富课堂教学内容,解决课岗对... 生物分离纯化技术是生物制药技术专业的专业核心课,与生产实践联系紧密,为提高高职生物制药技术专业学生的职业素养,培养高素质技术技能人才,将科研项目融入课堂教学,采用混合式教学、案例教学等教学方法,丰富课堂教学内容,解决课岗对接难题,对培养学生学习兴趣及提升培养质量和促进创新创业有重要作用。 展开更多
关键词 科研项目 生物分离纯化技术 课堂教学
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暗褐脉柄牛肝菌子实体多糖的分离纯化、结构表征及体外降血糖活性 被引量:1
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作者 潘章超 张人谕 +2 位作者 黎欢昶 曾念开 王勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第8期55-62,共8页
为研究暗褐脉柄牛肝菌多糖的结构特性及生物活性,本研究以暗褐脉柄牛肝菌子实体为研究对象,采用水提醇沉法制备粗多糖,Sevag试剂脱蛋白,大孔吸附树脂脱色,DEAE-52纤维素柱色谱分离,丙烯葡聚糖凝胶S-400HR纯化制备均一多糖。采用高效凝... 为研究暗褐脉柄牛肝菌多糖的结构特性及生物活性,本研究以暗褐脉柄牛肝菌子实体为研究对象,采用水提醇沉法制备粗多糖,Sevag试剂脱蛋白,大孔吸附树脂脱色,DEAE-52纤维素柱色谱分离,丙烯葡聚糖凝胶S-400HR纯化制备均一多糖。采用高效凝胶渗透法测定分子质量、PMP柱前衍生法结合高效液相色谱测定单糖组成、紫外光谱分析是否含蛋白或核酸、红外光谱分析官能团种类、核磁共振波谱初步分析多糖的结构,扫描电子显微镜观察多糖的形貌。利用α-葡萄糖苷酶抑制实验筛选出活性较好的多糖组分并进一步研究其酶动力学,初步阐明暗褐脉柄牛肝菌多糖的体外降血糖作用机制和类型。结果表明,筛选的4种大孔树脂(HP 2MGL、HP 20、SP 850、SP 825)中,SP 825大孔树脂综合脱色效果最好;活性组分(PPP-0)重均分子质量为31 059 Da,含有α和β构型糖苷键,是一种由半乳糖Gal、葡萄糖Glc、岩藻糖Fuc、甘露糖Man组成的杂多糖;体外降血糖活性实验表明粗多糖和3种均一多糖组分均对α-葡萄糖苷酶有抑制作用,其中PPP-2抑制率最高,PPP-0次之,且在酶动力学上属于竞争性可逆抑制。本研究可为暗褐脉柄牛肝菌多糖在降血糖相关功能食品和药品方面的开发提供理论依据。 展开更多
关键词 暗褐脉柄牛肝菌 多糖 分离纯化 结构表征 降血糖活性
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黍稷麸皮多糖分离纯化、结构表征及抑菌活性分析 被引量:1
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作者 陈燕云 平华 +3 位作者 高媛 杜远芳 刘静 张丽珍 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第10期1-7,共7页
本研究通过对黍稷麸皮多糖进行分离纯化、结构表征,并研究其抑菌活性,旨在为黍稷加工副产物中营养物质的开发利用提供参考。采用碱提醇沉法提取黍稷麸皮多糖(millet bran polysaccharides,MBP),DEAE-50、Sephadex G-100柱层析分离纯化,... 本研究通过对黍稷麸皮多糖进行分离纯化、结构表征,并研究其抑菌活性,旨在为黍稷加工副产物中营养物质的开发利用提供参考。采用碱提醇沉法提取黍稷麸皮多糖(millet bran polysaccharides,MBP),DEAE-50、Sephadex G-100柱层析分离纯化,利用HPLC色谱、红外光谱、原子力显微镜、扫描电镜、X-射线衍射等方法对黍稷麸皮多糖结构进行分析。结果表明,MBP分子量为3.479×104 Da,单糖组成的摩尔比为甘露糖:鼠李糖:葡萄糖:半乳糖:阿拉伯糖:木糖=0.11:0.13:5.86:0.62:1.00:0.52,是β型吡喃多糖。MBP具有良好的热稳定性,在形态结构方面呈片层状,连接紧密,不具备晶体结构。抑菌实验得出,MBP对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为2 mg/mL。综上,从黍稷麸皮中提取得到的多糖MBP具有良好的抑菌能力。 展开更多
关键词 黍稷麸皮 多糖 分离纯化 结构表征 抑菌活性
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白花蛇舌草三大类成分的分离纯化及抗肿瘤活性测定 被引量:1
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作者 范安琪 侯宝龙 +1 位作者 梁艳妮 王征 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期138-142,共5页
目的从白花蛇舌草中分离纯化总三萜、总多糖、总黄酮,并检测其抗肿瘤活性。方法将白花蛇舌草置于乙醇溶液中冷浸,对其中的三萜类、多糖和黄酮类化合物进行粗提;再通过大孔吸附树脂对粗提物进行处理,获得纯化后的总三萜、总多糖、总黄酮... 目的从白花蛇舌草中分离纯化总三萜、总多糖、总黄酮,并检测其抗肿瘤活性。方法将白花蛇舌草置于乙醇溶液中冷浸,对其中的三萜类、多糖和黄酮类化合物进行粗提;再通过大孔吸附树脂对粗提物进行处理,获得纯化后的总三萜、总多糖、总黄酮。通过CCK-8法检测白花蛇舌草总三萜、总多糖、总黄酮对A549细胞增殖的影响。结果三萜类化合物浸膏得率为20.60%,精制后总三萜纯度为82.73%;粗多糖得率为41.17%,精制后总多糖纯度为71.11%;黄酮类化合物浸膏得率为0.49%,精制后总黄酮纯度为38.14%。纯化后的白花蛇舌草总三萜、总黄酮和总多糖对A549细胞增殖均有抑制作用,白花蛇舌草总三萜和总黄酮对肺癌细胞A549的抑制作用明显。结论白花蛇舌草总三萜、总黄酮、总多糖均抑制肺癌A549细胞的增殖,为白花蛇舌草总黄酮、总多糖、总三萜的抗肿瘤作用研究提供了一定的参考。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 总三萜 总黄酮 总多糖 分离纯化 细胞增殖
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核桃谷蛋白抗菌肽的分离纯化及抑菌稳定性分析 被引量:1
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作者 马慧 顾雪敏 +4 位作者 梅洁 李芳 王佳利 王梓棚 孔令明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期69-77,共9页
目的:以核桃粕谷蛋白为原料生产抗菌肽,研发一种新型抗生素的替代品。方法:通过菌酶协同固态发酵法(枯草芽孢杆菌和碱性蛋白酶协同)从核桃粕谷蛋白中制备抗菌肽,通过超滤、凝胶层析过滤、液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tande... 目的:以核桃粕谷蛋白为原料生产抗菌肽,研发一种新型抗生素的替代品。方法:通过菌酶协同固态发酵法(枯草芽孢杆菌和碱性蛋白酶协同)从核桃粕谷蛋白中制备抗菌肽,通过超滤、凝胶层析过滤、液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)和分子对接对核桃粕谷蛋白抗菌肽(walnut glutelin antimicrobialpeptide,WGP)进行分离、纯化和筛选。以对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌性保持率为指标,研究抗菌肽的抑菌稳定性。结果:经超滤、凝胶层析分离后,WGP-ⅢA和WGP-ⅢC组分均具有较强抗菌活性;LC-MS/MS结合虚拟筛选,从2种组分中共鉴定得到6条多肽,分子对接筛选得到3个肽段,分别为WGP-ⅢA组分的LAEAYNIPDTIARRL和WGP-ⅢC组分的SHSVIYVIR、APQLLYIVK;分子对接结果显示,WGP-ⅢC组分的抑菌活性更强;抑菌稳定性分析表明,核桃谷蛋白抗菌肽在高温热处理、紫外线、不同pH值下和不同蛋白酶处理后均表现出较好的稳定性。结论:核桃粕谷蛋白抗菌肽在食品抑菌防腐领域具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 谷蛋白抗菌肽 菌酶协同 分离纯化 抑菌稳定性 分子对接
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