分级醇沉裙带菜褐藻糖胶及其体外降血糖活性研究

为研究裙带菜褐藻糖胶分级醇沉组分及其体外降血糖活性,本文以裙带菜为原料,通过CaCl2溶液浸提裙带菜褐藻糖胶后逐级沉淀得到四组多糖样品(UPP-45、UPP-55、UPP-65和UPP-75),分别测定其分子量、总糖含量、糖醛酸含量、蛋白质含量、硫酸根含量及单糖组成,通过紫外光谱扫描、红外光谱以及扫描电镜进行分析,并测定多糖组分对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率来探究其体外降血糖活性。结果表明,醇沉浓度越大,小分子量多糖占比越大。UPP-65的总糖含量最高为84.38%,UPP-45的粗糖蛋白和硫酸根含量与其他组分存在显著性差异(P<0.05);四种多糖组分均为酸性多糖。单糖组成分析可知多糖组分的单糖组成和摩尔百分比存在差异。紫外扫描分析可知多糖组分核酸含量有所不同。红外光谱分析可知四种组分的官能团和糖苷键有不同程度的吸收峰。电镜扫描结果可知,多糖组分微观形态各有不同。多糖组分对α-淀粉酶的抑制无剂量依赖关系,UPP-65的抑制率最高,IC50值为0.008 mg/mL;对α-葡萄糖苷酶的抑制呈量-效关系,UPP-65的IC50值最低,为2.346 mg/mL。综上所述,裙带菜分级醇沉的多糖制备工艺切实可行,四种多糖组分均有一定的体外降血糖活性,且UPP-65效果更好。

分级醇沉竹荪多糖的结构及抗氧化活性比较

通过缓冻协同微波法提取竹荪多糖,以20%~80%乙醇分级制备得到4种多糖组分,分别为PI-20、PI-40、PI-60和PI-80;采用UV、FI-IR、HPSEC-MALLS-RI、HPAEC对多糖结构进行分析.结果表明4种组分均含有少量蛋白质,但未检测到糖醛酸存在,PI-20和PI-40多糖含量均在50%以上;低浓度乙醇醇沉的多糖PI-20和PI-40的相对分子质量达到千万级,而高体积分数乙醇醇沉的多糖相对分子质量在万级水平;20%~60%醇沉多糖均由Gal、Glu和Man构成,PI-80仅由Glu和Man组成.4种醇沉多糖组分均具有一定的抗氧化能力,在3种抗氧化试验中,4种醇沉组分PI-80综合抗氧化能力最佳,清除ABTS自由基半抑制质量浓度为0.2484 mg/mL,PI-40综合抗氧化活性最弱,清除ABTS自由基半抑制质量浓度为2.9043 mg/mL.

硬毛粗盖孔菌多糖分级醇沉及抗氧化活性研究

通过对硬毛粗盖孔菌进行液体发酵培养获得菌丝,以冻干菌丝为原料,采用超声辅助热水法提取多糖。用不同终浓度的乙醇溶液(40%、60%和80%)进行沉淀,分别得到(FCP-40、FCP-60和FCP-80)3个组分。同时,运用不同方法对其化学组成、结构特征和抗氧化活性进行了探究。结果表明,3个组分的多糖均含有核酸和蛋白质,其中FCP-40的总糖含量最高,FCP-80的蛋白质含量最高。不同醇沉组分多糖均含有较长侧链和较多分支且都是三螺旋多糖。3种多糖均具有剂量依赖性的抗氧化活性,且羟基(·OH)清除能力相较DPPH自由基清除能力而言效果更显著。

响应面法提取优化破壁灵芝孢子粉多糖及其分级醇沉组分的抗氧化活性研究

目的:对破壁灵芝孢子粉多糖(BGP)的最佳提取工艺、各分级醇沉多糖组分的抗氧化性进行探究。方法:以破壁灵芝孢子粉为原料,采用内部沸腾法探究提取温度、提取时间、料液比对BGP得率的影响;利用响应面法分析优化BGP的提取参数。用不同浓度的乙醇醇沉多糖,通过测定其DPPH自由基以及羟自由基的清除力,测定其抗氧化性。结果:根据回归模型分析预测结果,最佳提取工艺参数为提取温度83℃、提取时间7 min、料液比1:21。在此条件下BGP的得率为9.10%。以不同浓度的乙醇分级醇沉BGP,得到5种醇沉BGP组分。乙醇浓度为90%时,所得BGP的得率最高。抗氧化实验表明各醇沉BGP都具有一定的抗氧化活性。90%-BGP的抗氧化性稍强于其他醇沉多糖,并且随着多糖浓度的增加,各醇沉多糖的抗氧化性均有一定的增加的趋势。结论:利用最佳提取参数提取,不同乙醇浓度醇沉的BGP均具有一定的抗氧化活性。

代料和段木栽培瓦尼桑黄子实体分级醇沉粗多糖理化性质及活性

用20%、50%、70%乙醇分级醇沉栎树木屑代料栽培(DL)、桑树木屑代料栽培(DS)、柞树段木栽培二年生(D 2)和三年生(D 3)瓦尼桑黄(Sanghuangporus vaninii,以下简称桑黄)子实体粗多糖,并比较同一醇沉组分下,4种粗多糖的多糖含量、总酚含量、重均分子量分布、单糖组成、免疫活性和抗氧化活性。结果表明:就多糖含量而言,在3个醇沉组分中,50%醇沉组分的差异最显著,段木栽培D 2、D 3(54.56%、58.55%)高于代料栽培DL、DS(32.42%、33.56%)。就总酚含量而言,在20%醇沉组分中,DL、DS、D 2(10.65%、15.47%、15.70%)较高,而D 3在50%、70%醇沉组分中(9.98%、8.43%)均较高。就重均分子量而言,在3个醇沉组分中,与DL、D 2和D 3相比,DS的重均分子量均较小;在50%醇沉组分中,DL、D 2、D 3主要分布在1.359×10^(5)、7.439×10^(4)、6.823×10^(4);在70%醇沉组分中,DL、D2、D3主要分布在1.124×10^(5)、2.417×10^(4)、2.179×10^(4)。就单糖组成而言,在20%醇沉组分中,D 3仅由葡萄糖构成,在50%与70%醇沉组分中DL均由半乳糖、葡萄糖和甘露糖构成,而D2的单糖组成最复杂。就免疫活性而言,在3个醇沉组分中,50%醇沉组分的差异最显著,柞树段木栽培的D 2和D 3刺激巨噬细胞释放NO的量高于代料栽培的DL和DS。就抗氧化活性而言,在3个醇沉组分中,D 2对DPPH和ABTS自由基清除率均高于DL、DS和D 3。人工栽培瓦尼桑黄可根据需要的活性组分和栽培适应性选择合适的栽培料和栽培方式。

分级醇沉发酵麸皮多糖的成分分析与抗氧化活性研究

以不同浓度乙醇(50%、60%、70%和80%)分级沉淀发酵麸皮多糖,得到4种多糖组分(WPB_S-50、WPB_S-60,WPB_S-70和WPB_S-80),通过分析纯度、多酚、残留蛋白含量、单糖组成和抗氧化活性,探究了4种多糖的组成、抗氧化活性差异及原因。结果表明,4种多糖组分的纯度均在70%以上,WPB_S-50组分多糖纯度最高,达79.95%;各组分中均含有多酚和蛋白,WPB_S-80组分中多酚和残留蛋白含量显著高于其他组分(P<0.05);4种多糖均由阿拉伯糖、木糖、甘露糖和葡萄糖等十种单糖组成,但组成比例存在差异;抗氧化活性表明:4种多糖组分均有一定的抗氧化活性,且与其中多酚及蛋白含量存在显著的正相关(P<0.05)。

夏枯草酶解水提液分级醇沉及其抗HSV⁃1活性

目的探究夏枯草酶解水提液分级醇沉部分的成分组成及其抗HSV⁃1活性。方法利用纤维素酶酶解法选择性提高夏枯草多糖的提取率,对其酶解水提液进行分级醇沉,用细胞病变效应(CPE)实验对各浓度的乙醇沉淀进行活性测试,根据细胞试验计算EC50。筛选出夏枯草水提液中抗HSV活性最优的部分,采用大孔树脂D301对夏枯草酶解水提液分级醇沉中具有抗HSV⁃1活性的部分进行分离纯化,除去多酚及蛋白质类成分,得到多糖含量较高的部分,并测试该部分的抗HSV活性。结果夏枯草粉末经纤维素酶酶解后的水提液分级醇沉沉淀中,20%、30%乙醇的沉淀具有良好的抗HSV⁃1活性,其ED50分别为60.79、42.45μg/mL,40%乙醇以上的分级沉淀无活性或活性较弱。经大孔树脂D301纯化后的夏枯草多糖纯度可达77.78%,但其抗HSV活性反而丧失。结论夏枯草多糖含量高低与其抗HSV活性强弱并不呈正相关,可为进一步研究研究其有效部位及构效关系提供参考。

蒲公英多糖的分级醇沉及其降血糖和抗氧化活性研究

以新疆野生蒲公英为原料,通过超声辅助法提取蒲公英多糖后以不同体积分数的乙醇溶液(20%,40%,60%和80%)进行分级沉淀,依次得到4种蒲公英多糖样品(PD-20,PD-40,PD-60和PD-80);为探究不同组分间的差异,分别测定其总糖含量、蛋白质含量、糖醛酸含量及单糖组成,并通过紫外和红外光谱进一步分析不同组分之间的特性差异。结果表明,蒲公英多糖4个组分均为结合蛋白的复合物,其中PD-80组分的总糖含量最高(PD-80>PD-40>PD-60>PD-20),蒲公英多糖PD-20组分的蛋白质含量最高;单糖组成测定结果显示4种多糖样品均由阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,但摩尔比存在一定差异;4种多糖样品均具有一定的降血糖和抗氧化活性,且呈量-效关系。

红参多糖分级醇沉组分对肺腺癌A549细胞增殖抑制作用

探究红参中分级醇沉多糖的体外抗肿瘤活性。采用水提醇沉法得红参粗多糖,用不同体积分数乙醇溶液(55%,60%,65%),分级沉淀得不同级分的红参多糖(RGP-55,RGP-60和RGP-65)。苯酚-硫酸法测定多糖含量,通过紫外、红外扫描进行纯度和结构分析。CCK-8法研究红参多糖对肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用。结果:红参多糖RGP-55,RGP-60和RGP-65的多糖含量分别为70.29%,63.15%和56.23%。紫外扫描结果显示3种红参多糖均不含核酸和蛋白质。红外光谱分析结果表明,3种红参多糖结构中均含有多糖类物质的特征吸收峰。3种红参多糖均可抑制肺腺癌A549细胞的增殖,且呈时间和浓度依赖性。结论:红参中分离出的3种分级醇沉多糖对肺腺癌A549细胞具有增殖抑制作用。

枳椇多糖的分级醇沉及其免疫调节活性的研究

文章采用醇沉分级法来获取和纯化枳椇多糖,并研究各组分的理化性质及免疫调节活性。从枳椇肉质果柄中提取粗多糖,用蒸馏水洗脱过DEAE纤维素柱后进行分级醇沉,获得了醇沉组分HDP1-1、HDP1-2和HDP1-3,研究了其化学成分、单糖组成、分子量分布、红外吸收特征峰及其对巨噬细胞的免疫调节活性。结果表明,总糖质量分数分别为(97.26±0.17)%、(92.90±1.02)%和(95.48±2.45)%;HDP1-1是分子量为2 187kDa的均一性多糖,由半乳糖组成;HDP1-2和HDP1-3主要由葡萄糖、鼠李糖和半乳糖组成,其中HDP1-3还含有少量木糖;红外光谱分析表明各醇沉组分均具有多糖的特征吸收峰。免疫调节活性实验表明,HDP1-3在巨噬细胞增殖、NO产量和中性红吞噬实验中,比其他2个组分对巨噬细胞的刺激作用更强。

菲律宾蛤仔蒸煮液分级醇沉多糖的理化性质和抗氧化活性研究

为提取菲律宾蛤仔Ruditapes philippinarum蒸煮液中的多糖组分,采用20%、40%、60%、80%不同浓度分级醇沉得到粗多糖组分RPCL1、RPCL2、RPCL3和RPCL4,并对每部分多糖进行纯度、回收率的计算、刚果红试验、红外光谱、差示量热扫描和单糖组成分析,以及抗氧化性测定。结果表明:60%(RPCL3)乙醇沉淀的多糖纯度最高,达73. 46%,回收率也最高,可达48. 31%,均显著高于其他组分(P<0. 05);只有RPCL1存在三螺旋结构; 4种多糖组分的红外光谱差别不大,但差示量热扫描结果相差很大,可见各组分多糖的糖链空间结构差别较大;岩藻糖(Fuc)和葡萄糖(Glc)在4种多糖组分中全部检测到,葡萄糖醛酸(Glc UA)在RPCL2和RPCL3多糖组分中检测到,半乳糖醛酸(Gal UA)在RPCL2、RPCL3、RPCL4多糖组分中检测到,氨基半乳糖盐酸盐(Gal N)和氨基葡萄糖(Glc N)在4种多糖组分中均未检测到;抗氧化性测定结果显示,随着糖浓度的不断增加,4种多糖组分对DPPH·自由基和羟自由基(·OH)的清除能力逐渐增强,且具有剂量依赖性。研究表明,4种多糖组分在纯度、单糖组成、糖链空间结构等方面存在较大差异,但都具有抗氧化活性。

分级醇沉对罗勒多糖体外抑菌及免疫活性的影响

目的:研究罗勒30%、50%、80%醇沉多糖对体外抗菌及免疫活性的影响,确定罗勒多糖的有效部位。方法:水提醇沉制备罗勒粗多糖,将罗勒粗多糖3次醇沉后去蛋白得精多糖,再分级醇沉得到30%、50%、80%醇沉多糖,最终测定其体外抗菌及免疫活性。结果:30%醇沉多糖具有最佳的抑菌效果和最高的刺激巨噬细胞增殖能力; 50%醇沉多糖促进脾脏细胞增殖作用最为显著。结论:不同浓度的醇沉罗勒多糖抑菌和刺激免疫细胞增殖活性有显著差异。

分级醇沉法在天然橡胶中提取白坚木皮醇的应用研究

探寻一种适合于工业化生产的从天然橡胶加工废水中提取白坚木皮醇的方法.采取普通的化工技术对胶清进行凝固、浓缩和净化处理,再采用分级醇沉的方法从浓缩液中提取白坚木皮醇粗品,用甲醇回流纯化,得到纯品.本项目研究的提取方法,其提取率占胶清重量的0.1%~0.15%.提取产品的纯度达到95%以上,FW（CE）195,mp.190~193℃,[α]25D为-82.0.

分级醇沉木奶果皮多糖的理化性质及抗氧化活性研究

以木奶果皮为原料,采用热水法提取木奶果皮粗多糖,通过乙醇分级醇沉法制备得到6个多糖组分(PBP-30、PBP-40、PBP-50、PBP-60、PBP-70、PBP-80),对比分析6个多糖组分的理化性质及抗氧化活性。结果表明,PBP-30的得率、总糖含量、糖醛酸含量、蛋白质含量最高,分别为(12.92±0.44)%、(77.13±1.53)%、(7.14±0.26)%、(4.89±0.92)%,相比其他组分存在显著性差异(P<0.05)。6种多糖组分对羟自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、超氧阴离子自由基、2,2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基的清除能力及还原力均随着浓度的增加逐渐增强,表明木奶果皮各多糖组分具有良好的抗氧化活性,有望开发成为新型天然抗氧化剂。

桑树木屑栽培的瓦尼桑黄子实体分级醇沉粗多糖组成特征与活性相关性

对桑树木屑代料栽培瓦尼桑黄Sanghuangporus vaninii子实体分级醇沉粗多糖组分的多糖含量、总酚含量、重均分子量分布、红外光谱、单糖组成、抗氧化活性和免疫活性进行了研究,并采用Pearson相关性分析对各醇沉粗多糖组分的组成特征与活性进行了关联性分析。结果表明,不同醇沉组分粗多糖的组成特征及活性差异较大,其中,各分级醇沉粗多糖组分的多糖含量随着醇沉浓度的增加而增加;20%醇沉多糖组分的总酚含量较高,50%醇沉多糖组分中的总酚含量较低;粗多糖重均分子量随着醇沉浓度的增加而降低;红外光谱结果表明,70%醇沉组分的多糖羟基振动峰不显著,与其分子量分布较低相关;就单糖组成而言,在50%醇沉组分中,果糖及甘露糖含量较高,而在20%和70%醇沉组分中含量较高的单糖是葡萄糖。相关性分析结果显示,子实体粗多糖组分中的总酚含量与DPPH及ABTS自由基清除能力呈显著正相关关系;3个粗多糖组分均能激活RAW 264.7细胞释放NO,促进其分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)等免疫调节因子,NO释放量与多糖含量呈显著正相关关系,总酚含量较低,且半乳糖和果糖含量较高的S50具有较好的体外免疫活性。本研究为代料栽培瓦尼桑黄子实体多糖类功效成分的研究及开发利用提供参考。

分级醇沉柳茶多糖的含量与单糖组成及抗氧化性研究

目的研究分级醇沉的柳茶多糖(SAPs)含量、单糖组成及抗氧化活性。方法采用水提、分级醇沉法制备SAPs,用硫酸-苯酚法测定多糖的含量,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化HPLC法分析单糖的组成,红外分光光度法研究多糖的构型,DPPH·法评价分级多糖的抗氧化活性。结果分级醇沉SAPs含量的高低顺序为60%>40%>80%>20%;葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖在各级醇沉SAPs三氟乙酸水解产物中的含量均最高,其次是半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、甘露糖和核糖,未检测到鼠李糖和木糖;分级醇沉SAPs的抗氧化性优劣顺序为40%>80%>60%>20%,40%醇沉多糖浓度为0.4mg·mL^-1时对DPPH·清除能力与0.04mg·mL^-1抗坏血酸相当,其半数抑制浓度IC50=0.235mg·mL^-1。结论实验结果为柳茶多糖进一步化学、工艺和药理研究提供了参考。

南瓜多糖的分级醇沉与抗氧化活性研究

以新鲜南瓜为原料,经热水浸提后以不同体积分数乙醇溶液(60%,70%,80%和90%)分级沉淀,依次得到4种南瓜多糖样品(PPA-60,PPA-70,PPA-80和PPA-90),为探究不同组分间的差异,分别测定其总糖含量、蛋白含量、半乳糖醛酸含量及单糖组成,并利用红外和紫外光谱进一步分析分级醇沉产物之间的特性差异。结果表明,南瓜多糖PPA-60,PPA-70,PPA-80和PPA-90均为结合蛋白的多糖复合物,其中70%,80%乙醇沉淀的多糖含量较高(PPA-70>PPA-80>PPA-90>PPA-60),60%乙醇沉淀的样品蛋白含量显著高于其他组;单糖检测结果显示4种多糖样品均由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,但单糖组成比例存在差异;4种多糖样品均具有一定的抗氧化活性,抑制羟自由基的能力随着乙醇体积分数的升高逐渐增大(PPA-90>PPA-80>PPA-70>PPA-60)。

不同梯度醇沉对红芪多糖提取含量的影响及其抗氧化活性和红外谱图的分析

目的研究不同梯度醇沉对红芪多糖提取含量的影响,及其抗氧化活性和红外谱图的分析。方法采用水提分级醇沉(20%、40%、60%、80%乙醇浓度)法提取红芪多糖,采用苯酚-浓硫酸法测定红芪多糖的含量,并利用方法学考察该含量测定方法。测定不同梯度醇沉所得红芪多糖对金属Cu2+螯合能力、DPPH自由基清除率及羟基自由基清除率。通过近红外光谱分析确定抗氧化活性最强多糖组分的特定官能团结构。结果当醇沉浓度为80%时,红芪多糖提取率为84.80%,含量为61.62%,抗氧化活性最强,红外光谱分析显示抗氧化活性最强的多糖组分中含有羟基(-OH),次甲基(C-H),羰基(C=O),碳氧单键(C-O-C或C-O)等多个还原性基团。结论红芪多糖的提取率和含量随着醇沉浓度增加明显增加,红芪多糖具有良好体外抗氧化活性,其抗氧化活性与富含羟基和次甲基等还原性官能团有关。

不同醇沉米糠多糖的体外抗氧化和降血糖活性研究

为分离纯化米糠粗多糖(RBP),提高其纯度及生物活性,对RBP进行分级醇沉,得到RBP-40、RBP-60、RBP-80、RBP-80S四组醇沉RBP,并将其与RBP对比进行理化性质、抗氧化活性、降血糖活性分析。结果表明:RBP-80S的总糖、可溶性蛋白质、糖醛酸含量均显著高于其他各组多糖(P<0.05);5组多糖的抗氧化活性和降血糖活性均随多糖纯度的提高而增强,RBP-80S对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_(2)^(-)·)的清除率,总抗氧化活性和Fe^(2+)还原力均最高;RBP-80S对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率最高可达90.69%和74.56%,且显著优于其他4组多糖(P<0.05)。以上结果说明,分级醇沉可提高RBP的纯度,从而提高其体外抗氧化和降血糖活性,为提高米糠粗多糖价值提供了新途径。

分级醇沉对真姬菇多糖抗氧化活性的影响

通过分级醇沉方法对真姬菇多糖进一步纯化,并测定其抗氧化活性。以清除ABTS自由基、DPPH自由基和羟基自由基的能力评价其抗氧化活性。实验结果表明:闽真2号和闽真3号的60%醇沉组分对ABTS自由基的清除能力比较好,当质量浓度为10 mg/mL时,其清除率分别为92.46%、93.62%;各醇沉组分对DPPH自由基均有着良好的清除能力;60%、70%的醇沉组分对羟基自由基的清除能力比较强,当浓度为5 mg/mL时,其清除能力与Vc基本相当。