基于化学激活荧光素酶表达基因法和标准方法评估动物源性固态食品中17种二噁英类化合物毒性当量的相关性比较

为使化学激活荧光素酶表达基因法(CALUX)在动物源性固态食品中二噁英类化合物毒性当量筛查中具有更好的适用性,使其能够与标准方法高分辨气相色谱-高分辨质谱法(HRGC-HRGC)的评估结果相互转换,分别基于CALUX和HRGC-HRGC评估了肉类、海鲜类和配方乳粉这3类典型动物源性固态食品中7种2,3,7,8-取代的多氯代二苯并二噁英(PCDDs)和10种2,3,7,8-取代的多氯代二苯并呋喃(PCDFs)的毒性当量,分析两种方法测定结果的相关性,并确定换算关系和适宜样品类型。结果表明:基于HRGC-HRMS得到的样品中17种目标物的毒性当量(TEQ)下限值为0.001~0.106 pg·g^(-1),TEQ上限值为0.004~0.242 pg·g^(-1),远低于欧盟法规EC 1881/2006规定的限量值(3.5 pg·g^(-1));基于CALUX得到的肉类样品中17种目标物的毒性当量(BEQ)值为0.74~1.30 pg·g^(-1),海鲜类样品中17种目标物的BEQ值为0.31~0.63 pg·g^(-1),配方乳粉样品中17种目标物的BEQ值为0.043~0.074 pg·g^(-1);肉类和配方乳粉样品的BEQ值与TEQ值的相关性较差,而海鲜类样品的BEQ值与TEQ上限值相关性较好。

几种不同化学激活方法对牛卵母细胞孤雌激活的影响

为确定牛体细胞核移植胚胎的激活条件 ,比较了几种不同化学激活方法对牛卵母细胞激活的影响。选择明显具有第一极体的成熟卵母细胞 ,随机分为 9组 :1Ionomycin(I) +6 -甲氨基嘌呤 (D) (ID) ;2 I+D+细胞松弛素 B(CCB) (IDC) ;3I+放线菌酮 (X) (IX) ;4 I+X+CCB(IXC) ;5体积分数 7%乙醇 (E) +D(ED) ;6E+D+CCB(EDC) ;7E+X(EX) ;8E+X+CCB(EXC) ;9Sr2 + +CCB(SC)。Ionom ycin和乙醇的处理时间为 5min,6 - DMAP± CCB的处理时间为 4 h,放线菌酮± CCB的处理时间为 5 h,Sr2 + +CCB的处理时间为 10 h。培养36 h后 ,各组卵母细胞的卵裂率分别为 72 .0 % ,75 .5 % ,81.3% ,85 .1% ,81.7% ,82 .4 % ,74 .4 % ,78.1%和 5 1.0 % ;培养到 196 h时 ,各组的囊胚发育率分别为 18.2 % ,2 4 .5 % ,7.2 % ,11.9% ,11.1% ,19.4 % ,6 .7% ,12 .2 %和 2 .0 %。结果表明 ,在 10 mm ol/ L Sr2 +内培养 10 h不能有效地激活牛卵母细胞 ,Ionom ycin+6 - DMAP± CCB以及乙醇 +6 -DMAP+CCB结合使用可以有效地激活牛卵母细胞。Ionom ycin比乙醇对牛卵母细胞的激活作用强 ;6 - DMAP比CHX的激活效果好 ,激活液中

不同化学激活方法对山羊卵母细胞激活效果的研究

激活是体细胞核移植技术的关键步骤。本研究对常用化学激活剂乙醇、钙离子载体A2 3187和离子霉素以及添加 6 二甲基氨基嘌呤 (6 Dimethylaminopurine ,6 DMAP)和放线菌酮 (cycloheximide ,CHX)对山羊卵母细胞的激活效果以及不同卵龄的卵母细胞激活后体外发育效果进行了比较。结果表明 :离子霉素处理组激活率显著高于乙醇和A2 3187处理组 (89.6 %vs 6 3.5 % ,6 8.7% ;P <0 .0 5 ) ;离子霉素 +6 -DMAP处理组激活率显著高于离子霉素 +CHX和离子霉素 +CHX +细胞松弛素D处理组 (90 .1%vs 5 8.9% ,6 3.7% ;P <0 .0 1) ;体外成熟 2 4、2 6、2 8h组桑椹胚率分别为 16 .0 %、2 0 .6 %和 33.3% ,30h组桑椹胚率下降 (13.8% )。以上结果说明 ,在本研究的激活条件下 ,山羊卵母细胞适宜的激活方法为 :成熟起始后 2 8h使用离子霉素和 6 DMAP进行联合激活。

化学激活对猪体外成熟卵母细胞孤雌发育的影响

探索了离子霉素结合细胞松驰素B(cytochalasinB,CB)、放线菌酮(cycloheximide,CHX)以及6-二甲基嘌呤(6-dimethylaminopurine,6-DMAP)等化学物质,对猪卵母细胞激活后发育的影响。试验1,体外成熟卵母细胞分别用15、20、25、30μmol·L-1的离子霉素处理40min或电激活(1.3kV·cm-1,80μs,1次脉冲),结果表明,20μmol·L-1组的激活率(69.93±5.80)%显著高于15μmol·L-1组(P<0.05),但与其它各组差异不显著(P>0.05)。试验2,卵母细胞采用20μmol·L-1离子霉素分别激活10、20、30、40、50min,再用2mmol·L-16-DMAP处理6h,其中,40min组的卵裂率、囊胚率[(72.40±13.02)%、(25.37±11.43)%]较高,但与其它各组差异不显著(P>0.05)。试验3,卵母细胞经离子霉素(20μmol·L-1、40min)激活后,分别用7.5μg·ml-1CB、10μg·ml-1CHX、2mmol·L-16-DMAP、7.5μg·ml-1CB+10μg·ml-1CHX和7.5μg·ml-1CB+2mmol·L-16-DMAP处理6h,2mmol·L-16-DMAP组的激活率、卵裂率和囊胚率[(86.05±4.29)%、(61.77±8.10)%和(21.62±3.31)%]显著高于7.5μg·ml-1CB组(P<0.05)与另外几组差异不显著(P>0.05)。试验4,卵母细胞由离子霉素(20μmol·L-1、40min)激活后,用2mmol·L-16-DMAP分别处理3.5、5.5、7.5h,5.5h组的卵裂率和囊胚率[(66.

化学激活在小鼠圆形精子细胞体外受精中的应用

目的:通过对生精细胞体外培养所获圆形精子细胞显微注射(ROSI)后的小鼠卵母细胞进行单一和联合化学激活,寻找小鼠圆形精子细胞体外受精的最佳激活方案。方法:采用不同浓度的乙醇(EH)、离子霉素(Ion)、钙离子载体A23187(CIA)、氯化锶(SrCl2)、6-二甲基苯胺嘌呤(6-DMAP)及放线菌酮(CHX)对ROSI后的卵母细胞进行不同作用时间的激活,并根据不同的激活途径,联合两种最佳激活浓度和时间的激活剂对ROSI后的卵母细胞行联合激活,以受精率、卵裂率和桑囊胚形成率为观察指标,比较单一及联合方案对卵母细胞的激活效果。结果:①单一激活时,各激活剂的最佳方案分别为7%EH作用6 min,5μmol/L CIA作用5 min,5μmol/L Ion作用5 min,2 mmol/L 6-DMAP作用2 h,10 mmol/L SrCl2作用1.5 h,10μg/ml CHX作用1.5 h,其中10 mmol/L SrCl2作用1.5 h桑囊胚率最高,显著优于CHX方案(P<0.05),但与其它各组无显著性差异;②EH+6-DMAP组桑囊胚率(29.63%)显著高于其它联合激活组以及除SrCl2以外所有单一激活方案(P<0.05),且正常受精率、卵裂率及桑囊胚率均高于SrCl2组,但无显著性差异。结论:单一激活方案中10 mmol/L SrCl2作用1.5 h,联合方案中7%EH作用6 min+2 mmol/L 6-DMAP作用2 h对体外培养所获圆形精子细胞ROSI后的卵母细胞激活效果最佳。EH+6-DMAP的联合激活方案优于单一激活。

不同化学激活方法及卵丘细胞层数对牛体外成熟卵母细胞孤雌发育的影响

为探索适宜的牛体外成熟卵母细胞孤雌激活方式,提高核移植效率及研究胚胎孤雌发育。研究比较了不同浓度的乙醇(EH)、离子霉素(ionomycin)、钙离子载体A23187与蛋白激酶抑制剂6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)、细胞松驰素(cytochalasin B,CCB)对牛卵母细胞激活发育的影响,并在相同条件下,比较了不同卵丘细胞层数对卵母细胞激活后胚胎发育能力的影响。结果表明:(1)5μmol.L-1Ionomyc in,10μmol.L-1A23187,7%EH分别联合2 mmol.L-16-DMAP,CCB均可以有效地激活牛孤雌胚,其中以Ionomyc in+6-DMAP+CCB组囊胚发育率极显著高于其他各组(P<0.01),并且激活液中CCB的存在对牛孤雌胚胎的发育有利;(2)卵母细胞包被的卵丘细胞层数不同对卵母细胞成熟激活有显著的影响,卵丘细胞层数3～5层和多于6层的卵丘—卵母细胞复合体(COCs)孤雌激活的分裂率和囊胚率分别为69.09%,31.58%和75.14%,38.85%,这2组之间差异不显著(P>0.05),但其显著高于1～2层组与混合组(P<0.05),因此,这2组细胞是最佳的试验研究材料。

不同化学激活剂对小鼠卵母细胞的激活效果

为探讨不同激活剂的卵母细胞孤雌激活效果及激活胚体外发育情况,用乙醇、CaA23187、SrCl2、6-DMAP及CB分别对小鼠卵母细胞进行了激活处理.结果显示,70 mL/L乙醇刺激小鼠卵母细胞时,以激活5～7 min的激活效果及孤雌胚发育较好,桑囊胚发育率可达29.11%;用SrCl2激活小鼠卵母细胞时,6～10 mmol/L为最佳处理浓度,3～6 h为最佳激活时间,桑囊胚发育率可达16.67%;以70 mL/L乙醇激活5 min,再用2 mmol/L 6-DMAP＋5 μg/mL CB激活3 h效果最佳,桑囊胚发育率高达35.77%.研究证实,小鼠卵母细胞经乙醇、6-DMAP和CB等复合激活后能较好地发育.

不同化学激活方法对小鼠卵母细胞激活及孤雌发育效果的影响

卵母细胞的激活（oocyte activation）是体细胞核移植过程中的关键技术之一,它的效率将直接影响细胞核移植的成功率。目前,已知机械、温度、渗透压及电刺激等物理因素以及酶、氢离子、二价氧离子、钙离子载体、乙醇、蛋白质合成抑制剂等化学因素均能有效地激活卵母细胞，重新启动其第2次减数分裂过程。

化学激活对小鼠卵母细胞孤雌发育的影响

分别用不同浓度的氯化锶联合细胞松弛素、钙离子载体A23187和乙醇分别与6-二甲氨基嘌呤和细胞松弛素B刺激小鼠卵母细胞,比较卵母细胞的激活率和体外发育情况。结果表明,乙醇+6-DMAP+CB和A23187+6-DMAP+CB激活获得的激活率、桑囊胚率较高。

几种化学激活剂刺激虾青素合成的机理研究

研究了几种化学激活剂对红发夫酵母产虾青素的刺激作用。添加一定浓度的亚硒酸钠、氯化镉、氯酸钠和二氧化钛 ,分别使虾青素质量分数提高了 18.6 %、31.4%、30 .6 %和 2 1.3%。并对这些化学激活剂促进虾青素合成的机理进行了探讨。

声化学激活血卟啉对瘤细胞K_(562)作用的研究

文章研究了超声激活血卟啉对人体肿瘤细胞K_(562)的作用以及声辐照剂量和血卟啉浓度对瘤细胞杀伤率的影响。结果表明,声辐射剂量和血卟啉浓度和瘤细胞杀伤率呈正相关系。当频率为1.8MHz、声强度为1.5W/cm^2、作用时间为60s、血卟啉浓度为200μg/mL时,超声激活血卟啉对K_(562)肿瘤作用效果较佳,杀伤率达98％,超声单独作用仅为42％,单纯血卟啉无抗肿瘤效应。

供体细胞的不同处理及重组胚化学激活对体细胞克隆胚胎发育的影响综述

哺乳动物体细胞克隆经过几年的发展,已取得了很大进展。已有多种细胞被采用并得到了克隆后代。但动物克隆效率仍然很低,供体细胞的选择和重组胚激活是动物克隆中的重要步骤。供体细胞的细胞周期、细胞类型、冷冻处理和化学激活等方面都可能影响动物克隆的效率。

化学激活剂对大掺量粉煤灰泡沫混凝土抗压强度和抗折强度的影响

泡沫混凝土具有轻质、保温、隔音、抗震等优良性能,应用范围非常广泛,掺入大量的粉煤灰取代水泥以降低成本,将会有更大的应用前景。针对粉煤灰取代水泥而不利于泡沫混凝土强度发展的问题,本文通过添加化学激活剂以激活粉煤灰在泡沫混凝土中的活性,达到提高泡沫混凝土强度的效果。试验结果表明:各类化学激活剂对大掺量粉煤灰泡沫混凝土的抗压强度和抗折强度均起到一定的改善作用,但存在各自的最佳掺量或范围。

不同化学激活方法对小鼠卵母细胞孤雌激活效果的影响

通过比较几种常用的化学激活方法对小鼠卵母细胞的孤雌激活和孤雌生殖胚胎体外发育的影响,从而筛选出小鼠卵母细胞孤雌激活的适宜方法.选取成熟小鼠卵母细胞,随机分为以下9组进行激活处理:①离子霉素(I)+6-二甲氨基嘌呤(D);②I+D+细胞松弛素B(CB);③I+放线菌酮(C);④I+C+CB;⑤φ(乙醇)=7%的乙醇(E)+D;⑥E+D+CB;⑦E+C;⑧E+C+CB;⑨Sr2++CB.比较了这9种化学激活方法以及SrCl2的作用时间和卵龄对小鼠卵母细胞激活效果的影响.实验结果表明:小鼠卵母细胞孤雌激活率与激活措施和卵龄有关;小鼠卵母细胞可以被I+D+CB或SrCl2+CB有效激活,激活率及孵化囊胚发育率均高于其他激活方法(P<0.05),且以SrCl2+CB最为有效.hCG注射后20h为小鼠卵母细胞进行SrCl2激活的最适卵龄,其最佳处理时间为4h.对小鼠卵母细胞而言,6-DMAP比放线菌酮的激活效果好.

不同化学激活剂对牛卵丘细胞重构胚发育的影响

本研究主要研究了Ⅰ:Ionomycin+6-甲氨基嘌呤(6-DMAP)、Ⅱ:Ionomycin+放线菌酮(CHX)、Ⅲ:体积分数7%乙醇+6-DMAP、Ⅳ:体积分数7%乙醇+CHX 4种不同化学激活方法对牛胞质内卵丘细胞全细胞注射法所获得重构胚的激活及前期发育的影响。Ionomycin和7%乙醇的处理时间为5 min,6-DMAP的处理时间为4 h,CHX的处理时间为5 h。结果表明,重构胚与颗粒细胞单层细胞共培养2 d后,各组卵裂率分别为52.6%、52.8%、53.8%和54.2%,差异不显著(P>0.05);培养8 d后,Ⅰ组激活的囊胚发育率(20.0%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为8.5%、10.2%和6.1%;培养10 d后,Ⅰ组激活的囊胚孵化率(10.7%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为2.3%、3.0%和1.8%。结果提示,4种激活方法均可以有效的激活重构胚,但Ionomycin+6-DMAP法激活重构胚的囊胚率和囊胚孵化率均极显著高于其它3组,说明Ionomycin+6-DMAP激活法有利于牛重构胚的发育,可以获得较理想的囊胚率,是胞质内全细胞注射法克隆的理想激活方法。

β-氨基正丁酸——植物防卫机制的化学激活剂

利用作物自身的防卫机制或免疫系统实现植物保护功能,是植保工作者长时期来梦寐以求、孜孜探索的目标。本文在概述植物天然防卫机制及其化学激活的基础上,着重论及化学激活剂—β—氨基正丁酸,并举例对其使用和评价作了详细介绍,以期能在国内植保界和农药界中引起广泛的关注。

β-氨基正丁酸——植物防卫机制的化学激活剂

利用作物自身的防卫机制或免疫系统实现植物保护功能,是植保工作者长时期来梦寐以求、孜孜探索的目标。本文在概述植物天然防卫机制及其化学激活的基础上,着重论及化学激活剂——β-氨基正丁酸,并举例对其使用和评价作了详细介绍,以期能在国内植保界和农药界中引起广泛的关注。

不同化学激活方法对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响

本研究利用常规化学激活剂离子酶素(Ionomycin)和乙醇分别与6-二甲基氨基嘌呤(6-Dimethylaminoputine,6-DMAP)和细胞松弛素B(CB)的不同组合对绵羊卵母细胞的激活后体外发育效果进行了比较。结果表明:在桑囊胚率上,Ionomycin联合6-DMAP与联合6-DMAP+CB差异不显著(40.4%vs46.0%),而与联合CB组差异显著(40.4%、46.0%vs 29.5%,p<0.05),与单独Ionomycin激活差异极显著(40.4%、46.0%vs 15%,p<0.01);乙醇联合6-DMAP+CB与联合6-DMAP、CB差异显著(46.9%vs 34.2%、36.2%,p<0.05),而与单独乙醇激活差异极显著(46.9%vs 21%,p<0.01)。

不同化学激活剂对牛卵丘细胞重构胚发育的影响

本文主要研究了①离子霉素(Ion)+6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)、②Ion+放线菌酮(CHX)、③体积分数7%乙醇+6-DMAP、④体积分数7%乙醇+CHX四种不同化学激活方法对牛胞质内卵丘细胞全细胞注射法所获得重构胚的激活及前期发育的影响。Ion和7%乙醇的处理时间为5min,6-DMAP的处理时间为4h,CHX的处理时间为5h。结果表明,重构胚与颗粒细胞单层细胞共培养2d后,各组卵裂率分别为52.7%、51.5%、53.2%和54.0%,差异不显著(P>0.05);培养8d后,①组激活的囊胚发育率(20.0%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为8.5%、10.2%和6.1%;培养10d后,①组激活的囊胚孵化率(10.7%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为2.3%、3.0%和1.8%。表明,4种激活方法均可以有效地激活重构胚,但Ion+6-DMAP法激活重构胚的囊胚率和囊胚孵化率均极显著高于其他3组,说明Ion+6-DMAP激活法有利于牛重构胚的发育,可以获得较理想的囊胚率,是胞质内全细胞注射法克隆的理想激活方法。