高效液相色谱法测定复方半夏片中橙皮苷含量

目的建立测定复方半夏片中橙皮苷含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Capcell PAK C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(20∶80,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为283 nm,进样量为5μL。结果橙皮苷进样量在0.2066~2.0660μg范围内与峰面积线性关系良好(r=1.000,n=5);精密度、重复性、稳定性试验的RSD分别为0.06%,0.44%,0.03%;平均加样回收率为99.66%,RSD为0.30%(n=6)。结论所建立的方法操作简便、结果准确、稳定性好,可用于复方半夏片的质量控制。

半微量高效液相色谱法同时测定芍药甘草汤与大鼠粪便培养物中GL、GA和GAMG的含量

芍药甘草汤只有解痉和松弛肌肉的作用。其活性成分甘草酸(GL)在芍药苷的协同作用下阻断骨骼肌的神经肌肉接点。已知GL吸收前被肠道细菌水解为甘草次酸(GA),而单葡糖醛酸(GAMG)是GL水解成GA的中间产物。本次建立了一种简便、灵敏、可重复的半微量高效液相层析法,同时测定芍药甘草汤在大鼠粪便中体外厌氧培养条件下GL及其代谢产物的含量。

高效液相色谱法测定贵州不同产地半夏药材中鸟苷和腺苷的含量

目的研究以HPLC同时测定贵州不同产地半夏药材中鸟苷、腺苷含量的方法。方法采用Diamonsil C18柱（4．6mm×250mm，5μm），以甲醇-水（15：85）为流动相，流速0．7ml·min^-1，检测波长λ=260nm，柱温25℃。结果鸟苷在0．048-0．480μg范围内线性关系良好，r=0．9999，腺苷在0．045-0．449μg范围内线性关系良好，r=0．9998。加样回收率（n=9）的RSD：鸟苷为2．94％，腺苷为2，06％。结论该法操作简便，结果可靠，重现性好，可作为半夏药材的质量控制方法之一。

高效液相色谱法测定发酵乳中的乳糖、葡萄糖和半乳糖

利用高效液相色谱法测定发酵乳中乳糖、葡萄糖、半乳糖的含量。样品通过Carrez法处理沉淀蛋白,采用Aminex HPX 87H色谱柱,5mmol/L H2SO4溶液为流动相,流速0.6mL/min。结果表明:利用该法进行色谱分析各组分达到较好的分离,各糖组分在0.5～12mg/mL范围内呈现良好线性关系,相关系数为0.9986～0.9999(n=5),样品回收率为96.45%～101.78%;精密度实验表明,各组分峰面积RSD在0.62%～4.21%之间(n=5);重现性实验表明,各组分含量测定值RSD为1.86%～3.44%。该法测定样品快速、准确、可靠,为发酵乳贮藏过程中关键糖含量的测定提供参考依据。

高效液相色谱法测定半夏中琥珀酸含量

目的:建立半夏、掌叶半夏和水半夏等中药品种中琥珀酸含量的HPLC测定法.方法:用Inertsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,4μm),以磷酸盐缓冲液(pH 2.5)为流动相,检测波长为210 nm,柱温为40℃,流速为1.0 mL·min-1.结果:琥珀酸在样品中的平均回收率为98.67%,RSD为1.8%.半夏样品中的琥珀酸含量,以干燥品计为0.0038%～0.0304%,掌叶半夏中为0.0110%～0.0559%.结论:该方法可供半夏等中药中进行琥珀酸的含量测定时参考.

固相萃取富集-高效液相色谱法测定大花红景天中微量元素硒

研究了用固相萃取富集,二极管矩阵检测器检测,反相液相色谱法测定大花红景天中微量元素硒的方法。样品中硒用邻苯二胺显色剂作柱前衍生,WatersSep-park-C18固相萃取微柱富集硒的邻苯二胺络合物,然后用乙腈和甲醇为流动相,WatersμBondapakC18色谱柱为固定相分离,用二极管矩阵检测器检测。方法相对标准偏差为2·40%,标准回收率为98·67%。该方法用于大花红景天样品的分析,结果令人满意。

高效液相色谱法测定半夏、水半夏及其炮制品中麻黄碱的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定半夏、水半夏及其炮制品中麻黄碱的含量。方法色谱柱为Diamen-silC18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶0.08%三乙胺水溶液(18∶82),醋酸调pH值为5.8,流速为1.0 ml/min,检测波长210 nm。结果麻黄碱在0.8-2.4μg内线关系良好(r=0.999 7),平均回收率97.22%,RSD为1.72%。结论半夏、水半夏中麻黄碱的含量存在差异,可为评价半夏、水半夏的质量提供依据。

超高效液相色谱法测定半夏不同炮制品中核苷类成分含量

目的建立以超高效液相色谱（UPLC）法测定不同炮制工艺半夏中尿苷、鸟苷和腺苷含量的方法。方法色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×50 mm,1.7μm）,流动相为水-甲醇,梯度洗脱,柱温30℃,流速0.5 m L·min-1,检测波长254 nm。结果尿苷在2.214～22.140μg·m L-1浓度范围内线性关系良好,回归方程为：Y=93 991X-1 653（r=0.999 9）,平均回收率为99.18%,RSD=2.40%;鸟苷在1.212～12.120μg·m L-1浓度范围内线性关系良好,回归方程为：Y=61 542X-806（r=0.999 9）,平均回收率为98.88%,RSD=1.16%;腺苷在0.245 2～2.452 0μg·m L-1浓度范围内线性关系良好,回归方程为：Y=14 994X-145（r=0.999 9）;平均回收率为98.66%,RSD=0.97%。结论该方法准确、快速,能有效地测定不同炮制工艺半夏中尿苷、鸟苷和腺苷的含量。

高效液相色谱法测定微量全血中维生素A

建立了反相高效液相色谱法测定微量全血样品中维生素A的方法。取全血50μL,用100μL无水乙醇沉淀蛋白后,加入400μL×2正己烷漩涡混匀提取维生素A,高速离心分层后取正己烷层在弱氮气流下挥干,加100μL甲醇溶解后用反相色谱柱C8（150 mm×4.6 mmi.d.,5μm）分离,紫外检测波长325nm,外标法定量。色谱条件：柱温,60℃;流动相为V（甲醇）∶V（水）=92∶8;流速：0.8 mL/min。用本法同时测定了27例成人微量全血及其血清中的维生素A。标准曲线的相关系数大于0.999;相对标准偏差（RSD）小于5%。对于50μL全血,方法检出限为0.02μg/mL。加标回收率为88%-115%。成人血清与其全血中维生素A含量之比为2.907±0.160（x-±s）。方法适合于微量全血中维生素A的测定,并可以通过测定全血中维生素A含量推算血清中维生素A的含量。

高效液相色谱法测定半夏厚朴汤不同煎液中和厚朴酚含量

目的考察用合煎、分煎方法制备的半夏厚朴汤汤剂中和厚朴酚含量的变化。方法建立高效液相色谱方法,采用Diamonisl C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(78∶22),流速为1 mL/min,检测波长为294 nm。分析半夏厚朴汤合煎液和分煎液样品中和厚朴酚的含量变化。结果半夏厚朴汤分煎液和合煎液中和厚朴酚含量无差异性。结论合煎液和分煎液中和厚朴酚的含量在煎煮过程中没有因素的影响。

反相高效液相色谱法测定血浆中同型半胱氨酸的含量

本文建立了在等度洗脱下高效液相色谱法(HPLC)测定血清中同型半胱氨酸含量的方法。血浆同型半胱氨酸经巯基乙醇还原后用H2O2氧化巯基,与邻苯二甲醛(OPA)衍生,经C18色谱柱在45℃分离,荧光检测。方法简便、快速,线性范围为0.685～148.0μmol·L-1,r=0.9998;方法回收率为96.4%～100.1%。日内相对标准偏差小于5%,日间相对标准偏差小于6%。

反相高效液相色谱法同时测定半夏中尿苷鸟苷和腺苷

目的 建立同时测定半夏中尿苷、鸟苷和腺苷含量的反相高效液相色谱（RP-HPLC）梯度洗脱法.方法 采用ZORBAX-SB-C18色谱柱（150 mm ×4.6 mm,5 μm）;以水-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为0.6 mL·min-1,柱温为25 ℃,检测波长260 nm.结果 尿苷在0.078 4～0.784 0 μg范围内线性关系良好,r＝0.999 5;鸟苷在0.079 8～0.798 0 μg范围内线性关系良好,r＝0.999 5;腺苷在0.085 2～0.852 0 μg范围内线性关系良好,r＝0.999 4.结论 该方法操作简便,方法可靠,重复性好,可以作为半夏的质量控制方法之一.

半制备高效液相色谱-离子色谱法检测婴幼儿配方食品中低聚半乳糖的含量

目的优化并建立半制备高效液相色谱法-离子色谱法测定婴幼儿配方食品中低聚半乳糖含量的方法。方法以乳粉、特殊医学配方奶粉和液态奶为实验对象,利用半制备高效液相色谱法分别收集婴幼儿配方食品中的二糖和三糖及聚合度(degree of polymerization,DP)3以上的糖,再利用β-半乳糖苷酶水解收集聚合度3及3以上的糖组分,利用离子色谱法测定酶解后的半乳糖和葡萄糖的含量,通过计算得到样品中低聚半乳糖的含量。结果异乳糖、葡萄糖、半乳糖、1,6-β-D-半乳二糖和1,3(4)-β-D-半乳二糖在1.0~30.0μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.9985~0.9999,回收率为82.80%~87.67%,相对标准偏差≤5%。结论该方法结果准确,能够满足检测要求,且前处理操作简单,便于大批量样品的检测。

5,5′-二硫硝基苯甲酸柱前衍生高效液相色谱法测定酶促反应液中的L-半胱氨酸

以5,5′ 二硫硝基苯甲酸(DTNB)为柱前衍生试剂对酶促反应液进行衍生化,用C18色谱柱在室温下采用二元梯度洗脱,于330nm波长下检测,同时以2 巯基乙醇和二硫苏糖醇(DTT)为对照,对L 半胱氨酸的分离峰进行确认,并对酶促反应液中的L 半胱氨酸进行分离测定。L 半胱氨酸浓度为5～950μmol/L时,其浓度与峰面积呈显著的线性关系。高、中、低浓度水平的L 半胱氨酸加标回收率为99 7%～100 5%,相对标准偏差小于1 3%,检测限为0 8μmol/L。方法简便、快速、可靠。用于样品分析,结果令人满意。

高效液相色谱法检测蔗渣半纤维素水解物中的单糖

用高效液相色谱法测定甘蔗渣半纤维素水解物中的单糖含量。以 Hypersil NH2 柱为色谱分析柱 ,用示差折光检测器检测 ,流动相是乙腈∶水 (80∶ 2 0 )。在此色谱条件下 ,甘蔗渣半纤维素水解物分离成 :木糖、阿拉伯糖、果糖和葡萄糖。各单糖呈良好的线性关系。加样回收率的平均值为 97.3%～ 98.7% ,此方法简便、快速、准确。

半制备高效液相色谱法同时分离制备肉桂中5种苯丙素类化合物及其免疫抑制活性考察

目的:建立一种从肉桂中同时分离5种苯丙素类化合物的制备分析方法,并对化合物的免疫抑制活性进行了评价。方法:肉桂经乙醇提取后,取乙酸乙酯部位经高效液相色谱仪分离制备化合物,制备色谱条件:采用Ultimate XB-C18(250 mm×10 mm,5μm)半制备柱,流动相为乙腈-水,进行梯度洗脱,检测波长为330 nm,柱温为30℃,流速为2.5 ml·min-1,进样量为0.3 ml。采用MS及NMR对化合物进行结构鉴定。采用CCK-8法对分离出的化合物进行免疫抑制活性考察。结果:同时分离得到5种苯丙素类化合物,分别为赤式-愈创木甘油、(7R,8S)-syringoylglycerol、(7S,8S)-syringoylglycerol、3-甲氧基苯基-丙烯醛、邻甲氧基肉桂醛。CCK-8法证明化合物3在浓度800μmol·L-1时对T细胞及B细胞的抑制率均大于20%,有一定免疫抑制作用。结论:苯丙素分离方法简便,分离效果好,能同时制备肉桂中5种苯丙素类化合物,其中化合物3有一定的免疫抑制活性。

高效液相色谱法测定血浆中同型半胱氨酸

建立了一种高效液相色谱-库仑阵列电化学测定血浆中同型半胱氨酸的方法。采用3-2-羧乙基膦作为还原剂还原巯基间形成的二硫键,用0.1 mol.L-1HC lO4来沉淀血浆蛋白,离心取上清,进样分析。在0.40~50.00μmol.L-1范围内,线性关系良好。加标平均回收率是98.43%,RSD%是4.35%。该方法简单、快速、灵敏。

高效液相色谱法测定半夏泻心口服液中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量

目的建立同时测定半夏泻心口服液中黄芩苷和盐酸小檗碱含量的方法。方法色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为甲醇:20 mM醋酸铵溶液(38:62);流速为1.0 ml/min;检测波长为280 nm(0～8 min),345 nm(8～12 min);进样量:10μl;柱温为室温。结果黄芩苷和盐酸小檗碱分别0.03216～0.64320μg和0.02324～0.46480μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.82%和99.39%,相对标准差分别为1.73%和1.90%。结论高效液相色谱法快速、简便、准确,可用于半夏泻心口服液中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量测定。

反相高效液相色谱法测定生物介质中泼尼松龙及泼尼松龙琥珀酸半酯

目的 :建立生物介质测定泼尼松龙及其琥珀酸半酯药物浓度的分析方法。方法 :采用反相高效液相色谱法 ,内容物及血浆样品均用正戊烷 -甲基叔丁醚 (2∶3)混合液提取 ,挥干后以乙腈 -柠檬酸缓冲液 (33∶67)为流动相 ,经过反相C18 柱 (250mm×4 6mm ,5μm )分离后在254nm波长处检测。结果 :两种药物提取回收率高于80 % ,日内、日间精密度均低于3 %。结论 :本方法具有快速、简便、灵敏、准确的特点 ,适用于泼尼松龙新剂型药代动力学研究 ,也可推广应用于泼尼松龙其它剂型及同类药物。

高效液相色谱法测定半夏糖浆中麻黄碱和伪麻黄碱含量

目的建立测定半夏糖浆中麻黄碱和伪麻黄碱含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法采用Welch(月旭)Ultimate XB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以p H=3.0的0.02 mol/L磷酸二氢钠缓冲液(含0.4%的三乙胺)-甲醇(90∶10)为流动相,流速为1 m L/min,检测波长为210 nm。结果盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱质量浓度分别在1.934 4~92.85μg/m L和2.481 3~119.10μg/m L范围内与峰面积线性关系良好,线性回归方程分别为Y=0.888 8 X-0.067 2,r=1.000 0(n=6)和Y=0.691 1 X-0.139 6,r=1.000 0(n=6),回收率均大于95.00%(n=6)。结论该方法分离度、线性关系、重复性、稳定性、回收率均符合要求,适合于半夏糖浆中麻黄碱和伪麻黄碱的含量测定。