卡介苗膀胱灌注相关肝炎临床病理特征分析

目的 阐明卡介苗膀胱灌注相关肝炎的临床病理特征。方法 2023年北京友谊医院诊治的卡介苗膀胱灌注相关肝损伤患者2例,通过文献检索卡介苗膀胱灌注相关肝损伤21例。总结患者性别、年龄、卡介苗膀胱灌注次数、肝脏生化结果、肝脏病理活检、结核杆菌检测结果、治疗方案、预后等信息。结果 本中心共诊治2例、文献共报道21例资料较为齐全的卡介苗膀胱灌注相关肝损伤。23例患者均为男性,年龄66(34~88)岁,接受卡介苗膀胱灌注次数为6(1~17)次。主要表现为ALP和(或)GGT明显升高,伴或不伴ALT和AST升高,52.2%(12/23)患者血清TBil升高。结核菌检测阳性6例,阴性14例,检测结果不详3例。共20例接受肝穿刺活检,其中19例呈肉芽肿性肝炎,1例呈汇管区扩大及炎症细胞浸润,未见肉芽肿形成。7例接受抗结核治疗,14例接受抗结核+激素治疗,2例只接受激素治疗。87.0%(20/23)患者痊愈,2例患者好转后没有继续随访,死亡2例。结论 卡介苗膀胱灌注相关肝炎表现为ALP和(或)GGT明显升高,约半数患者可出现黄疸,绝大部分呈肉芽肿性肝炎,少数患者可找到结核分枝杆菌。部分患者经过抗结核治疗痊愈,大部分患者抗结核联合激素治疗、部分患者只接受激素治疗后痊愈,提示免疫反应参与了疾病的发生发展。

关注卡介苗接种反应,早期识别免疫缺陷信号

带宝宝进行疫苗接种是每个爸爸妈妈的责任。接种疫苗可使宝宝获得特异性抗体,以抵抗相应的疾病。婴儿需要在1岁内完成计划免疫要求的疫苗,这些疫苗按性质不同,可以分为灭活疫苗和减毒活疫苗。灭活疫苗包括乙型肝炎疫苗、百白破疫苗等,减毒活疫苗包括卡介苗、口服脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗等。宝宝接种了疫苗之后,可能会出现发热、过度哭闹、局部红肿等反应,通常来说,这些疫苗的接种反应都是暂时的,2~3天后会自行缓解。总的来说,接种灭活疫苗相对安全,而接种减毒活疫苗可能会给潜在免疫异常的孩子带来风险。卡介苗也是一种减毒活疫苗,接下来就重点谈一谈卡介苗的接种反应。

卡介苗用于我国中高危非肌层浸润性膀胱癌患者TUR-BT术后灌注治疗的药物经济学评价

目的对卡介苗(BCG)与表柔比星用于中高危非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)患者经尿道膀胱肿瘤切除术(TUR-BT)术后膀胱灌注治疗的经济性进行评价。方法从我国卫生体系角度出发,基于ChiCTR-IIR-16008357研究构建Markov队列模型。以质量调整生命年(QALYs)作为健康产出,意愿支付阈值设定为1倍2023年中国人均国内生产总值(89358元/QALY)。采用成本-效用分析比较BCG方案相对表柔比星方案用于我国中高危NMIBC患者TUR-BT术后膀胱灌注治疗的增量成本-效果比(ICER),并进行敏感性分析。结果BCG方案相比于表柔比星方案的增量成本为34309.51元,增量效用为0.800 QALYs,ICER为42871.33元/QALY,低于意愿支付阈值。当意愿支付阈值为89358元/QALY时,概率敏感性分析中BCG方案可被接受的概率为77.70%,高于表柔比星方案,且BCG方案的可接受性随意愿支付阈值的增加而增加。结论以1倍2023年我国人均GDP为意愿支付阈值时,相比表柔比星,BCG用于中高危NMIBC患者TUR-BT术后膀胱灌注治疗具有更好的经济性。

膀胱内灌注卡介苗致多器官功能衰竭1例分析

目的关注膀胱灌注卡介苗后引起的并发症,探讨发病机制,为临床应用提供参考。方法分析膀胱内灌注卡介苗致多器官功能衰竭的病例,查阅文献对此并发症发病率、发病机制、临床表现等进行讨论。结果该患者经升压、经验性抗感染、抗休克、抗结核、补液等对症治疗后,实验室指标回升,病情好转出院。但患者仍不能排除播散性结核感染的可能,过敏反应也有可能参与其中。结论虽然大部分患者对膀胱灌注卡介苗耐受性良好,但仍需警惕其发生脓毒血症的可能。

高危非肌层浸润性膀胱癌术后行膀胱热灌注化疗和卡介苗灌注治疗的对比研究

目的:探讨膀胱热灌注化疗和卡介苗(BCG)膀胱灌注预防高危非肌层浸润性膀胱癌患者术后复发的安全性和有效性。方法:回顾性分析2019年8月—2021年8月在新乡医学院第一附属医院行经尿道膀胱肿瘤电切术,且术后行吉西他滨膀胱热灌注化疗(HIVEC-GEM)或BCG膀胱灌注的高危非肌层浸润性膀胱癌患者资料共74例,其中38例行HIVEC-GEM膀胱灌注(HIVEC-GEM组),36例行BCG膀胱灌注(BCG组),比较两组术后肿瘤复发率和进展率以及不良反应发生率。结果:两组术后6个月的复发率(5.26%vs.2.78%,χ^(2)=0.002)和进展率(5.26%vs.2.78%,χ^(2)=0.002)、术后12个月的复发率(13.16%vs.8.33%,χ^(2)=0.086)和进展率(10.53%vs.8.33%,χ^(2)=0.006)以及术后24个月的复发率(18.42%vs.13.89%,χ^(2)=0.279)和进展率(13.16%vs.11.11%,χ^(2)=0.007)差异均无统计学意义(均P>0.05),多种不良反应发生率之间的比较也无统计学意义(均P>0.05)。结论:HIVEC-GEM的疗效和安全性与BCG膀胱灌注相当。

敲低双特异性磷酸酶5(DUSP5)通过阻断NF-κB信号抑制卡介苗诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎性反应

目的探讨双特异性磷酸酶5(DUSP5)对卡介苗(BCG)介导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎性反应的调控作用。方法Western blot法检测BCG感染RAW264.7巨噬细胞0.5、1、2、4、6、8、12、24 h,DUSP5表达变化;采用小干扰RNA(siRNA)技术下调RAW264.7巨噬细胞DUSP5水平,并设置siRNA阴性对照(si-NC)组、DUSP5敲低(si-DUSP5)组、si-NC联合BCG感染组、si-DUSP5联合BCG感染组。实时定量PCR检测细胞白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10的mRNA表达,ELISA检测细胞上清液IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10含量;Western blot法检测细胞核因子κB(NF-κB)与磷酸化的NF-κB(p-NF-κB)表达变化。结果BCG感染上调RAW264.7巨噬细胞核DUSP5蛋白表达,并在BCG刺激4 h后,DUSP5表达量达到高峰;与si-NC联合BCG感染组相比,敲低DUSP5抑制细胞促炎因子IL-1β、IL-6与TNF-α表达与分泌,而抑炎因子IL-10表达不受DUSP5的影响;且敲低DUSP5抑制细胞NF-κB磷酸化。结论敲低DUSP5通过阻断NF-κB信号抑制BCG介导的巨噬细胞炎性反应。

卡介苗通过抑制大鼠急性脊髓损伤中炎症级联反应保护脊髓的机制

目的探究卡介苗(BCG)对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后炎症因子的影响。方法选取健康成年SD雄性大鼠72只,体重250~300 g,随机分为假手术组、模型组和BCG治疗组,各24只。假手术组仅行椎板切除,模型组和BCG治疗组均采用改良的Allen’S法制作脊髓损伤大鼠模型。BCG治疗组分别予模型建立后30 min、24 h、48 h大鼠腹腔注射BCG(105CFU),另外两组大鼠腹腔注射等剂量生理盐水。造模成功后应用BBB评分法对各组大鼠的后肢功能进行评分。14 d后处死大鼠,提取血清及脊髓组织标本,用HE染色观察病变组织浸润的中性粒细胞和巨噬细胞变化;用ELISA法检测脊髓匀浆促炎因子和抑炎因子变化。结果与假手术组相比,模型组大鼠后肢功能明显下降,而BCG治疗组较模型组有所改善;HE染色可见BCG治疗组炎症细胞较模型组减少、空洞较模型组减小。模型组中TNF-α、IL-1β及IL-6含量高于卡介苗治疗组(P<0.05),TGF-β和IL-10含量低于BCG治疗组(P<0.05)。结论BCG具有免疫调节及抗炎作用,进而抑制SCI后的免疫炎症反应,从而发挥脊髓保护作用。

美国FDA批准Anktiva(nogapendekin alfa inbakicept-pmln)与卡介苗联用治疗非肌层浸润性膀胱癌

美国FDA于2024年4月22日批准nogapendekin alfa inbakicept-pmln(商品名Anktiva,研发商Altor BioScience,LLC;Nogapendekin alfa的CAS登记号为1622189-43-8;inbakicept的CAS登记号为2135939-52-3)与卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)联用用于成人治疗卡介苗无反应性非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)原位癌,无论是否伴有乳头状癌均适用。Anktiva是一种白介素15(interleukin-15,IL-15)受体激动剂,用法为稀释后经膀胱灌注。Anktiva最常见(发生率≥15%)的副作用(含生化指标异常)有肌酐水平升高、排尿困难、血尿、尿频、尿急、尿道感染、血钾水平升高、肌肉骨骼痛、发冷、发热。

吉西他滨和卡介苗膀胱灌注在高危非肌层浸润性膀胱癌术后患者中的应用效果及复发率影响分析

探讨在治疗高危非肌层浸润性膀胱癌术后患者中,应用吉西他滨和卡介苗膀胱灌注的效果及复发率影响分析。方法 择取60例赤峰市肿瘤医院泌尿外科于2020年6月~2022年11月时间期间内收治之高危非肌层浸润性膀胱癌患者,以登记序号单数30例入对照组同时双数30例归入观察组。收集实施吉西他滨膀胱灌注前组之免疫指标、体能及生活质量评分、复发率及不良反应等对比于实施卡介苗膀胱灌注的后组。结果 治疗前,两组之免疫球蛋白G(g/L)、自然杀伤细胞NK(%)、CD3+(%)及CD4+/CD8+检测测算值及SPPB、KPS评分差别极小(P>0.05),治疗后,四项指标两组同步提高,观察组检测值显示更高(P<0.05)。观察组在两组治疗后SPPB、KPS评分同步提升中评分值以更高显示(P<0.05)。两组不良反应发生率相差不大(P>0.05),观察组复发率10.00%显著低过对照组(33.33%)(P<0.05)。结论 在治疗高危非肌层浸润性膀胱癌术后患者中,相对吉西他滨膀胱灌注,应用卡介苗膀胱灌注能有效降低复发率,提升生活质量及活动能力、免疫能力,安全性亦有保障。

中高危膀胱癌应用卡介苗+吡柔比星与卡介苗+吉西他滨预防术后复发的效果及对血清AGR、PON1的影响

目的:探究中高危膀胱癌应用卡介苗+吡柔比星与卡介苗+吉西他滨预防术后复发的效果及对血清白蛋白/球蛋白比值(AGR)、对氧磷酶1(PON1)的影响。方法:选取2021年10月至2022年4月本院80例中高危膀胱癌患者,随机分为两组,各40例。两组均行经尿道膀胱肿瘤切除术治疗,对照组术后给予吡柔比星联合卡介苗膀胱灌注,研究组术后给予吉西他滨联合卡介苗膀胱灌注。比较两组治疗效果、血清肿瘤标志物[分泌型蛋白Dickkopf(DKK)、膀胱癌特异性核基质蛋白-1(BLCA-1)、β2-微球蛋白(β2-MG)]、新血管生成因子[血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)]、AGR、PON1水平、生活质量[生活质量核心问卷量表(EORTC QLQ-C30)]、功能状态[功能状态评分标准(KPS)]、不良反应,术后随访1年,统计比较两组术后1年复发率。结果:研究组治疗总有效率92.50%(37/40),高于对照组的75.00%(30/40)(P<0.05);研究组术后1个月、3个月、6个月血清DKK、BLCA-1、β2-MG、VEGF、FGF、AGR水平低于对照组,PON1水平高于对照组(P<0.05);研究组术后1个月、3个月、6个月EORTC QLQ-C30、KPS评分高于对照组(P<0.05);研究组恶心/呕吐、腹泻、白细胞减少、膀胱炎发生率低于对照组(P<0.05);研究组术后1年复发率低于对照组(P<0.05)。结论:相较吡柔比星联合卡介苗,中高危膀胱癌应用吉西他滨联合卡介苗治疗效果更为显著,可抑制肿瘤血管生成,调节AGR、PON1水平,预防术后复发,提升生活质量,改善功能状态,且安全性更高。

百日咳毒素联合卡介苗诱导CD-1小鼠抑郁症模型研究

为了构建具备良好的治疗性干预时间窗的新型抑郁症动物模型,本研究基于抑郁症发病的炎症假说,选用血脑屏障通透剂——百日咳毒素,联合低剂量免疫激活剂——卡介苗(牛结核分枝杆菌)对CD-1小鼠造模。实验发现,与单独低剂量卡介苗诱导相比,百日咳毒素联合低剂量卡介苗诱导可以增强小鼠的抑郁样行为,如行为绝望状态增加(悬尾实验中一动不动时间)、探索性行为降低(开场实验中的区域穿梭次数和抬头直立次数)、自发运动状态降低(开场实验总运动距离)等,促进小鼠中枢神经炎症和外周炎症(IL-1β、IL-6、IFN-γ等);同时,加剧脑中色氨酸-犬尿氨酸通路的激活,表现为其关键酶——吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)进一步显著升高。经口给予抗抑郁药丙咪嗪,可缓解百日咳毒素联合低剂量卡介苗诱导的小鼠抑郁样症状、炎症反应和激活的色氨酸-犬尿氨酸通路。另外,发现百日咳毒素联合低剂量卡介苗诱导的小鼠抑郁样症状可以从第7天至少持续到第28天。综上,本研究基于百日咳毒素和低剂量卡介苗构建的小鼠抑郁模型具有较好的表面效度、结构效度和预测效度,其长期持续性的抑郁表型可为抗抑郁疗法研究提供宝贵的治疗性干预时间窗。

2020-2021年北京市某医疗机构3月龄以下儿童卡介苗接种情况分析

目的了解北京市海淀区妇幼保健院出生的3月龄以下儿童卡介苗(bacillus calmette-guerin vaccine,BCG)接种情况,分析影响疫苗接种率的相关因素,为提高BCG的接种率和产科接种率提供参考。方法收集分娩日期为2020年1月1日-2021年12月31日,在海淀区妇幼保健院建档、产检、出生的3月龄以下儿童相关资料及母亲孕产期保健资料,计算研究对象BCG接种率和产科接种率。结果北京市海淀区妇幼保健院出生的3月龄以下儿童BCG接种率为96.74%,产科接种率为91.28%。早产、低出生体重、高危孕产妇、剖宫产对BCG接种率有影响(χ^(2)=70.037、36.524、8.011、4.322,P均<0.05);早产、低出生体重、高危孕产妇、剖宫产和产时产后并发症对BCG产科接种率有影响(χ^(2)=2097.176、4753.231、143.613、642.231、330.850,P均<0.05)。结论海淀区妇幼保健院3月龄以下儿童卡介苗接种率和产科接种率有进一步提升的空间。加强高危孕产妇管理,减少妊娠并发症、难产和不良妊娠结局,探索卡介苗接种禁忌的合理性,制定科学实用的BCG接种指南,细化BCG接种标准,以及加强对产科、新生儿科医生和预防接种医生培训可以提高儿童BCG的接种率和产科接种率。

打过卡介苗,为何没防住肺结核

临床工作中,经常遇到中学生入学体检时发现肺结核的案例。一些父母表示疑惑:孩子小时候就接种过卡介苗,怎么还会得肺结核?在我们专科医生看来,这并不奇怪。

广西卡介苗疑似预防接种异常反应影响因素分析

目的:对2015—2020年广西卡介苗疑似预防接种异常反应(AEFI)监测数据进行分析,描述广西卡介苗AEFI发生率空间分布趋势,查找对卡介苗AEFI发生率的影响因素,从而减少卡介苗接种异常反应的发生。方法:通过开展问卷调查111个县区免疫规划经费人员投入情况和业务工作情况,使用空间自相关分析、地理加权回归分析等方法从数理和空间上进行卡介苗AEFI发生率影响因素分析。结果:2015—2020年广西卡介苗AEFI发生率20.31/10万,免疫规划工作经费是否达到人均1元、是否配备自动温度监控设备及接种事故发生率是卡介苗AEFI发生率的影响因素(P<0.05)。卡介苗AEFI发生率具有空间自相关性,Moran’s I指数=0.173,Z=2.677,P=0.007;卡介苗AEFI发生率高—高聚集区的桂北部主要受预防接种人员数量、接种事故发生率、温度监测设备的配备、上卡率的影响;桂东部主要受接种事故发生率、免疫规划人员数量影响;桂西北部主要受经费投入、预防接种人员数量和上卡率的影响。结论:广西卡介苗AEFI发生率具有空间自相关性,不同区域各因素的影响程度不同,各地可通过制定适宜的政策措施,降低接种差错和卡介苗AEFI发生率。

单中心非肌层浸润性膀胱癌患者行卡介苗灌注治疗的疗效分析

目的探讨非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)患者行卡介苗(BCG)灌注治疗的疗效、不良反应及其独立危险因素。方法回顾2015年9月~2021年9月于中山大学肿瘤防治中心术后BCG灌注的患者资料。采用无复发生存率(RFS)、无进展生存率(PFS)和疾病特异生存率(DSS)评估BCG灌注患者的预后。不良反应事件评价标准5.0版评估灌注后不良反应。采用Kaplan-Meier生存分析,单因素、多因素COX回归分析BCG灌注的独立预测因子。结果共纳入患者421名,患者平均年龄为61.79±11.51岁,中位随访时间为17月。BCG灌注后88名患者发现复发(20.9%),中位复发时间为13个月;40名患者出现进展(9.5%),中位时间为18个月;14名患者死亡(3.3%),中位时间为30个月。201名患者出现相关不良反应,1级不良反应的患者有69名;2级不良反应有110名;3级不良反应23名。生存分析提示当患者年龄小于67.5岁(P=0.013),肿瘤为初发(P<0.001)、单发(P=0.010)、超过1年复发(P=0.042),且患者中性粒细胞较低(P=0.005),单核细胞较低(P=0.001),NLR(中性粒细胞/淋巴细胞)(P=0.014)较低,细胞角蛋白19片段(CyFra21-1)(P=0.002)较低时无复发生存率明显升高,当患者年龄小于67.5岁(P=0.042),肿瘤为初发(P<0.001),CyFra21-1较低(P=0.042)时患者无进展生存率更高。多因素COX分析提示:肿瘤复发时间(P=0.007,HR=2.669,95%CI 1.316-5.414)、单核细胞数(P=0.015,HR=0.376,95%CI 0.171-0.829)和CyFra21-1值(P=0.002,HR=0.312,95%CI 0.151-0.647)是NMIBC患者BCG灌注RFS的独立预测因素;肿瘤初发或复发(P=0.003,HR=0.301,95%CI 0.138-0.660)、中性粒细胞数(P=0.028,HR=0.302,95%CI 0.103-0.882)和CyFra21-1值(P=0.029,HR=0.358,95%CI 0.142-0.903)是PFS的独立预测因素。结论对于中、高危的NMIBC患者术后的BCG灌注治疗效果显著,且大部分的不良反应患者可耐受。肿瘤的复发时间、单核细胞计数和CyFra21-1为RFS的独立预测因素,肿瘤的初发或复发、中性粒细胞计数以及CyFra21-1为PFS的独立预测因素。

卡介苗对1型糖尿病小鼠的免疫治疗作用及其机制

目的评价卡介苗(BCG)对1型糖尿病(T1DM)小鼠的免疫治疗效果,并探索其作用机制。方法将15只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为造模组(n=10,腹腔注射50 mg/kg链尿佐菌素建立T1DM模型)与对照组(n=5,腹腔注射等量柠檬酸缓冲液);取造模成功即随机血糖≥16.7 mmol/L的10只小鼠分为T1DM组(n=5)与卡介苗(BCG)组(n=5)。随后BCG组小鼠经皮下注射BCG 1×10^(6) cfu/只进行免疫治疗,4周后加强免疫治疗1次,T1DM组与对照组注射相同剂量磷酸盐缓冲液(PBS)。在实验周期(13周)内,每周监测小鼠体重和进食量变化,尾静脉采血检测各组小鼠血糖水平,采用口服葡萄糖耐量实验(OGTT)检测各组小鼠葡萄糖负荷后的血糖调节能力。采用HE染色观察各组小鼠胰腺组织病理变化,免疫组化染色检测胰腺胰岛素水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清C-肽含量,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组小鼠脾组织细胞因子mRNA水平,流式细胞术检测各组小鼠脾细胞中调节性T细胞(Treg)比例。结果BCG免疫治疗2次后(第13周),T1DM组小鼠血糖水平明显高于对照组(P<0.001),而BCG组血糖水平虽高于对照组(P<0.01),但明显低于T1DM组(P<0.01)。OGTT结果显示,3组小鼠在葡萄糖灌胃后血糖水平迅速升高,120 min时开始下降,到180 min时,对照组小鼠血糖水平降至正常水平;与对照组比较,T1DM组及BCG组小鼠在120 min后血糖水平虽有下降趋势,但在180 min时仍明显高于对照组(P<0.001),而BCG组与T1DM组间差异无统计学意义(P>0.05)。在初次免疫时(第5周),与对照组比较,T1DM组和BCG组小鼠体重增长百分比明显降低(P<0.0001),进食量明显增加(P<0.0001)。BCG免疫治疗2次后(第13周),与对照组比较,T1DM组小鼠体重增长百分比仍明显降低(P<0.0001),进食量明显增加(P<0.0001);与T1DM组比较,BCG组小鼠体重增长百分比增高(P<0.001),进食量减少(P<0.001),且与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示,与对照组比较,T1DM组小鼠胰岛发生明显的萎缩,而BCG组小鼠胰岛形态与对照组接近,且胰岛内细胞数目明显多于T1DM组。免疫组化染色结果显示,与对照组比较,T1DM组小鼠胰腺中胰岛素阳性面积明显减少(P<0.01),而BCG组胰岛素阳性面积虽然少于对照组(P<0.05),但明显多于T1DM组(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组比较,T1DM组、BCG组血清C-肽含量明显降低(P<0.001,P<0.05),但BCG组血清C-肽含量明显高于T1DM组(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与对照组比较,T1DM组脾组织细胞因子mRNA水平无明显变化(P>0.05);BCG组白细胞介素-2(IL-2)、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA水平与对照组和T1DM组比较均明显升高(P<0.0001),而γ干扰素(IFN-γ)mRNA水平无明显变化(P>0.05)。流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,T1DM组小鼠体内Treg细胞百分比降低(P<0.05);与T1DM组比较,BCG组小鼠Treg细胞百分比明显增高(P<0.05),且与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论BCG免疫治疗可诱导Treg细胞增多,调节自身免疫应答,并通过减轻胰腺病理损伤、恢复胰岛细胞功能以促进胰岛素分泌,从而降低T1DM小鼠的血糖水平。

左氧氟沙星联合纤维素酶在体外能有效根除卡介苗生物被膜感染

目的 探究左氧氟沙星(LEV)和纤维素酶(CL)对结核杆菌模式菌—卡介苗(BCG)生物被膜的体外抗菌效果。方法 采用XTT法与结晶紫染色法确定BCG生物被膜的成熟生长周期。不同浓度的LEV和CL单独或联用处理BCG浮游菌及BCG生物被膜,采用结晶紫染色定量生物被膜中生物量的变化。然后将成熟的BCG生物被膜用CL单独处理24 h,通过SYTO 9染色、Calcofluor White Stain染色后,在共聚焦激光扫描显微镜观察活菌数量、生物被膜中纤维素含量变化,扫描电子显微镜下观察生物被膜的结构变化。结果 采用微量肉汤稀释法检测LEV的MIC、MBC和MBEC值分别为4、8和1024μg/mL。浓度为2.56、5.12和10.24 U/mL的CL与1/4×MIC抗生素(LEV)的组合会导致生物被膜生物量减少(P<0.001)。CL在10.24、5.12和2.56 U/mL3种浓度下对成熟BCG生物被膜均表现出明显的分散效应(P<0.001)。结论 当左氧氟沙星与纤维素酶联合使用时,抗生素能有效根除BCG生物被膜感染。

膀胱灌注卡介苗治疗中高危非肌层浸润性膀胱癌疗效预测模型的建立

目的探讨膀胱灌注卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)对于中高危非肌层浸润性膀胱癌(nonmuscle invasive bladder cancer,NMIBC)的疗效,结合术前血液学指标建立疗效预测模型筛选获益人群。方法 回顾性分析2014年1月至2019年1月收治于复旦大学附属中山医院泌尿外科258例中高危NMIBC患者。所有患者均采用尿道膀胱肿瘤切除术后膀胱灌注卡介苗治疗,记录患者术前血液学指标及临床病理信息。在训练集(n=180)中采用LASSO回归和Cox多因素回归模型筛选预后因子,同时建立疗效预测模型,利用C-index验证模型预测效能,并在验证集(n=78)中进行确认。结果 258例患者均获得有效随访,中位随访时间为53.0个月(12.0~98.2个月),总体复发率为31.0%(80/258),1年复发率为15.1%(39/258),3年复发率为25.6%(66/258),通过LASSO回归方法筛选出中性粒细胞和C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)作为预后因子,纳入多因素Cox分析,显示灌注前行二次经尿道膀胱肿瘤切除术(P=0.001),高龄(>70岁)(P=0.008)、CRP(P=0.002)和中性粒细胞(P=0.044)是中高危NMIBC患者行膀胱灌注卡介苗疗效的独立预测因子。疗效预测模型在训练集中的C-index为0.744,在验证集中的C-index为0.847。结论 膀胱灌注卡介苗治疗对中高危NMIBC安全有效,本研究所建立疗效预测模型(包含中性粒细胞、CRP、高龄和二次经尿道膀胱肿瘤切除术)预测中高危NMIBC患者膀胱灌注卡介苗疗效的准确性较高。

敲低Wnt7a抑制卡介苗诱导的小鼠肺泡上皮细胞自噬

目的探究无翅基因7a(Wnt7a)对牛结核分枝杆菌卡介苗(BCG)感染的肺泡上皮细胞自噬水平的调控作用。方法使用干扰Wnt7a慢病毒及BCG单独作用或共处理TC-1小鼠肺泡上皮细胞,设置小干涉RNA对照(si-NC)组、si-NC联合BCG组、Wnt7a小干涉RNA(si-Wnt7a)组和si-Wnt7a联合BCG组。Western blot法检测Wnt7a、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62及自噬相关基因5(ATG5)蛋白表达水平,利用免疫荧光细胞化学染色检测LC3的分布以确定细胞自噬情况。结果与si-NC组相比,BCG感染的TC-1细胞Wnt7a、LC3和ATG5蛋白表达均升高、LC3绿色荧光斑点亮度与分布显著增加;与BCG组感染的TC-1细胞相比,si-Wnt7a联合BCG组Wnt7a、LC3、P62及ATG5蛋白表达均显著降低,LC3绿色荧光斑点亮度与分布显著降低。结论敲低Wnt7a抑制BCG诱导的肺泡上皮细胞自噬。

卡介苗、铜绿假单胞菌交替膀胱灌注预防高危非肌层浸润性膀胱癌术后复发的疗效及安全性

目的:分析卡介苗(bacillus calmette guerin, BCG)、铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa, PA)-MSHA菌毛株交替膀胱灌注对高危非肌层浸润性膀胱癌(non-muscular invasive bladder cancer, NMIBC)术后患者的肿瘤复发率、不良反应及灌注前后患者生活质量的影响。方法:回顾性分析我科自2017年10月至2019年10月收治的120例诊断为膀胱癌并行经尿道膀胱肿瘤电切术(transurethral resection of bladder tumor, TURBT),且术后病理提示为高危NMIBC的患者。随机分为两组,分别为BCG、PA-MSHA交替灌注组(实验组,60例)及吉西他滨单药灌注组(对照组,60例)。术后2年不同阶段对患者进行随访,针对两组患者治疗后肿瘤复发率、不良反应及灌注前后对患者生活质量的影响进行比较分析。结果:经过术后12个月的灌注治疗,两组患者肿瘤复发率比较无统计学差异(P> 0.05);灌注18个月及24个月,实验组肿瘤复发率(11.67%、15.00%)均低于对照组(26.67%、33.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。实验组交替灌注PA-MSHA后不良反应较少,发热发生率为1.30%,恶心呕吐发生率为0.40%,膀胱刺激征发生率为3.70%,血尿发生率为0.40%;对照组在使用吉西他滨灌注后发热发生率为3.15%,恶心呕吐发生率为0.90%,膀胱刺激征发生率为13.52%,血尿发生率为1.10%。实验组使用PA-MSHA灌注后与对照组相比,发热发生率和膀胱刺激征发生率差异均有统计学意义(P<0.05);恶心呕吐发生率、血尿发生率两者并无明显差异,不具有统计学意义(P>0.05)。实验组治疗后12个月、24个月的生活质量评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:高危NMIBC术后使用BCG、PA-MSHA交替膀胱灌注可有效预防NMIBC术后肿瘤复发,可在降低膀胱灌注不良反应发生率的同时提高患者的耐受性及生活质量。