抗激活小鼠T细胞抗原单抗抑制同种移植物排斥反应的作用及其机理

为阐明活化 T 细胞主动免疫同系小鼠诱导同种移植物存活期延长的机理,利用本室制备的抗活化小鼠 T 细胞抗原单克隆抗体(2H_3)观察它对同种免疫反应的影响;结果表明给接受同种移植物的受者转输2H_3能显著地延长同种心肌移植物的存活时间;在 ConA 诱导的淋巴细胞增生反应、混合淋巴细胞反应和诱导同种 T 杀伤性细胞的体外实验中加入2H_3,观察到2H_3对上述反应的明显抑制作用。提示活化 T细胞主动免疫同系小鼠诱导同种移植物存活期延长的机理,可能与免疫动物体内产生了相应的抗体,抑制了同种免疫反应的进行有关。

欧洲同种移植物组织库(EHB)参观见闻

2015年9月14日,适值欧洲器官移植年会之际,郑虹副院长带领邓永林主任、蒋文涛主任、高伟主任、史源、宋卓伦6位医生访问欧洲同种移植物组织库（EHB）,与组织负责人R.JASHRI教授举行座谈会（图1）,交流双方各自在心脏瓣膜及血管的保存方面的经验,对国际间合作达成初步共识,会后R.JASHRI教授带领大家参观了组织库,

辅助肝脏对其它同种移植物的免疫保护作用

目的探讨辅助性肝脏移植免疫学特点,明确辅助肝脏移植物的免疫保护作用。方法 分析二例辅助性肝脏移植患者的免疫学指标和病理学资料。结果辅助性肝脏移植患者免疫抑制剂浓度相对较低,排斥反应次数少,强度低。存活良好的辅助性肝移植患者的其它移植物功能良好。结论辅助性肝脏移植术后处于免疫低反应状态。辅助性肝脏对其它移植物有免疫保护作用,低浓度免疫抑制剂对辅助肝脏和其它同种移植物的负作用也较小。

未成熟树突细胞免疫诱导同种移植物存活延长

目的 :利用未成熟DC免疫受鼠诱导同种移植物存活延长 ,分析未成熟DC在诱导同种免疫低应答反应中的可能机理。方法 :以小鼠耳后心肌移植为模型 ,观察未成熟DC和成熟DC免疫受鼠同种移植心肌的存活情况。同时检测未成熟DC免疫的小鼠脾细胞对同种细胞的CTL活性。结果 :未成熟DC免疫受鼠的同种移植物存活时间明显延长 ,平均存活期从9 1± 0 73d延长到 2 5 4± 4 2 7d ,联合使用阿霉素效果更好 ,平均存活期为 30 5± 3 98d ;C5 7BL/ 6未成熟DC免疫的Balb/c小鼠脾细胞对C5 7BL/ 6靶细胞的杀伤 (3 H TdR释放率为 16 32 % )明显低于经成熟DC免疫的受鼠的脾细胞 (3 H TdR释放率为39 5 8% )。结论 :未成熟DC免疫可诱导同种移植心肌的存活明显延长 ,可能与受鼠体内的效应T细胞对移植物细胞杀伤低下有关。

用两种CD45单克隆抗体灌注移植物对肾同种移植物排斥的作用

在一项盲性试验中,77名病人随机接受首次尸体肾同种移植物,移植物曾用一对CD45单克隆抗体(mAbs)或用人白蛋白溶液灌注,其目的是降低过客白细胞的免疫原性。现未发现mAb灌注的并发症。两组中,病人及同种移植物的存活率相似。研究结果表明,用mAb灌注的同种移植物病人中的排斥事件为7人(18％),相比之下,对照组则为24人(63％)。

常规超声联合瞬时弹性成像预测肝移植患者早期同种异体移植物功能障碍的临床价值

目的 探讨常规超声联合瞬时弹性成像预测肝移植患者早期同种异体移植物功能障碍(EAD)的临床价值。方法 回顾性分析我院37例脑死亡器官捐献(DBD)供者肝脏(以下简称供肝)影像学资料,所有供肝移植前均行常规超声及瞬时弹性成像检查获取超声分级、受控衰减参数(CAP)、肝脏硬度值(LS),根据相应受者术后1周内是否发生EAD将其分为EAD组17例和非EAD组20例,比较两组供肝超声分级、CAP及LS的差异。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析供肝超声分级、CAP、LS单独及联合预测肝移植患者EAD的诊断效能。结果 EAD组供肝CAP、LS及超声分级均高于非EAD组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,供肝CAP、LS、超声分级截断值分别为206 dB/m、5.5 kPa、3.5级时,预测肝移植患者EAD的曲线下面积(AUC)分别为0.854、0.729、0.762,供肝超声分级联合CAP、LS预测肝移植患者EAD的AUC最高,为0.888,与供肝超声分级、LS的AUC比较差异均有统计学意义(均P<0.05);其余两两比较差异均无统计学意义。结论 常规超声联合瞬时弹性成像在预测肝移植患者EAD中有一定的临床价值。

同种异体移植物炎性因子-1在糖尿病睾丸大鼠模型中的表达及意义

目的探讨同种异体移植物炎性因子-1(AIF-1)在糖尿病(DM)睾丸大鼠模型中的表达及其意义。方法糖尿病睾丸(DMT)大鼠模型,随机分为糖尿病睾丸4周组(DMT4W组)、糖尿病睾丸8周组(DMT8W)、糖尿病睾丸12周组(DMT12W)。正常对照组(NC组)分为正常对照4周组(NC4W)、正常对照8周组(NC8W)、正常对照12周组(NC12W)。组织病理学检测各组睾丸形态学变化,免疫组织化学检测AIF-1蛋白表达,免疫荧光法观察AIF-1和NF-κB p65蛋白表达。结果组织病理学显示,与NC组相比,DMT组内睾丸内生精细胞数量,支持细胞、间质细胞、精子数明显减少。免疫组织化学结果显示,与NC组相比,DMT组睾丸内AIF-1蛋白表达显著增加(P<0.05)。免疫荧光结果显示,与NC组相比,DMT各组AIF-1和NF-κB p65蛋白荧光强度显著增强。结论DMT组织AIF-1蛋白过表达,提示其在DMT病变过程可能起重要作用,有望成为治疗新靶点和诊断标记物。

脱细胞同种异体神经移植物修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的 观察脱细胞处理的同种异体神经移植物修复大鼠坐骨神经缺损的作用。 方法 用组织工程学方法制备的大鼠同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损 ,并对再生神经进行电生理学功能测试 ,光镜、电镜观察移植物内的再生神经 ,并进行统计分析。 结果 术后 13周内 ,动物未见炎症及排斥反应。用脱细胞处理的同种异体神经移植物修复神经缺损 ,再生神经的传导功能、纤维数量、轴突直径、有髓纤维占有的面积与自体神经移植对照及计量学上统计分析均无显著性差异。 结论 脱细胞处理的同种异体神经移植物具有良好的组织相容性 ,它对缺损的坐骨神经再生有促进作用。

BDNF在脱细胞同种异体神经移植物修复神经缺损后不同组织中的表达

目的探讨脱细胞同种异体神经移植物(ANA)修复大鼠坐骨神经缺损后促神经再生的分子作用机制。方法将36只Wistar大鼠随机分成6组:正常对照组,自体移植组,桥接2,4,8,12周组,每组6只,分别观测患侧L4脊髓及胫前肌内脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白及mRNA表达。结果ANA桥接大鼠坐骨神经缺损后2周患侧脊髓内BDNF表达增高,4周时达高峰,持续到8周,然后逐渐降低,12周时仍显著高于正常对照组,与自体移植组相比无差异。而患侧胫前肌最初4周内逐渐降低,然后逐渐升高,12周时达到正常水平,与自体移植组相比无差异。BDNF mRNA的表达基本与蛋白表达一致。结论ANA具有良好的组织相容性,也许可替代自体神经修复大鼠坐骨神经长距离缺损,此作用可能与上调脊髓BDNF蛋白及mRNA表达有关。

化学去细胞同种异体神经移植物储存方法的初步研究

目的 :探索犬去细胞神经的最佳储存方法。方法 :采用真空封装辐照灭菌法深低温储存犬去细胞坐骨神经12个月 ,进行细菌学检查、一般组织学观察、免疫组化染色、透射电镜观察。结果 :储存过程中不会发生细菌污染 ,储存去细胞神经的延展性及神经外膜的韧弹性保持良好 ;其基本结构、神经基底膜及许旺细胞基底板层被保留 ;仍然保持为没有细胞髓鞘及其碎片的空的神经基质管。结论 :真空封装辐照灭菌法可有效储存去细胞神经 1年。

同种异体移植物处置方法影响犬前交叉韧带重建术后腱骨愈合界面的骨重塑

背景:使用同种异体移植物进行前交叉韧带重建手术后的腱骨愈合过程复杂,愈合不良易导致隧道扩大。术前移植物的处理过程可能对腱骨愈合存在一定影响,但是具体情况并不清楚。目的:探讨同种异体移植物术前处置方法对韧带重建术后腱骨愈合过程中骨重塑的影响。方法:取32只雄性比格犬,建立双侧后膝前交叉韧带断裂模型后,采用抛硬币法随机分4组进行前交叉韧重建手术:A组以新鲜自体跟腱为移植物,B组以新鲜同种异体跟腱为移植物,C组以γ射线辐照后低温冷藏的同种异体跟腱为移植物,D组以冻干后经γ射线辐照的同种异体跟腱为移植物,每组8只。术后3,6个月取股骨-移植物-胫骨复合体,行Micro CT扫描和组织切片破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色,扫描图像进一步行骨微观结构参数测量,并建立3D骨隧道模型测量隧道面积。结果与结论:(1)Micro CT扫描:术后3个月,D组连接密度、骨小梁数量、骨小梁厚度、骨体积与总体积比值及结构模型指数均低于A、C组(P<0.05),骨小梁分离度高于A组(P<0.05);B组接密度、骨小梁数量及结构模型指数均低于A组(P<0.05),骨小梁分离度高于A组(P<0.05),骨体积与总体积比值低于A、C组(P<0.05)。术后6个月,D组连接密度、骨小梁数量及骨体积与总体积比值均低于A组(P<0.05),骨小梁厚度及结构模型指数均低于A、C组(P<0.05),骨小梁分离度高于A组(P<0.05);B组连接密度、结构模型指数低于A组(P<0.05),骨小梁厚度低于A、C组(P<0.05),骨小梁分离度高于A组(P<0.05);(2)抗酒石酸酸性磷酸酶染色:与A组相比,B、D组破骨细胞染色更深且数量更多;C组破骨细胞在形态和数量上类似于A组,体积偏小且着色偏淡;(3)隧道面积:相同时间点下,D组股骨与胫骨隧道扩大程度最大;B组术后3个月的股骨隧道内口、术后3,6个月的股骨隧道内口与中部面积均大于A组(P<0.05),术后3,6个月的胫骨隧道内口面积大于A组(P<0.05);(4)结果显示:前交叉韧带重建术后腱骨愈合过程中骨隧道扩大现象普遍存在,移植物处置方法通过影响腱骨界面破骨细胞介导的骨吸收导致骨微观结构的改变,从而干预腱骨愈合过程中的骨重塑。

脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损的形态学观察

目的: 研究脱细胞处理的同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损后, 再生神经的形态学变化。方法: 光镜、电镜观察移植物内再生神经的超微结构变化, 免疫组织化学技术观察再生神经中S-100蛋白表达,并对再生神经的纤维数量、髓鞘厚度等进行统计学分析。结果: 实验组和自体神经移植对照组的移植段内见有由束膜和外膜包被的大量再生神经纤维, 两组比较再生神经的纤维数量、髓鞘厚度、有髓纤维占有的面积均无显著性差异; 两组移植段神经中的S-100阳性施万细胞数、形态和排列等方面也无明显差异。结论: 脱细胞同种异体神经同自体神经一样,对缺损的坐骨神经再生具有促进作用。

脱细胞同种异体神经移植物的制备及成分分析

目的 探讨脱细胞同种异体神经移植的制备方法及其含有的成分。方法 采用组织工程化低渗脱细胞方法制备神经异体移植物 ,光电镜观察其结构特征 ;用免疫组织化学法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析神经异体移植物的成分。结果 正常的 (天然的 )周围神经经脱细胞处理后 ,清除了雪旺细胞、神经外膜和束膜的细胞 ,以及神经纤维的髓鞘和轴突 ,保存了由雪旺细胞基底膜管以及神经外膜和束膜的细胞外基质构成的三维支架结构。成分分析结果显示 ,含有LN、FN以及生长相关蛋白GAP 4 3和 6 5kDa蛋白等促进和诱导受体损伤神经再生的重要成分。结论 脱细胞异体神经移植物含有诱导和促进神经再生的相关蛋白 ,有利于受损神经的再生。

移植物类型对前交叉韧带重建后患者膝关节功能的影响

背景:临床上常采用移植物重建前交叉韧带,而不同移植物类型又影响着患者术后膝关节功能和康复方案的制定。目的:回顾分析不同移植物类型对前交叉韧带重建后患者肌力、关节稳定性、功能性活动及重返运动的影响。方法:在PubMed、Web of Science、Cochrane、中国知网、万方数据库中进行检索,中文检索词为“前交叉韧带重建术,自体移植物,同种异体移植物,人工韧带,骨-髌腱-骨,股四头肌肌腱,腘绳肌肌腱,腓骨长肌肌腱,康复训练,重返运动”;英文检索词为“anterior cruciate ligament reconstruction,autografts,allografts,artificial ligaments,bone-patellatendon-bone,quadriceps tendon autograft,hamstring tendon autograft,peroneus longus tendon autograft,rehabilitation,exercise,protocol,return to sport”。结果与结论:选用骨-髌腱-骨移植物的患者应加强股四头肌离心收缩练习,康复后期应关注股四头肌耐力和爆发力的恢复。与骨-髌腱-骨移植物和腘绳肌肌腱移植物相比,选用股四头肌肌腱移植物的患者在5-8个月内符合回归标准的患者明显更少,应制定较长时间的训练计划,训练周期尽量持续到3年以上。选用腘绳肌肌腱移植物应强化多角度下腘绳肌力量训练,尤其是屈膝60°以上的周期至少持续至术后18周。选用腓骨长肌肌腱移植物的患者后续应加强踝关节周围肌肉力量,以足底肌肉力量为主。选用同种异体移植物应注意移植物经低剂量辐射消毒后其抗张力性降低20%,因此应关注膝关节稳定性训练。选用人工韧带移植物的患者3-6周内可渐进性增强股四头肌和腘绳肌力量训练,重视早期本体感觉练习,对平衡、跳跃及灵活性进行针对性训练。

几种制备因素对同种骨移植物的生物力学特性的影响

本文研究了超声清洗,冷冻干燥和Co^(60)r射线辐照灭菌几项制备因素对同种骨移植物的生物力学特性的影响。结果表明,实验组和对照组之间无显著性差异,即这些制备因素对同种骨移植物的生物力学特性无影响。

血清同种异体移植物炎性因子-1在2型糖尿病肾病中的变化及意义

目的探讨2型糖尿病肾病(DN)患者血清同种异体移植物炎性因子-1(AIF-1)的变化及其临床意义。方法选取2018~2019年首都医科大学附属北京友谊医院收治的180例2型糖尿病肾病患者(观察组)进行前瞻性研究,根据尿白蛋白排泄率(UAER)情况将其分为正常白蛋白尿组(NA组,n=59)、微量白蛋白尿组(MA组,n=61)和大量白蛋白尿组(LA组,n=60);另选取同期健康体检者60例作为对照组。收集所有研究对象24 h尿进行UAER检测,并采集静脉血进行肿瘤坏死因子α(TNF-α)和AIF-1检测,比较各组间UAER、TNF-α和AIF-1水平,以及对DN患者UAER、TNF-α和AIF-1间的关系进行Pearson相关性分析。结果观察组患者UAER、TNF-α和AIF-1水平分别为(196.40±202.54)mg/24 h、(25.09±10.58)pg/ml和(225.06±121.50)pg/ml,较对照组(5.93±1.39)mg/24 h、(12.22±2.76)pg/ml和(79.61±16.91)pg/ml明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。NA组、MA组和LA组患者UAER、TNF-α和AIF-1水平分别为(6.93±1.79)mg/24 h、(118.74±23.98)mg/24 h、(461.66±100.87)mg/24 h,(16.08±3.33)pg/ml、(20.44±4.09)pg/ml、(38.69±4.49)pg/ml,(102.72±36.70)pg/ml、(211.95±37.25)pg/ml、(358.69±93.55)pg/ml,除NA组UAER较对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其他指标组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,DN患者AIF-1与UAER、TNF-α间的关系呈正相关性(r=0.822、0.772,P<0.01)。结论DN患者血清AIF-1水平升高,且与UAER和TNF-α呈正相关性,AIF-1极有可能成为DN诊治的新生物学标志物。

反复冻融同种异体跟腱重建兔前交叉韧带后移植物生物力学研究

目的:研究反复冻融对同种异体跟腱重建兔前交叉韧带(ACL)后移植物的生物力学特性是否有影响。方法:取成年雄性新西兰白兔异体跟腱,经密封包装和Co60照射灭菌后,-80℃和室温20℃反复冻融。选用36只体重2.0～2.5kg成年雄性新西兰白兔行ACL重建手术,其中18只左、右膝分别用冻融1次(对照组)、2次的移植物,另外18只左、右膝分别用冻融3次、10次的移植物。术后6周、12周分批宰杀取材。每一时段各组随机取4条重建ACL行生物力学拉伸试验(各组剩下5个膝关节用于形态学研究),检测重建前交叉韧带最大载荷、刚度、最大载荷能量、最大应力、最大应变、弹性模量和能量密度。结果:6周时冻融10次组最大载荷(26.38±4.71N)及最大载荷能量(0.52±0.07N·m)明显高于其他三组(P<0.05),其余指标各组间无显著性差异(P>0.05)。12周时各组间的所有力学指标均无显著性差异(P>0.05)。结论:虽然术后6周反复冻融10次同种异体跟腱重建的兔膝ACL的抗拉强度高于冻融次数少组,但术后12周不同反复冻融次数对重建ACL生物力学的影响无明显差异。

反复冻融同种异体跟腱重建前交叉韧带移植物的组织学特点

背景:在临床应用中,经常出现解冻后的同种异体移植物由于某种原因而不用的情况,这样的异体移植物是否可以回收冷冻即经历了反复冻融的过程后继续使用呢?反复冻融后的移植物在体内的病理学改变尚无报道。目的:观察反复冻融的同种异体跟腱重建兔前交叉韧带后移植物的组织学改变。方法:无菌条件下选取成年雄性新西兰白兔异体跟腱,经密封包装和60Co照射灭菌后,在-80℃和20℃反复冻融。选用24只成年雄性新西兰白兔行前交叉韧带重建,其中12只左、右膝分别用冻融1次(对照组)、2次的移植物,另外12只左、右膝分别用冻融3次、10次的移植物。分别于造模后6,12,24周取材。每一时段各组随机取3条重建的前交叉韧带,通过Modified Histology Grading Score评分,评估重建前交叉韧带的细胞形态、数量、基质染色强度、纤维软骨、新骨形成、腱骨愈合、软骨损伤程度等。结果与结论:(1)造模后6周冻融10次组的细胞形态、基质染色强度和总分明显高于其他组(P<0.05),其他各组的评分差异无显著性意义(P>0.05);(2)虽然造模后6周反复冻融10次同种异体跟腱重建的兔膝前交叉韧带的组织学评分高于冻融次数少组,但造模后12,24周不同反复冻融次数对重建前交叉韧带组织学评分的影响无明显差异;(3)实验仅从组织学的角度证明反复冻融多次的肌腱在术后早期组织学评分优于冻融次数较少的肌腱。

同种异体移植物炎症因子在子宫内膜异位症的表达

目的检测同种异体移植物炎症因子(AIF-1)在子宫内膜异位症在位子宫内膜和异位子宫内膜组织中的表达情况,探讨其与子宫内膜异位症的关系。方法收集子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织48例和异位子宫内膜组织58例(研究组),取同期手术的子宫肌瘤患者子宫内膜组织43例(对照组),采用免疫组织化学法检测子宫内膜组织中AIF-1的表达情况。结果研究组在位子宫内膜组织中AIF-1表达与对照组相比,差异无显著性(P>0.05);研究组异位子宫内膜组织中AIF-1呈明显的高表达,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05);研究组在位子宫内膜AIF-1表达与异位子宫内膜AIF-1表达之间,差异有显著性(P<0.05)。结论AIF-1在子宫内膜异位症在位子宫内膜和异位子宫内膜组织中表达增强,可能在子宫内膜异位症的发生、发展中起重要作用。