右美托咪定减轻呼吸机相关性肺损伤模型大鼠肺组织损伤

目的探讨右美托咪定(DEX)对呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠肺组织Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho激酶1(ROCK1)信号通路的影响。方法建立VILI大鼠模型,将大鼠分为对照组(control组)、模型组(VILI组)、右美托咪定低、高剂量组(DEX-L、DEX-H组)、右美托咪定高剂量+溶血磷脂酸(LPA)组(DEX-H+LPA组)。测定大鼠肺组织湿/干质量比值(W/D);HE染色观察肺组织病理形态;ELISA试剂盒检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的水平;TUNEL染色法检测肺上皮细胞死亡;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白及RhoA、ROCK1表达水平。结果DEX可以减轻VILI大鼠肺损伤,降低肺损伤评分、W/D、细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、IL-6水平及Bax、cleaved caspase-3、RhoA、ROCK、α-SMA表达(P<0.05),升高Bcl-2表达(P<0.05);LPA可以促使大鼠肺损伤加重,肺损伤评分、W/D、细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、IL-6水平及Bax、cleaved caspase-3、RhoA、ROCK、α-SMA表达升高(P<0.05),Bcl-2表达降低(P<0.05)。结论右美托咪定可能通过抑制RhoA/ROCK1通路保护大鼠呼吸机相关性肺损伤。

机械功评估呼吸机相关性肺损伤的临床应用进展

随着新型冠状病毒肺炎的大流行,肺力学评估和呼吸机诱导肺损伤(VILI)监测工具的需求随之增加。机械功(MP)作为一个评估VILI的新兴综合参数受到临床广泛关注。本文就MP的定义和计算公式、MP与VILI的相关性以及由此引发的保护性通气策略的相关研究进展进行综述,以期为临床避免VILI提供新视角。

利多卡因预处理对小鼠呼吸机相关性肺损伤的影响

目的探究利多卡因预处理对小鼠呼吸机相关性肺损伤的影响及可能机制。方法将SPF级的健康雄性C57BL/6小鼠32只采用随机数字表法分为4组(每组8只):对照组(Sham组)、机械通气组(MV组)、利多卡因+机械通气组(Lido+MV组)和茴香霉素+利多卡因+机械通气组(Anis+Lido+MV组)。Sham组小鼠经口气管插管后自主呼吸4 h,MV组经口气管插管后行机械通气4 h,Lido+MV组小鼠机械通气前30 min腹腔注射利多卡因8 mg/kg,Anis+Lido+MV组小鼠机械通气前30 min腹腔注射茴香霉素20 mg/kg+利多卡因8 mg/kg,余同MV组。机械通气4 h后使用BCA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度,酶联免疫吸附试验检测BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)浓度,显微镜下计数BALF中性粒细胞数量,蛋白质印迹法检测肺组织p38 MAPK、p-p38 MAPK、NLRP3、IL-6蛋白水平。结果与Sham组比较,MV组和Anis+Lido+MV组小鼠BALF中总蛋白、中性粒细胞计数、TNF-α和IL-6浓度均升高,小鼠肺组织p-p38 MAPK、NLRP3、IL-6水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);Lido+MV组小鼠BALF中总蛋白、中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6浓度、小鼠肺组织p-p38 MAPK、NLRP3、IL-6水平均低于MV组和Anis+Lido+MV组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论利多卡因预处理能够抑制呼吸机相关性肺损伤,其机制可能是通过抑制p38 MAPK/NLRP3信号通路从而发挥作用,此外利多卡因对NLRP3的抑制作用可能依赖于其对p38 MAPK磷酸化的抑制作用。

PI3K/Akt信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的研究进展

呼吸机相关性肺损伤(VILI)是机械通气的严重并发症,会增加接受呼吸机治疗患者的死亡率,目前临床尚缺乏有效的治疗方法。随着VILI发生机制研究的不断深入,发现磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路具有调控细胞增殖、存活及迁移等多种细胞功能的作用,其在机械通气过程中通过参与炎症、肺水肿形成、氧化应激、细胞凋亡等病理过程影响VILI的发生发展。当前通过调节该信号通路治疗VILI在国内外受到广泛关注。未来深入研究PI3K/Akt信号通路可为VILI的防治提供参考。

不同潮气量机械通气过程中呼吸机相关性肺损伤的病理学变化

目的:观察不同潮气量机械通气下大鼠肺组织的病理学变化。方法:实验于2006-05/2007-02在解放军第四军医大学唐都医院呼吸科实验室完成。①实验分组:SD大鼠60只按随机数字表法分为4组:对照组(未行机械通气),常规潮气量组(潮气量10mL/kg),过度通气小潮气量组(潮气量20mL/kg),过度通气大潮气量组(潮气量40mL/kg),每组15只。②实验方法:除对照组外,其余各组大鼠均通过胶管与动物人工呼吸机相连接,行机械通气。各组大鼠的通气参数除潮气量外,其余参数均相同,即频率为60次/min,吸/呼比为1∶3,吸入氧的体积分数为0.21。各通气组分别于机械通气结束后采集相关组织标本。③实验评估:大鼠麻醉处死后,分别在肉眼和光镜下观察各组大鼠肺组织的病理学改变;测定肺湿/干质量比值。结果:①大鼠肺组织大体观察和病理学观察:常规潮气量组大鼠肺组织在肉眼和光镜下观察与对照组相比较均无明显差别;过度通气小潮气量组在光镜下可见肺间质水肿及炎性细胞浸润;过度通气大潮气量组大鼠肺组织有明显的损伤表现。②肺湿/干质量比值:过度通气大潮气量组和小潮气量组的肺湿/干质量比值高于对照组和常规潮气量组,差异均有显著性意义(P均<0.05),常规潮气量组与对照组之间的差异无显著性意义(P>0.05)。结论:呼吸机相关性肺损伤的发生与机械通气的过度通气潮气量大小有密切关系,而常规潮气量通气对正常肺组织结构无明显影响。

呼吸机相关性肺损伤的炎症反应机制

机械通气是治疗急性呼吸窘迫综合征的主要手段 ,但呼吸机应用不当也可能加重原有的肺损伤 ,引起呼吸机相关性肺损伤。呼吸机相关性肺损伤本质上是生物伤 ,异常的机械力作用于细胞 ,激活细胞内信号转导通路 ,活化炎性细胞 ,产生大量炎症介质 ,加重炎症反应。探讨呼吸机相关性肺损伤的炎症反应机制 ,阻断机械力作用向细胞内的传导和细胞内信号转导途径的激活 ,减少炎症细胞的激活和炎症介质基因的表达 。

呼吸机相关性肺损伤17例回顾性分析

目的 提高对呼吸机相关性肺损伤(VALI)的认识。方法 对1986年～2001年行机械通气(MV)过程中发生VALI的17例患者进行回顾性分析。结果 17例VALI中包括气胸5例,系统性气栓塞4例,急性肺损伤4例,弥漫性肺损伤4例。结论 呼吸机因素和患者本身因素是发生VALI的重要原因;制定更为合理的个体化通气策略及其它措施是提高MV治疗价值的关键。

外源性瘦素预防糖尿病大鼠呼吸机相关性肺损伤机制探讨

目的探讨外源性瘦素对糖尿病大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)的保护机制。方法选择Wistar大鼠40只,取其中30只制备2型糖尿病模型并分为B、C、D组各10只,其余10只未造模大鼠为A组。造模后各组腹腔注射麻醉,气管切开并插管,A、B组带管自主呼吸,C组应用40 m L/kg潮气量行呼吸机机械通气4 h,D组经气管插管滴注外源性重组瘦素50μg/kg后,应用40 m L/kg潮气量行呼吸机机械通气4 h。机械通气结束后,处死各组大鼠,取出肺脏,测定湿干比(W/D),HE染色法观察肺组织病理改变并进行病理评分,免疫组化法检测肺组织瘦素及瘦素受体(OB-Rb)蛋白表达,ELISA法检测肺组织匀浆中白细胞介素1β(IL-1β)、髓过氧化物酶(MPO)、巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果 C、D组W/D、肺组织病理评分均高于A、B组,D组W/D、肺组织病理评分、瘦素、OB-Rb蛋白表达均低于C组(P均<0.05)。D组肺组织匀浆中IL-1β、TNF-α、MIP-2、MPO水平及肺组织瘦素、OB-Rb表达均低于C组(P均<0.05)。结论外源性瘦素预处理可明显减轻糖尿病大鼠VILI,其机制可能与抑制内源性瘦素水平及肺组织炎症反应有关。

磷酸酰肌醇-3激酶γ抑制剂AS605240对治疗呼吸机相关性肺损伤大鼠的影响

目的:建立呼吸机相关性肺损伤(ventilator associated lung injury,VALI)大鼠模型,了解磷酸酰肌醇-3激酶γ(phosphatidylinositol 3-hydroxy kinase gamma,PI3Kγ)小分子抑制剂AS605240对其的影响,探讨可能的作用机制。方法:将30只SD大鼠随机均分为3组:对照组、VALI模型组和AS605240处理组。对照组不作机械通气处理;VALI模型组行大潮气量(40 ml/kg)机械通气;AS605240处理组,机械通气前10 min静脉预注AS605240 20 mg/kg。大鼠机械通气4 h后放血处死,计算肺湿干重(W/D)比值。收集肺泡灌洗液(broncho alveolar lavage fluid,BALF),测定其总蛋白含量并行白细胞(WBC)计数。采用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8及IL-10的细胞因子浓度,比色法测定血清和BALF中超氧化物歧化酶(superoxide dismu-tase,SOD)活性及丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde,MDA)浓度。结果:(1)与对照组相比,AS605240处理组与VALI模型组其W/D、WBC计数、总蛋白含量均升高(均P<0.05);AS605240处理组与VALI模型组相比,AS605240组W/D、WBC计数、TP含量均降低(均P<0.05)。(2)与对照组相比,AS605240处理组与VALI模型组大鼠BALF和血清中TNF-α、IL-6、IL-8水平和MDA活性均明显升高、而IL-10和SOD浓度则明显降低(均P<0.05)。与VALI模型组相比,AS605240组BALF及血清中TNF-α、IL-6、IL-8和MDA活性降低,IL-10和SOD浓度增高(均P<0.05)。结论:AS605240能够有效防治VALI,其机制可能与抑制各种炎性因子、抑制肺部微循环通透性的增加及减少内脂质过氧化等有关。

呼吸窘迫综合征呼吸机相关性肺损伤应用肺保护性通气策略的疗效分析

目的探讨新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)呼吸机相关性肺损伤应用肺保护性通气策略的疗效。方法选取右江民族医学院附属医院2010年6月-2012年6月收治的58例呼吸机相关性肺损伤(VILI)患儿,按照呼吸支持治疗方式分为观察组与对照组,每组各29例。观察组给予肺保护性通气策略支持治疗,对照组患儿采取传统机械通气策略进行治疗。对两组患儿观察指标进行比较分析。结果观察组治疗总有效率为96.55%(28/29),对照组为75.86%(22/29),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);在治疗7 d后,观察组氧合指数、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平分别是(264±25)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)、(74.3±40.6)、(142.2±14.9)、(170.4±98.8)pg/mL,均优于对照组(P<0.05);治疗前后两组患儿pH、静脉血氧分压均无差异(P>0.05)。结论对NRDS呼吸机相关性肺损伤应用肺保护性通气策略疗效显著,值得临床推广应用。

呼吸机相关性肺损伤的炎症机制研究进展

目前．呼吸机已经成为抢救危重病人最重要的仪器设备之一．但随着呼吸机使用的增加，呼吸机本身引起的肺损伤[呼吸机相关性肺损伤（VILI）]的发生率也逐渐增加。据最新统计，VILI的发生率在机械通气患者中高达15％，而且在临床上，机械通气患者死于多器官功能衰竭（multiplesystemorganfailure）者比死于缺氧者更甚。对VILI损伤机制的研究经历了气压伤（bamtrauma）、容积伤（volutrauma）、剪切伤（atelectrauma）和生物伤（biotrauma）等阶段。目前普遍认为，机械通气导致VILI是上述各种致伤机制综合作用的结果，而并非单一作用的结果。因此，深入研究VILI的发病机制，并筛选防治VILI的有效药物，是临床上迫切需要解决的问题。

右美托咪定对呼吸机相关性肺损伤大鼠肺组织内质网应激的影响及PI3K/Akt 信号通路的关系

目的探讨右美托咪定(DEX)对大鼠呼吸机相关性肺损伤(ventilator associated lung injury,VALI)时内质网应激(ERS)诱导的细胞凋亡及磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法将80只SD大鼠采用随机数字表法分为四组(n=20):对照组(C组)、机械通气组(V组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定+PI3K/Akt信号转导通路抑制剂(LY294002)组(DL组)。C组不行机械通气,自主呼吸空气;V组、D组、DL组机械通气4h,机械通气前20minD组静脉输注右美托咪定5.0μg/kg,机械通气期间以5.0μg/(kg·h)的速率静脉输注;DL组在给予右美托咪定前5min静脉输注LY2940020.3mg/kg;V组给予等容量生理盐水。机械通气4h时处死大鼠,测定肺通透指数(LPI)与肺湿/干质量(W/D)比值。采用蛋白质印迹(Westernblot)法检测Akt、磷酸化Akt(P-Akt)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)的表达水平。光镜下观察肺组织病理学结果,测定肺泡损伤率(IAR),采用原位末端标记技术(TUNEL)法观察肺组织细胞凋亡情况并计算凋亡指数(AI)。结果与C组比较,V组与DL组W/D比、LPI、IAR(%)、AI(%)明显升高,GRP78、CHOP、caspase-12表达升高(C组:0.35±0.02、0.28±0.02、0.51±0.03;V组:1.27±0.11、1.09±0.13、1.37±0.15;DL组:0.97±0.08、0.66±0.07、1.01±0.09;P<0.05),P-Akt表达降低(C组:0.81±0.04;V组:0.23±0.01;DL组:0.44±0.02;P<0.05);与V组比较,DL组与D组W/D比、LPI、IAR(%)、AI(%)明显降低,GRP78、CHOP、caspase-12表达降低(V组:1.27±0.11、1.09±0.13、1.37±0.15;DL组:0.97±0.08、0.66±0.07、1.01±0.09;D组:0.62±0.04、0.43±0.05、0.79±0.07;P<0.05),P-Akt表达升高(V组:0.23±0.01;DL组:0.44±0.02;D组:0.65±0.03;P<0.05)且肺组织病理损伤减轻;与D组比较,DL组W/D比、LPI、IAR(%)、AI(%)明显升高,GRP78、CHOP、caspase-12表达升高(D组:0.62±0.04、0.43±0.05、0.79±0.07;DL组:0.97±0.08、0.66±0.07、1.01±0.09;P<0.05),P-Akt表达降低(D组:0.65±0.03;DL组:0.44±0.02;P<0.05),肺组织病理损伤较重。结论右美托咪定可减轻大鼠VALI,与其激活PI3K/Akt信号通路,抑制ERS,减少肺组织细胞凋亡有关。

Rho/Rock信号通路在大鼠呼吸机相关性肺损伤中的作用

目的评价Rho/Rock信号通路在大鼠呼吸机相关性肺损伤（ventilator-induced lung injury,VILI）中的作用。方法选择健康雄性SD大鼠96只,12~15周龄,体重300~350g,采用随机数字表法将大鼠随机分为四组：空白对照组（C组）、Rho激酶抑制药法舒地尔组（F组）、高潮气量组（H组）和高潮气量＋Rho激酶抑制药法舒地尔组（HF组）,每组24只。C组和F组不行机械通气,H组和HF组行高潮气量40ml/kg机械通气4h。F组和HF组在机械通气前1h给予腹腔注射法舒地尔10mg/kg。分别于通气前（T0）、通气后4h（T1）、8h（T2）和24h（T3）每组随机取6只大鼠,采集血样,测定血清TNF-α、IL-6及IL-10浓度;采血结束后处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,采用考马斯亮兰法检测BALF总蛋白;测定肺组织湿/干重比（W/D）;光镜下行肺组织病理学损伤评分;采用分光光度法检测肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性;采用Western blot和RT-PCR法分别检测肺组织RhoA、Rock2蛋白含量和mRNA表达水平。结果与C组比较,T1~T3时H组和HF组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-10浓度、BALF总蛋白含量、肺组织W/D、病理学损伤评分、MPO活性、RhoA、Rock2蛋白含量和mRNA表达水平明显升高（P〈0.05）;与H组比较,T1~T3时HF组大鼠血清TNF-α、IL-6浓度、BALF总蛋白含量、肺组织W/D、病理学损伤评分、MPO活性、RhoA、Rock2蛋白含量和mRNA表达水平明显下降,血清IL-10浓度明显升高（P〈0.05）。结论Rho激酶抑制药法舒地尔可减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤,其机制可能与其抑制Rho/Rock信号通路,降低肺组织内炎性反应有关。

气道压力释放通气个体化治疗对ARDS患者呼吸机相关性肺损伤的影响

目的探讨气道压力释放通气个体化治疗(P-APRV)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者呼吸机相关性肺损伤(VILI)的影响。方法将44例ARDS患者随机分为同步间歇指令通气(SIMV)组24例、气道压力释放通气(APRV)组20例。SIMV组应用AVEA呼吸机同步间歇指令通气(SIMV)+压力支持(PS)模式通气48 h;APRV组给予P-APRV,根据时间-压力曲线、时间-流速曲线设置APRV参数,通气24 h后复测呼吸曲线并调整参数。分别于入组时及通气24、48 h记录两组呼吸力学指标、血流动力学指标,采用ELISA法测定血清肺损伤生物学标记物肺表面活性蛋白D(SP-D)、唾液酸化大分子黏蛋白(KL-6)。结果通气24、48 h,APRV组呼吸力学指标改善优于SIMV组(P均<0.05)。两组通气前后血流动力学指标比较差异无统计学意义(P均>0.05)。与通气前比较,通气24、48 h两组血清SP-D、KL-6水平下降(P均<0.05),APRV组下降更明显(P均<0.05)。结论 P-APRV可减轻ARDS患者呼吸机相关性肺损伤。

甲泼尼龙对呼吸机相关性肺损伤大鼠肺组织TRPV4/MMP-2/MMP-9信号通路的影响

目的评价甲泼尼龙对呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠肺组织瞬时受体电位香草酸4 (TRPV4)/基质金属蛋白酶2/9(MMP-2/MMP-9)信号通路的影响。方法清洁级雄性SD大鼠100只,采用随机数字表法分为5组(n=20):对照组(C组)、机械通气组(V组)、甲泼尼龙组(Mp组)、甲泼尼龙+GSK1016790A组(MpG组)、HC-067047组(H组)。C组不行机械通气,自主呼吸空气4 h;V组机械通气(RR 40次/min,VT 40 m L/kg,I∶E 1∶1,PEEP 0,Fi O221%) 4 h;Mp组在机械通气前20 min静脉输注甲泼尼龙10.0 mg/kg;MpG组在给予甲泼尼龙前20 min静脉输注GSK1016790A 0.025 mg/kg;H组机械通气前30 min静脉输注HC-067047 10.0 mg/kg。机械通气4 h时,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、总蛋白浓度,测定肺通透指数(LPI)、肺湿/干质量比(W/D),观察肺组织病理学结果。Western blot法检测肺组织TRPV4、MMP-2、MMP-9的表达水平。结果与C组比较,V组和MpG组BALF中IL-1(ng/m L:84.56±5.35 vs. 144.85±9.39、121.56±7.69)、TNF-α(ng/m L:179.65±45.73 vs. 486.18±94.79、316.93±69.71)、总蛋白(mg/m L:321.29±28.76 vs. 687.78±65.78、476.39±46.67)升高,肺组织LPI [(2.47±0.17)×10^(-3)vs.(6.19±0.29)×10^(-3)、(4.24±0.25)×10^(-3)]、W/D比值(4.42±0.19 vs. 8.83±0.61、6.32±0.41)升高,TRPV4(1.85±0.25 vs.5.81±0.92、3.87±0.65)、MMP-2 (0.44±0.06 vs. 1.16±0.23、0.85±0.11)、MMP-9(0.19±0.03 vs. 0.46±0.09、0.34±0.07)表达上调(P<0.05);与V组比较,Mp组、MpG组和H组BALF中IL-1(ng/m L:144.85±9.39 vs. 89.78±5.91、121.56±7.69、94.23±6.78)、TNF-α(ng/m L:486.18±94.79 vs. 186.42±49.37、316.93±69.71、193.71±51.41)、总蛋白(mg/m L:687.78±65.78 vs. 348.78±31.52、476.39±46.67、359.68±36.12)降低,肺组织LPI [(6.19±0.29)×10^(-3)vs.(2.85±0.14)×10^(-3)、(4.24±0.25)×10^(-3)、(2.97±0.21)×10^(-3)]、W/D比值(8.83±0.61 vs. 4.75±0.22、6.32±0.41、4.82±0.25)降低,TRPV4(5.81±0.92 vs. 2.13±0.29、3.87±0.65、2.35±0.37)、MMP-2 (1.16±0.23 vs. 0.48±0.08、0.85±0.11、0.52±0.08)、MMP-9(0.46±0.09 vs. 0.22±0.04、0.34±0.07、0.25±0.05)表达下调(P<0.05),肺组织病理损伤减轻;与Mp组比较,MpG组BALF中IL-1 (ng/m L:89.78±5.91 vs. 121.56±7.69)、TNF-α(ng/m L:186.42±49.37 vs. 316.93±69.71)、总蛋白(mg/m L:348.78±31.52 vs. 476.39±46.67)升高,肺组织LPI [(2.85±0.14)×10^(-3)vs.(4.24±0.25)×10^(-3)]、W/D比值(4.75±0.22 vs. 6.32±0.41)升高,TRPV4(2.13±0.29 vs. 3.87±0.65)、MMP-2(0.48±0.08 vs. 0.85±0.11)、MMP-9(0.22±0.04 vs. 0.34±0.07)表达上调(P<0.05)。结论甲泼尼龙可减轻大鼠VILI,与其抑制TRPV4/MMP-2/MMP-9信号通路有关。

程序性坏死特异性抑制剂-1对呼吸机相关性肺损伤的保护作用

目的探讨程序性坏死特异性抑制剂-1(Nec-1)对呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠的保护作用。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸组(C组)、正常潮气量(VT)组(N组)、高VT组(H组)和Nec-1组共4组,每组10只。C组保持自主呼吸,N组、H组和Nec-1组分别给予8、40、40 mL/kg的VT行机械通气,Nec-1组在机械通气开始时静脉给予Nec-1(1 mg/kg)。通气4 h后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本,测定BALF中总细胞数、总蛋白水平、白细胞介素(IL)-6、IL-1β及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。测定肺组织湿/干质量比值(W/D),HE染色观察肺组织病理学改变并进行肺组织评分;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)分别检测肺组织中受体相互作用蛋白1(RIPK1)、RIPK3和核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的m RNA及蛋白表达。结果 C组和N组大鼠BALF中和肺组织各指标差异均无统计学意义。H组大鼠BALF中总细胞数、总蛋白、炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平、肺组织W/D比值、肺组织病理评分及肺组织内RIPK1、RIPK3、NF-κB p65的m RNA和蛋白相对表达水平较C组和N组明显升高(P<0.01)。与H组相比,Nec-1组大鼠BALF中和肺组织各指标水平下降(P<0.01)。结论 RIPK1/RIPK3/NF-κB信号传导通路参与大鼠VILI,Nec-1对大鼠VILI的肺脏具有一定的保护作用。

新生儿呼吸机相关性肺损伤动物模型的建立

目的探索建立新生儿呼吸机相关性肺损伤动物模型的可靠方法。方法使用新生大鼠共32只,分为正常组(无通气组)、对照组(插管无通气)、通气组(潮气量25 mL/kg,通气5 h)。通气组以气管切开方式进行气管插管,大潮气量过度通气造成肺损伤,观察形态学改变,验证模型的成败,并总结气管插管深度。结果通气组的16只新生大鼠,15只病理学改变符合呼吸机相关性肺损伤表现,成功建立模型,成功率达95.8%,并总结适合的插管深度(体重为15～16、16.1～18、18.1～21、21.1～24、>24 g的插管深度分别为0.55～0.6、0.65～0.7、0.75～0.8、0.85～0.9、0.9～0.95 cm)。结论以气管切开方式进行气管插管,大潮气量过度通气结合正确的插管深度是建立新生儿呼吸机相关性肺损伤动物模型的可靠方法。

低潮气量机械通气在呼吸机相关性肺损伤中的应用进展

机械通气用于急症患者的呼吸支持治疗和外科手术患者的全麻通气支持已经几十年,尽管它提供了一种救命的手段,但同时还可导致一系列并发症,其中呼吸机相关性肺损伤（ventilator induced lung injury。

高迁移率族蛋白1在呼吸机相关性肺损伤大鼠中的表达变化

目的:探讨呼吸机相关性肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)大鼠肺组织中高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)的表达变化。方法:将24只成年SD大鼠随机分为3组,每组8只。对照组:自主呼吸;大潮气量组:潮气量(TV)=30 mL/kg;丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate,EP)干预组:尾静脉注射EP(100 mg/kg),机械通气模式同大潮气量组。采用Western blotting、RT-PCR、ELISA检测大鼠血清、肺泡灌洗液、肺组织以及牵张24 h后肺泡巨噬细胞的培养液中的HMGB1以及炎性因子的水平。结果:大潮气量组大鼠血清、肺泡灌洗液及肺组织中HMGB1含量较对照组增加。体外肺泡巨噬细胞培养液中的HMGB1在机械牵张的作用下也呈现上升趋势。EP干预后,VILI大鼠肺组织中HMGB1减少,且细胞凋亡信号通路相关蛋白Caspase3、Caspase9和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达增加。结论:VILI大鼠模型中HMGB1的表达增加,可能与肺泡巨噬细胞受机械牵张有关;EP干预对VILI肺组织有一定保护作用。

SP-D、KL-6评价呼吸机相关性肺损伤的初步研究

目的评价呼吸机相关性肺损伤的可行性。方法 25例急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者入选,所有患者采用肺保护通气策略,依据动脉血气分析、脉搏血氧饱和度(SpO_2)调整呼吸机参数,使动脉血PaO_2>60mm Hg,PaCO_2<50mm Hg。通气24h后以Pplat35cm H_2O为临界点分为高平台压组(Pplat>35cm H_2O),低平台压组(Pplat<35cm H2O),留取血标本。高平台压组采用个体化通气策略通气24h后留取血标本。记录发生气胸、纵膈气肿等严重呼吸机相关性肺损伤事件病例数并留取血标本。结果高平台压组SP-D(24.60±1.95)μg/ml、KL-6(8.39±0.67)μg/ml明显高于低平台压组SP-D(16.71±1.50)μg/ml、KL-6(3.48±0.99)μg/ml(P<0.05)。高平台压组采用个体化通气策略后SP-D(16.93±1.28)μg/ml、KL-6(3.54±0.69)μg/ml明显下降,P<0.05,高平台压组发生1例气胸且SP-D、(KL-6值明显升高。Pplat与血清中SP-D(r=0.881,P<0.05)、KL-6(r=0.840,P<0.05)之间呈正相关。结论血清标志物SP-D、KL-6可作为呼吸机相关性肺损伤指标,个体化通气策略可减轻呼吸机相关性肺损伤。