乳酸菌基础培养基比较研究

研究了脱脂乳中性蛋白酶的最适酶解条件,并以保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌为混合发酵菌种,对MRS、脱脂乳和脱脂乳酶解液3种基础培养基进行了比较研究。结果表明:(1)脱脂乳中性蛋白酶的适宜酶解条件为:加酶量5000U/g蛋白质,在pH=7.0,50℃下酶解2h;(2)脱脂乳酶解液是保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合菌种较好的基础培养基,其冻干发酵剂的质量和数量均优于脱脂乳培养基。以脱脂乳酶解液为基础培养基制备的冻干发酵剂的活菌数达到3.5×1011cfu/g,冻干发酵剂的重量是脱脂乳的1.93倍。

乳酸菌混合菌株基础培养基及增殖因子的筛选

研究了嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌混合菌株培养时,其基础培养基的选择和增殖因子的筛选。实验结果表明:经蛋白水解酶处理后的脱脂奶培养基适宜乳酸菌混合菌株的生长;在此基础上,通过对促进生长物质的研究,得出了增殖因子的配比:蛋白胨0.8%、酵母粉0.8%、吐温0.1%、乳糖0.5%。

脱脂乳酶解液作为基础培养基对冻干菌活菌数的影响

目的:选择适宜的乳酸菌冻干发酵剂的基础培养基;方法:采用对比方法探讨脱脂乳中性蛋白酶的酶解条件,制得脱脂乳酶解液,以酶解液中氨基态氮和冻干发酵剂活菌数为指标,研究MRS、脱脂乳和脱脂乳酶解液3种基础培养基对乳酸菌冻干效果的影响;结果:(1)脱脂乳中性蛋白酶的适宜酶解条件为:加酶量5000U/g底物(蛋白质),在pH=7.0,50℃下酶解2h;(2)以脱脂乳酶解液为基础培养基制备的冻干发酵剂的活菌数多于脱脂乳和MRS制备的活菌数(p<0.01),且酶解液所得的冻干发酵剂的活菌数可达到3.5×1011CFU/g;结论:脱脂乳酶解液是保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合菌种较好的基础培养基。

产气荚膜梭菌和腐败梭菌在厌氧菌基础培养基中的生长特性

测定了产气荚膜梭菌B型、D型和腐败梭菌在新研制的厌氧菌基础培养基中的生长曲线和产毒能力等特性。结果表明,这些细菌可以在新培养基中良好生长和产毒。产气荚膜梭菌B 型经2 h 的适应期后,很快进入对数生长期,培养到8 h细菌密度接近最高值,OD630为4.329;经检测,培养4 h^24 h的细菌所产生的毒素(培养物上清)1μL^2μL可致死KM小鼠。产气荚膜梭菌D型的生长速度也较快,无适应期就直接进入对数生长期,培养到12 h 时细菌密度最高, OD630 为1.75;细菌最佳产毒期在6 h^14 h,培养物上清0.5μL^0.65μL可致死KM小鼠。腐败梭菌生长速度较慢,经6 h的适应期后,才进入对数生长期,培养到14 h时细菌密度最高,OD630为1.335;细菌毒力在培养后的6 h^24 h内10μL菌液可达到在24 h内致死KM小鼠的效果。

鸡枞菌菌丝体基础培养基的优化

利用响应面分析法对影响鸡枞菌菌丝体产量的基础培养基进行优化。研究碳源、氮源、生长因子对鸡枞菌菌丝体产量的影响。在单因素试验的基础上,利用Box-Benhnken设计和响应面分析法以菌丝体产量作为响应值,对基础培养基最佳参数进行分析。结果表明,鸡枞菌基础培养基的最佳条件为葡萄糖20.233g/L,蛋白胨2.145 5g/L,维生素B60.149g/L,由回归方程可计算出在该参数下菌丝体干重的理论值为4.858g/L。

产红色素酵母菌的分离、鉴定及其基础培养基的优化

利用微生物平板分离方法,从花生渣土、椰汁土中分离、筛选得到3株产红色素菌株。光学鉴定发现菌体呈现椭球形,大小约为(2.5～5.0)μm×(5.5～8.0)μm;无性繁殖为出芽生殖。根据菌体形态特征、群体形态特征和生理生化反应,3株菌株归属于红酵母属(Rhodotorula),命名为红酵母FS-1(Rhodotorula sp.FS-1)。依据OD值法、DCW法测得红酵母FS-1的典型生长曲线为:延滞期,0～8h;对数期,8～24h;稳定期,24～34h;衰亡期为34h后。红酵母FS-1能够较好地利用豆芽汁蔗糖培养基作为其发酵基础培养基产生红色色素。

羊肚菌菌丝体基础培养基的优化

利用响应面分析法对影响羊肚菌菌丝体产量的基础培养基进行优化。研究碳源、氮源、生长因子对羊肚菌菌丝体产量的影响。在单因素试验的基础上,利用Box-Benhnken设计和响应面分析法以菌丝体产量作为响应值,对基础培养基最佳参数进行分析。试验结果表明,羊肚菌菌丝发酵基础培养基的最佳条件为:可溶性淀粉21.32g/L,硝酸钾2.15g/L,萘乙酸0.149g/L,由回归方程可计算出在此参数条件下菌丝体干重的理论值为4.986g/L。

甘蔗胚性愈伤高效诱导系列研究II.基础培养基对甘蔗胚性愈伤发生的影响

在前期工作基础上,以甘蔗栽培品种ROC22、桂11、云蔗06-407为材料,研究了不同类型培养基、氮素铵硝比和碳源对甘蔗胚性愈伤诱导的影响。结果显示,不同类型培养基对甘蔗胚性愈伤诱导差异显著,MK培养基为最佳基础培养基,而氮素铵硝比和碳源作用不明显。研究结果从基础培养基角度优化了甘蔗胚性愈伤直接诱导体系。同时,由于MK为原创培养基,本研究可丰富植物组织培养的基础培养基选择。

党参黄芪制做基础培养基的初步探讨

本文介绍用党参黄芪作基础培养基,代替牛肉膏、蛋白胨,对本地区分离的十二种菌株作了对照培养,生长基本一致。

乙肝治疗性可复制型DNA疫苗pSVK-HBVA高稳定宿主菌的筛选及其基础培养基的选择

目的为乙肝治疗性可复制型DNA疫苗质粒pSVK-HBVA筛选稳定性高,能多次传代的宿主菌,以满足中试工艺的要求,同时对该工程菌最适的基础发酵培养基进行选择。方法将质粒pSVK-HBVA分别转化几种不同的大肠杆菌感受态细胞并提取质粒,通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的形态结构,连续传代法对工程菌的稳定性进行检测;选取质粒含量最高和稳定性最好的工程菌作为原始种子,按照2010版《中国药典》要求建立工程菌的三级种子批,并对种子批进行鉴定。同时,从LB,TB,M9(甘油),M9(葡萄糖)4种培养基中为工程菌筛选质粒产量最高的基础发酵培养基。结果经过筛选发现,在以大肠杆菌XL10-Gold为宿主菌时,质粒pSVK-HBVA表现出了同常规质粒DNA类似的稳定性,转接传代30次也未发生重组或片段丢失,能满足后续中试工艺的要求,LB作为基础培养基能得到最高的质粒容积产率为5.5 mg/L。结论大肠杆菌XL10-Gold是一个更利于可复制型DNA疫苗质粒pSVK-HBVA扩增的宿主菌,该工程菌发酵的最佳基础培养基是LB培养基。

甘薯脱毒苗组培扩繁基本培养基配方的探究与优化

甘薯在种植过程中因连年种植出现的病害发生加重、产量降低、品质变劣等因素严重制约了甘薯产业的发展。甘薯脱毒技术是脱除病毒、恢复品种种性、提高甘薯产量和品质的有效途径,但生产中脱毒苗的供应能力不足,为了探索其解决办法,以徐薯18、龙薯9号为试验材料,根据甘薯龙薯9号扦插苗自身吸收矿质元素的量计算所得的基质培配方龙9以及1/2龙9、MS、1/2MS为处理,进行了脱毒苗组培扩繁的比较探究。结果表明,徐薯18和龙薯9号1/2龙9配方的茎节数和茎长均为最好,但试验过程中该配方出现了叶片黄化现象,故对1/2龙9配方进行了完善,并在徐薯18、龙薯9号、烟薯25、绵薯10号、遂宁524及北京1号6个甘薯品种进行了验证,结果表明1/2改良龙9配方处理下的各品种茎长和茎节数均优于MS配方,这对于解决生产中脱毒苗供应不足的问题以及经济效益的增加有极其重要的作用。

1株解淀粉芽孢杆菌发酵培养基的设计及发酵条件的优化

[目的]为解淀粉芽孢杆菌的应用提供科学依据。[方法]从最佳碳源、氮源、初始pH值、发酵时间、发酵温度、接菌量和装液量的确定出发,针对一株新发现的解淀粉芽孢杆菌SAB-1进行发酵培养基的设计及发酵条件的优化。[结果]从8种不同的碳源和氮源中确定了长效碳源水溶性淀粉、长效氮源棉籽粉与速效碳源葡萄糖、速效氮源酵母浸膏。并优化了基础发酵培养基的发酵条件:温度31℃、转速180 r/min、发酵时间26 h、初始pH值6.0、接菌量1%、装液量50 ml/250 ml。该条件下发酵后菌体产量为46.0×109/ml。[结论]该解淀粉芽孢杆菌在设计发酵条件下基本达到了工业规模化生产的要求。

响应面法优化唾液链球菌嗜热亚种增殖培养基

采用响应面方法对唾液链球菌嗜热亚种增殖培养基进行了优化。以MRS培养基作为基础培养基,采用Plackett-Burman(PB)设计法,对12种乳酸菌生长促进因子以及培养基的初始pH等13个因素对唾液链球菌嗜热亚种STX2生长的影响进行评价。筛选出CaCl2与豆粕水解液为STX2的生长强化因子,且培养基的初始pH值也是影响该菌体生长的关键因子,而其他物质对STX2增菌量的影响不显著。然后用旋转中心组合设计及响应面分析法确定强化因子的最佳浓度以及最佳的培养基初始pH值。在优化培养基中,STX2的菌体浓度达到6·8×108cfu/mL,比优化前的1·5×108cfu/mL提高了4·5倍。

大鼠骨髓间充质干细胞在海马神经元培养基中的定向分化

目的：观察大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）在大鼠海马神经元条件培养液中向神经元的分化。方法：以回收的海马神经元Neurobasal加B27作为条件培养基，DMEM加bFGF作为无血清培养基，普通Neurobasal加B27作为神经元基础培养基分别诱导第5代BMSCs12h和24h；免疫细胞化学显色方法鉴定各组神经元样细胞，计数和比较各组阳性细胞阳性率。结果：经海马神经元条件培养基诱导，大鼠BMSCs能够分化为神经元样细胞，免疫细胞化学显色呈微管相关蛋白－II（MAP—II）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）阳性；且阳性比例明显高于其他实验组，差异有统计学意义。结论：BMSCs在海马神经元条件培养基中可以分化为神经元样细胞，其分化效果优于传统DMEM加bFGF无血清培养基和神经元基础培养基。

Xenorhabdus nematophila YL001培养基筛选和培养条件优化

筛选得到一株昆虫病原线虫共生菌X.nematophilaYL001,进行了基础培养基的筛选及培养条件优化研究。结果表明最佳发酵条件为:初始pH 7.0,250 mL三角瓶装液25 mL,摇床转速220 r/min,培养温度28.0℃,接种量9.0%,在此条件下菌体生长量和抗菌活性分别达到23.28 g/L和30.00 mm,抑菌圈直径增大23.3%,细胞干重增加52.97%。

产紫杉醇真菌Pestalotiopsis microspora NK17适合遗传筛选的培养基优化

小孢拟盘多毛孢菌株NK17被证明能够产生多种具有药物开发价值的紫杉烷类似物以及冠心病治疗药物的前导物pestalotiollide B等次级代谢产物。由于是天然分离的菌株,该菌的营养要求未知,特别是缺少合适的全合成基础培养基,制约了实验室对其性状和基因水平的操作。尤其是在使用营养缺陷型菌株进行遗传转化时,全合成基础培养基是筛选工作的前提。对各种基础培养基进行筛选比较,最终确定酵母氮源加乳糖和硫酸铵的全合成基础培养基最适合NK17菌丝生长和营养缺陷型筛选。同时对该培养基的发酵产物进行了研究,成功应用该培养基进行了缺陷型回补筛选,效果较好。

甜蛋白Monellin在毕赤酵母中的表达及响应面法优化发酵培养基

根据毕赤酵母密码子偏好,人工合成了单链甜蛋白Monellin基因,构建了胞内表达载体pPICZA-Mon,重组载体经Sac I线性化后,电击转入毕赤酵母GSll5,转化子经PCR分析鉴定后通过甲醇诱导实现了甜蛋白Monellin在毕赤酵母中的胞内表达。采用Design Expert 7.0软件,利用响应面法对毕赤酵母盐培养基进行优化。首先用Plackett-Burman方法研究发酵培养基各成分对响应值的影响,结果表明酵母提取物、硫酸钙和磷酸缓冲液为3个主要因素;利用最陡爬坡法逼近最大响应区域;最后通过中心组合设计和响应面分析得到最优培养基组成为0.6%酵母提取物,0.03%硫酸钙,0.45%硫酸镁,4%甘油,1.25%硫酸铵,7.7%100mmol/L磷酸缓冲液(pH值为6.0)。在优化培养基条件下,工程菌生物量增加0.5倍,蛋白表达量提高近60%。

啤酒微生物检测中培养基的选择和使用

<正> 前言培养基是指人工配制的含有营养物质的供微生物生长的介质。不同的微生物生长条件不同,对营养成分需求不同,对某些特定物质的敏感性也不同。据此,我们可以通过几种基础培养基、选择性培养基、鉴别培养基的组合使用,来达到对啤酒有害菌进行定性和定量检测的目的。1.培养基1.1 通用液体培养基(WLM)1.1.1 适用范围:主要用于检测细菌。1.1.2 原理:通用液体培养基(WLM)有助于啤酒厂大多数细菌的生长,包括腐败菌。

淋球菌1640分离培养基的研制与临床应用

淋球菌１６４０分离培养基的研制与临床应用大连市第四人民医院（１１６０３１）周国华，王爱丽，刘淑梅提高临床标本淋球菌检出率的关键是培养基营养丰富、新鲜。为此，我们研制一种以１６４０为主要营养成份的淋球菌１６４０分离培养基。该培养基分基础培养基和营养培养...

国家食品药品监督管理局对培养基类产品进行分类界定

2008年10月10日，国家食品药品监督管理局组织有关单位和专家对培养基类产品进行了分类界定，并于日前公布。其中作为Ⅰ类医疗器械管理的培养基产品包括基础培养基、营养培养基、通用增菌培养基、运送培养基、保存培养基。作为Ⅱ类医疗器械管理的培养基产品包括一般鉴别培养基、选择性鉴别培养基、专用／选择增菌培养基、分离培养基、选择培养基。