灯盏花素干预糖尿病模型大鼠睾丸组织增殖细胞核抗原和c-fos的表达

背景:有研究表明灯盏花素可影响2型糖尿病大鼠的生殖能力,但其作用机制少有报道。目的:探讨灯盏花素对2型糖尿病大鼠睾丸增殖细胞核抗原和原癌基因c-fos表达的影响作用。方法:选取36只健康雄性大鼠随机分为对照组、模型组和灯盏花素组各12只。模型组和灯盏花素组采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,大鼠血糖监测达到16.7 mmol/L作为建模标准,对照组大鼠予以同等容积的柠檬酸缓冲液单次腹腔注射。灯盏花素组采用灯盏花素注射液10 mg/(kg·d)连续4周腹腔注射,其他2组在相同时间注入等量生理盐水。结果与结论:干预4周后,血清睾酮检测、免疫组织化学染色和PCR检测结果显示,血清睾酮水平、增殖细胞核抗原、c-Fos蛋白及mR NA表达:对照组>灯盏花素组>模型组(P<0.05);血糖水平:对照组<灯盏花素组<模型组(P<0.05)。结果证实,灯盏花素可以通过增强增殖细胞核抗原和c-fos的表达,保护2型糖尿病大鼠的生殖功能。

复方抗瘤冲剂抑制小鼠肉瘤180的生长及对p53和增殖细胞核抗原表达的影响

探讨复方抗瘤冲剂对小鼠肉瘤 180的作用及机制。通过体内实验 ,观察复方抗瘤冲剂对小鼠肉瘤180的抑瘤作用和免疫组化法检测p5 3和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达水平。结果显示 ,经复方抗瘤冲剂及其不同组合和CTX治疗 10天后 ,对小鼠肉瘤 180有不同程度的抑制作用 ,抑瘤率分别为 2 0 31%、6 5 6 %、12 5 %、19 0 6 %和 30 3%。同时各组药物对p5 3和PCNA的表达水平也有不同程度的影响。提示复方抗瘤冲剂对小鼠肉瘤 180的生长具有一定的抑制作用 ,其机制可能与抑制突变型p5

β-榄香烯对大鼠胃癌及癌前病变DNA含量、增殖细胞核抗原表达及端粒酶活性的影响

目的 研究β 榄香烯对癌变大鼠胃黏膜端粒酶活性、增殖细胞核抗原表达及DNA含量的影响。 方法 采用MNNG、10 %NaCl混合液及酒精灌胃建立大鼠胃癌模型 ,设立正常空白组、模型组及 β 榄香烯组 ,分别采用免疫组化、Feulgen染色及端粒重复扩增微孔板杂交法检测大鼠胃黏膜增殖细胞核抗原表达、DNA含量及端粒酶活性。结果 β 榄香烯组癌变发生率、DNA含量、增殖细胞核抗原表达及端粒酶活性均低于模型组。在大鼠癌变过程中 ,随着胃黏膜癌变的发展 ,DNA含量、增殖细胞核抗原表达及端粒酶活性均呈递增趋势 ,且两者与端粒酶活性具有重要的相关性。结论 β 榄香烯抗癌 ,抑制端粒酶活性是其重要机制之一。

大蒜素对血管平滑肌细胞增殖细胞核抗原表达的影响

目的：观察大蒜素对培养的兔主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖细胞核抗原（ＰＣ－ＮＡ）表达的影响。方法：用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＳＭＣ的ＰＣＮＡ表达，同时测定培养液中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、脂质过氧化物（ＬＰ）、前列环素（ＰＧＩ２）及环磷酸腺苷（ＣＡＭＰ）的含量。结果：大蒜素能增加ＳＯＤ活性，降低ＬＰＯ，升高ＰＧＩ２和ｃＡＭＰ水平，抑制ＳＭＣ的ＰＣＮＡ表达（Ｐ＜０．０５～０．０１）。结论：大蒜素有抑制ＳＭＣ增殖的作用。

放射治疗对人宫颈癌组织的增殖细胞核抗原表达的影响

目的 探讨放射前、后人宫颈癌组织增殖细胞核抗原 (PCNA )表达的变化 .方法 在多聚甲醛固定的活检癌组织冰冻切片上 ,进行 PCNA的免疫组织化学染色 .结果 放疗前的宫颈癌组织内 ,多数癌细胞呈 PCNA免疫染色阳性 ;照射 (30～ 40 Gy)后 ,多数癌细胞无 PCNA染色 ,但间质细胞的 PCNA免疫染色明显升高 ,大量间质细胞则呈中等或强阳性染色 .结论 放射抑制宫颈癌细胞的 PCNA表达的同时 ,诱导间质细胞的 PCNA表达 .提示

胃癌组织P16,P53蛋白和增殖细胞核抗原的表达意义

目的探讨Ｐ１６，Ｐ５３蛋白和增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）在胃癌的发生、发展中的作用及临床意义．方法应用免疫组织化学方法，对７７例胃癌和癌旁粘膜组织、２１例胃正常组织中Ｐ１６，Ｐ５３蛋白表达产物和ＰＣＮＡ进行检测，并结合临床资料进行分析．结果胃癌组织中Ｐ１６蛋白的阳性率为２０８％（１６／７７），明显低于癌旁粘膜组织５９７％（４６／７７）和胃正常组织９０５％（１９／２１，Ｐ＜００５）；Ｐ５３蛋白与ＰＣＮＡ在胃癌组织中的阳性率为８０５％（６２／７７）和９２２％（７１／７７），明显高于癌旁粘膜组织４１６％（３２／７７），６４９％（５０／７７）和胃正常组织００％（０／２１，Ｐ＜００５）．Ｐ１６，Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ阳性表达与胃癌组织学类型、浸润深度、分化程度及淋巴结转移有显著性差异（Ｐ＜００５），与患者年龄、性别、肿瘤大小及部位无关（Ｐ＞００１）．结论Ｐ１６，Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ的异常表达对胃癌的发生发展、恶性程度、淋巴结转移及预后有密切关系和重要临床意义．

大肠癌微血管密度及增殖细胞核抗原与临床预后的关系

目的探讨大肠癌微血管密度(MVD)及增殖细胞核抗原(PCNA)与手术后有无潜在性肿瘤转移及复发的相关性。方法对55例大肠癌进行术后5a的随访及石蜡标本的S-P免疫组化法染色。结果大肠癌MVD与其分化程度密切相关(P<0.01);与临床病理分期(Dukes')间差异有显著意义(P<0.05);与有无淋巴结、肝转移密切相关(P<0.05);在术后复发与无复发生存者间差异有非常显著性意义(F<0.01)。增殖活性表达提示,分化愈差,有淋巴结或肝转移时,增殖活性增高,术后复发与无复发生存者之间,增殖活性差异有显著意义(P<0.05)。结论大肠癌MVD及PCNA与肿瘤的浸润、淋巴结及肝转移相关。手术时虽无明显转移,但MVD增高及PCNA活性增强,提示可能有潜在的转移存在。

p53、c-erbB2基因、增殖细胞核抗原表达与卵巢上皮性癌预后的关系

背景与目的:p53、c-erbB2基因和增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达与卵巢癌预后关系问题已有报道,由于研究方法、样本大小等方面的不同,结果存在差异。为进一步探讨p53、c-erbB2基因和PCNA表达与卵巢上皮性癌预后的关系,我们进行了本研究。材料与方法:1990年3月1日至1994年3月31日间确诊的卵巢上皮性癌共84例,采用标记的链白素-生物素辣根过氧化酶复合物(LSAB)免疫组化方法检测癌组织中p53、c-erbB2基因和PCNA的表达,使用SPSS8.0版分析它们的表达与卵巢癌患者平均生存期、5年生存率之间的关系。结果:本组84例癌组织中,p53、c-erbB2和PCNA表达的阳性率分别为58.3%(49/84)、77.5%(65/84)和100%(84/84)。单因素分析显示,c-erbB2过度表达和PCNA表达强度与患者的平均生存期、5年生存率均呈负相关(P值分别为0.05和小于0.01),未发现p53蛋白表达与患者的平均生存期、5年生存率之间存在相关性(P>0.05)。多因素分析发现卵巢上皮性癌的预后与临床分期、组织分化程度有关,而与p53、c-erbB2和PCNA的表达均无相关性。结论:p53的表达与卵巢上皮性癌的预后无关,而c-erbB2、PCNA表达对卵巢上皮性癌预后的影响是间接的。临床分期、组织分化程度仍是卵巢上皮性癌独立的预后因素。

补阳还五汤及其有效组分生物碱和苷对大鼠血管内膜损伤后主动脉内膜增生和增殖细胞核抗原表达的影响

目的:探讨补阳还五汤及其有效组分生物碱和苷类对大鼠血管内膜损伤后主动脉内膜增生和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法:用国产2.0F球囊导管建立大鼠主动脉内皮剥脱模型,术后第1天开始灌胃给药,术后第15天取胸主动脉血管损伤段测定内膜增生程度及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果:剥脱术后第15天,模型组大鼠主动脉内膜出现显著增生。与假手术组比较,术后各组中膜增生不明显(P>0.05),内膜增生明显(P<0.01)。生物碱组、苷组、补阳还五汤原方组和阿伐他汀组血管内膜增生程度轻于模型组(P<0.01)。模型组PCNA表达高于假手术组(P<0.01)。生物碱组、苷组、阿托伐他汀组PCNA表达高于假手术组(P<0.05,P<0.01),但均低于模型组(P<0.01)。补阳还五汤原方组大鼠PCNA表达高于假手术组(P<0.01),虽低于模型组,但差异无显著性意义(P>0.05)。结论:补阳还五汤有效组分生物碱和苷类均可抑制血管内皮剥脱后的血管内膜增生,可能为补阳还五汤抗血管内膜增生的药效物质基础之一,其抗血管内膜增生的作用可能与降低PCNA表达有关。

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中CaN活性及增殖细胞核抗原表达水平的影响

目的:观察川芎嗪对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)中钙调神经磷酸酶(CaN)活性及增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的影响。方法:建立AngⅡ诱导VSMCs增殖模型,应用免疫细胞化学法观察血管平滑肌细胞PCNA表达;并用酶促反应定磷法测定CaN活性。结果:AngⅡ组能够明显刺激VSMCs增殖,VSMCs细胞数目和细胞增殖活度明显高于正常对照组(P<0.01);CaN活性和PCNA表达量(A值)显著高于正常对照组(P<0.01)。同时加川芎嗪处理,各组CaN活性和PCNA表达水平均显著低于AngⅡ组(P<0.01)。结论:川芎嗪对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖有显著抑制作用,其机制与抑制CaN介导的信号转导进而抑制PCNA的表达有关。

莪术醇联合氟尿嘧啶对裸鼠胃癌移植瘤生长、增殖细胞核抗原和P27表达的影响

目的观察莪术醇联合氟尿嘧啶对胃癌裸鼠皮下移植瘤的影响。方法将人胃癌细胞株BGC823接种于裸鼠皮下建立荷瘤裸鼠模型。将荷瘤裸鼠随机分为对照组、莪术醇组、氟尿嘧啶组、联合用药组(莪术醇联合氟尿嘧啶),记录各组的肿瘤体积和瘤重。应用荧光定量聚合酶链反应(q PCR)和免疫组织化学法检测各组肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、P27的表达。结果对照组肿瘤体积和重量比其他3组升高(P<0.05);联合用药组肿瘤体积和重量低于莪术醇组(P<0.05);联合用药组肿瘤体积和重量与氟尿嘧啶组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组肿瘤组织中PCNA的表达均低于对照组(P<0.05);与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组PCNA的表达降低(P<0.05)。各实验组移植瘤组织中P27的表达均高于对照组(P<0.05);与莪术醇组比较,联合用药组P27的表达增强(P<0.05);与氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27 m RNA的相对表达有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27蛋白阳性率升高(P<0.05)。结论莪术醇联合氟尿嘧啶能抑制胃癌裸鼠皮下移植瘤的生长,其机制可能与调节PCNA、P27基因有关。

龟板含药血清对骨髓间充质干细胞增殖细胞核抗原表达的影响

目的:观察益肾龟板血清对大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)体外增殖过程的增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法:使用密度梯度法分离大鼠骨髓间质干细胞进行培养,经Brdu标记和CD44染色及两者双重染色鉴定后,观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSC增殖过程。用免疫组织化学方法和原位杂交方法检测MSC的PCNA及其mRNA表达;免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚焦显微镜技术检测PCNA蛋白表达的变化。结果:龟板血清以浓度依赖方式促进MSC的PC-NA及其mRNA表达阳性细胞数和PCNA蛋白表达,与对照组比较有显著性(P<0.05)。结论:龟板血清促MSC增殖作用可能与上调PCNA表达有关。

染锰鼠睾丸增殖细胞核抗原与热休克蛋白表达

目的研究锰对小鼠精子数量与睾丸增殖细胞核抗原(PCNA)和热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法将小鼠随机分为3个不同剂量MnCl2(7.5,15,30 mg/kg)组和对照组,分别于染锰,3,7,14,28,56 d计数精子数量,用免疫组化S-P法结合图象分析技术测定睾丸PCNA和HSP70表达。结果随染锰剂量增加和时间延长精子数量减少、睾丸PCNA表达降低。3个不同剂量MnCl2组精子计数于染锰28 d明显低于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01),睾丸PCNA表达于染锰14,28,56 d比对照组明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01),直线相关分析各染锰组小鼠精子数量与睾丸PCNA表达呈正相关(r=0.794,P<0.01)。睾丸HSP70表达,15,30 mg/kg组染锰56 d明显低于染锰28 d(P<0.01)。结论锰对小鼠生精功能的损伤呈一定的剂量-效应和时间-效应关系。各染锰组小鼠精子数量与睾丸PCNA表达呈正相关(r=0.794,P<0.01)。锰可诱导小鼠睾丸HSP70表达,染锰28 d达高峰。

八月札水提物对H22荷瘤小鼠突变型P53、Bcl-2和增殖细胞核抗原表达的影响

目的探讨八月札水提物对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞增殖的抑制作用及其机制。方法健康昆明种小鼠90只制备为荷瘤小鼠并随机分成6组。通过苏木精-伊红(HE)染色观察各组肝脏、肾脏和肿瘤组织细胞的病理改变,免疫组织化学法检测各组肿瘤组织细胞中突变型(m)P53、Bcl-2和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达。结果对照组和八月札水提物组肝脏和肾脏未见明显病理学改变,CTX组和联合用药组可见轻微病理改变。与对照组比较,CTX组、水提低组、水提高组和水提低+CTX组、水提高+CTX组肿瘤组织重量明显降低(P<0.01),肿瘤抑制率分别为44.0%、36.4%、38.0%、58.4%和60.0%。与对照组比较,八月札水提物能够显著降低H22荷瘤小鼠肿瘤组织中mP53、Bcl-2和PCNA蛋白的表达(P<0.01)。其中,以八月札水提低+CTX组肿瘤组织中mP53、Bcl-2和PCNA蛋白阳性率最低,分别为(33.18±5.89)%,(22.11±5.28)%,(19.28±7.12)%。结论八月札水提物能够阻止H22荷瘤小鼠肿瘤组织mP53蛋白的生成,下调抑制凋亡基因Bcl-2的表达,抑制PCNA蛋白的表达,从而达到抑制肿瘤组织细胞增殖的作用,且对CTX表现出一定的增效减毒作用。

增殖细胞核抗原的表达与鼻咽癌临床生物学行为及预后的关系

目的：探讨增殖细胞核抗原（ＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇＣｅｌＮｕｃｌｅａｒＡｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）与鼻咽癌（ＮＰＣ）临床生物学行为及预后的关系。方法：所有患者的疗前鼻咽活检标本，用ＰＣＮＡ抗体进行ＳＰ法免疫组化染色，阳性程度分为四级：０、＋、＋＋和＋＋＋级。结果：ＰＣＮＡ的阳性程度与ＮＰＣ的Ｔ、Ｎ分期、临床分期及放疗结束时颈结残留无关，与肿瘤复发和转移呈极显著性正相关（Ｐ＜０．０１）。结论：ＰＣＮＡ可作为对ＮＰＣ预后的判断及指导临床治疗的指标。

阴囊升温对大鼠睾丸生精细胞凋亡及增殖细胞核抗原表达的影响

目的 研究阴囊升温对大鼠睾丸生精细胞凋亡及增殖细胞核抗原 ( PCNA)表达的影响 ,探讨其在升温引起生精细胞变化中的意义。 方法 应用原位末端标记( TUNEL )法和免疫组化法 ,检测大鼠睾丸局部升温至 43℃、3 0 min后 ,经 0 .5、1、3、6、1 0和 50 d观察生精细胞凋亡和 PCNA表达情况。 结果 大鼠睾丸局部升温至 43℃、3 0min后生精上皮受到损伤 ,生精细胞凋亡增加 ( P<0 .0 1 ) ,生精细胞 PCNA表达下降( 0 .5～ 1 0 d组 P<0 .0 1 ,50 d组 P<0 .0 5)。 结论 43℃、3 0 min作用后生精细胞 PCNA表达与细胞凋亡呈负相关 。

饮酒对小鼠睾丸生精小管一氧化氮合酶、增殖细胞核抗原表达及细胞凋亡影响的研究

目的 探讨酒精对小鼠睾丸的组织结构、内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)、增殖细胞核抗原 (PCNA)及细胞凋亡的影响。 方法 用 5 %、10 %及 15 % 3种不同浓度的酒精作用于 2 2d龄小鼠 ,取睾丸做石蜡切片、HE染色 ;用免疫组织化学方法检测睾丸eNOS、细胞增殖的变化 ;TUNEL法检测细胞凋亡的变化 ,并进行统计学分析。 结果 随着酒精浓度的增大 ,睾丸组织结构发生明显改变 ,生精小管的直径逐渐减小 ,eNOS阳性细胞面积密度逐渐增大 ,单位面积内PCNA阳性细胞和凋亡细胞数目增加 ,高浓度酒精组与其他组差异极显著 (P <0 0 1)。 结论 酒精可使生精小管的直径变小 ,eNOS及PCNA表达增强 ,凋亡细胞增加并随酒精浓度的增大而变化加重。这可能是过量饮酒导致生精细胞减少 ,生殖能力降低的重要因素。

非小细胞肺癌survivin和增殖细胞核抗原表达的意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中survivin蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达及探讨其临床病理学意义。方法:采用免疫组织化学SP法,分别检测43例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中survivin和PCNA蛋白的表达。43例均随访或追观5年以上。结果:NSCLC的survivin阳性表达率(79.1%,34/43)明显高于正常支气管上皮组织阳性表达率(13.3%,2/15)(P<0.01);Ⅲ期survivin表达明显高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05);Survivin++^+++组的生存期明显较survivin-^+组短;Survivin的表达与其它临床病理参数均无明显关系(P>0.05)。NSCLC的PCNA增殖指数显著高于正常支气管黏膜上皮组织(P<0.01);增殖指数与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期呈正相关(P<0.01),与生存期呈负相关(P<0.01)。增殖指数与其它临床病理参数均无明显关系(P>0.05)。Survivin蛋白++^+++组中,增殖指数明显高于survivin-^+组(P<0.05)。结论:Sur-vivin和PCNA蛋白过度表达与NSCLC的发展、预后有密切关系,可作为临床评估NSCLC的进展及判断其预后的重要指标之一。Survivin在NSCLC中表达上调,与细胞增殖关系密切,提示survivin对肺癌的发生发展起重要作用。

米非司酮对葡萄胎组织增殖细胞核抗原表达影响及意义

目的通过研究葡萄胎米非司酮治疗前后增殖细胞核抗原(PCNA)表达的改变,探讨米非司酮对滋养细胞肿瘤组织的影响,及其用于妊娠滋养细胞肿瘤治疗的可行性。方法葡萄胎组织32例,应用免疫组织化学方法染色检测葡萄胎组织的PCNA表达。选取PCNA阳性表达病例10例,给予米非司酮治疗,1周后二次清宫,取组织重复染色,观察PCNA染色变化情况,分析米非司酮治疗对葡萄胎组织PCNA表达的影响。结果葡萄胎和正常胚胎组织PCNA阳性表达阳性率分别为46.9%和43.3%,差异无显著性(P>0.05)。但经米非司酮治疗后葡萄胎组织PCNA表达减弱,滋养细胞增生程度降低。全部治疗病例随访13～38个月,无1例进展成侵蚀性葡萄胎。结论米非司酮对葡萄胎组织PCNA表达具有明显抑制作用,能有效抑制葡萄胎滋养细胞增生,对葡萄胎预后未见不良影响,是葡萄胎安全的新辅助治疗手段。