多角度激光光散射检测器和示差折光检测器联用测定壳聚糖分子量及分子量分布

目的:建立多角度激光光散射检测器和示差折光检测器联用测定壳聚糖分子量及分子量分布的方法。方法:以0.1 mol·L^(-1)醋酸钠缓冲液为流动相,流速0.8mL·min^(-1),TSK Gel G5000PWxl凝胶排阻色谱柱与多角度激光光散射检测器和示差折光检测器联用。结果:获得了各样品的分子量和分子量分布以及样品的聚集态信息。结论:本方法快速、简便,结果准确。

凝胶渗透色谱与多角度激光光散射联用仪(GPC-MALLS)的使用和维护

光散射与凝胶渗透色谱联用技术在高分子分析领域应用日益广泛,本文结合实际工作经验,介绍了仪器使用和日常维护中应注意的问题,以达到延长仪器使用寿命的目的。

凝胶渗透色谱联用多角度激光光散射测定铁皮石斛多糖分子量及其分布

为研究铁皮石斛多糖的分子量及其分布,采用凝胶渗透色谱-多角度激光散射联用技术,对不同种源地铁皮石斛多糖分子量及其分布进行测定。结果表明,它们的重均分子量、多分散系数和旋转半径分别为:2.975×10^5~3.741×10^5 u、1.289~1.502和60.3~61.1 nm。该方法快速、简便,可用于测定铁皮石斛多糖的分子量及其分布,为铁皮石斛的种源优选和质量控制提供了依据。

多角度激光光散射仪与尺寸排阻色谱法联用测定透明质酸相对分子质量及其分布

目的多角度激光光散射仪与体积排阻色谱法联用(MALLS-SEC)测定透明质酸钠(HA)相对分子质量(Mr)及其分布。方法考察MALLS-SEC法测定HA Mr的准确度和精密度,以及HA溶液浓度对测定的影响;比较此法、黏度法和尺寸排阻色谱法测定HA Mr的结果。结果MALLS-SEC法的准确度、精密度均较好,相对标准偏差小于2%;测定Mr为104以上的HA样品采用0.05 mg/mL的浓度较为适宜;MALLS-SEC法测定HAMr的数值与黏度法较为接近,体积排阻色谱法测定值偏高。结论MALLS-SEC法测定HA Mr,操作简单快速,结果准确,可用于HA的质量控制和应用研究。

高效分子排阻色谱-多角度激光光散射法测定人凝血因子Ⅷ产品分子量及其分布

目的建立高效分子排阻色谱-多角度激光光散射法(HPSEC-MALLS)测定人凝血因子Ⅷ产品分子量及其分布的方法,并对不同企业产品的测定结果进行比较。方法采用HPSEC-MALLS法,以磷酸盐缓冲液为流动相,流速0.5 mL·min^(-1),采用TSK gel G3000SWXL(7.8 mm×300 mm,5μm)色谱柱,柱温为30℃。结果不同企业的人凝血因子Ⅷ产品均由4个组分组成,分子量分别为7.8×10^(6),5.3×10^(5),2.5×10^(5),2.0×10^(5),不同企业各组分含量存在差异。结论该文所建立的方法可用于人凝血因子Ⅷ分子量及其分布的测定,并能对不同企业的产品进行区分,为产品质量控制提供参考。

多角度激光光散射仪和体积排阻色谱法联用测定透明质酸相对分子质量及其分布

建立多角度激光光散射仪和体积排阻色谱法联用测定透明质酸相对分子质量及其分布的方法。考察MALLS-SEC法测定HA Mr的准确性和精密度,以及不同HA溶液浓度对测定的影响。结果表明:MALLS-SEC法的准确性好、精密度高,相对标准偏差小于2%;测定HA Mr时,采用0.1mg/mL的进样浓度较合适。操作简单、快速,结果准确,可用于HA的质量控制和应用研究。

凝胶色谱-多角度激光光散射法测定聚对二氧环己酮绝对分子量及分子量分布指数

以含0.01 mol·L^(-1)三氟乙酸钠的六氟异丙醇(HFIP)溶液(流动相)为溶剂溶解聚对二氧环己酮(PPDO)样品,使其质量浓度达到4 g·L^(-1)。过0.45μm滤膜,在凝胶色谱仪的Shodex HFIP 805/Shodex HFIP 803串联色谱柱上分离。多角度激光光散射仪的角度经聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)标准溶液进行归一化校正后,用来分析色谱仪分离得到的目标物,并将示差折光仪测得的折光指数增量代入光散射法测定绝对分子量的公式,计算PPDO的重均分子量、数均分子量及分子量分布指数。结果显示,重均分子量、数均分子量及分子量分布指数的相对标准偏差(n=6)均小于5.0%;PPDO在HFIP中的分子构象为无规线团状;凝胶色谱法所得重均分子量、数均分子量和分子量分布指数远大于上述方法的,主要由PMMA(用于制作标准曲线)和PPDO分子结构差异较大所致。

脑膜炎球菌疫苗多糖及多糖蛋白结合物分子量尺寸排阻色谱-多角度激光光散射联用检测方法的建立及验证

目的建立尺寸排阻色谱-多角度激光光散射(size exclusion chromatography-multiangle laser-light scattering,SEC-MALLS)联用测定脑膜炎球菌多糖及多糖蛋白结合物分子量的方法,并进行验证及初步应用,以期进一步提高该品种质量控制水平。方法建立SEC-MALLS联用方法检测脑膜炎球菌多糖及多糖蛋白结合物分子量,色谱条件:流动相为0.9%氯化钠溶液,色谱分离柱为Shodex OHpak LB-806 HQ(300 mm×8.0 mm,13μm),流速为0.5 mL/min,柱温为35℃。对方法的系统适用性、准确性、精密性、耐用性进行验证,并用该方法检测不同厂家来源的样品,同时与现行药典质量标准方法进行相关性分析。结果普鲁兰糖标准品除STD P-100以外,STD P-50 STD P-800重均分子量(Mw)实测值与标示值相对误差和精密度小于5.0%,可作为系统适应性样品;重复性、中间精密度RSD均不大于5.0%。多糖及多糖蛋白结合物在配制完成48 h内稳定性良好。A、C、Y、W135群多糖平均Mw分别为257.5、377.3、399.7、305.5 kDa;A、C群多糖蛋白结合物分别为6438、23360 kDa。71批多糖样品中有5批次A、C群结果超趋势,其余批次批内和批间差异均在均值±3 SD的范围以内。SEC-MALLS法与现行药典质量标准方法测定结果除Y群多糖分配系数(KD)与Mw呈一定的负相关性外,两种方法在其余多糖及多糖蛋白结合物中相关性并不显著。结论SEC-MALLS方法能直接测定脑膜炎球菌疫苗多糖及多糖蛋白结合物分子量,具有操作简单、快速、准确、能一定程度反映分子结构信息等优点,有利于提升该关键质量参数的质量控制水平。

分子排阻色谱-多角度激光散射法测定注射用核糖核酸分子量及其分布

目的测定注射用核糖核酸中核糖核酸的分子量及其分布。方法采用分子排阻色谱-多角度激光散射联用技术,以含0.02%叠氮钠的0.1 mol·L-1氯化钠溶液为流动相,流速0.5 m L·min-1,采用TSKgel G2000SWXL色谱柱,柱温为30℃。结果获得了样品的dn/dc值、分子量与分子量分布等分子特征参数。测得样品dn/dc值为0.1547,分子量（Mw）在4.6-234.2 k Da,分子量分布系数（Mw/Mn）在1.3-2.9。结论本文尝试以新的思路建立测定生物大分子核糖核酸分子量的方法,该方法快速、简便,可用于核酸类药物分子量及其分布的测定。实际样品检测结果表明,市售的注射用核糖核酸的分子量及分布差异均较大,原料及生产工艺有待进一步规范,加强质量控制。

联合超高效聚合物色谱和激光光散射法的聚酯分子质量及其分布测定

将超高效聚合物色谱-多角度激光光散射仪(APC-MALLS)联用建立了一种新型测试聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)分子质量及其分布的方法,确定了含三氟乙酸钠的六氟异丙醇(HFIP)作为溶剂和流动相的测试体系;并通过优化样品浓度、流动相流速等测试条件获得了不同特性黏度PET样品的分子质量及其分布。结果表明,所建立的测试方法无需用标准样校正即可获得样品的分子质量,比传统凝胶渗透色谱(GPC)测试方法速度提高4倍以上,重复性实验结果误差小于2%。实验测得特性黏度为0.685、0.884、1.038 d L/g的样品数均分子质量分别为22 700、32 000、41 600,分子质量分布分别为1.62、1.56、1.55。

角度激光光散射仪和体积排阻色谱法联用检测双黄连注射液中的高分子物质

目的:多角度激光光散射仪与体积排阻色谱法联用(MALLS-SEC)测定双黄连注射液中的高分子物质。方法:以0.7%Na2SO4缓冲液(加0.05%NaN3)为流动相,流速0.5 mL.min-1,TSK-GEL G3000SWxl凝胶排阻色谱柱与多角度激光光散射仪和示差折光检测器联用。结果:该方法对相对分子质量4600～133800 g.mol-1范围内物质线性关系良好(r=0.9922)。结论:本方法简便、快速、准确。

碱性蛋白酶酶解蛋白制备活性肽的质控研究

以胶原蛋白和大豆分离蛋白为主要研究对象,应用体积排阻色谱(SEC)结合多角度激光光散射(MALLS)及示差折光(RI)联用技术对碱性蛋白酶酶解蛋白制备肽段的过程进行了详细分析。在酶解过程中,不同来源的胶原蛋白(牛、鸡)和大豆分离蛋白在分子量分布、体系的分散度及粒径变化规律上表现出了典型的差异。结果表明,牛胶原蛋白在酶解开始时就迅速被降解产生了大量小分子肽段,鸡胶原蛋白相对于牛胶原蛋白在相同的酶解条件下更难产生小分子肽段,大豆分离蛋白随着酶的加入则是表现出了先聚集再降解的特性。SEC-MALLS技术可以有效把控蛋白酶解的过程以及体系中肽段分子量分布,该技术可以为活性肽产品的开发及品质检测提供依据。

A群脑膜炎球菌多糖疫苗的分子量分布测定方法的建立

目的 建立高效分子排阻色谱-多角度激光光散射法(HPSEC-MALLS)测定A群脑膜炎球菌多糖疫苗分子量分布的方法,并对不同批次样品的测定结果进行比较。方法 采用TSK gel G5000PWXL(7.8 mm×300 mm,5μm)凝胶色谱柱,柱温35℃,以0.2 mol/L氯化钠溶液为流动相,流速0.6 ml/min,多角度激光光散射检测器测定多糖分子量分布。结果 建立的方法精密度、准确度、重复性均良好,5批次样品重均分子量为480 560~512 780 Da。结论 HPSEC-MALLS可以用于A群脑膜炎球菌多糖疫苗的分子量测定,该方法准确度高,操作简便、快捷。

“沪农灵芝1号”品种子实体多糖分析

以水提醇沉法获得"沪农灵芝1号"子实体中的灵芝多糖,并对其结构特征和含量进行分析。高效凝胶尺寸排阻色谱-多角度激光光散射仪-示差折光检测仪联用分析结果表明,该多糖重均相对分子质量为2.28×106,均方根半径为150.1 nm,多分散系数(Mw/Mn)为1.14,在水溶液中呈棒状结构。单糖组成及甲基化分析结合酶解试验结果表明,该多糖为β-1,3/1,6-葡聚糖。经液相色谱法定量检测,段木栽培所得灵芝子实体中,该多糖质量分数为0.52 mg/g,显著高于袋料栽培所得子实体中相应组分的含量。

糖谱法比较不同产地竹荪多糖结构特征

利用微波辅助水提取长裙竹荪水溶性多糖,高效凝胶排阻色谱联用多角度激光光散射和糖谱法联用荧光辅助凝胶电泳分析比较不同产地长裙竹荪多糖结构特征。结果表明:不同产地长裙竹荪多糖的高效凝胶排阻色谱图、重均分子质量及其分布均相似,并均含有α-1,4-、α-1,6-、β-1,3-和β-1,4-葡萄糖苷键,以及α-1,4-半乳糖醛酸苷键和β-2,1-果糖苷键,不同产地长裙竹荪多糖具有较高相似性。

驱油用聚丙烯酰胺分子量测试的光散射研究

利用旋转流变仪分析了超高分子量部分水解聚丙烯酰胺溶液的流变性质,并根据光散射动态模式分析了其在不同浓度和不同盐离子浓度下的尺寸分布.建立了利用多角度激光光散射准确测量驱油用超高分子量聚丙烯酰胺重均分子量(Mw)、均方根回转半径(<Rg>)和第二位力系数值(A2)的方法.准确测量了商品化驱油用超高分子量聚丙烯酰胺FP3630S的这3个参数,分别为Mw=(1.33±0.06)×107,

高效凝胶色谱法同时测定眼用粘弹剂中透明质酸钠和硫酸软骨素钠的含量

样品经50mmol·L^(-1) NaH_2PO_4-0.1mol·L^(-1) NaCl混合溶液溶解后,首先采用凝胶渗透色谱与多角度激光光散射联用仪确定透明质酸钠和硫酸软骨素钠的分子量,依据分子量分布确定水凝胶色谱柱(OH pak SB-806HQ L012028与OH pak p8514-804L102028串联)为分离柱,OH pak SB-G G008146为保护柱,流动相采用50mmol·L^(-1) NaH_2PO_4-0.1mol·L^(-1) NaCl混合溶液,流量为0.5mL·min^(-1),以示差折光检测器进行测定。透明质酸钠和硫酸软骨素钠的质量浓度在0.10~1.0g·L^(-1)内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)分别为0.051,0.059g·L^(-1)。加标回收率在83.3%~110%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)小于2.2%。

3种方法测定玻璃酸钠的分子量比较

目的:比较3种方法测定玻璃酸钠注射液中玻璃酸钠分子量的结果。方法:采用黏度法测定玻璃酸钠注射液中玻璃酸钠的分子量,并采用体积排阻色谱法(SEC)及多角度激光光散射仪与体积排阻色谱法联用(MALLS-SEC)对其分子量及分子量分布(Mw/Mn)进行测定。结果:MALLS-SEC法与黏度法的测定结果较为接近,且同时可测定样品的Mw/Mn。3批样品分子量4次测定的平均值分别为991 962,1 007 438,990 232;RSD分别为6.5%,4.6%,2.2%(n=4)。分子量分布4次测定的平均值为1.6,1.6,1.6;RSD为7.2%,3.2%,3.2%(n=4)。结论:MALLS-SEC法测定准确度及精密度较好,可用于玻璃酸钠样品的质量控制。

JOS/PD复合物的相对分子质量与助留助滤性能

采用多角度激光光散射仪（MALLS）-体积排除色谱法（SEC）联用技术研究了交联氧化淀粉（JOS）与聚二甲基二烯丙基氯化铵（PD）形成的复合物（JOS/PD）的质均相对分子质量（Mw）及分布,探讨了JOS的羧基含量对复合物Mw的影响,考察了复合物对废纸浆的助留助滤性能。结果表明,芭蕉芋交联淀粉（JS）的Mw主要分布在1.1×106~2.0×107,其均方旋转半径为236 nm,约是原淀粉（76 nm）的3倍。NaClO氧化导致JOS的羧基含量增大,Mw大幅减小。JOS的氧化程度越大,JOS与PD的复合作用越大,JOS-6的Mw为9.2×10^4,而JOS-6/PD的Mw为1.0×10^6。JOS/PD的阳离子含量随JOS羧基含量的增大而减小。JOS/PD用于废纸浆时显示出优良的助留助滤作用,当w（JOS-2/PD）=0.5%时,废纸浆的打浆度和滤液的浊度分别减小63%和81%。JOS/PD的分子形态和离子含量影响其助留助滤性能。

眼用硅油重均相对分子质量及其寡聚硅氧烷含量分析

采用凝胶渗透色谱与多角度激光光散射联用仪测定眼用硅油的重均相对分子质量,用气相色谱–质谱联用仪对其低聚物(寡聚硅氧烷类物质)进行定性定量分析。以八甲基环四硅氧烷(D4)、十甲基环五硅氧烷(D5)作为寡聚硅氧烷代表进行检测研究。硅油的重均相对分子质量(Mw)为31KD,相对分子质量分布系数Mw/Mn为2.9。D4,D5的质量浓度分别在1~50μg/mL,2~60μg/mL范围内与其色谱峰面积呈良好的线性,线性相关系数(r^2)分别为0.999,0.998,检出限分别为0.10,0.23μg/mL,D4,D5的加标回收率分别为90.7%~96.7%,87.3%~94.1%。重均相对分子质量及D4,D5测定结果的相对标准偏差均小于5%(n=6)。该方法干扰少,准确度高,可用于眼用硅油质量控制。