基于“肠脑互动”探讨大建中汤治疗肠易激综合征大鼠内脏痛作用机制

目的研究大建中汤对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)大鼠内脏痛的影响及神经-免疫-内分泌网络的分子机制。方法将新生大鼠48只,随机分为正常对照组(control组)、肠易激综合征模型组(IBS组)、酮替芬组(Ketotifen组)、低剂量大建中汤治疗组(DJZT-L)、中剂量大建中汤治疗组(DJZT-M)、高剂量大建中汤治疗组(DJZT-H)。采用母婴分离法制备IBS内脏痛大鼠模型,利用腹壁撤退反应(abdominal withdrawal reflex,AWR)评估大鼠内脏敏感性;免疫组化法测定大鼠下丘脑星形胶质细胞(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、小胶质细胞(OX-42);免疫蛋白印迹(Western blot,WB)检测结肠和下丘脑P物质(substance P,SP);甲苯胺蓝染色法检测结肠组织肥大细胞(mast cell,MC)脱颗粒率;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)测定分析结肠组织SP、特异性IgE(sIgE)和组胺。结果与正常大鼠相比,模型大鼠中60、40和20 mm Hg压力下AWR评分明显升高(P<0.05),下丘脑GFAP、OX-42、SP表达显著上升(P<0.05),结肠组织中肥大细胞脱颗粒率、sIgE、组胺和SP表达显著上升(P<0.05);与模型大鼠相比,大建中汤高剂量组(40和20 mm Hg压力),大建中汤中剂量组(60、40和20 mm Hg压力)的AWR评分,下丘脑GFAP、OX-42、SP,结肠肥大细胞脱颗粒率、sIgE、组胺、SP表达明显下降(P<0.05)。结论大建中汤能够降低IBS模型大鼠内脏痛,可能与其抑制SD大鼠结肠组织中肥大细胞活性,进而影响免疫神经网络有关。

大建中汤古代文献考证与临床应用分析

目的搜集大建中汤中医古籍与现代文献,对大建中汤进行考证和临床应用分析。方法古籍检索第5版《中华医典》、国医典藏中医古籍数据库、“读秀”数据库,现代文献检索中国知识资源总库(CNKI)、中文科技期刊数据库(VIP)、中国学术期刊数据库(万方数据)、PubMed数据库大建中汤相关文献,统计分析其历史源流、组方原理、剂量炮制、功效主治、制法服法,梳理历代医家应用心得及现代临床应用。结果大建中汤在古代医家治疗腹痛、呕吐等脾胃病证上发挥重要作用,现代临床研究表明,该方对急腹症、肠梗阻、胃溃疡等疾病具有疗效。结论本研究为大建中汤的合理应用提供系统参考,有助于拓展本方临床应用。

大建中汤对术后肠梗阻大鼠胃肠功能的影响

目的观察大建中汤对术后肠梗阻大鼠胃肠功能及血清血管活性肽(VIP)、分泌型免疫球蛋白(sIgA)、白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,探讨大建中汤的可能作用机制。方法将40只雄性SD大鼠随机为正常组、假手术组、术后肠梗阻组、大建中汤组,每组10只。术后肠梗阻组和大建中汤组大鼠通过Klaff小肠干扰术建立术后肠梗阻模型。造模成功后,大建中汤组分别在术后6 h、12 h、24 h灌胃0.486 g/mL大建中汤溶液,正常组、假手术组和术后肠梗阻组灌胃等量生理盐水。在处死前60 min,各组均灌胃2%蓝色葡聚糖2000,30 min后取小肠,肉眼观察肠道形态,测定小肠推进率,HE染色观察肠组织病理表现,ELISA法测定血清中VIP、sIgA、IL-1β水平。结果术后肠梗阻组大鼠肠管表面有少量渗血点,肠壁水肿,肠腔内有气液聚积,肠蠕动稍差,部分大鼠肠管明显粘连、扩张;小肠推进率明显低于正常组及假手术组(P均<0.05);HE染色显示肠黏膜损害明显,黏膜下充血水肿,绒毛萎缩变短、部分水肿变宽,间质可见炎性细胞浸润;血清VIP、IL-1β水平均明显高于正常组及假手术组(P均<0.05),血清sIgA水平明显低于正常组及假手术组(P均<0.05)。大建中汤组大鼠肠管充血水肿情况较术后肠梗阻组明显改善,无明显出血、溃疡,肠蠕动尚可;小肠推进率明显高于术后肠梗阻组(P<0.05);HE染色显示肠黏膜上皮排列较整齐,绒毛长短稍显不齐,间质轻度充血水肿,可见少量炎性细胞浸润;血清VIP、IL-1β水平均明显低于术后肠梗阻组(P均<0.05),血清sIgA水平明显高于术后肠梗阻组(P<0.05)。结论大建中汤能够有效改善术后肠梗阻大鼠的胃肠功能,机制可能与降低血清VIP水平促进胃肠运动,升高sIgA水平和下调IL-1β水平从而调控肠道炎症反应,保护肠黏膜屏障,维持肠道免疫功能有关。

大建中汤通过调节P2X7R介导胶质细胞活化减轻大鼠肠易激综合征内脏痛

目的:研究肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)内脏痛大鼠脊髓后角(posterior horn of spinal cord,PHSC)和前扣带回皮质(anterior cingulate cortex,ACC)星形胶质细胞中胶质细胞原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及P2X7受体(P2X7 receptor,P2X7R)表达的变化及大建中汤(Dajianzhongtang,DJZT)的干预作用。方法:通过腹腔注射卵清白蛋白、母婴分离、乙酸灌肠等方式制备IBS内脏痛大鼠模型,将模型大鼠随机分为3组:模型组(灌服等体积生理盐水,每天1次,持续2周)、DJZT组(10.8 g/kg DJZT灌胃,每天1次,持续2周)和P2X7R拮抗剂亮蓝G(brilliant blue G,BBG)组(腹腔注射50 mg/kg,每天1次,持续2周),另设正常组(灌服等体积生理盐水,每天1次,持续2周),共计4组,每组10只。采用腹部撤离反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评估各组大鼠内脏疼痛敏感度;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠结肠黏膜的病理变化;RT-qPCR和Western blot检测大鼠PHSC和ACC组织中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、GFAP和P2X7R的mRNA及蛋白表达水平;免疫荧光双染法观察PHSC和ACC组织中GFAP和P2X7R的定位情况。结果:与正常组大鼠比较,模型组大鼠AWR评分于60、40和20 mmHg压力下增加(P<0.01),结肠组织HE染色病变均未见病理改变,PHSC和ACC组织中BDNF、IL-1β、GFAP和P2X7R的mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01);PHSC和ACC组织中GFAP与P2X7R共表达,且模型组PHSC和ACC组织中GFAP和P2X7R共表达阳性细胞数量显著增多(P<0.01)。与模型组相比,BBG组和DJZT组AWR评分于60、40和20 mmHg压力下下降(P<0.01),ACC和PHSC组织中IL-1β、BDNF、GFAP和P2X7R的mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01);BBG组大鼠PHSC和ACC组织中GFAP和P2X7R共表达阳性细胞数量显著减少(P<0.01)。DJZT组和BBG组上述各指标的差异均无统计学意义。结论:DJZT减轻大鼠IBS内脏痛的机制可能与其调节PHSC和ACC组织中P2X7R和GFAP的表达有关。

基于网络药理学及分子对接技术探讨大建中汤治疗肠易激综合征潜在作用机制

基于网络药理学和分子对接技术,探讨大建中汤医治肠易激综合征的潜伏机制。方法 利用TCMSP、Genecard等数据库挑选收集大建中汤和肠易激综合征的靶点,利用TCMSP、Genecard等数据库挑选收集二者的靶点。利用AutoDock 4.2.6对大建中汤有效成分与核心靶点进行分子对接,用PyMOL软件进行可视化分析。结果 大建中汤共有50个主要有效成分和270个药物靶点。疾病靶点2171个,通路67条。排名最优的对接结果为β-sitosterol与PRKACA可形成氢键连接。结论 大建中汤的活性成分可能通过Toll样受体信号通路及作用于PRKACA、TNF、IL6等相关靶点来发挥医治肠易激综合征作用。

脾阳虚大鼠下丘脑星形胶质细胞GFAP和小胶质细胞OX42的表达及大建中汤的干预作用

目的观察脾阳虚症大鼠下丘脑星形胶质细胞和小胶质细胞表达的改变,以及大建中汤对脾阳虚大鼠下丘脑星形胶质细胞和小胶质细胞表达的影响,探讨下丘脑神经胶质细胞在脾阳虚症发病机制中的作用和大建中汤可能的作用环节。方法采用饮食失节伤脾气,劳倦过度伤脾气及苦寒泻下伤脾阳的方法,建立脾阳虚模型。实验分为正常对照组,模型组,大建中汤治疗组。采用免疫组织化学染色法对下丘脑胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和特异性标记小胶质细胞的OX42抗体进行染色,观察与内脏活动密切相关的下丘脑组织中星形胶质细胞GFAP和小胶质细胞OX42表达的变化。结果与正常对照组相比,脾阳虚模型组大鼠下丘脑GFAP与OX42表达增强,阳性细胞数增多,差异具有统计学意义(P<0.01);大建中汤高剂量组GFAP与OX42表达与模型组相比明显下降,具有显著性差异(P<0.01)。结论脾阳虚能激活下丘脑星形胶质细胞和小胶质细胞,胶质细胞的激活可能是脾阳虚症大鼠模型形成的神经机制之一,大建中汤可能通过作用于神经胶质细胞来达到其干预脾阳虚症的作用。

大建中汤对脾阳虚大鼠肠系膜微循环功能的影响

研究大建中汤对脾阳虚大鼠微循环的影响。将大鼠随机均分为正常组、模型组、建大组、建小组和理中组 ,用多因素方法建立大鼠脾阳虚模型后 ,分别予生理盐水、大建中汤、附子理中汤灌胃治疗 15天 ,观测各组大鼠肠系膜微循环状况。结果显示 ,建中组、理中组及正常组微循环状况均优于模型组 (P <0 0 1) ,且建大组优于建小组和理中组 (P <0 0 1)。大建中汤能改善大鼠肠系膜微循环 ,且存在明显量效关系 。

大建中汤对脾阳虚大鼠TXB_2及6-Keto-PGF_(1α)的影响

研究大建中汤对脾阳虚大鼠血浆血栓素B2 、6 -酮前列腺素的影响。将大鼠随机均分为正常组、模型组、建大组、建小组和理中组 ,用多因素方法建立脾阳虚模型后 ,分别予生理盐水、大建中汤、附子理中汤灌胃治疗 15天 ,测定各组大鼠血浆血栓素B2 、6 -酮前列腺素水平。结果表明建中组、理中组及正常组 6 -酮前列腺素 (血栓素B2 )水平高 (低 )于模型组 (P <0 0 1) ,且建大组高 (低 )于建小组和理中组 (P <0 0 1)。提示大建中汤能调节大鼠血浆血栓素B2 、6 -酮前列腺素水平 ,且存在明显量效关系 ,可能是其建中作用的机理之一。

大建中汤对脾阳虚疼痛大鼠模型血中NO β-EP影响的实验研究

大建中汤出自于《金匮要略·腹满寒疝宿食病脉证并治》篇中，是临床治疗脾胃虚寒证的有效方剂。方中蜀椒、干姜温中散寒止痛，人参、饴糖甘温益气、补脾缓中，诸药合用，共奏温中补虚、大建中气之功。目前国内对该方的研究多局限于临床报道，国外对本方的动物实验也较少，所以本文在中医药理论指导下，用现代生物技术手段，

大建中汤治疗大鼠脾阳虚胃炎的机制

目的:探讨大建中汤治疗脾阳虚胃炎的作用机制。方法:SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、枸橼酸铋钾对照组,大建中汤高、中、低剂量组。采用RT-PCR检测单核细胞白介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)mRNA表达水平;ELISA法检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α);同时观察胃黏膜的病理。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠IRAK-4mRNA和血清中IL-6、TNF-α的水平升高,胃黏膜显示腺萎缩、浸润;与模型组比较,大建中汤高剂量组、中剂量组IRAK-4mRNA和血清中IL-6、TNF-α均降低,差异有统计学意义;大建中汤低剂量组血清中IL-6、TNF-α差异亦显著;大建中汤低剂量组IRAK-4mRNA无明显差异。结论:大建中汤高剂量组、中剂量组均对脾阳虚胃炎有显著治疗作用,大建中汤降低IRAK-4、IL-6及TNF-α可能是治疗胃炎的机制之一。

大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠大脑皮质三磷酸腺苷含量和三磷酸腺苷酶活性的影响

目的:通过观察大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠皮质ATP含量以及钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性的影响,探讨大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠的镇痛机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,大建中汤大、小剂量组。用饮食失调、劳倦过度加苦寒泻下的方法,建立脾阳虚腹痛大鼠模型后分别给予相应治疗。取大脑皮质处理后,采用高效液相色谱法测定各组大鼠皮质ATP含量的变化;采用无机磷法测定钠钾-三磷酸腺苷酶和钙镁-三磷酸腺苷酶活性。结果:与正常对照组相比,脾阳虚腹痛模型组大鼠大脑皮质ATP含量明显升高,钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性显著降低;与模型组相比,大建中汤能显著减少脾阳虚腹痛大鼠大脑皮质ATP含量,增加钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性。结论:脾阳虚腹痛症能使大脑皮质ATP含量升高,钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性降低,大建中汤能下调脾阳虚症动物大脑皮质ATP及上调钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性,这可能是其治疗脾阳虚腹痛的作用机制之一。

大建中汤对粘连性肠梗阻大鼠肠黏膜免疫系统中CD4^+、CD8^+及SIgA表达的影响

目的:观察大建中汤对粘连性肠梗阻大鼠肠黏膜免疫系统中CD4+、CD8+T淋巴细胞及SIgA表达的影响。方法:复制粘连性肠梗阻大鼠模型,将140只SD大鼠随机分7组,即正常组、模型组、假手术组、理中组、建大组、建中组、建小组,分别予生理盐水、附子理中丸、大建中汤灌胃治疗。于造模术后7、14 d各取一半大鼠取回肠组织,运用免疫组织化学染色法标记小肠黏膜中CD4+、CD8+T淋巴细胞及SIgA数量,用图像分析仪统计其含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠肠黏膜免疫系统中SIgA及CD4+、CD8+T淋巴细胞数量明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);建大组较模型组上述各指标均有升高(P<0.05),其中CD4+、CD8+T淋巴细胞数量显著升高(P<0.01);各给药组治疗7 d与14 d后无明显差异。结论:大建中汤可增强粘连性肠梗阻大鼠肠黏膜免疫功能,发挥肠黏膜的保护作用。

大建中汤加减治疗急性过敏性紫癜性腹痛1例

1病案介绍患者,男,28岁,2009年9月16日初诊。患者双下肢紫癜20余天,间断腹痛4天加重1天。患者20余天前无诱因出现双下肢皮疹,外院考虑＂过敏性紫癜＂,予口服泼尼松片至就诊时（具体剂量及服法不详）。4天前出现间断胃脘痛,喜按,且双大腿皮肤紫癜增多,查血尿便、B超等相关检查未见异常,予解痉止痛药可缓解。

大建中汤对脾阳虚胃癌大鼠环氧化酶-2和核转录因子-кB的影响

目的:研究大建中汤对脾阳虚胃癌大鼠模型环氧化酶-2(Cox-2)和核转录因子-кB(NF-кB)的影响。方法:取SD大鼠50只,随机分为5组,即空白对照组、模型对照组、大建中汤高剂量组、大建中汤低剂量组和西药对照组,每组10只。空白对照组给予生理盐水10 m L·kg^(-1),每天1次;模型对照组给予藩泻叶水浸液10 m L·kg^(-1),每天1次;大建中汤高剂量组、大建中汤低剂量组分别给予10.8 g·kg^(-1)和5.4g·kg^(-1),每天1次;西药对照组给予环磷酰胺2 m L/200 g,每天1次。各组灌胃15 d后处死,取出异常胃组织,甲醛溶液固定,石蜡包埋,切片。免疫组化检测各组Cox-2、NF-κB蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠胃组织Cox-2、NF-κB蛋白的含量明显升高(P<0.01);与模型对照组比较,大建中汤高剂量组、大建中汤低剂量组、西药对照组大鼠Cox-2、NF-κB蛋白的含量明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论:大建中汤可调节胃组织Cox-2、NF-κB蛋白的水平,从而改善脾阳虚胃癌大鼠的症状。

大建中汤对脾阳虚疼痛大鼠COX-2mRNA及蛋白和CaMKⅡmRNA的影响

【目的】观察大建中汤对脾阳虚疼痛大鼠脑组织环氧合酶-2(COX-2)m RNA及蛋白和钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)m RNA的影响,探讨大建中汤对脾阳虚疼痛的作用机理。【方法】将SD大鼠40只随机分为正常组,模型组,大建中汤高、低剂量组(剂量分别为3、0.75 g·kg^(-1)·d^(-1))各10只,采用综合造模法复制脾虚动物模型,根据实验分组以灌胃形式连续给药15 d后,断颈处死大鼠并立即取脑组织。采用Real-time PCR法检测脑组织COX-2 m RNA、Ca MKⅡm RNA表达的变化;免疫组织化学法检测COX-2蛋白表达变化。【结果】与正常组比较,脾阳虚模型组大鼠大脑COX-2 m RNA及蛋白表达显著增加(P<0.01),Ca MKⅡm RNA表达显著降低(P<0.01);大建中汤高、低剂量组COX-2 m RNA与蛋白表达较模型组显著下降(P<0.01),Ca MKⅡm RNA表达较模型组显著升高(P<0.01)。【结论】大建中汤可通过抑制脾阳虚疼痛大鼠脑组织中COX-2 m RNA及蛋白表达,提高Ca MKⅡm RNA表达来达到治疗疼痛的目的。

史载祥教授应用大建中汤治疗寒性腹痛经验

史载祥教授是中日友好医院中西医结合心内科首席专家、主任医师,全国第3、4批名老中医药专家学术经验继承工作指导老师,博士生导师。他从事中西医结合临床工作40余载,积累了丰富的临床经验。史教授尤其擅长运用经方治疗许多现代疑难重症,疗效显著。现将其运用大建中汤治疗寒性腹痛的经验整理如下,以供同道参考。

大建中汤对粘连性肠梗阻大鼠血浆血管活性肠肽、胃动素的影响

目的研究大建中汤对粘连性肠梗阻大鼠血浆血管活性肠肽(VIP)、胃动素(MTL)的影响。方法复制粘连性肠梗阻大鼠模型,将70只SD大鼠随机分7组,即正常组、模型组、假手术组、理中组、建大组、建中组、建小组各10只,分别予生理盐水、附子理中丸、大建中汤灌胃治疗。于造模后14 d留取大鼠血浆,利用放射免疫分析方法检测各组大鼠血浆VIP、MTL含量。结果各给药组大鼠的食欲、活力、排便等一般情况均优于模型组;模型组较正常组、假手术组粘连分级显著加重(P<0.01),而理中组及建大组粘连分级则低于模型组(P<0.05);模型组血浆VIP水平低于建中组、建小组及正常组(P<0.05),其中建小组显著高于模型组(P<0.01);理中组、建中组及建小组血浆MTL水平显著高于模型组(P<0.01)。结论大建中汤能通过调节血浆VIP、MTL以改善粘连性肠梗阻大鼠的胃肠动力。

大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠CaMKⅡmRNA的影响

目的:观察大建中汤对脾阳虚疼痛大鼠大脑中环氧合酶-2(COX-2)mRNA的影响,探讨大建中汤对脾阳虚疼痛的作用机理。方法:将SD大鼠40只随机分为正常组、模型组、大建中汤大、小剂量组各10只,采用综合造模法制备脾虚动物模型,根据实验分组以灌胃形式进行给药,各组大鼠连续给药15天后,断颈处死大鼠并立即取脑组织。用RT-PCR法分析检测脑组织Ca MKⅡmRNA表达的变化。结果:与正常对照组相比,脾阳虚模型组大鼠大脑Ca MKⅡmRNA表达明显增加,具有显著统计学意义(P﹤0.01);大建中汤高剂量组Ca MKⅡ表达与模型组相比明显下降,具有显著性差异(P﹤0.01)。结论:Ca MKⅡmRNA在脾阳虚疼痛中高表达,大建中汤可抑制脾阳虚疼痛大鼠大脑中Ca MKⅡ的表达,并可能通过此抑制作用来达到治疗疼痛的目的。