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一株孔雀源奇异变形杆菌全基因组测序及毒力与耐药性分析
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作者 焦凤超 雷震 +2 位作者 李迎晓 武娴 曲哲会 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3030-3040,共11页
【目的】试验旨在了解分离自蓝孔雀的奇异变形杆菌PM19的毒力、耐药性以及基因组特征。【方法】采用动物试验、药敏试验和PCR方法对分离菌进行毒力、耐药性以及毒力基因检测,并运用Illumina NovaSeq6000平台进行基因组框架图测序,通过NR... 【目的】试验旨在了解分离自蓝孔雀的奇异变形杆菌PM19的毒力、耐药性以及基因组特征。【方法】采用动物试验、药敏试验和PCR方法对分离菌进行毒力、耐药性以及毒力基因检测,并运用Illumina NovaSeq6000平台进行基因组框架图测序,通过NR、KEGG、Swiss-Prot、COG、PHI-base、CAZy、CARD和VFDB数据库进行功能基因注释以及病原宿主互作用蛋白、碳水化合物活性酶、耐药基因和毒力因子预测分析。【结果】分离菌PM19为多重耐药菌,对受试的氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸钾、头孢曲松、头孢噻肟、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、环丙沙星、四环素、强力霉素、磺胺嘧啶钠、替米考星、氟苯尼考和氯霉素共14种抗菌药物全部耐药。分离菌具有较强毒力,对小鼠半数致死量为6.19×10^(6)CFU。FliL、zapA、rsmA、hmpA、mrpA、atfA、pmfA和ureC共8种毒力基因在该菌中被检测到。全基因组测序分析显示,该菌基因组大小约为3.98 Mb,GC含量为38.94%,预测到3715个编码基因。PHI-base数据库注释出158个与病原宿主互作用有关的蛋白基因;CAZy数据库注释出101个碳水化合物活性酶基因;通过CARD数据库和VFDB数据库分别注释到92个耐药基因和8类毒力相关基因。【结论】奇异变形杆菌PM19菌株具有较强毒力且为多重耐药菌株,携带大量病原宿主互作用蛋白基因、碳水化合物活性酶基因、耐药基因及毒力基因。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 多重耐药性 毒力 全基因组测序
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冀北地区致犊牛腹泻奇异变形杆菌的分离鉴定及耐药性研究 被引量:7
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作者 张召兴 韩平 +6 位作者 王亚男 王珍珊 张妍 郭磊 衡江鸿 闫港 张艳英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期24-31,共8页
为鉴定冀北地区养殖场中引起犊牛腹泻的病原菌,本实验于2021年~2023年采集冀北地区养殖场中患腹泻病奶肉犊牛的肛拭子、粪便及肝脏等病料样品247份,采用细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定和ureR基因的PCR扩增等方法进行细菌的分离鉴定... 为鉴定冀北地区养殖场中引起犊牛腹泻的病原菌,本实验于2021年~2023年采集冀北地区养殖场中患腹泻病奶肉犊牛的肛拭子、粪便及肝脏等病料样品247份,采用细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定和ureR基因的PCR扩增等方法进行细菌的分离鉴定,结果显示,从采集的247份患腹泻病的奶肉犊牛病料样品中分离并鉴定到102株奇异变形杆菌(PM)。将分离菌人工感染小鼠(0.20 m L/只,含菌量为108cfu/mL),检测PM对小鼠的致病性。结果显示其中72株PM引起小鼠发病与死亡,为致病性PM,小鼠的死亡率在40%~100%。采用PCR方法及K-B药敏纸片法分别检测分离菌的毒力基因、相关耐药基因及耐药性,采用SPSS19软件中的Fisher确切概率法分析PM耐药表型与相关耐药基因之间的相关性。结果显示,毒力基因fliL、zapA、pmf A、atfA、rsb A、ureC、atfC在72株致病性PM中的检出率在63.4%~100%,其他毒力基因的检出率在2.7%~8.1%;72株致病性PM对阿莫西林、氨苄西林、安普霉素等12种药物耐药的菌株占51.4%以上,对其他药物耐药的菌株占6.9%~33.3%,均呈多重耐药性(MDR),且至少耐3类药物;72株致病性PM的β-内酰胺类耐药基因blaOXA、blaCTX-M、blaTEM,磺胺类耐药基因Sul1、Sul2、Sul3,氨基糖苷类耐药基因adA、aac(6’)-Ib,四环素类耐药基因TetA、TetM的检出率在43.2%~98.6%,其他耐药基因检出率在4.2%~33.3%,其耐药表型与耐药基因型之间基本呈正相关(除多粘菌素类和大环内酯类药物外)。本研究为致奶肉犊牛腹泻的奇异变形杆菌病的防控提供了参考。 展开更多
关键词 犊牛 奇异变形杆菌 致病性 毒力基因 耐药性 耐药基因
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家兔奇异变形杆菌的分离鉴定及致病性分析 被引量:1
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作者 王佳宁 李双军 +4 位作者 张自强 王帅帅 位兰 朱雪敏 刘玉梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期32-38,共7页
为探究河南省某规模化兔场暴发的以精神萎靡、腹泻为主要症状的疾病病原,本实验随机选取6只病死兔剖检并观察其各组织剖检病变后,通过四区划线法分离纯化并增菌培养后,分别于普通琼脂培养基、血琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基培养,并对... 为探究河南省某规模化兔场暴发的以精神萎靡、腹泻为主要症状的疾病病原,本实验随机选取6只病死兔剖检并观察其各组织剖检病变后,通过四区划线法分离纯化并增菌培养后,分别于普通琼脂培养基、血琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基培养,并对分离菌进行疑似病原菌的PCR鉴定、球虫检测、生化鉴定、16S r RNA基因的PCR扩增、测序和序列分析,构建分离菌16S r RNA基因的进化树,进一步确定病原菌。剖检观察可见病死兔肾脏呈土黄色、肝脏肿大有出血点、胸腺出血、脾脏萎缩呈深褐色、肺脏发白且有散在出血点等。疑似病原菌的鉴定结果显示,大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、魏氏梭菌、沙门氏菌、波氏杆菌及球虫均呈阴性,且通过细菌的分离培养、16S r RNA基因的PCR扩增、测序并构建系统进化树,进一步确定引起该兔场发病的病原菌为奇异变形杆菌,并将其命名为HN001株。通过PCR检测该菌携带的毒力基因,并采集病死兔肝、肾、肠等病变组织制作病理切片,观察其病理变化。将HN001株以1011cfu/mL感染家兔,一周后剖杀,观察各组兔的剖检病变,并再次从兔的内脏分离并鉴定病原菌。毒力基因的PCR检测结果显示,HN001菌株中鞭毛基因FliL和菌毛结构亚单位基因Mrp A均为阳性,溶血素基因Hpm A、金属蛋白酶结构亚单位基因ZapA和“雾蔓”菌毛迁移能力的调控基因Rsb A均为阴性。组织病理学结果显示,病死兔肾、肝、胸腺、脾、肺脏和空肠组织均损伤严重,主要表现为炎性细胞浸润、散在分布部分红细胞等病理变化。家兔致病性试验结果显示,该病原菌感染兔后出现与自然感染兔类似的症状和脏器的剖检症状,但病变程度与自然感染兔相比较轻。且从病兔体内再次分离到与感染菌相同的菌株,表明奇异变形杆菌为该兔场暴发疾病的病原菌。本研究为兔奇异变形杆菌病的防控提供参考依据。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 消化道疾病 组织病理学 毒力基因
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bla_(CMY-2)阳性禽源奇异变形杆菌的多重耐药特征 被引量:1
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作者 于丽洁 李学义 +4 位作者 马梦娟 王梦桃 贺丹丹 苑丽 潘玉善 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期239-248,共10页
【目的】研究bla_(CMY-2)阳性禽源奇异变形杆菌的多重耐药特征,并分析菌株CY32全基因组序列结构。【方法】对5株bla_(CMY-2)阳性禽源奇异变形杆菌进行氟苯尼考和质粒介导氟喹诺酮类耐药基因检测、接合试验和bla_(CMY-2)基因的Southern... 【目的】研究bla_(CMY-2)阳性禽源奇异变形杆菌的多重耐药特征,并分析菌株CY32全基因组序列结构。【方法】对5株bla_(CMY-2)阳性禽源奇异变形杆菌进行氟苯尼考和质粒介导氟喹诺酮类耐药基因检测、接合试验和bla_(CMY-2)基因的Southern杂交定位,对其中一株菌CY32进行全基因测序和生物信息学分析。【结果】5株奇异变形杆菌携带的bla_(CMY-2)位于染色体,其中,菌株CY12、CY32、S31和S52携带floR,菌株CY12和CY32携带qnrD。CY32的染色体同时含有SXT/R391型整合性接合元件(integrative and conjugative elements,ICEs)(ICEPmiJpn1)和PmGRI1共2种耐药基因岛。ICEs的可变区包含2个串联的复合型转座子(IS10构成),其中一个复合型转座子携带bla_(CMY-2);CY32的PmGRI1耐药岛含有12个耐药基因。与其他奇异变形杆菌携带的PmGRI1相比,多重耐药区差异最大的区域位于Tn21转座子。此外,CY32包含2个质粒,包括携带floR的IncQ质粒和携带qnrD的非接合质粒。奇异变形杆菌CY32携带15个耐药基因,呈现多重耐药的特性。【结论】奇异变形杆菌经基因岛和质粒获得多重耐药,使治疗奇异变形杆菌感染变得更加困难,应加强对动物源奇异变形杆菌耐药性监测。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 基因岛 整合性接合元件 C类头孢菌素酶 多重耐药
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奶牛乳房炎大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌三重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 朱安基 李世宏 +4 位作者 徐浩 杨亚军 白莉霞 李剑勇 许笑 《动物医学进展》 北大核心 2024年第12期19-25,共7页
为建立检测奶牛乳房炎主要革兰氏阴性致病菌的快速诊断方法,选择大肠埃希氏菌phoa基因,肺炎克雷伯菌rcsa基因以及奇异变形杆菌urer基因设计合成特异性引物与探针,建立了奶牛乳房炎大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌三重Taq Man... 为建立检测奶牛乳房炎主要革兰氏阴性致病菌的快速诊断方法,选择大肠埃希氏菌phoa基因,肺炎克雷伯菌rcsa基因以及奇异变形杆菌urer基因设计合成特异性引物与探针,建立了奶牛乳房炎大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌三重Taq Man荧光定量PCR检测方法。该方法可在120 min内通过一管反应体系特异性鉴定出3种常见的奶牛乳房炎革兰氏阴性致病菌,最低检测限可达1×10^(1)copies/μL且特异性和重复性良好,以此方法对80份奶牛乳房炎生乳样进行检测,大肠埃希氏菌检出率为35%(28/80),肺炎克雷伯菌检出率为21.2%(17/80),奇异变形杆菌检出率为11.2%(9/80)。结果表明,所建立的奶牛乳房炎大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌三重Taq Man荧光定量PCR检测方法具有操作简单、特异性强、灵敏度高的特点,适用于奶牛乳房炎的临床诊断,对革兰氏阴性致病菌的快速检测及合理用药具有指导意义。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 实时荧光定量PCR 大肠埃希氏菌 肺炎克雷伯菌 奇异变形杆菌
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兔源大肠杆菌、奇异变形杆菌和球虫混合感染及药物敏感性分析
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作者 王佳宁 张自强 +1 位作者 王帅帅 刘玉梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期4204-4212,共9页
旨在确定引起河南某规模化兔场病死兔发病的病原及其药物敏感性。本研究对河南某规模化兔场中病死兔进行剖检并采集3份病死兔病料组织,通过问诊,结合发病情况、临床表现、剖检变化、细菌的分离培养、生化试验、16S rRNA PCR鉴定、构建... 旨在确定引起河南某规模化兔场病死兔发病的病原及其药物敏感性。本研究对河南某规模化兔场中病死兔进行剖检并采集3份病死兔病料组织,通过问诊,结合发病情况、临床表现、剖检变化、细菌的分离培养、生化试验、16S rRNA PCR鉴定、构建系统进化树和药敏试验,确定引起该兔场发病的病原及其药物敏感性。结果显示,经细菌分离培养得到2株大小不等的革兰阴性短杆菌(分别命名为LY-01和LY-02株),其分别符合大肠杆菌和奇异变形杆菌的生化特性。经PCR鉴定发现,LY-01和LY-02的16S rRNA基因序列片段大小分别为833 bp和1500 bp。经同源比对分析发现LY-01与OR717622.1同源性为99.88%;LY-02与CP042907.1同源性为99.93%。经球虫检查发现,其粪便中存在大量球虫卵,其OPG值分别为0.64×10^(4)、0.62×10^(4)和0.68×10^(4),均达到肠球虫感染标准。药敏试验结果显示,分离得到的大肠杆菌和奇异变形杆菌同时对青霉素和头孢曲松敏感。综上,本研究为家兔养殖过程中大肠杆菌、奇异变形杆菌和球虫混合感染的防治提供了理论依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 奇异变形杆菌 球虫 分离鉴定 耐药性
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20味中药体外抑制奇异变形杆菌的研究
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作者 冯玉树 李贵琴 +2 位作者 李冰慧 李勤凡 王妍 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期67-71,共5页
为探讨诃子、薄荷、黄连等20味中药提取物对犊牛腹泻粪便样本中分离鉴定的奇异变形杆菌的抑制效果。用水煮法分别提取中药有效成分,通过微量二倍稀释法分别测定各中药提取物对奇异变形杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),用棋... 为探讨诃子、薄荷、黄连等20味中药提取物对犊牛腹泻粪便样本中分离鉴定的奇异变形杆菌的抑制效果。用水煮法分别提取中药有效成分,通过微量二倍稀释法分别测定各中药提取物对奇异变形杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),用棋盘法、时间杀菌-曲线绘制法测定中药提取物对奇异变形杆菌的联合抑菌效果。结果显示,诃子、薄荷、黄连、艾叶、金银花、知母、五倍子的抑菌效果明显,MIC值为3.9~62.5 mg/mL,MBC值为3.9~125 mg/mL;其中诃子与薄荷联用,表现协同作用;诃子和黄连、金银花、艾叶、五倍子联用,均表现相加作用;诃子和知母联用,表现无关作用。结果提示,诃子与不同中药组合能起到不同抑菌效果,为临床奇异变形杆菌引发的疾病治疗用药提供了参考。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 中药 联合抑菌 时间-杀菌曲线
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北京地区犬猫尿源奇异变形杆菌耐药性及生物被膜形成能力分析
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作者 陈玉娟 黄克斌 于咏兰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期39-45,共7页
为调查北京地区犬猫尿源奇异变形杆菌对临床常用抗菌药的耐药现状,并分析其对β-内酰胺类药物的主要耐药机制,本试验于2018—2019年采集北京地区16只犬和13只猫的符合菌尿标准的尿液样本,以及264株犬源和152株猫源尿液中未鉴定细菌分离... 为调查北京地区犬猫尿源奇异变形杆菌对临床常用抗菌药的耐药现状,并分析其对β-内酰胺类药物的主要耐药机制,本试验于2018—2019年采集北京地区16只犬和13只猫的符合菌尿标准的尿液样本,以及264株犬源和152株猫源尿液中未鉴定细菌分离株;分离鉴定奇异变形杆菌,检测其对临床常用的12种抗菌药的耐药性,并分析奇异变形杆菌携带β-内酰胺酶的情况和生物被膜形成能力。结果显示,共分离获得44株犬源(15.7%)和5株猫源(3.0%)奇异变形杆菌。奇异变形杆菌分离株对阿奇霉素和多西环素耐药率均为98.0%,对β-内酰胺类药物耐药率为6.1%~73.5%,多重耐药率为79.6%。28株分离株携带超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),阳性率为57.1%,主要基因型为bla TEM型、bla CTX-M-9型和bla OXA-1型;1株分离株携带头孢菌素酶(AmpC),基因型为bla CMY-2型。产ESBLs菌株对氨苄西林、氯霉素、头孢吡肟、头孢曲松和庆大霉素的耐药率显著高于非产ESBLs菌株的耐药率(P<0.05)。奇异变形杆菌分离株形成生物被膜阳性率为100%,其生物被膜形成能力强度与所选抗菌药的耐药性无明显相关性(P>0.05)。结果表明,北京地区犬猫尿源奇异变形杆菌耐药情况严重,携带ESBLs阳性率较高,形成生物被膜阳性率达100%,临床用药时可选择耐药率较低的阿莫西林克拉维酸进行治疗。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 尿源 耐药性 Β-内酰胺酶 生物被膜形成
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动物园禽源奇异变形杆菌对第三代头孢菌素的耐药分子机制
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作者 梁玉蕾 李垠树 +3 位作者 陈秋如 董焱斌 丁爱萍 苑丽 《野生动物学报》 北大核心 2024年第4期811-818,共8页
为研究观赏禽类中分离的奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)对第三代头孢菌素的耐药机制,于2019年从河南省某动物园禽类养殖区绿孔雀(Pavo muticus)、红绿金刚鹦鹉(Ara chloroptera)、火鸡(Meleagris gallopavo)、帽子鸡(polish chicken)... 为研究观赏禽类中分离的奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)对第三代头孢菌素的耐药机制,于2019年从河南省某动物园禽类养殖区绿孔雀(Pavo muticus)、红绿金刚鹦鹉(Ara chloroptera)、火鸡(Meleagris gallopavo)、帽子鸡(polish chicken)和非洲鸵鸟(Struthio camelus)5种观赏禽类中分离17株奇异变形杆菌,经药物敏感性试验、blaCTX-M基因检测、全基因组测序、PFGE和RT-qPCR等探明受试菌对第三代头孢菌素的耐药机制。结果发现:共有6株受试菌对第三代头孢菌素耐药,除1株(6D)携带超广谱β-内酰胺酶blaCTX-M-14和1株(106A)携带AmpC酶blaACT-16外,其余4株经PFGE检测证实为同一克隆型,且细菌体内双组分信号转导系统CpxAR、BaeSR和EnvZ/OmpR的表达量显著高于敏感菌,主要通过抑制耐药菌细胞膜上OmpC和OmpF的表达减少药物吸收,同时促进OmpW表达加速药物外排,从而减少菌体内药物浓度,进而导致其对第三代头孢菌素类耐药。研究表明,动物园禽类养殖区的奇异变形杆菌对第三代头孢菌素的耐药机制复杂多样,散播机制主要为染色体介导的克隆传播,应引起重视。 展开更多
关键词 禽源奇异变形杆菌 头孢菌素类 耐药基因 膜孔蛋白 双组分信号转导系统
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致羔羊肺炎奇异变形杆菌的分离鉴定及毒力性和耐药性分析
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作者 袁丽宁 马玉忠 +1 位作者 刘月 杨威 《北方牧业》 2024年第10期14-14,共1页
近年来,随着抗生素在生产中长期不规范使用,细菌耐药现象越来越严重。奇异变形杆菌属于肠杆菌科变形杆菌属的革兰氏阴性菌,对奇异变形杆菌感染羔羊并引起肺炎的相关报道较少。本研究对保定地区以肺炎为主要症状的患病羔羊进行剖检,采集... 近年来,随着抗生素在生产中长期不规范使用,细菌耐药现象越来越严重。奇异变形杆菌属于肠杆菌科变形杆菌属的革兰氏阴性菌,对奇异变形杆菌感染羔羊并引起肺炎的相关报道较少。本研究对保定地区以肺炎为主要症状的患病羔羊进行剖检,采集病变组织进行奇异变形杆菌的分离鉴定,并检测其致病性、耐药性及毒力基因和耐药基因的携带情况,以期为致羔羊肺炎性奇异变形杆菌的防控和治疗提供参考。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 毒力基因 耐药基因 变形杆菌 羔羊肺炎 病变组织 杆菌 保定地区
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1例奇异变形杆菌致鸡胚与雏鸡死亡的诊治
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作者 喻永福 史修远 +1 位作者 何成华 孙卫东 《现代畜牧科技》 2024年第10期102-105,共4页
鸡奇异变形杆菌病是由奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)引起的一种急性细菌性传染病,造成鸡胚死亡、卵黄感染,雏鸡死亡和生长发育不良。本研究对1家孵化场送检的死胚、弱雏进行临床检查、病理剖检和实验室的细菌分离和鉴定,对分离菌进... 鸡奇异变形杆菌病是由奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)引起的一种急性细菌性传染病,造成鸡胚死亡、卵黄感染,雏鸡死亡和生长发育不良。本研究对1家孵化场送检的死胚、弱雏进行临床检查、病理剖检和实验室的细菌分离和鉴定,对分离菌进行药敏试验。试验结果表明,共分离样品20份,其中9份样本阳性,检出率为45%。分离菌对新霉素敏感,对多西环素较为敏感,而对其他多种抗生素已经产生耐药性。由此可以看出,造成此次鸡胚和雏鸡死亡的主要原因是鸡奇异变形杆菌感染所致,这为养殖户在疾病防控上提供新的思路。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 鸡胚和雏鸡 诊治
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致仔猪腹泻奇异变形杆菌的分离鉴定与耐药性分析
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作者 何雯雯 《中国动物保健》 2024年第8期14-15,共2页
为了鉴定合肥地区规模化养殖场中引起16日龄仔猪腹泻死亡的病原,本试验从合肥地区规模化养殖场采集16日龄因腹泻死亡仔猪的肛拭子、血液及肝脏等病料组织共计3份,采用胶体金试纸条法分别检测猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、冠状病毒及猪流行... 为了鉴定合肥地区规模化养殖场中引起16日龄仔猪腹泻死亡的病原,本试验从合肥地区规模化养殖场采集16日龄因腹泻死亡仔猪的肛拭子、血液及肝脏等病料组织共计3份,采用胶体金试纸条法分别检测猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、冠状病毒及猪流行性腹泻病毒4种病毒性病原;采用分离培养、形态学观察、生化鉴定对病原菌进行鉴定,采用人工感染动物攻毒试验和K-B药敏纸片法分别测定致病菌株的致病性、毒力基因及耐药性。结果显示,从采集16日龄因腹泻死亡仔猪的肛拭子、血液及肝脏等病料组织中4种病毒性病原检测为阴性;分离得到1株奇异变形杆菌,并命名为SP-1株,它能引起小鼠死亡,其死亡率为60%;SP-1株对青霉素、阿莫西林、氨苄西林等6种抗菌药耐药性较高;对头孢噻呋、恩诺沙星等4种抗菌药物高度敏感,对大观霉素、氟苯尼考中敏。为该地区致仔猪腹泻奇异变形杆菌的流行病学调查和防控提供参考。 展开更多
关键词 仔猪 奇异变形杆菌 致病性 药敏试验
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奇异变形杆菌源外膜囊泡诱导小鼠巨噬细胞向M1型和M2b型极化
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作者 韦君志 刘师佳 +2 位作者 宗永泰 张红 覃尧 《热带生物学报》 2024年第4期445-451,共7页
为探究条件致病菌奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)分泌的细菌外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是否具备诱导巨噬细胞极化以调控肿瘤微环境的功能,本研究以该OMVs刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7,检测巨噬细胞极化相关表型。首先,利用... 为探究条件致病菌奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)分泌的细菌外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是否具备诱导巨噬细胞极化以调控肿瘤微环境的功能,本研究以该OMVs刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7,检测巨噬细胞极化相关表型。首先,利用透射电镜对分离提取的OMVs进行表征;其次,用PKH67荧光染料示踪OMVs,通过荧光显微镜观察RAW264.7细胞对OMVs的摄取情况;最后,利用总一氧化氮(NO)检测试剂盒和实时荧光定量PCR (RT-qPCR),分别对RAW264.7细胞分泌的总NO含量和RAW264.7细胞极化相关因子表达进行检测。结果表明,OMVs可被RAW264.7细胞摄取并诱导该细胞NO分泌增多,同时上调IL-10、IL-1β、TNF-α和IL-6的表达,即发生M1型和M2b型极化,从而激活巨噬细胞的抗肿瘤活性。上述结果表明奇异变形杆菌分泌的OMVs在该菌抗乳腺肿瘤生长和肺脏转移中发挥潜在作用。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 细菌外膜囊泡 巨噬细胞
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狐狸奇异变形杆菌的分离与鉴定 被引量:41
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作者 段二珍 夏平安 +4 位作者 张凤华 卢高峰 党占国 李伟娟 崔保安 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1050-1054,共5页
无菌采取病死狐狸内脏,用LB液体培养基和麦康凯琼脂平板培养,分离到1株细菌,通过对该菌的形态特征、培养特性、生化特性进行分析,初步鉴定为变形杆菌。用PCR方法扩增该分离菌株的16 SrRNA基因,结果获得大小为1 539 bp的DNA片段(已登录Ge... 无菌采取病死狐狸内脏,用LB液体培养基和麦康凯琼脂平板培养,分离到1株细菌,通过对该菌的形态特征、培养特性、生化特性进行分析,初步鉴定为变形杆菌。用PCR方法扩增该分离菌株的16 SrRNA基因,结果获得大小为1 539 bp的DNA片段(已登录GenBank,登录号EU643833)。经BLAST分析,结果表明,该分离株的16 S rRNA基因核苷酸序列与GenBank上登录的奇异变形杆菌分离株(AY820623、EF091150)的同源性为99.7%,证实该分离菌株为狐狸奇异变形杆菌,并命名为HU/08。致病性试验证明,该分离菌株对小白鼠有高致病性;毒素测定试验证明,该分离菌培养液的无菌滤液对小白鼠无毒性作用。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 分离鉴定 16 S RRNA
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貂奇异变形杆菌的分离及其生物学鉴定 被引量:27
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作者 史同瑞 李丹 +5 位作者 刘宇 王岩 王爽 吴博 王志强 李阳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期817-820,共4页
为分离貂奇异变形杆菌(P.mirabilis)并鉴定其生物学特性,本研究从临床病死貂的肝脏样品中分离出一株细菌,通过生物学特性检验及16SrRNA基因比对对该分离株进行鉴定。其中,应用PCR方法扩增出1504bp的16SrRNA基因片段。经BLAST比对... 为分离貂奇异变形杆菌(P.mirabilis)并鉴定其生物学特性,本研究从临床病死貂的肝脏样品中分离出一株细菌,通过生物学特性检验及16SrRNA基因比对对该分离株进行鉴定。其中,应用PCR方法扩增出1504bp的16SrRNA基因片段。经BLAST比对分析表明,与其同源性最高的均为P.mirabilis各株系的16SrRNA序列,同源性均高达98%以上。通过系统进化树分析表明,该分离菌株与10株参考菌的同源性为98.9%~99.9%,其中与HQ259932同源性最高(99.9%),检验结果表明,该分离菌为貂P.mirabilis。以0.2mL/只(3.2×10-9 cfu/mL)菌液的剂量接种小白鼠,其发病率为100%,死亡率为60%,表明分离菌具有较强致病性。免疫保护性实验表明分离菌具有良好的免疫原性。此外,该分离菌株对头孢哌酮钠、卡那霉素、链霉素和阿米卡星敏感,对氧氟沙星、红霉素、恩诺沙星和阿莫西林等药物具有一定的耐药性。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 分离鉴定 生物学特性
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大黄鱼溃烂症的一种致病菌——奇异变形杆菌ZXS02菌株 被引量:15
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作者 张庆华 熊清明 +2 位作者 肖琳琳 杨灏 杨先乐 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期824-830,共7页
从浙江象山网箱养殖的患体表溃烂症的大黄鱼(Pseudosciaena crocea)身上分离到7株细菌,人工感染试验表明分离菌株ZXS01、ZXS02、ZXS07为致病菌。常规生理生化测试表明,ZXS02菌株具有变形杆菌属(Proteus)的特征。为了进一步明确菌株ZXS0... 从浙江象山网箱养殖的患体表溃烂症的大黄鱼(Pseudosciaena crocea)身上分离到7株细菌,人工感染试验表明分离菌株ZXS01、ZXS02、ZXS07为致病菌。常规生理生化测试表明,ZXS02菌株具有变形杆菌属(Proteus)的特征。为了进一步明确菌株ZXS02的分类学地位,测定其16S rRNA基因序列的1495个碱基,分析相关细菌相应序列的同源性,构建系统发生树,结果表明菌株ZXS02与奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)的同源性可达99.0%。用Sensitire细菌鉴定系统对其进行验证,测试结果表明与奇异变形杆菌的相似性达99.96%。综合上述结果,可鉴定菌株ZXS02为奇异变形杆菌。同时该菌株的药敏试验、对盐度、温度的耐受性试验表明其对氯霉素等4种药物敏感,37℃、盐度20生长最适。 展开更多
关键词 大黄鱼 体表溃烂症 16S RRNA基因 电泳 PCR扩增 奇异变形杆菌
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禽源奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶基因的分子特征 被引量:10
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作者 潘玉善 苑丽 +4 位作者 吴华 刘建华 刘珍珍 赵宜双 胡功政 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1463-1469,共7页
【目的】研究禽源奇异变形杆菌携带超广谱β-内胺酰酶基因的亚型和blaCTX-M基因的上下游环境。【方法】对分离、鉴定的奇异变形杆菌进行药物敏感性试验、ESBLs产酶确证试验、耐药基因检测和接合试验;利用PCR定位技术(PCR mapping)分析bl... 【目的】研究禽源奇异变形杆菌携带超广谱β-内胺酰酶基因的亚型和blaCTX-M基因的上下游环境。【方法】对分离、鉴定的奇异变形杆菌进行药物敏感性试验、ESBLs产酶确证试验、耐药基因检测和接合试验;利用PCR定位技术(PCR mapping)分析blaCTX-M的基因环境。【结果】ESBLs确证试验表明,21株禽源奇异变形杆菌有10株是阳性表型。PCR扩增和测序结果表明,最常见的ESBL基因是blaCTX-M-14(n=6),blaOXA-1(n=6),其次是blaCTX-M-65(n=4),同时也检测到了blaOXA-10(n=1),没有检测到blaSHV。序列分析表明,禽源奇异变形杆菌携带blaCTX-M的上游普遍存在ISEcp1B,下游均为IS903D。【结论】首次在禽源奇异变形杆菌中检测到了blaCTX-M-65,CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因在禽源奇异变形杆菌中已不在少见。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 ESBLS blaCTX-M 插入序列元件 家禽
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水貂奇异变形杆菌的分离鉴定及16SrRNA基因序列分析 被引量:18
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作者 王建科 程悦宁 +4 位作者 易立 赵航 林鹏 仝明薇 程世鹏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期852-858,共7页
从辽宁某貂场发病水貂中分离到1株致病菌,命名为PMSD株,通过形态学观察和生化试验等常规鉴定发现符合奇异变形杆菌特性,进一步经VITEK 2 Compact30全自动细菌鉴定及药敏分析系统鉴定该株细菌为奇异变形杆菌。药敏试验结果显示PMSD株... 从辽宁某貂场发病水貂中分离到1株致病菌,命名为PMSD株,通过形态学观察和生化试验等常规鉴定发现符合奇异变形杆菌特性,进一步经VITEK 2 Compact30全自动细菌鉴定及药敏分析系统鉴定该株细菌为奇异变形杆菌。药敏试验结果显示PMSD株对氨基糖苷类药物、喹诺酮类药物等敏感,而对p内酰胺类药物和磺胺类药物等不敏感。以细菌16SrRNA基因为模板应用通用引物进行PCR扩增,得到PMSD株的16SrRNA基因序列,长约1504bp,提交到GenBank中,登录号:KM229530。将该序列与GenBank中序列进行BLAST比对,结果发现与其匹配度最高的均是奇异变形杆菌各株系的16SrRNA序列,均高达99%以上。选取其中前20株作为参考序列,运用生物学软件构建系统发育树并进行同源性比对,结果表明,分离菌PMSD株与20个代表菌株的同源性为98.9%~99.7%,其中与BB2000株、H14320株、B1株和FCC141株同源性最高,为99.7%。本研究为预防和控制奇异变形杆菌引起的水貂疾病奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 水貂 奇异变形杆菌 分离鉴定 16S RRNA
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珍禽源奇异变形杆菌分离株微生物学特征研究 被引量:17
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作者 谌南辉 邓舜洲 +4 位作者 郭松林 朱芝秀 张锦华 李彦萍 谌澄光 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第4期241-245,共5页
从一起以眼炎、呼吸道症状及腹泻为主症的美国七彩山鸡、白颈长尾雉所分离的17 株奇异变形杆菌,其培养性状及生化特性基本一致, 均表现出特有的迁徒生长现象。16 株菌对3 种敏感药物 C F P、 A K N、 G E N 的药敏试验... 从一起以眼炎、呼吸道症状及腹泻为主症的美国七彩山鸡、白颈长尾雉所分离的17 株奇异变形杆菌,其培养性状及生化特性基本一致, 均表现出特有的迁徒生长现象。16 株菌对3 种敏感药物 C F P、 A K N、 G E N 的药敏试验经方差分析, 菌株间差异不显著, 对 C F P 一致显示双抑菌环现象。经系统聚类分析, 可细分为4 个类型。另外, 均对 C M P、 O X A、 S X T、 E P Y、 V A N、 T E T 六种抗生素耐药。由拮抗试验, 可将17 株菌划分4 个 Dienes型。通过动物回归试验, 分离株对小鼠有较强的致死性作用, 雏伊莎公鸡人工造病成功, 并从死亡例中回收到相应细菌。 展开更多
关键词 白颈长尾雉 七彩山鸡 奇异变形杆菌 微生物学
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猪源奇异变形杆菌的分离鉴定及集群运动分析 被引量:25
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作者 赵振鹏 杨振 +5 位作者 林伟东 于恩琪 李玉 张笛 秦爱建 金文杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期219-224,共6页
本试验从发病猪肝脏中分离到1株细菌,经革兰氏染色镜检、生化试验、药敏分析、16SrDNA测序,确认该菌为1株多重耐药奇异变形杆菌。该菌与GenBank中其他9株不同来源的奇异变形杆菌进行16SrDNA比对分析,从遗传进化规律方面证明不同来源的... 本试验从发病猪肝脏中分离到1株细菌,经革兰氏染色镜检、生化试验、药敏分析、16SrDNA测序,确认该菌为1株多重耐药奇异变形杆菌。该菌与GenBank中其他9株不同来源的奇异变形杆菌进行16SrDNA比对分析,从遗传进化规律方面证明不同来源的的奇异变形杆菌亲缘性极其相近。周期性群集运动分析结果表明在含0.5%和1.0%琼脂平板上,该菌不以圆环样周期运动;在含1.5%和2.0%琼脂平板上,该菌以圆环样周期运动。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 分离鉴定 周期性群集运动
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