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预防血管成形术后再狭窄的C-sis反义寡脱氧核苷酸在血清中的稳定性 被引量:1
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作者 杨敏 唐其东 +1 位作者 蔡立丰 林曙光 《岭南心血管病杂志》 1999年第3期208-209,179,共3页
目的 探讨自行设计合成的C-sis癌基因反义寡脱氧核苷酸(AODN)和C-sis癌基因反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(PS-AODN)血清稳定性。方法 用小牛血清模拟体内条件于不同时相点进行稳定性试验,用高效液相色谱法测定血清中AODN和FS-ODN。结果 AOD... 目的 探讨自行设计合成的C-sis癌基因反义寡脱氧核苷酸(AODN)和C-sis癌基因反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(PS-AODN)血清稳定性。方法 用小牛血清模拟体内条件于不同时相点进行稳定性试验,用高效液相色谱法测定血清中AODN和FS-ODN。结果 AODN在血清中1小时内降解43.3%,1天降解53.1%。PS-ODN 1 h降解23.7%,第6天降解59.6%。PS-AODN血清中的稳定性明显高于AODN。结论 PS-AODN在血清中有较好的稳定性,提示其具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 反义寡脱氧核苷酸 硫代磷反义寡脱氧核苷酸 稳定性 C-sis原癌基因
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高效液相色谱法测定C-sis硫代磷酸反义寡脱氧核苷酸血清浓度
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作者 杨敏 蔡立丰 +1 位作者 唐其东 余细勇 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期778-780,共3页
目的 :建立C sis硫代磷酸反义寡脱氧核苷酸 (C sisPS AODN)血清浓度测定的HPLC法。方法 :采用醋酸缓冲液 乙腈 水 (3∶9∶88)流动相 ,氰基色谱柱 ,采用乙腈沉淀的样品处理方法。结果 :C sisPS AODN在 1 9.6~31 4 .0 μg·mL- 1 血... 目的 :建立C sis硫代磷酸反义寡脱氧核苷酸 (C sisPS AODN)血清浓度测定的HPLC法。方法 :采用醋酸缓冲液 乙腈 水 (3∶9∶88)流动相 ,氰基色谱柱 ,采用乙腈沉淀的样品处理方法。结果 :C sisPS AODN在 1 9.6~31 4 .0 μg·mL- 1 血清浓度范围内线性良好 ,r =0 .9998,回收率为 (97.9± 3 .3) % ,日内和日间变异系数均在 1 .4%~8.2 %范围内。结论 :本方法适用于C sisPS AODN体内。 展开更多
关键词 反义寡脱氧核苷酸 硫代磷反义寡脱氧核苷酸 高效液相色谱法
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利用小鼠模型评价含有5'-GTCGTT-3'特征序列的人CpG寡脱氧核苷酸的免疫刺激活性 被引量:12
3
作者 许洪林 王四清 +3 位作者 王世峰 郭斐 陆柔剑 阮力 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期43-47,共5页
为了寻找合适的动物模型来评价人CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)的活性 ,研究了CpG2 0 0 6等含有 5 ' GTCGTT 3'特征序列的人CpG ODN对小鼠的免疫刺激活性。在体外它们能够促进小鼠脾淋巴细胞转化 ,促进B细胞分泌IgM ,但不能诱生高... 为了寻找合适的动物模型来评价人CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)的活性 ,研究了CpG2 0 0 6等含有 5 ' GTCGTT 3'特征序列的人CpG ODN对小鼠的免疫刺激活性。在体外它们能够促进小鼠脾淋巴细胞转化 ,促进B细胞分泌IgM ,但不能诱生高水平的IFN γ。研究了CpG2 0 0 6等序列在体内作为疫苗佐剂对HBsAg免疫效果的影响 ,发现 :(1)人CpG ODN能够明显提高抗 HBs抗体水平 ,并逆转Al(OH) 3 对Thl类免疫应答的抑制 ;(2 )初免时以CpG2 0 0 6为佐剂可以使免疫应答“锁定”在Thl类免疫应答 ,而加强免疫时以CpG2 0 0 6为佐剂可以在一定程度上逆转初免时Al(OH) 3 诱生的Th2类免疫应答 ;(3)CpG2 0 0 6联合Al(OH) 3 作为佐剂的单剂量疫苗的免疫效果强于两剂量以Al(OH) 3 为佐剂的常规疫苗。上述结果表明 :小鼠可以作为动物模型用于含有 5 ' GTCGTT 3'特征序列的人CpG ODN免疫效果的研究。 展开更多
关键词 CPG寡脱氧核苷酸 HBSAG TH1/TH2免疫应答 小鼠模型 免疫刺激活性 特征序列
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体外筛选对鸡具有免疫刺激活性的CpG寡脱氧核苷酸 被引量:8
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作者 朱鸿飞 朱建中 +4 位作者 李光富 卢春 邵国青 范红结 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期83-86,共4页
分别用有丝分裂原和CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对SPF鸡全血 ,经低速离心分离的外周血单个核细胞(PBMC)和脾脏细胞 ,用淋巴细胞分离液分离的PBMC和脾脏细胞进行刺激 ,用3 H TdR掺入法测定并比较上述鸡免疫细胞在不同培养温度和细胞浓度下... 分别用有丝分裂原和CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对SPF鸡全血 ,经低速离心分离的外周血单个核细胞(PBMC)和脾脏细胞 ,用淋巴细胞分离液分离的PBMC和脾脏细胞进行刺激 ,用3 H TdR掺入法测定并比较上述鸡免疫细胞在不同培养温度和细胞浓度下的转化效果 ,从而建立了适用于大批量筛选对鸡具有免疫刺激活性CpGODN的淋巴细胞转化方法。进一步用该方法筛选自行设计合成的 38条ODN。结果表明 ,用低速离心法分离的鸡PBMC ,在细胞含量为10 7mL-1、 37℃、 5 %CO2 条件下 ,经CpGODN刺激 6 4~ 6 6h后 ,可以得到稳定的高效转化 ;不含CpG模体的ODN不具有免疫刺激活性 ;CpGODN 10、 11和 14具有最佳的免疫刺激活性 ,刺激指数大于 10。 展开更多
关键词 CPG寡脱氧核苷酸 CpG模体 淋巴细胞转化 免疫刺激活性
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PDE5基因反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞cNMP的影响 被引量:8
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作者 白文俊 侯树坤 +5 位作者 王晓峰 闫征 何培英 邓庆平 胡小朋 管考鹏 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期88-91,共4页
目的 :观察PDE5基因反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞内cAMP和cGMP的影响 ,为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验依据。 方法 :将PDE5基因反义寡脱氧核苷酸 (含第 1外显子部分序列 )与脂质转染试剂DOTAP共同转染人阴... 目的 :观察PDE5基因反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞内cAMP和cGMP的影响 ,为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验依据。 方法 :将PDE5基因反义寡脱氧核苷酸 (含第 1外显子部分序列 )与脂质转染试剂DOTAP共同转染人阴茎海绵体平滑肌原代细胞 ,以酶联免疫法分别检测转染后不同时间 (1~ 4 8h)海绵体平滑肌细胞内cAMP和cGMP的浓度变化 ,观察反义寡脱氧核苷酸对平滑肌细胞内cNMP的影响。 结果 :转染后 ,反义实验组平滑肌原代细胞内cGMP水平 (1~ 6h)显著高于对照组 (P <0 .0 1)。 结论 :PDE5基因反义寡脱氧核苷酸可以增加人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP水平 ,本研究有助于了解PDE5基因与cNMP在阴茎勃起中的作用 ,并为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验基础。 展开更多
关键词 反义寡脱氧核苷酸 细胞转染 海绵体平滑肌细胞 环磷核苷
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CpG寡脱氧核苷酸对慢性哮喘小鼠模型气道炎症的预防作用 被引量:4
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作者 金美玲 揭志军 +3 位作者 蔡映云 袁正宏 胡芸文 任涛 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期358-363,共6页
目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤(CpG)寡脱氧核苷酸(CpG-oligodeoxynueleotides,CpG- ODN)能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL/6小鼠随机均分为4组,A组(慢性哮喘组)、B组(CpG-ODN干预组)和C组(GpC-... 目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤(CpG)寡脱氧核苷酸(CpG-oligodeoxynueleotides,CpG- ODN)能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL/6小鼠随机均分为4组,A组(慢性哮喘组)、B组(CpG-ODN干预组)和C组(GpC-ODN对照组)分别腹腔注射卵蛋白致敏,然后用卵蛋白雾化吸入激发以制作慢性哮喘模型,D组(生理盐水对照组)用生理盐水进行致敏和激发。B组在致敏同时(d1, d14)和激发阶段(每2周1次)分别给予60μg/mLCpG-ODN腹腔注射,共6次。C组将CpG替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶(GpC)作为对照。在末次激发24 h后,取血测嗜酸粒细胞(eosinophil,EOS)数,血清IgE、IgG1和IgG2α;收集支气管肺泡灌洗液(bronehoalveolar lavage fluid,BALF)作细胞分类计数;测定肺组织中白介素-4 (interleukin-4,IL-4)、白介素-13(interleukin-13,IL-13)和γ-干扰素的mRNA(interferon-γ,IFN-γ)表达量;以及肺组织病理学检查。结果A组外周血EOS数[(89±10)×104/mL]、血清IgE值[(279±53)ng/mL)、IgG1(A值2.151±0.628)、IgG2α(A值0.772±0.245)、BALF中EPS(6.3±1.3)]×105/mL)及百分比[(18.1±3.0)%]较D组明显增高(P<0.01);且肺组织中IL-4、IL-13和IFN-γ等细胞因子mRNA表达量[(分别为(5.72±3.89)×10-2、(9.45±5.91)×10-2和(3.23±1.69)×10-2)]也明显高于D组(P<0.05)。用CpG-ODN干预后(B组),除IgG2α(A值1.186±0.414)和IFNγmRNA表达量[(18.91±9.85)×10-2]增高外(P<0.05),其余指标均低于A组(P<0.05)。C组的上述各指标与A组相比差异均无显著性(P>0.05)。结论CpG- ODN对小剂量OVA反复激发所致的慢性气道炎症有一定的预防作用。 展开更多
关键词 慢性哮喘 气道炎症 CpG-寡脱氧核苷酸 小鼠
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超顺磁性氧化铁标记反义寡脱氧核苷酸探针在转染细胞磁共振成像中的应用 被引量:4
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作者 文明 李必波 +3 位作者 欧阳羽 蒋明东 罗弋 李少林 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期554-558,I0001,共6页
目的制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针,探讨其应用于转染细胞磁共振(MR)成像的可行性。方法采用化学交联法将SPIO标记于c-erbB2癌基因的ASODN制成ASODN探针,原子力显微镜检测探针形态,高效液相凝胶色谱法检... 目的制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针,探讨其应用于转染细胞磁共振(MR)成像的可行性。方法采用化学交联法将SPIO标记于c-erbB2癌基因的ASODN制成ASODN探针,原子力显微镜检测探针形态,高效液相凝胶色谱法检测联接率和生物活性,聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测稳定性。将ASODN探针转染高表达c-erbB2癌基因的SK-Br3肿瘤细胞株,普鲁士蓝染色后于光学显微镜下观察细胞内铁分布,原子吸收光谱法测定细胞内铁含量,MR扫描观察细胞信号强度变化情况。结果制备的ASODN探针近似球形,粒径在25~40nm间,分散均匀,联接率为100%,仍保持原有生物活性,稳定性好。转染ASODN探针后的SK-Br3细胞胞浆内可见多少不等的蓝色铁颗粒,细胞内铁含量明显高于未转染ASODN探针的其他各组细胞(P均<0.01);MR扫描显示其信号强度最弱,信噪比值明显低于其他各组细胞(P均<0.05)。结论成功制备SPIO标记ASODN探针,该探针能有效进入SK-Br3细胞内,明显降低MR扫描下的转染细胞信号强度。 展开更多
关键词 磁共振成像 超顺磁氧化铁 反义寡脱氧核苷酸 靶向对比剂
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EGFR反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段调节人肝癌细胞中E-cadherin mRNA表达的研究 被引量:4
8
作者 高艳景 袁孟彪 +2 位作者 辛华 王茜 邵洪莲 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期255-257,共3页
目的:研究表皮生长因子受体( epidermal growth factor receptor, EGFR)反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段对人肝癌细胞 E-cadherin基因表达调节。方法:应用逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)方法。以 HPRT(hypoxanthine phosphoribosyltr... 目的:研究表皮生长因子受体( epidermal growth factor receptor, EGFR)反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段对人肝癌细胞 E-cadherin基因表达调节。方法:应用逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)方法。以 HPRT(hypoxanthine phosphoribosyltransferase)为内标,分析 3.2μ mol/L浓度的 EGFR反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段在作用 84 h时对人肝癌细胞基因 E-cadherin mRNA表达水平的影响。结果: EGFR反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段有明显的刺激人肝癌细胞表达 E-cadherin的作用,与正常对照组相比,其 E-cadherin mRNA表达水平增高约 66.36%( P< 0.05)。结论: EGFR反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段是人肝癌细胞表达 E-cadherin基因的调节剂,能刺激人肝癌细胞 E-cadherin基因的表达 ;本研究为预防和治疗肝癌的侵袭转移提供了新的途径和方法。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 硫代磷寡脱氧核苷酸 钙粘蛋白 肝癌细胞 逆转录聚合酶链反应 MRNA E-CADHERIN
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反义bcl-2硫代磷酸寡脱氧核苷酸对小细胞肺癌细胞株NCI-H446的抑制作用及诱导细胞凋亡的研究 被引量:5
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作者 陈鑫基 胡建达 +1 位作者 战榕 吕联煌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期374-378,共5页
目的 :观察反义bcl- 2硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (AS -PS -ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6mRNA、蛋白以及增殖、活力和凋亡的影响。方法 :合成bcl- 2AS -PS -ODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6,半定量RT -PCR检测bcl- 2mRNA表达 ;免疫... 目的 :观察反义bcl- 2硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (AS -PS -ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6mRNA、蛋白以及增殖、活力和凋亡的影响。方法 :合成bcl- 2AS -PS -ODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6,半定量RT -PCR检测bcl- 2mRNA表达 ;免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测Bcl- 2蛋白表达 ;通过克隆形成率、细胞计数、流式细胞仪DNA倍体分析、TUNEL等指标观察bcl- 2AS -PS -ODN对细胞增殖、活力和凋亡的影响。结果 :①bcl- 2AS -PS -ODN能特异性地降低NCI-H44 6细胞bcl- 2mRNA和Bcl- 2蛋白的表达。 1μmol/LAS -PS-ODN作用 2 4h后bcl- 2mRNA表达量下降 69 5 % ,48h后Bcl- 2蛋白下降 62 7%。②bcl- 2AS -PS -ODN能够抑制细胞增殖和活力 ,诱导细胞凋亡 ,1μmol/LAS -PS -ODN作用 2 4h后 ,细胞凋亡率约为 2 2 3 % - 3 2 7%。 结论 :bcl- 2AS -PS -ODN能够特异性降低bcl- 2mRNA、蛋白表达 ,抑制NCI-H44 6细胞的增殖和活力 。 展开更多
关键词 硫代磷寡脱氧核苷酸 小细胞 肺癌细胞株 NCI-H446 BCL-2 细胞凋亡
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CpG寡脱氧核苷酸增强免疫抑制小鼠对乙肝疫苗的免疫应答(英文) 被引量:4
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作者 秦卫兵 蒋建伟 +4 位作者 杨宁 陈巧儿 王一峰 韦相才 欧汝强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期647-650,共4页
目的 :探讨CpG寡脱氧核苷酸 (ODN)增强免疫抑制小鼠对乙肝疫苗的免疫应答效果。方法 :选用环磷酰胺 (CTX)所致免疫抑制模型小鼠 ,以乙肝疫苗和 2 0 μgCpGODN联合或单独左胫前肌肌注免疫C5 7BL/6小鼠。 2wk后以同样剂量加强免疫 1次 ,再... 目的 :探讨CpG寡脱氧核苷酸 (ODN)增强免疫抑制小鼠对乙肝疫苗的免疫应答效果。方法 :选用环磷酰胺 (CTX)所致免疫抑制模型小鼠 ,以乙肝疫苗和 2 0 μgCpGODN联合或单独左胫前肌肌注免疫C5 7BL/6小鼠。 2wk后以同样剂量加强免疫 1次 ,再过 3wk后摘除眼球取血 ,用ELISA法检测抗 HBsIgG抗体和IL 12的水平。同时 ,无菌取脾脏做HE染色 ,观察脾脏淋巴细胞的数量和细胞核的变化。结果 :CpGODN与疫苗联合注射组产生的绝对抗体量比单独注射疫苗组提高 1倍 ;注射组产生IL 12的水平较单独注射疫苗组也有明显升高。光镜下各组脾脏淋巴细胞的变化如下 :正常对照组脾脏可见大量的淋巴细胞 ;与正常对照组相比较 ,CTX组的淋巴细胞明显稀少 ;而CTX加CpG组的淋巴细胞数明显增多 ,细胞核也明显增大。结论 展开更多
关键词 CPG寡脱氧核苷酸 免疫抑制小鼠 佐剂作用
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STAT 5诱杀寡脱氧核苷酸对K 562细胞裸鼠致瘤能力的影响 被引量:3
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作者 王小中 冯文莉 +6 位作者 曾建明 史梅 白卫君 赵世巧 曹唯希 涂植光 黄宗干 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期935-938,共4页
目的:通过动物实验,研究裸鼠信号转导及转录活化蛋白5(signal transducer and activator of transcription5,STAT5)诱杀寡脱氧核苷酸(decoy oligodeoxynucleotide,Decoy ODN)的抑瘤作用。方法:采用皮下注射的方法建立K562细胞裸鼠移植... 目的:通过动物实验,研究裸鼠信号转导及转录活化蛋白5(signal transducer and activator of transcription5,STAT5)诱杀寡脱氧核苷酸(decoy oligodeoxynucleotide,Decoy ODN)的抑瘤作用。方法:采用皮下注射的方法建立K562细胞裸鼠移植瘤模型,瘤体内注射脂质体-ODN混合物,观察裸鼠生长状况、瘤体大小等。分别采用反转录-聚合酶链反应(reverse tran-scription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western印迹法检测瘤组织中bcl-xL、cyclin D1和c-myc的mRNA和蛋白表达水平的改变情况。结果:经Decoy ODN处理抑制了K562细胞对裸鼠的致瘤能力,瘤体积和质量明显小于突变ODN组[MutantODN组瘤重(0.93±0.22)gvsDecoy ODN组瘤重(0.485±0.178)g,P<0.05],肿瘤生长抑制率达47.7%。RT-PCR、Western印迹检测结果显示bcl-xL、cyclin D1和c-myc的mRNA和蛋白表达水平下调。结论:转录因子诱杀策略可以有效地在移植瘤裸鼠模型体内阻断STAT5靶基因的表达。 展开更多
关键词 白血病 髓样 慢性 STAT5转录因子 诱杀寡脱氧核苷酸 结合 竞争性 小鼠
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反义c-myc寡脱氧核苷酸对血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响 被引量:4
12
作者 马雅銮 高天祥 +3 位作者 王家宁 祁雅慧 殷红 冯桂芬 《首都医科大学学报》 CAS 1998年第3期205-208,共4页
为研究硫代磷酸修饰的反义cmyc寡脱氧核苷酸(ODN)对血管平滑肌细胞(SMC)的增殖、迁移及凋亡的影响。应用脂质体分别介导硫代磷酸修饰的反义cmycODN、正义cmycODN和错配cmycODN进入体外培养... 为研究硫代磷酸修饰的反义cmyc寡脱氧核苷酸(ODN)对血管平滑肌细胞(SMC)的增殖、迁移及凋亡的影响。应用脂质体分别介导硫代磷酸修饰的反义cmycODN、正义cmycODN和错配cmycODN进入体外培养的大鼠主动脉SMC内,观察其对SMC细胞cmyc表达、增殖、迁移和凋亡的影响。结果:①反义ODN降低cmyc蛋白的表达。②反义cmycODN抑制SMC增殖、迁移,并诱导SMC凋亡。而正义ODN及错配ODN则无上述作用。结果提示:应用反义技术抑制cmyc表达在防治经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)术后再狭窄中具有潜在作用。 展开更多
关键词 C-MYC 平滑肌细胞 增殖 迁移 凋亡 寡脱氧核苷酸
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反义bcl-2寡脱氧核苷酸对U937细胞增殖和存活能力的影响 被引量:5
13
作者 何凤田 黄云辉 朱锡华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期91-93,共3页
本实验观察了与人类bcl-2mRNA翻译起始部位相互补的硫代反义bcl-2寡脱氧核苷酸(AS-sODN)对U937细胞增殖和存活能力的影响,结果表明:一定浓度的AS-sODN可明显抑制细胞Bcl-2蛋白的表达,但对细... 本实验观察了与人类bcl-2mRNA翻译起始部位相互补的硫代反义bcl-2寡脱氧核苷酸(AS-sODN)对U937细胞增殖和存活能力的影响,结果表明:一定浓度的AS-sODN可明显抑制细胞Bcl-2蛋白的表达,但对细胞增殖和存活能力无明显影响。 展开更多
关键词 BCL-2 反义 寡脱氧核苷酸 U937细胞
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血管内皮生长因子反义寡脱氧核苷酸联合血管生成素-1对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜血管渗漏及新生血管生成的影响 被引量:8
14
作者 曾莉 常以力 邵毅 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第10期905-908,共4页
目的观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)反义寡脱氧核苷酸(ASODN)联合血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)大鼠视网膜血管渗漏及新生血管生成的影响。方法选取健... 目的观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)反义寡脱氧核苷酸(ASODN)联合血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)大鼠视网膜血管渗漏及新生血管生成的影响。方法选取健康雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组(A组)5只和糖尿病组55只,糖尿病组通过链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型成功后再饲养3个月行眼底荧光血管造影检查,确定DR大鼠模型且视网膜病变程度相仿的大鼠,随机抽取45只分为DR对照组(B组,5只)、PBS缓冲液对照组(C组,10只)、VEGFASODN干预组(D组,10只)、Ang-1干预组(E组,10只)、联合干预组(F组,10只)。C组玻璃体内注射PBS缓冲液5μL;D组玻璃体内注射浓度为100μmol·L-1VEGFASODN5μL;E组玻璃体内注射浓度为160mg·L-1Ang-15μL;F组玻璃体内注射100μmol·L-1VEGFASODN及160mg·L-1Ang-1各5μL;3d后再次行上述操作。各组大鼠行眼底荧光血管造影检查,对比观察不同组别大鼠视网膜血管渗漏情况,病理组织切片光学显微镜下突破内界膜的观察视网膜新生血管芽细胞核数。结果 A、B、C、D、E和F组视网膜新生血管渗漏面积分别为0、(20.98±1.14)mm2、(21.47±1.65)mm2、(14.60±1.55)mm2、(13.80±1.19)mm2、(10.81±1.35)mm2;D、E、F组新生血管渗漏面积低于B、C组,差异有统计学意义(F=103.99,P<0.05);F组渗漏面积低于D、E组,差异有统计学意义(F=190.94,P<0.05);B组与C组之间差异无统计学意义(t=0.22,P>0.05)。A、B、C、D、E和F组突破内界膜的新生血管芽细胞核数分别为(1.13±0.31)个、(80.31±5.21)个、(81.08±2.57)个、(37.37±3.41)个、(41.07±2.09)个、(14.41±1.23)个;D、E、F组突破内界膜的血管芽细胞核数均低于B、C组,差异有统计学意义(F=1339.41,P<0.05);F组突破内界膜的血管芽细胞核数低于D、E组,差异有统计学意义(F=714.91,P<0.05);B组与C组之间差异无统计学意义(t=0.35,P>0.05)。结论 VEGF ASODN联合Ang-1玻璃体内注射能明显抑DR大鼠视网膜新生血管的生成,减少视网膜血管渗漏。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 血管内皮生长因子 反义寡脱氧核苷酸 血管生成素-1
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CpG基序的寡脱氧核苷酸对人轮状病毒乳鼠腹泻模型的保护作用 被引量:3
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作者 徐志伟 李孟荣 +2 位作者 陈益平 石海矾 狄军波 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第9期1010-1016,共7页
目的:探讨含CpG基序的寡脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)干预对人轮状病毒(human rotavirus,HRV)感染乳鼠的保护作用机制。方法:64只ICR乳鼠随母鼠按窝随机均分为4组:正常对照组、HRV感染组、CpG ODN预处理组、CpG ODN治... 目的:探讨含CpG基序的寡脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)干预对人轮状病毒(human rotavirus,HRV)感染乳鼠的保护作用机制。方法:64只ICR乳鼠随母鼠按窝随机均分为4组:正常对照组、HRV感染组、CpG ODN预处理组、CpG ODN治疗组。观察各组乳鼠的治疗反应和排毒情况;免疫组化法检测小肠组织Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)、IFN-γ的表达。结果:HRV感染组乳鼠的腹泻天数、排毒时间及重型腹泻发病率均高于CpG ODN预处理组和CpGODN治疗组(P<0.05);CpG ODN预处理组、CpG ODN治疗组TLR9、IFN-γ表达水平明显高于正常对照组和HRV感染组(P<0.01),并且两者存在正相关(P<0.05)。结论:CpG ODN预处理和治疗都能提高HRV感染乳鼠小肠组织TLR9、IFN-γ的表达,对HRV感染乳鼠有保护作用。 展开更多
关键词 CpG基序的寡脱氧核苷酸 轮状病毒 TOLL样受体9 IFN-Γ
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鞘内注射M受体和GDNF反义寡脱氧核苷酸抑制吗啡戒断大鼠蓝斑c-Fos表达 被引量:4
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作者 刘惠芬 周文华 +4 位作者 唐甩恩 赖苗军 刘胜 陈为升 杨国栋 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期211-218,共8页
应用免疫组化方法观察鞘内注射毒蕈碱型乙酰胆碱(muscarinic acetylcholine receptor,M) 受体和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell derived neurotrophic factor,GDNF)反义寡脱氧核苷酸对吗啡戒断大鼠蓝斑(locus coeruleus,LC)区内Fo... 应用免疫组化方法观察鞘内注射毒蕈碱型乙酰胆碱(muscarinic acetylcholine receptor,M) 受体和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell derived neurotrophic factor,GDNF)反义寡脱氧核苷酸对吗啡戒断大鼠蓝斑(locus coeruleus,LC)区内Fos表达的影响。结果显示,鞘内注射M_2受体和GDNF反义寡脱氧核苷酸明显减少大鼠吗啡戒断症状评分值(n=6,P<0.05)。正常大鼠LC区神经元Fos基础表达较低,吗啡依赖大鼠LC区神经元Fos表达增加,吗啡依赖大鼠纳酪酮(4mg/Kg,ip)催促戒断后,Fos表达进一步增加;鞘内注射M_2受体和GDNF反义寡脱氧核苷酸处理后均减少吗啡戒断大鼠LC区神经元Fos表达(n=5,P<0.05)。而鞘内注射M_1受体反义寡脱氧核苷酸处理组LC 区神经元Fos表达较吗啡戒断组没有显著差异(n=5,P>O.05)。结果提示:脊髓M_2受体调节吗啡戒断时LC区的神经元激活,而这种神经上行性激活涉及神经元与胶质细胞之间的适应性调节。 展开更多
关键词 反义寡脱氧核苷酸 鞘内注射 GDNF Fos 表达 大鼠 戒断 胶质细胞源性神经营养因子 蓝斑 M受体 抑制 吗啡依赖 神经元 乙酰胆碱 免疫组化 cell 处理 LC 毒蕈碱 适应性 激活 脊髓
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TLR9在CpG寡脱氧核苷酸所致种属特异性免疫效应中的意义 被引量:3
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作者 李宁 范学工 +1 位作者 汤参娥 朱才 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期533-535,共3页
目的:探讨TLR9在CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)种属特异性免疫效应中的意义。方法:CpG-ODN体外刺激人、猕猴、小鼠外周血单个核细胞(PBMC),ELISA测培养液IFN-α含量;RT-PCR检测PBMC中TLR9的表达水平。结果:CpG-ODN2216有效诱导人PBMC分泌IFN... 目的:探讨TLR9在CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)种属特异性免疫效应中的意义。方法:CpG-ODN体外刺激人、猕猴、小鼠外周血单个核细胞(PBMC),ELISA测培养液IFN-α含量;RT-PCR检测PBMC中TLR9的表达水平。结果:CpG-ODN2216有效诱导人PBMC分泌IFN-α,而对猕猴和小鼠却无明显的免疫刺激活性;TLR9在人PBMC中均有表达,并且在CpG-ODN介导激活的人PBMC中表达上调;TLR9在猕猴PBMC中不表达。结论:TLR9是构成CpG-ODN种属特异性的重要分子基础。 展开更多
关键词 CPG寡脱氧核苷酸 Α干扰素 TOLL样受体9 种属特异性
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乙酰肝素酶反义硫代寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞系侵袭力的抑制作用 被引量:4
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作者 王顺祥 吴晓慧 +1 位作者 周少英 彭利 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第7期734-738,共5页
目的探讨乙酰肝素酶反义硫代寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞系侵袭力的抑制作用。方法设计合成互补于HPAmRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS-ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS-ODN,以阳离子脂质体OligofectamineTMReagent包埋后转染SM... 目的探讨乙酰肝素酶反义硫代寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞系侵袭力的抑制作用。方法设计合成互补于HPAmRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS-ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS-ODN,以阳离子脂质体OligofectamineTMReagent包埋后转染SMMC-7721、BEL-7402细胞。采用RT-PCR和Western-blot检测转染前后细胞HPAmRNA及蛋白表达的变化,以基底膜重建实验检测SMMC-7721、BEL-7402细胞侵袭力的变化。结果与正常对照组相比,AS-ODN转染组SMMC-7721、BEL-7402细胞HPAmRNA和蛋白的表达均显著下降(P<0.01,P<0.05),转染后两细胞系的侵袭力抑制率分别为55.8%和61.8%。结论HPA硫代反义寡脱氧核苷酸可通过下调HPAmRNA和蛋白的表达抑制肝癌的侵袭力。 展开更多
关键词 乙酰肝素酶 反义寡脱氧核苷酸 肝癌 侵袭力
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K型和D型CpG寡脱氧核苷酸对猪外周血单个核细胞免疫刺激活性的比较研究 被引量:2
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作者 朱鸿飞 李光富 +3 位作者 朱建中 卢春 邵国清 张兆松 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期542-544,553,共4页
目的:比较K、D两型CpG寡脱氧核苷酸(CpG 0DN)对猪外周血单个核细胞(PBMC)免疫刺激活性的差异.方法:用人工合成的@K型和D型两类CpG 0DN和不含CpG基元的对照0DN D48分别刺激已分离的猪PBMC,3H-TdR掺入法测定每分闪烁次数(cpm)值,计算刺激... 目的:比较K、D两型CpG寡脱氧核苷酸(CpG 0DN)对猪外周血单个核细胞(PBMC)免疫刺激活性的差异.方法:用人工合成的@K型和D型两类CpG 0DN和不含CpG基元的对照0DN D48分别刺激已分离的猪PBMC,3H-TdR掺入法测定每分闪烁次数(cpm)值,计算刺激指数(SI).双抗体夹心ELISA法测定活化细胞上清中IFN-γ和IL-2表达水平.结果:D和K型CpGODN对猪PBMC增殖均具有较强刺激作用,K型的增殖效应高于D型.含'GTCGTT'基元的2006作用尤为显著,但不能有效刺激猪PBMC分泌IFN-γ和IL-2.D型刺激增殖效应低于K型,但能有效地促进猪PBMC分泌IFN-γ和IL-2.结论:K型和D型CpG 0DN在刺激猪PBMC增殖及其分泌IFN-γ、IL-2的水平有所不同. 展开更多
关键词 CPG寡脱氧核苷酸 CPG基元 IFN—γ IL—2
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NF-κB圈套寡脱氧核苷酸联合紫杉醇对肺癌血管生成的影响 被引量:2
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作者 王宁 邢丽华 +3 位作者 高炜 高景 焦婧 赵世龙 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期29-31,共3页
目的探讨NF-κB圈套寡脱氧核苷酸技术(NF-κB decoy ODN)联合紫杉醇对肺癌血管生成的影响。方法培养人肺癌细胞A549:(1)用脂质体瞬时转染法介导NF-κB全硫代圈套寡核苷酸(decoy ODN)和全硫代错义圈套寡核苷酸(scramble decoy ODN)处理A... 目的探讨NF-κB圈套寡脱氧核苷酸技术(NF-κB decoy ODN)联合紫杉醇对肺癌血管生成的影响。方法培养人肺癌细胞A549:(1)用脂质体瞬时转染法介导NF-κB全硫代圈套寡核苷酸(decoy ODN)和全硫代错义圈套寡核苷酸(scramble decoy ODN)处理A549细胞;(2)分为对照组、NF-κB decoy ODN组、紫杉醇组(1 000 ng/mL)和NF-κB decoy ODN+紫杉醇组,RT-PCR法测COX-2 mRNA水平表达;(3)免疫组织化学法测VEGF蛋白表达。结果 NF-κB decoy ODN、紫杉醇干预后A549细胞的COX-2 mRNA水平表达下降,对照组、NF-κB decoy ODN组、紫杉醇组、NF-κB decoy ODN+紫杉醇组浓度依次是:(0.71±0.04)μg/μL、(0.44±0.08)μg/μL、(0.51±0.02)μg/μL、(0.34±0.05)μg/μL(P<0.05)。VEGF蛋白表达亦下降,各组细胞阳性率依次是:(85±0.50)%、(63±0.26)%、(57±1.5)%、(21±0.34)%(P<0.05)。结论 NF-κB decoy ODN联合紫杉醇可明显抑制肺癌细胞血管生成,该作用可能与COX-2、VEGF表达相关。 展开更多
关键词 肺癌 NF-κB圈套寡脱氧核苷酸 紫杉醇 环氧化酶-2 血管内皮生长因子
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