海藻多糖对γ射线照射小鼠免疫功能的影响

目的 观察海藻多糖对辐射损伤小鼠免疫功能的影响。方法 测定小鼠胸腺细胞自发掺入3H -TdR的能力、脾细胞对ConA(刀豆蛋白A)及LPS(脂多糖 )的增殖反应及脾混合淋巴细胞反应 ,考察海藻多糖对γ射线照射小鼠免疫功能的影响。结果 海藻多糖处理组小鼠胸腺细胞自发掺入3H -TdR值、脾细胞对ConA及LPS的增殖反应、脾混合淋巴细胞反应均较照射组明显增强 (P <0 0 5 ) ,且与海藻多糖的剂量增加呈正相关。

四物汤及两味中药组方对γ射线照射所致血虚证小鼠作用机制的研究

[目的]探讨四物汤及其两味药组方治疗血虚证小鼠的补血作用机制。[方法]采用 60Coγ射线全身照射制成实验性小鼠血虚证模型 ,测定外周血象、CD34+ 细胞、细胞周期、NFS60细胞增殖以及造血干祖细胞的增殖情况。[结果]1)四物汤在各指标上都优于其两味药组方 ;(2)两味药组方中 ,当归相关组对CFU -E ,CFU -Mix ,CFU -GM的促进作用较好 ,且有升高白细胞的作用 ;而地黄相关组对CFU -E有增殖作用 ;白芍相关组能明显促进NFS60细胞的增殖 ;川芎相关组增加CD34抗原表达 ,并促进细胞由G0/1 期向S期转化 ,其作用和所含的川芎嗪有关。[结论]四物汤全方优于两味药组方 。

X射线照射后鼻咽癌细胞多药耐药基因的表达

目的通过检测射线照射前后鼻咽癌CNE1细胞多药耐药基因(mdr1基因)及其编码产物P糖蛋白(P-gp)的表达和功能为临床鼻咽癌放化疗顺序提供参考。方法利用RT-PCR、Western blotting和流式细胞仪检测射线照射前后CNE1细胞的mdr1基因和P-gp的表达及对柔红霉素的外排功能。结果鼻咽癌CNE1细胞射线照射前mdr1基因、P-gp不表达;照射后较长时间内mdr1基因、P-gp均明显表达;对柔红霉素的摄取较射线照射前低。结论鼻咽癌CNE1细胞射线照射后化疗敏感性降低,提示临床对于中晚期鼻咽癌的治疗应考虑先化疗再放疗即诱导化疗的治疗方案。

小肠RNA对受^(60)Coγ射线照射后小鼠肠系膜淋巴结细菌移位和血中内毒素含量的影响

目的:探讨小肠RNA对受60Coγ线照后小鼠肠系膜淋巴结细菌移位和血中内毒素含量的影响.方法:选用BALB/c雄性小鼠144只,用1150cGy60Coγ射线进行腹部一次照射,于照后1～3h采用局部肠腔扩张注入法给小鼠空肠肠腔内注入正常大鼠小肠RNA,分别于照后1,3,5d麻醉后解剖,取血,测定内毒素含量;取肠系膜淋巴结,测定细菌移位率;取空肠段,计数肠腺存活率.结果:小肠RNA可降低受照小鼠肠系膜淋巴结细菌移位率和血中内毒素含量,明显提高受腹部照射小鼠空肠的肠腺存活率(P<0.01).结论:小肠RNA可改善受照小鼠肠黏膜机械屏障功能,减少细菌移位.

15Gy ^(137)Csγ射线照射大鼠肾脏对骨代谢的影响

观察了γ射线照射大鼠双侧肾脏对骨代谢的影响。6月龄雄性SD大鼠20只,随机分为对照组(n=10)和双侧肾脏γ射线照射组(n=10)。应用137Csγ射线照射装置每侧肾脏照射15Gy,剂量率为0.91Gy/min,照射后饲养3个月。收集24h尿,处死动物,收集血、肾脏、腰椎、股骨、胫骨标本。测定血肌酐、尿素氮、钙、磷、25(OH)D3、1,25(OH)2D3、PTH和尿生白、β2微球蛋白、钙、磷、PYD/肌酐等指标。肾脏标本作光镜和透射电镜观察。第1—4腰椎和右侧股骨作骨密度测定,第3腰椎和右侧股骨作成分分析,第4腰椎和左侧胫骨上段作形态计量学分析。结果表明,射线致肾小球、肾小管和肾间质病理性损伤。与假手术组比较,射线照射组血尿素氮、肌酐和尿β2微球蛋白分别升高26％(p<0.05)、9％和29.6％(p<0.05),血清钙降低4％,血清磷升高2％,尿钙增加24％,尿磷减少35％(p<0.05),血清碱性磷酸酶活性提高17％(p<0.05),血清25(OH)D3变化不明显,而1,25(OH)2D3降低54.9％(p<0.05)血清PTH升高27.3％(p<0.05),尿PYD/肌酐值增加31.7％(p<0.05),腰椎骨密度降低13.0％(p<0.05),第4腰椎骨矿盐含量降低13.1％(p<0.05),右侧股骨骨密度、干重和灰重分别降低3.5％(p<0.05)、7.6％(p<0.05)和11.6％(p<0.05),骨小梁体积、平均骨小梁厚度和结点末端比分别下降13.

γ射线照射花粉后对玉米结实及生长影响的探讨

玉米杂交种 (F1)的花粉用60 Coγ射线照射后 ,采取自交的方法进行授粉 ,观测其结实情况及后代植株的状况 ,以探讨照射花粉对M1结实及后代植株生长的影响。结果表明 ,较大剂量 (10 0Gy)照射花粉后 ,M1的结实性受到极大的影响 ,外观正常的子粒极少 ,瘪粒和泡状物所占比例很高 ;用 10 0Gy和 5 0Gy的γ射线分别处理杂交种两个亲本的花粉 ,然后将花粉混合起来授粉 ,其性状的表现与单一剂量照射花粉植株无明显差异 ;M2 与对照相比 ,差异显著 ,并出现雄穗花药、花粉发育不良的植株 ;M3 植株仍表现出了照射的损伤作用 ,在主要调查性状中 ,它的变异幅度都大于对照 ,并出现有明显突变性状的个体 。

P53及其相关蛋白对X射线照射肝癌细胞周期的调节

X射线照射人肝癌细胞HepG2,照射后细胞存活随照射剂量增大明显下降。流式细胞术分析,不同剂量组照射后24h均发生G2期阻滞。照射后不同时间组的细胞周期分布也有不同,照射后12h,有显著的S期延迟。Western Blot显示照射后24hP53,MDM2,P21蛋白表达上升,并有时间效应:P53在照射后24h之内始终维持较高表达,MDM2和P21分别在照射后6和12h的表达最高。X射线照射通过影响P53及其相关蛋白的表达影响细胞周期。

不同剂量γ射线照射对体外培养胶质瘤细胞系的影响及对神经功能的保护作用

目的:比较不同剂量γ射线对胶质瘤细胞系C6和SHG-44的影响,建立γ射线诱导胶质瘤细胞系C6和SHG-44凋亡研究的生物模型,探索γ射线照射对胶质瘤细胞周期的影响。方法:采用对数生长期的C6和SHG-44胶质瘤细胞经4,8,16,32和64Gy的γ射线照射后培养48h,用流式细胞仪进行细胞凋亡检测并分析细胞周期的改变。结果:不同剂量γ射线照射均可诱导C6和SHG-44胶质瘤细胞凋亡。C6细胞对照组、4,8,16,32和64Gy组照射后48h的凋亡百分数分别为(3.1±0.5),(16.7±0.6),(27.9±0.8),(27.3±0.4),(33.8±0.7)和(36.7±0.7),照射组凋亡率均高于对照组(t=30.16～67.65,P<0.01)。SHG-44细胞对照组,4,8,16,32和64Gy组照射后48h的凋亡率均高于对照组(t=35.51～103.79,P<0.01),但两组细胞的坏死比例均无明显增加(P>0.05)。SHG-44细胞对电离辐射更加敏感。两种细胞G0/G1期的细胞比例与γ射线照射剂量呈正相关;S期的细胞比例与照射剂量呈负相关。结论:以γ射线照射C6和SHG-44胶质瘤细胞可建立理想的射线诱导的细胞凋亡模型,γ射线照射可引起两种胶质瘤细胞系G1期阻滞和S期延迟。

4GyX射线照射对EL-4细胞cyclin B1及cdc2 mRNA水平的影响

采用流式细胞术和半定量 RT-PCR 的方法分别检测 4Gy X 射线照射后 EL-4 细胞不同细胞周期时相和EL-4 细胞内 cyclin B1 及 cdc2 mRNA 水平的时程变化,以探讨 X 射线照射诱导 EL-4 细胞 G2 期阻滞的分子调控机制。 结果表明,4Gy X 射线照射 EL-4 细胞后 2h,G2期细胞开始明显增多,4—8h 达峰值(p<0.001)。EL-4 细胞内 cyclin B1 mRNA 水平于照射后 1h 开始下降,24h 降至最低值,为假照组的 57.7 %,72h 恢复至正常水平。EL-4 细胞中 cdc2 mRNA 水平于照射后 12h 开始降低,24—48h 降至最低水平,分别为假照组的59.2% 和 58.9%,72h 恢复至假照组水平。结果提示, 4Gy X 射线照射可诱导 EL-4 细胞 cyclin B1 及 cdc2 mRNA水平明显下降,直接导致 MPF 活性减少是引发 G2 期阻滞的关键。

^(60)Coγ射线照射的新生牛血清对培养细胞的影响

为了获得质量合格的牛血清用于大规模细胞培养 ,以 3种不同剂量γ射线照射的新生牛血清加入细胞培养液 ,并用加热灭活的牛血清做对照培养CHO -C2 8细胞 ,观察两种灭活方法对除去牛血清中热原的效果及对细胞贴壁、生长增殖及分泌HBsAg的影响。结果表明 ,γ射线照射可除去牛血清中的热原质 ,在培养前期试验组牛血清对细胞贴壁和细胞生长增殖效果优于对照组。在培养中期 ,当γ射线的照射剂量为 2 0KGy时 ,细胞生长增殖和分泌HBsAg与对照组接近 ,两者无显著性差异 (P >0 .0 5 )。当照射剂量≥ 3 0KGy时 ,可抑制细胞分泌HBsAg ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 5 )。因而在细胞培养中采用γ射线照射牛血清以除去热原质是可行的 ,但照射剂量应≤ 2 0KGy。

重离子射线照射后家蚕胚胎造血器官的修复再生

为了研究重离子射线照射后家蚕造血器官的修复再生作用,用碳离子射线局部照射家蚕接近孵化时紧贴翅原基内侧的胚胎造血器官,局部细微手术损伤造血器官,观察了对幼虫造血功能的影响,了解了造血器官的修复程度。100Gy以上剂量照射,家蚕出现变态困难,幼虫和蛹的生存率下降,眠中、化蛹或羽化时期出现死亡个体等缺血生理障碍,其影响程度随射线剂量增加而加重。200Gy照射组5龄存活幼虫血细胞含量下降,但其中部分个体的血细胞含量接近对照未照射处理,其体内出现了再生的造血器官。家蚕幼虫有很强的修复再生造血器官功能。

低剂量X射线照射对J774A.1细胞IL-12和p38MAPK表达的影响

通过检测低剂量辐射 (LDR)对J774A .1细胞株中白细胞介素 12 (IL - 12 )及 p38丝裂原活化蛋白激酶 (p38MAPK)的影响 ,以研究LDR辐射免疫效应的机制。分别采用流式细胞术和ELISA检测了p38MAPK、IL - 12蛋白水平的变化。结果表明 ,75mGyX射线照射后 ,J774A .1细胞分泌IL - 12量在照射后 2、4、8h升高 (p <0 .0 5 ) ,随后即开始下降至恢复假照射水平 ;而 p38MAPK也于照射后 2h出现升高 ,两者在发生时间上呈现一致性。结果显示LDR引起IL - 12表达增加 ,而p38MAPK传导通路可能在其中发挥作用 ,为低剂量辐射增强细胞免疫功能提供了实验依据。

现场校准试验用便携式γ射线照射装置研制

固定式环境γ辐射剂量率监测仪表是承担环境连续监测任务的主要设备,这类仪表通常不便于拆卸和安装,而且送检周期较长(一周左右),影响了连续监测点数据的连续性。为了固定式仪表的按期校准,结合蒙卡方法研制了便携式γ射线照射装置,利用PTW剂量计对辐射场进行标定,最后利用便携式照射装置对固定式环境γ辐射剂量率监测仪表进行现场校准实验。

鼻咽癌细胞株γ射线照射后端粒酶活性及各组分表达的研究

目的 探讨γ射线照射鼻咽癌细胞株HNE1后 ,端粒酶活性改变情况以及与端粒酶各组分基因表达的关系。方法 HNE1在γ射线照射前和照射后不同时间 ,利用RT-PCR方法检测端粒酶亚单位人端粒酶RNA (humantelomeraseRNA ,hTR)、人端粒酶相关蛋白 (humantelomerase -associated 1,TP1)和人端粒酶逆转录酶 (humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)基因表达情况 ,以及用TelomerasePCR -ELISA方法检测端粒酶的活性。结果 HNE1在γ射线照射后端粒酶各组分中 ,hTR和TP1mRNA改变不明显 ,而hTERTmRNA逐渐降低 ,端粒酶的活性也逐渐降低。结论 HNE1经γ射线照射后 ,hTERTmRNA表达逐渐下降 ,端粒酶活性亦逐渐降低 ,hTERTmRNA改变与端粒酶活性改变呈一致性 ,提示hTERTmRNA的表达可能在调节端粒酶活性中起关键作用。

^(60)Coγ射线照射对AT和GM细胞增殖能力及O_2^(.-)浓度的影响

为探求AT5BIVA细胞辐射敏感性与超氧阴离子自由基O2.-之间的联系,以正常人皮肤成纤维细胞GM0639为对照,用3HTdR掺入法和细胞色素C还原法分别测定正常及照射条件下细胞增殖能力及其培养介质中O2.-浓度(nmol/106细胞)。结果表明,在正常培养条件下,两种细胞的增殖能力和向培养介质中释放O2.-的量均随培养时间的延长而增加。在不同剂量60Coγ射线照射条件下,两种细胞的增殖能力和向培养介质中释放O2.—的量均随剂量增大而减小;两种细胞的增殖能力均与其培养介质中O2.—浓度密切相关,且AT5BIVA细胞的增殖速率大于GM0639细胞。提示AT5BIVA细胞高辐射敏感性与O2.—产生量密切相关。

^(60)Coγ射线照射对人脆性组胺酸基因表达的影响

目的研究人脆性组胺酸三联体(fragilehistidinetriad,FHIT)基因在电离辐射损伤过程中的动态变化。方法以SV40病毒转染的永生化人支气管上皮细胞株BEAS2B细胞为照射对象,分为0.5、1、2、4、8、16Gy60Coγ射线照射剂量组和未照射对照组,分别于照射后24h、72h和10d,采用单细胞RT PCR技术以及PCR产物直接测序法检测FHIT基因的表达情况。结果对照组各时间点均未检出异常FHIT转录本,不同剂量照射组照射后各时间点均不同程度检出异常缺失FHIT转录本,照射后24h各组突变百分比分别为52.6%、66.7%、57.9%、76.5%、64.7%和81.3%,照射后72h各组突变百分比分别为17.6%、22.2%、50.0%、47.4%、47.1%和68.4%,照射后10d各组突变百分比分别为21.1%、25.0%、60.0%、57.9%、61.1%和68.4%;突变体经测序证实为外显子缺失性突变。结论电离辐射可引起FHIT基因的缺失突变。

致死剂量γ射线照射小鼠淋巴结淋巴细胞凋亡动力学及其与相关蛋白表达的关系

用原位末端标记、原位杂交和碱磷酶免疫组化技术,观察致死剂量 γ 射线照射小鼠淋巴结淋巴细胞的凋亡动力学变化,及其与 Bax、Bcl-2 和 Bcl-XL表达的关系。结果表明,照射后 24h 淋巴结淋巴细胞凋亡指数迅速升高,在 6—12Gy 范围内与照射剂量呈正比,≥15Gy 照射后变化不明显。6Gy 照射后 24h,淋巴细胞凋亡达高峰,尔后开始降低;然而直至照射后 6 个月和 12 个月,凋亡指数仍明显高于对照组。6Gy 照射后 24h,淋巴细胞 Bax 蛋白表达即出现升高,当剂量为 12Gy 时达到峰值,15Gy 和 20Gy 照射后未观察到这种剂量效应关系。而 Bcl-2 和 Bcl-XL蛋白表达在照射后 24h 明显下降。bax 和 bcl-2mRNA 的表达显示出相似趋势。以上结果显示,≤12Gy 照射后细胞凋亡是淋巴细胞的重要死亡方式。照射后 Bax 的上调及 Bcl-XL 的下调在致死剂量照射引起的淋巴细胞凋亡调控中起重要作用。

靶向存活素的RNAi联合X射线照射对肺腺癌移植肿瘤的抑制作用

目的利用RNAi、RT-PCR和Western blot技术,探讨靶向存活素的基因沉默联合X射线照射对肺腺癌移植瘤的抑制作用及相关机制。方法根据Genbank中存活素(Survivin)的cDNA序列设计RNAi序列,构建shRNA真核表达载体pGenesil-2-Survivin,经过酶切,测序鉴定后,将经脂质体包裹的pGenesil-2-Survivin注射到裸鼠移植肺腺癌瘤体内,并联合5 Gy X射线照射,利用RT-PCR和Western blot技术检测移植肿瘤内Survivin mRNA和蛋白表达情况,观察肿瘤生长变化。实验分为正常组、pGenesil-2-Survivin组、5 Gy照射组和pGenesil2-Survivin+5 Gy组。结果RT-PCR和Western blot结果显示,5 Gy X射线没有明显改变Survivin mRNA和蛋白的表达,而pGenesil-2-Survivin和pGenesil-2-Sur-vivin+5 Gy照射则明显抑制了Survivin的表达,与正常组比较具有统计学意义(P<0.001);5 Gy照射后,肿瘤的生长被抑制,而pGenesil-2-Survivin质粒的抑制作用更强,5 Gy照射能增强pGenesil-2-Survivin质粒的抑制作用。结论靶向存活素的RNAi能够明显抑制裸鼠移植肿瘤的生长,联合5 Gy X射线照射能够增强抑制作用,这可能与Survivin基因mR-NA与蛋白被抑制相关。

伽玛射线照射法对凡士林纱布灭菌效果

灭菌凡士林纱布是烧伤、烫伤、皮肤感染创口引流的必需无菌物品.凡士林不宜压力蒸汽灭菌,干热灭菌油脂会干燥老化,导致凡士林纱布吸附引流效果差.我院自2000年采用伽玛射线照射法对凡士林纱布进行灭菌处理,经临床使用效果满意.

白细胞过滤及γ射线照射在预防血小板输注无效中的作用研究

目的观察血液病患者输注机采血小板的治疗效果,探讨白细胞过滤及γ射线照射在预防血小板输注无效(PTR)中的作用。方法 759例患者每次输注机采血小板前1 h和输注后24 h检查靜脉血小板数量,计算血小板计数纠正增加指数(CCI),以输注后24 h CCI<4.5×109·L-1为PTR;发生PTR的患者,在再次输注血小板前,分别进行67例次的白细胞过滤和81例次的γ射线照射,其中,有26例次的血小板联合应用了这2项技术。结果 3 467例次输注新鲜机采血小板,无效率1 222/3 467,35.25%。免疫性血小板减少症(ITP)组的PTR发生率最高49.35%;机采血小板输注次数、累积剂量与输注效果比较,血小板量10 U,无效率26.2%;20 U,无效率51.72%;≥30 U,无效率73.58。20 U与10 U,≥30 U与10 U、20 U与≥30 U比较,χ2分别为38.56、106.46、14.29,P均<0.05。白细胞过滤、γ射线照射及γ射线照射联合白细胞过滤后的PTR发生率分别是19.51%(8/41)、20.00%(11/55)和3.85%(1/26),P均>0.05,但三者与未经治疗前患者的PTR发生率比较有显著差异(P<0.05)。结论 PTR的发生随患者疾病的不同而不同,ITP患者的PTR发生率最高;PTR的发生与患者血小板输注剂量有关,输注剂量越大,发生PTR的机率越大;白细胞过滤、γ射线照射等对预防PTR有明显效果。