两种肌少症小鼠模型的功能表型、肌肉质量及力量特点比较

背景:地塞米松和后肢悬吊是常用的动物肌少症造模方法,具有造模时间短、操作简便、成本低等特点。目的:比较地塞米松和后肢悬吊诱导小鼠肌少症模型在肌肉质量、力量及功能表型以及分子机制表型方面的差异。方法:采用随机抽样法将30只C57BL/6小鼠随机分成3组,每组10只:正常对照组不进行任何干预;地塞米松组小鼠腹腔注射地塞米松磷酸钠溶液1 mg/(kg•d),连续注射6周,建立肌少症模型;后肢悬吊组采用鼠尾套悬吊小鼠后肢16 h,1次/d,连续悬吊6周,建立肌少症模型。造模6周内,监测小鼠体质量变化;造模6周后,检测小鼠四肢抓力、活动能力(游泳实验)、骨骼肌湿质量、骨骼肌病理形态,采用RT-PCR与Western blot检测骨骼肌蛋白质合成与分解代谢指标、AMPK/FoXO3α信号通路的表达。结果与结论:①从造模后第2周开始,地塞米松组、后肢悬吊组小鼠体质量均低于正常对照组(P<0.05)。②造模6周后,与正常对照组相比,造模两组小鼠四肢抓力均下降(P<0.05),腓肠肌湿质量、趾长伸肌湿质量、腓肠肌与比目鱼肌横截面积均下降(P<0.05);地塞米松组小鼠腓肠肌横截面积明显小于后肢悬吊组(P<0.05),比目鱼肌横截面积大于后肢悬吊组(P<0.05);与正常对照组、后肢悬吊组相比,地塞米松组小鼠活动能力降低(P<0.05)。③与正常对照组相比,造模两组PI3K、mTOR、AMPK、PGC-1αmRNA表达与p-AMPK/AMPK蛋白均降低(P<0.05),FoXO3αmRNA表达与PGC-1α、FoXO3蛋白表达均升高(P<0.05);地塞米松组Akt1 mRNA表达降低(P<0.05),Atrogin-1、MuRF-1 mRNA表达升高(P<0.05);后肢悬吊组Akt1 mRNA表达升高(P<0.05)。④与地塞米松组相比,后肢悬吊组mTOR、Akt1、FoXO3αmRNA表达升高(P<0.05),Atrogin-1、MuRF-1 mRNA表达降低(P<0.05)。⑤结果表明,两种造模方法均会导致骨骼肌线粒体能量代谢水平下降,地塞米松组通过泛素蛋白酶体和能量代谢途径的双重作用介导骨骼肌发生萎缩,后肢悬吊组通过AMPK/FoXO3α信号通路介导能量代谢途径引起骨骼肌发生萎缩,从而引起骨骼肌的质量、力量及功能下降。

建立我国自主知识产权的致癌性小鼠模型

致癌性试验是药物非临床安全性评价的重要内容之一。当前国内外普遍采用并认可基于ICH S1B指南建立的药物非临床致癌性试验替代方案。遗传修饰致癌性小鼠模型是替代方案中“卡脖子”的关键技术问题。从1997年ICH S1B指南发布至今,我国制药行业主要依赖进口获得小鼠模型,其价格高昂、进口周期长、条件严苛,且由于模型资源唯一,制药行业承受着成本高昂和供应链不稳的双重压力。本文概述了国内外致癌性试验相关指导原则,介绍了国内外主要的致癌性小鼠模型,包括Tg.rasH2、KI.C57-ras、p53^(+/-)小鼠等的构建、验证与应用历程,并展望了建立我国自主知识产权的致癌性小鼠模型以及标准化生产供应的途径。

肌少症小鼠模型构建的系统回顾

背景:肌少症是一种进行性、广泛性骨骼肌疾病,与老年人骨关节炎、骨折、肢体残疾和死亡的发生密切相关。建立肌少症相关动物模型对了解肌少症病理生理机制以及找出有效治疗策略至关重要。目的:综述肌少症小鼠模型的评价标准及肌少症小鼠模型的造模方法,并分析比较各种造模方式的优缺点,以期为肌少症的研究与诊疗提供参考。方法:以“肌少症,肌肉减少症,肌肉衰减症,骨骼肌衰老,小鼠模型,动物模型”为中文检索词,检索公式为“(肌少症OR肌肉减少症OR肌肉衰减症OR骨骼肌衰老)AND(小鼠模型OR动物模型)”;以“sarcopenia,skeletal muscle aging,mouse models,animal models”为英文检索词,检索公式为“(Sarcopenia OR Skeletal muscle aging)AND(Mouse model OR Animal models)”,检索中国知网、万方数据库和PubMed数据库在2010年1月至2022年10月期间与主题相关的文献,最终纳入59篇文献进行分析。结果与结论:①SAMP8小鼠造模时间较快,且肌肉萎缩类型与人类肌少症患者变化一致,因此是较为理想的模型;②手术法虽可以成功诱导肌肉萎缩,但需精确的手术操作,难度较大且较耗费时间;后肢悬吊法小鼠造模与老年人较类似,可视为老年肌少症的有效模型;③试剂注射造模虽操作简单,但无论是试剂的给药剂量及给药天数等尚不明确,需进一步研究;④转基因小鼠模型应用较少,其模型稳定性需进一步研究;⑤探索出一种成本低、耗时短并能高度模拟人体肌少症的小鼠模型仍是未来的研究方向。

动脉粥样硬化小鼠模型研究进展

动脉粥样硬化(As)是一种发生于大中动脉的慢性进行性疾病,其导致的心脑血管并发症是造成人类死亡的主要原因。目前小鼠模型不仅广泛用于As的机制研究,还运用于临床前药物的转化研究。常用的小鼠模型包括ApoE^(-/-)小鼠、LDLr^(-/-)小鼠等转基因小鼠。此外,一些基于手术或操作的新兴动物模型(如部分颈动脉结扎、AAV8-PCSK9-D377Y注射小鼠)也逐渐应用于As病理生理机制的探究。但由于As发病机制复杂,目前尚无一种模型可完全复制人As的形态及病理生理过程。

Ⅰ型毛-肝-肠综合征小鼠模型构建及表型分析

目的 建立基于Ttc37(Tetratricopeptide Repeat Domain 37)基因缺失的Ⅰ型毛-肝-肠综合征(trichohepato-enteric syndrome,THES)的小鼠疾病模型。方法 利用CRISPR/CAS9技术在小鼠Ttc37基因中插入loxP序列构建Ttc37flox品系,通过与全身表达的CAG-Cre品系交配产生全身敲除小鼠Ⅰ型THES动物模型(Ttc37flox/flox;CAG-Cre),利用荧光定量PCR和Western blot确认敲除效果。选取8周龄小鼠,对皮肤、脾脏、肝脏、膀胱和胃肠道等主要组织进行苏木精-依红染色和病理分析,对血清中的谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)进行酶学检测,对血清中的血红蛋白进行检测,注射抗原后利用ELISA检测免疫球蛋白IgM和IgG水平。结果 Ttc37flox/flox;CAG-Cre表现出与Ⅰ型THES相似的毛发、皮肤、B细胞和眼睛发育异常表型;常规饲养条件下未表现出肝脏、胃肠道、膀胱和血红蛋白异常。结论 Ⅰ型THES的小鼠疾病模型构建成功,可用于病理机制研究。

利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰小鼠模型的技术优化进展

CRISPR/Cas9技术的兴起,推动了生命科学各个领域的发展。随着对其认识的不断加深,人们进行了多重改进和优化,以适应不同的应用场景。在基因修饰小鼠模型制作中,CRISPR/Cas9技术的优化也带来了众多突破性进展。本文简要回顾了CRISPR/Cas9技术的发展历程,并从CRISPR/Cas9元件优化、条件敲除/敲入基因修饰小鼠模型的构建以及CRISPR/Cas9元件和HDR模板的递送系统层面总结了优化策略,展望该技术未来的发展。

基于小鼠模型的前列腺癌骨转移机制研究进展

前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤,具有很高的骨转移倾向,约70%的患者死于骨转移。小鼠模型是研究前列腺癌骨转移的重要工具,对于前列腺癌骨转移病理生理学机制的阐释,治疗药物的筛选和评价均具有重要意义。基于此,本文综述了前列腺癌骨转移小鼠模型的研究进展,归纳构建动物模型方法以及评价策略,重点总结通过小鼠模型揭示的前列腺癌骨转移发生发展的机制,以期为前列腺癌的骨转移研究提供重要的实验工具。

MHC功能及其转基因小鼠模型的研究进展

主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)与机体免疫调节密切相关,不仅具有遗传多态性,而且MHC限制性存在种属差异。人类的MHC被称为人白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA),小鼠MHC则被称为H-2。构建人源化MHC转基因小鼠模型是突破MHC种属差异并模拟人体免疫应答特征的重要策略。MHC转基因小鼠主要分为MHCⅠ或MHCⅡ单转基因小鼠模型和MHCⅠ与MHCⅡ双转基因小鼠模型。HLAⅠ类转基因小鼠模型发展经历了3个阶段,目前采取敲除H-2Kb和H-2Db或者敲除鼠源β2m的策略来消除内源的H-2Ⅰ类分子对HLAⅠ类分子的竞争性抑制;HLAⅡ类转基因小鼠模型的构建则是将鼠源β链敲除,转入HLAⅡ类基因。随着构建策略的优化,MHC转基因小鼠模型被应用于表位疫苗研发、肿瘤治疗及疾病遗传关联研究中,成为临床前试验的有力工具。本文对MHC转基因小鼠模型相关资料进行了总结,概述了MHC转基因小鼠模型的构建策略及其在疫苗研发、疾病治疗等方面的应用进展。

肺癌小鼠模型研究进展

肺癌是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,明确其病因、发病机制及药物防治方法是目前研究热点。小鼠是肺癌临床前研究中最常用的实验动物,根据不同的研究策略和目的选择合适的小鼠模型。目前常用的小鼠肺癌模型包括诱发性模型、移植物模型及基因工程模型等,根据研究目的选择不同的小鼠模型。回顾国内外肺癌小鼠模型相关文献报道,归纳总结常用肺癌小鼠模型的研究进展,为肺癌研究提供参考。

一种改良的餐后高三酰甘油血症小鼠模型的建立

目的探索建立一种改良的餐后高三酰甘油血症的小鼠模型,以期更好地模拟人类饮食结构和习惯,为研究中医药防治餐后高三酰甘油血症及其相关疾病,以及相关保健品和药物的开发提供动物模型参考。方法将32只SPF级5周龄雄性ICR小鼠经标准饲料适应性喂养1周后随机分为灌胃0.9%氯化钠溶液组、灌胃食用油组、组合灌胃食用油和30%果糖水组、腹腔注射P-407组,一共4组,每组8只。根据脂耐量实验的相关参考文献决定在灌胃120 min后取材,并利用全自动生化仪检测相关血清学指标(TG、TC、HDL和LDL)。根据实验结果,进行后续实验;24只SPF级5周龄雄性ICR小鼠经标准饲料适应性喂养1周后随机分为空白组(12只)和模型组(12只)。其中,空白组给予0.7 mL的0.9%氯化钠溶液灌胃,模型组给予0.5 mL的花生油和0.2 mL 30%果糖水灌胃。灌胃120 min后取材,并利用全自动生化仪检测糖脂相关生化指标(TG、TC、HDL、LDL、AST、ALT、GLU和ALP);超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒检测了血清SOD、MDA的含量以评估氧化应激水平;利用HE染色和油红O染色观察肝病理情况;透射电镜观察肝细胞内线粒体形态。结果组合灌胃食用油和果糖水更符合人类餐后血脂升高的机制,可以显著升高餐后小鼠TG水平。在后续实验中,模型组小鼠相关生化指标血清TG、LDL、GLU、ALT、AST、ALP显著升高,HDL显著下降。模型组小鼠血清SOD水平显著降低,MDA水平显著升高。HE染色模型组肝细胞结构轻微改变,肝油红O染色可见脂滴聚集,透射电镜可见肝细胞内线粒体内质网与脂滴相随的现象。结论通过花生油和30%果糖水组合灌胃,可以成功建立一种改良的餐后高三酰甘油小鼠模型,这种糖脂代谢紊乱可能与氧化应激和线粒体功能有关。

中和外周循环的IL1β可减缓慢病毒感染OPTNE478G肌萎缩侧索硬化症小鼠模型的进展

肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种不可逆的神经退行性疾病,大部分患者一旦发病,仅有三到五年存活期,且目前没有安全有效的延缓该疾病进展的药物。因此,迫切需要开发一种基于症状的治疗方法,以提高ALS患者的生存率并改善他们的生活质量。据报道,炎症状态,尤其是白细胞介素1β(IL1β)升高,在ALS进展中起关键作用。本研究发现通过中和外周循环IL1β可减缓ALS小鼠模型的进展。

抗结核药物性肝损伤小鼠模型细胞角蛋白18与基质金属蛋白酶7的表达水平

目的 分析抗结核药物性肝损伤(ATB-DILI)模型小鼠组织及血清中细胞角蛋白18(CK18)与基质细胞金属蛋白酶7(MMP-7)表达,探讨CK18与MMP-7在肝损伤发生中的临床价值。方法 6周龄SPF级雄性KM小鼠20只,体重18~24 g,按照随机区组法分为4组,每组5只。选择3组进行卡介苗(BCG)滴鼻使小鼠感染结核分枝杆菌,其中两组分别灌胃异烟肼(INH)45 mg/(kg·d)、利福平(RIF)90 mg/(kg·d),持续3周,记为INH 3周组及RIF3周组,剩余一组为BCG感染对照组;未经任何处理的为空白对照组。通过PCR检测小鼠肺组织BCG含量,病理观察小鼠肝损伤证实动物模型建立成功。比较各组肝脏指数、病变范围;比较各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBil)、CK18、MMP-7表达情况;比较各组小鼠肝脏组织CK18、MMP-7蛋白表达情况。结果 BCG感染对照组与空白对照组小鼠ALT、AST、ALP、GGT、TBil表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);INH 3周组和RIF 3周组小鼠ALT、AST、GGT、TBil表达高于BCG感染对照组(P<0.05)。空白对照组、BCG感染对照组小鼠肝脏组织CK18、MMP-7蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);INH 3周组、RIF 3周组小鼠肝脏组织CK18、MMP-7蛋白表达高于BCG感染对照组(P<0.05)。空白对照组、BCG感染对照组小鼠血清CK18、MMP-7表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);INH 3周组、RIF 3周组小鼠血清CK18、MMP-7表达高于BCG感染对照组(P<0.05)。空白对照组、BCG感染对照组小鼠肝脏指数、病变范围比较,差异无统计学意义(P>0.05);INH 3周组、RIF 3周组小鼠肝脏指数、病变范围高于BCG感染对照组(P<0.05)。结论 CK18与MMP-7可能影响ATB-DILI,明确CK18与MMP-7表达水平,提前干预,可以降低ATB-DILI发生风险。

七种不同基质金属蛋白酶在抗结核药物性肝损伤小鼠模型中的表达与临床价值

目的 探讨7种不同基质金属蛋白酶(MMP)在抗结核药物性肝损伤小鼠模型中的表达与临床价值。方法选取120只雄性昆明小鼠,SPF级,6周龄,体重18~24 g,随机区组法分为6组,每组20只。一组设为对照组,五组感染结核分枝杆菌后分别灌胃异烟肼(INH)45 mg/(kg·d)(INH组)、利福平(RIF)90 mg/(kg·d)(RIF组)、乙胺丁醇(EB)135 mg/(kg·d)(EB组)、吡嗪酰胺(PZA)180 mg/(kg·d)(PZA组)、四联抗结核药(INH+RIF+EB+PZA)剂量同上(四联药组),建立抗结核药物性肝损伤小鼠模型。通过酶联免疫吸附试验法检测药物灌胃后12 h及1、2、3周小鼠模型血清中MMP-1、2、3、7、9、13、14的表达水平,分析其与肝脏指数变化的相关性,探讨不同MMP在抗结核药物性肝损伤中的作用。结果 给药12 h,与对照组比较,RIF组MMP-7表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。各组MMP-1、2、3、9、13、14,肝脏指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。连续灌胃1周,与对照组比较,INH组、RIF组和四联药组小鼠MMP-2和MMP-7表达上调,肝脏指数升高,差异有统计学意义(P<0.05);各组MMP-1、3、9、13、14,肝脏指数,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。连续灌胃药物2、3周后,与对照组比较,RIF组、INH组、四联药组小鼠血清MMP-2、7、9表达上调,肝脏指数升高,差异有统计学意义(P<0.05);各组其他MMPs表达水平和肝脏指数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。INH组MMP-2、7、9与肝脏指数无相关性(P>0.05),四联药组MMP-2、7、9与肝脏指数无相关性(P>0.05)。RIF组MMP-7与肝脏指数呈正相关(r=0.981,P<0.05)。结论 抗结核药物性肝损伤小鼠血清MMP-2、MMP-7和MMP-9明显升高,提示MMP-2、MMP-7和MMP-9介导的炎症反应与抗结核药物性肝损伤密切相关,其中MMP-7可用于预判抗结核药物性肝损伤严重程度。

Lieber-DeCarli液体饲料中三种方法诱导酒精性肝病小鼠模型的比较

目的配制Lieber-DeCarli液体饲料,通过酒精热量过渡、酒精不过渡、酒精体积过渡三种方法诱导酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)小鼠模型,比较其肝功能损伤程度、血脂水平和肝脏脂肪变性程度。方法健康雄性C57BL/6J小鼠36只,随机分为6组(n=6),即酒精热量过渡对照组(A1)、酒精热量过渡组(A2)、酒精不过渡对照组(B1)、酒精不过渡组(B2)、酒精体积过渡对照组(C1)、酒精体积过渡组(C2),在饲喂相应液体饲料的第16、22、28 d分别处死对应组小鼠,测定并比较血清天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷氨酸氨基转移酶(glutamic acid aminotransferase,ALT)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量;肝脏苏木精-伊红染色(H&E染色)观察肝脏病理改变;肝脏油红O染色观察肝脏脂肪变性。结果血清生化结果显示,各模型组小鼠血清ALT、AST、TG含量均高于其对照组(P<0.05);A2、B2、C2组小鼠血清AST、ALT含量无明显差异(P>0.05);A2组小鼠血清TC、HDL-C含量高于B2、C2组(P<0.05);A2、C2组小鼠血清LDL-C含量均高于B2组(P<0.05)。病理结果显示,各模型组小鼠肝脏H&E染色均可见肝细胞脂肪变性;肝脏油红O染色均可见橘红色或红色脂滴聚集。结论Lieber-DeCarli液体饲料中三种方法诱导的ALD小鼠模型肝功能损伤无差异,表现为不同程度的肝脏脂肪变性及血脂异常。

利用小鼠模型研究线粒体DNA复制及其与肌肉代谢相关的分子机制

本研究从线粒体DNA复制和肌肉代谢的关系出发,以健康成年小鼠为实验对象,通过分子生物学技术检测线粒体DNA复制过程中关键酶及其调控因子在不同代谢状态下的表达和活性变化,探讨线粒体DNA复制与肌肉代谢的分子机制。结果发现,线粒体DNA复制过程中关键酶,如DNA聚合酶γ和线粒体DNA转录因子A在高代谢需求状态下显著上调,而线粒体DNA复制障碍造成肌肉代谢明显下降,表现为运动耐力降低和乳酸堆积增加。该研究成果为进一步认识线粒体在肌肉代谢中的作用提供了重要基础。因此,对于线粒体DNA在肌肉代谢中的功能及其与某些疾病的关系也有进一步的探讨和借鉴价值。

尿毒症皮肤瘙痒小鼠模型的构建

构建尿毒症皮肤瘙痒(uremic pruritus,UP)小鼠模型。方法 将16只7周龄雄性ICR小鼠随机平均分为模型组和假手术组。模型组行改良5/6肾切除术,术后12周于小鼠颈背部皮内注射β2微球蛋白(β2-MG,0.67mg/kg),每天1次,注射后1h观察并记录30min内小鼠抓挠行为,连续注射1周。检测血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)以评估小鼠肾功能;HE染色观察肾脏及皮肤组织病理变化;免疫组化检测皮肤组织中嗜碱性粒细胞、IL-31、IL-1β、TNF-α、SP的表达;Western blot检测IL-31、IL-1β、TNF-α、SP蛋白表达水平。结果 与假手术组相比,模型组小鼠抓挠次数明显增加(P<0.001);Scr和BUN浓度显著升高(P<0.01);肾脏和皮肤组织病理改变显著;皮肤组织中嗜碱性粒细胞、IL-31、IL-1β、TNF-α、SP表达明显提高(P<0.05),皮肤组织中IL-31、IL-1β、TNF-α、SP蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论 改良5/6肾切除术联合皮内注射β2-MG可诱导小鼠尿毒症皮肤瘙痒模型。

2型糖尿病小鼠模型的建立与评价

目的通过高热量饮食与小剂量多次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立2型糖尿病小鼠模型。方法采用随机数字表将30只雄性昆明种(KM)小鼠随机分为对照组和模型组(n=15),模型组小鼠饲喂高热量饲料1个月后,连续2~4 d腹腔注射30 mg/kg体重剂量的STZ;对照组则饲喂标准维持鼠料及注射等量柠檬酸盐缓冲液。观测小鼠食水量、体重等一般情况,并于造模后第1、2、4、5、12、21周尾尖采血检测血糖值,在小鼠血糖趋于稳定时检测血清胰岛素(INS),血浆总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL),血浆糖化血红蛋白(Hb A1c)含量,并进行口服葡萄糖耐量试验。结果模型组小鼠存活率为100%。与对照组相比,模型组小鼠注射STZ后体重逐渐下降并于第4周降到最低,此后逐渐回升,直到第21周仍显著低于对照组(t=3.160,P=0.006)。模型组小鼠在造模后血糖水平均明显高于造模前和对照组(P均<0.05);随着时间推移,血糖值也在不断上升,至21周,小鼠血糖值仍旧保持在较高水平的(26.38±1.34)mmol/L。造模后第4周,模型组小鼠的空腹血糖为(11.86±3.33)mmol/L,明显高于对照组的(6.37±1.27)mmol/L(t=-3.830,P=0.002);空腹血清胰岛素水平与对照组差异无统计学意义[(5.73±0.24)m U/L比(5.48±0.32)m U/L;t=-0.863,P=0.416];胰岛素敏感指数为0.0145±0.0039,明显低于对照组的0.0267±0.0039(t=4.414,P=0.003)。造模后第6周,模型组小鼠在口服灌胃葡萄糖0、30、60、120 min后的血糖分别为(15.35±1.82)、(26.45±1.07)、(25.58±1.46)、(26.15±1.00)mmol/L,均明显高于对照组的(6.88±1.75)(t=-8.203,P=0.000)、(17.65±2.94)(t=-6.884,P=0.000)、(13.18±2.04)(t=-12.110,P=0.000)、(7.37±3.40)mmol/L(t=-12.969,P=0.000)。造模后第8周,模型组小鼠的血清TC和TG水平分别为(3.83±0.06)和(2.20±0.20)mmol/L,明显高于对照组的(3.10±0.10)(t=11.000,P=0.000)和(0.90±0.10)mmol/L(t=10.070,P=0.000);HDL水平为(2.03±0.06)mmol/L,明显低于对照组的(2.48±0.02)mmol/L(t=11.662,P=0.000);LDL水平上升但差异无统计学意义[(0.34±0.08)mmol/L比(0.26±0.02)mmol/L;t=1.680,P=0.168];Hb A1c含量为(7.30±0.31)%,明显高于对照组的(4.40±0.32)%(t=-11.587,P=0.000)。结论采用高热量饮食与小剂量多次腹腔注射STZ的方法成功建立了2型糖尿病KM小鼠模型。

产后抑郁小鼠模型的构建及越鞠甘麦大枣汤对其抑郁样行为的影响

目的建立产后抑郁症(PPD)小鼠模型,评估母鼠产后的异常行为,观察中药越鞠甘麦大枣汤对产后抑郁母鼠的快速抗抑郁作用。方法将32只Balb/c母鼠随机分为2组,空白对照组不给予任何刺激,模型组小鼠给予慢性束缚刺激。3周后予模型组小鼠♀♂合笼交配怀孕,于分娩后3周检测母鼠行为学,包括蔗糖消耗测试(sucrose preference test,SPT)、强迫游泳测试(forced swimming test,FST)及陌生环境摄食实验(novelty suppressed feeding test,NSFT),以评价造模是否成功。造模成功后,模型组单次给予越鞠甘麦大枣汤(越甘组),空白对照组和模型组予以生理盐水,以单次给予模型组西药氯胺酮(氯胺酮组)设为阳性参照组。结果产后3周,与空白对照组比较,在蔗糖消耗测试中,模型组母鼠的糖水消耗百分比明显降低(P<0.01);在强迫游泳测试中,模型组母鼠绝望状态不动时间明显延长(P<0.01);在陌生环境摄食实验中,模型组母鼠摄食潜伏时间明显增加而单位时间摄食量明显减少(P<0.01,P<0.01)。而单次给予中药越甘24 h之后,PPD模型母鼠的糖水消耗百分比明显增加(P<0.01),在强迫游泳测试中的绝望不动时间明显降低(P<0.01),陌生环境摄食测试中的潜伏时间明显缩短,单位时间摄食量明显增加(P<0.01,P<0.01),表现出与西药氯胺酮相似的结果。结论慢性孕前应激可诱导Balb/c母鼠表现出产后抑郁样症状;中药越甘对产后抑郁小鼠模型具有与西药氯胺酮相似的快速抗抑郁作用。

不同禁食时间对四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的血清胰岛素和血糖的影响

目的 :通过ip四氧嘧啶 (ALX)建立速发型糖尿病小鼠模型观察不同禁食时间对ALX糖尿病小鼠模型的血清胰岛素和血糖的影响。方法 :测定了正常小鼠不同禁食时间的血糖以观察其血糖变化 ;按禁食时间 (0 ,6 ,12 ,18,2 4h)分组 ,各组ip 2 0 0mg/kg体重ALX造糖尿病小鼠模型 ,测定各组糖尿病小鼠在造模前 (即d 0 )、d 3、d8、d 13时的血糖和体重及d13时各小鼠的血清胰岛素水平 ,随时观察各组的成模率和死亡率。结果 :正常小鼠的血糖随着禁食时间的延长而下降 ;ALX糖尿病小鼠的血糖随着禁食时间的延长而上升 ,其血清胰岛素水平和体重则下降。本实验结果表明ALX糖尿病小鼠造模的最佳时间为禁食 12 18h后造模 ,禁食 18h糖尿病小鼠模型组为最好。结论

肺腺癌骨转移裸小鼠模型的建立及MicroCT观察

背景与目的骨转移占晚期肺癌的50%-70%。本研究以体外侵袭、迁移能力不同的肺腺癌细胞系A549、H1299、SPC-A-1、XL-2为基础建立肺腺癌骨转移裸小鼠模型,MicroCT观察骨转移情况。方法将50只6 w-8 w龄裸小鼠随机平均分为5组,4个实验组左心室分别注射相应四种细胞悬液(0.2 mL/只);对照组左心室注射等量生理盐水。注射后第二周起定期对各组小鼠进行MicroCT扫描,当小鼠明显消瘦时此组观察结束,结束前行骨组织病理学检查;对各实验组出现的骨转移部位按中轴骨和四肢骨归类,比较这两种部位之间的转移率;根据各组出现骨转移所用平均时间、骨转移率,对各细胞系骨转移能力进行统计分析。结果经MicroCT、病理学检查确定,各实验组出现不同骨转移率,对照组小鼠无骨转移现象;各实验组中轴骨转移率均明显高于四肢骨,这与临床上肺癌骨转移规律一致,模型建立成功。各实验组间发生骨转移的小鼠数目及出现转移所用平均时间无明显差异。结论MicroCT能清晰地检测到骨质破坏,利于骨转移情况的判断;我们成功建立了肺腺癌骨转移模型,为以后探索出新的肺腺癌乃至肺癌骨转移临床预防和治疗方案提供基础;4种肺腺癌细胞系体外侵袭、迁移能力强弱不等,但体内骨转移能力没有明显差异,其原因还有待进一步的探索。