小鼠^(13)N-NH_(3)·H_(2)O心肌灌注Micro-PET显像中尾静脉注射技术的优化与评估

目的通过自制小鼠尾静脉留置针,为小鼠^(13)N-NH_(3)·H_(2)O心肌灌注显像提供实用、快捷、成功率高的实验工具,并总结归纳出一套流畅、高效的实验流程。方法实验组和对照组分别使用本实验室自制的鼠尾静脉留置针及人外周浅静脉一次性使用静脉留置针(洁瑞26G)为小鼠行尾静脉留置针穿刺,经留置针推注^(13)N-NH_(3)·H_(2)O,配合Micro-PET动态采集,记录图像采集的成功率及图像质量并评价两组注射的优缺点。结果两组实验在穿刺成功率、穿刺时间、药物残留量、图像质量及小鼠尾部放射性药物残留量5方面差异均具有统计学意义(P<0.05)。综合比较,自制留置针制作及操作简便、穿刺成功率高、对鼠尾静脉损伤小,且在图像采集成功率及质量方面均占优势。结论自制鼠尾静脉留置针联合优化的实验流程,能显著提高鼠尾静脉穿刺成功率和图像质量,很好地应用于小鼠^(13)N-NH_(3)·H_(2)O心肌灌注Micro-PET显像中。

实验用小鼠尾静脉穿刺的几点体会

在哺乳动物中，小鼠由于体形最小，易于控制，生长繁殖快，且饲养管理方便，又有明确的质量控制标准，因此在生物医学各个领域中已得到广泛应用。目前，小鼠在实验中所用的给药方式有腹腔注射，灌胃给药，皮下注射，尾静脉注射等目，虽然尾静脉注射有着起效快，血药浓度高等优势，但由于小鼠尾静脉细小，穿刺难度大而限制了其使用。笔者通过自己及周围同学的实践发现，只要掌握了小鼠尾静脉注射的技巧，适当练习，尾静脉注射的成功率和重复率同样是很高的。

人脐血间充质干细胞尾静脉移植治疗扩张型心肌病

背景:体外研究表明人脐血间充质干细胞可分化为自律性跳动的心肌细胞,而经静脉移植人脐血间充质干细胞治疗扩张型心肌病心力衰竭的报道较少。目的:探讨经尾静脉移植人脐血间充质干细胞对扩张型心肌病大鼠心肌结构、心功能的影响。方法:Wistar大鼠通过腹腔注射阿霉素诱导扩张型心肌病模型,扩张型心肌病实验组于造模后8周经尾静脉移植人脐血间充质干细胞,扩张型心肌病对照组注射等量DMEM培养基。健康对照组不造模,于相同时间点注射等体积的生理盐水。结果与结论:与健康对照组相比,扩张型心肌病组心功能明显受损,且扩张型心肌病实验组受损较扩张型心肌病对照组轻;移植的细胞有肌钙蛋白T的表达。结果提示人脐血间充质干细胞移植能促进扩张型心肌病大鼠心功能恢复,使心肌组织病变减轻。

脑缺血再灌注损伤大鼠尾静脉移植脐带间充质干细胞的安全性

背景:尾静脉移植干细胞穿过血脑屏障到达宿主脑损伤区域内的具体机制尚不明确。目的:观察尾静脉移植人脐带间充质干细胞治疗脑缺血再灌注损伤大鼠的效果及安全性,并探讨其作用机制。方法:通过密度梯度离心法结合贴壁筛选法获取人脐带间充质干细胞并以BrdU标记。Sprague-Dawley大鼠以改良线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,移植A组在造模后第7天、移植B组在造模后第14天通过尾静脉移植人脐带间充质干细胞,模型组不做处理。结果与结论:①移植后7,14,28,35,42,49,56d,2个移植组mNSS评分低于模型组(P<0.05)。移植后7,14,28,35,42,49d,移植A组mNSS评分低于B组(P<0.05)。模型组在造模后第35天、移植A组在第42天、移植B组在第49天时mNSS评分进入平台期。②2个移植组大鼠脑组织未见到CD11b、MPO单染阳性细胞,可见Brdu+Nestin、Brdu+MAP-2、Brdu+GFAP、Brdu+FⅧ,Brdu+VEGF双染阳性细胞。结果表明人脐带间充质干细胞经尾静脉途径移植可以在宿主脑内存活,通过生成神经元样和神经胶质样细胞、促进新生血管形成并分泌神经营养因子等因素促进大鼠神经功能恢复,且未发现明显免疫排斥反应及异常分化细胞,具有较高的安全性。

清醒大鼠经皮穿刺大鼠尾静脉保留置管的方法改进

目的评估改进静脉留置针清醒大鼠经皮穿刺尾静脉,并行长时间保留置管的方法。方法92只SD或Wistar大鼠拟行清醒大鼠经皮尾静脉穿刺和保留置管,记录操作时间、护理情况的指标。结果92只大鼠皆穿刺成功,5只大鼠存在置管困难。操作时间(3.87±0.81)min,留管时间(22.46±6.32)h。留置管脱出的原因主要是大鼠啃咬外套保护管。结论改进的新方法安全可行,可广泛用于急性药理学及毒理学等实验。

尾静脉移植羊膜间充质干细胞治疗大鼠脑缺血再灌注损伤

背景:羊膜间充质干细胞是一种理想的再生医学领域的种子细胞来源。目的:探讨尾静脉移植羊膜间充质干细胞对脑缺血损伤的作用。方法:线栓法制备大鼠大脑中动脉梗死模型,缺血2h后进行再灌注。造模后24h通过尾静脉移植1.0×105个人羊膜间充质干细胞,于造模后2,4周完成神经功能评分后取材。以未移植的模型大鼠为对照。结果与结论:脑损伤后,大鼠出现神经功能评分明显增高,羊膜间充质干细胞移植1周,大鼠的神经功能评分显著降低(P<0.05),移植2,4周时,神经功能进一步改善。免疫荧光染色显示,移植羊膜间充质干细胞的大鼠脑组织中可见较多发绿色荧光的BrdU阳性细胞,主要位于缺血区周围、皮质下和侧脑室。说明尾静脉移植羊膜间充质干细胞可迁移至大鼠脑缺血区,改善大鼠的神经功能。

尾静脉移植骨髓间充质干细胞治疗脑缺血损伤大鼠的研究

目的通过尾静脉途径移植大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)到大脑中动脉闭塞模型(MCAO)的大鼠体内,观察MSCs移植对大鼠缺血性脑损伤后神经功能恢复的作用并探讨其作用机制。方法分离和培养大鼠的MSCs,线栓法制作脑缺血再灌注模型。将48只SD大鼠随机分为对照组和尾静脉移植组2组,移植组在造模7d后尾静脉途径将MSCs植入MCAO大鼠体内,对照组仅造模。比较两组大鼠在不同时间的神经功能评分的差异,免疫组化染色和脑源性神经生长因子(BDNF)分泌的情况。结果移植后1d两组之间无统计学差异;在2w、1m、2m、3m时移植组NSS评分均低于对照组;免疫组化结果发现尾静脉组见到双侧半球均可见较多的Brdu阳性细胞。移植后1m即可见到MSCs分化为Brdu+NSE、Brdu+GFAP免疫组化双阳性细胞。不同时间点移植组的BDNF分泌较对照组明显增高。结论 MSCs可以在体外分离、培养和传代,尾静脉移植的MSCs可在宿主脑内存活和分化并改善神经功能。MSCs移植后可促进脑内BDNF的分泌。

实用改良大鼠尾静脉穿刺置管术

目的改进清醒大鼠尾静脉留置针穿刺技术及固定技术,延长留置针留置时间。方法 50只SD大鼠均于清醒状态下行尾静脉穿刺及固定留置针,并用微量注射泵连续缓慢输液3h,每日1次,连续6d,观察大鼠清醒状态下在简易固定器内接受长时间连续输液的表现。结果 50只大鼠全部成功置管,顺利者穿刺时间(30±5)s,固定留置针时间(4±1.5)min,针管留置时间(52±4)h,连续6d输液过程中所有大鼠在简易固定器内均表现十分安静。结论改进后的大鼠尾静脉穿刺方法穿刺时间缩短,针管留置时间明显延长,该方法完全可以用作连续式静脉输液给药。

大鼠尾静脉取血方法介绍

大鼠作为实验室较为常用的实验动物,常被用作多种实验。但大鼠的形体比较小,因此在实验过程中不伤害大鼠顺利采取一定量的血液是大家关注和探讨的问题。目前,对大鼠取血的方法虽然较多,但多数都会对大鼠造成严重的伤害,甚至导致其死亡。

尾静脉移植人脂肪干细胞在脑缺血大鼠脑内的存活

背景:间充质干细胞移植可显著改善缺血性脑血管病神经功能。目的:观察尾静脉途径移植人脂肪源间充质干细胞对局灶性脑缺血大鼠神经功能的影响。方法:制作局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为实验组和对照组,实验组在造模后3d尾静脉注射5×106脂肪源间充质干细胞,对照组不进行细胞移植。结果与结论:两组大鼠神经功能缺损行为学评分随着细胞移植后时间延长均逐渐降低。移植后第14,21天,实验组大鼠行为学评分较对照组显著降低(P<0.05),且实验组改善程度明显优于对照组(P<0.01);移植的人脂肪源间充质干细胞在局灶性脑缺血大鼠血管周边和缺血周边区聚集并存活。说明尾静脉移植的脂肪源间充质干细胞可在宿主脑内存活,并改善神经功能。

新型实验大鼠尾静脉穿刺用途四联固定器的设计及其效用评价

目的改进清醒大鼠固定技术,提高成组实验大鼠尾静脉穿刺效率。方法采用聚苯乙烯、聚氯乙烯材料自制四联大鼠固定器。40只成年雄性SD大鼠(262±15 g)随机分成A、B两组,每组20只,A组使用自制四联固定器,B组使用市售有机玻璃大鼠固定器。在清醒状态下由单人操作行尾静脉穿刺并注射生理盐水200μL,完成大鼠固定、尾静脉水浴加温、穿刺注射、压迫止血的全过程。观察并记录穿刺时间、总操作时间、大鼠躁动次数等指标。结果 A组一次穿刺成功率80%,穿刺时间(9.25±3.70)s,总操作时间(47.05±4.65)s,大鼠躁动次数(1.4±0.8)次;B组一次穿刺成功率85%,穿刺时间(9.95±4.38)s,总操作时间(122.45±7.71)s,大鼠躁动次数(2.5±1.2)次。结论自制四联大鼠固定器结构简单,使用方便,明显缩短尾静脉穿刺点操作时间,提高了大鼠配合度及穿刺操作效率,是一种安全有效的设计。

大鼠清醒状态下尾静脉注射的快速操作技巧与体会

目的介绍大鼠清醒状态下尾静脉注射的快速操作技巧与体会,提高操作成功率。方法采用自制大鼠束缚衣结合操作者轻按的方法固定大鼠,一人辅助固定,一人穿刺,一人注药,在注射过程中尽量减少对鼠尾的损伤和对大鼠产生的应激,严格规定进针点和穿刺次数,限制一次性最大给药剂量和注射速度,并采取将进针与注射药液的部位分开等方法避免药物污的染和浪费。结果本法操作快速、可靠、稳定、重复性好、动物配合度高。结论本法避免了药物的浪费和污染,对于药物昂贵的尾静脉注射实验此做法尤为推荐。

小鼠尾静脉注射和采血简易固定装置的制作和使用方法

目的荫道设计制作简易小鼠固定装置,为小鼠尾静脉采血或注射提供安全、方便、经济的实验工具。方法选用废弃的50 ml离心管,按设计图纸进行剪切、拼装制成简易小鼠固定装置。结果该小鼠固定装置与目前市售同类固定装置比较,具有成本低廉、制作简单、使用安全、操作携带方便等优点。结论该小鼠固定装置为小鼠尾静脉采血及注射等实验操作提供了安全便利的方法。

大鼠非麻醉状态下双尾静脉穿刺高胰岛素-正血糖钳夹实验

目的大鼠在非麻醉状态下,采用双尾静脉穿刺术实施高胰岛素-正血糖钳夹实验并与局麻下尾动静脉插管高胰岛素-正血糖钳夹实验进行比较。方法普通饲料喂养和高脂高糖饲料喂养的SD大鼠各8只,喂养8周后,各分为2组,每组4只,分别进行不同的高胰岛素-正血糖钳夹实验;大鼠在非麻醉状态下,选用两条尾静脉行静脉穿刺,一条尾静脉靠近根部输入胰岛素[0.12 U/(kg·h)]和葡萄糖,同时另一条尾静脉靠近尾末1/3采血,进行高胰岛素-正血糖钳夹实验。结果大鼠在非麻醉状态下双尾静脉穿刺术后血糖在正常范围内,无明显波动,无大鼠死亡;高脂高糖饲料喂养组大鼠的葡萄糖输注率显著低于对照组(P<0.01);血糖变异系数和葡萄糖输入速率变异系数分别为5.7%和14.9%;双尾静脉穿刺术高胰岛素-正血糖钳夹实验与尾动静脉插管术高胰岛素-正血糖钳夹实验两组结果之间差异无统计学意义。结论在非麻醉状态下采用双尾静脉穿刺术行大鼠的高胰岛素-正血糖钳夹实验,具有安全可行、实验结果稳定、准确、操作简便、实验周期短、术后大鼠恢复快、可多次重复进行等优点;大鼠饲喂高脂高糖饲料可诱发明显的胰岛素抵抗。

大鼠连续尾静脉采血方法研究

目的采用自制的固定器控制SD大鼠,并用改进的采血方法对其尾静脉进行连续采血,根据相关指标评价其效果。方法 SD大鼠24只在乙醚麻醉下,采用改进的一次性静脉输液针进行尾静脉采血并补充生理盐水,每日1次,连续13 d。观察采血成功率和大鼠存活率。结果 24只SD大鼠连续12 d采血成功;1只SD大鼠在第13天死亡,原因为乙醚麻醉过量,只采到该只大鼠0.2 m L血液。采血成功率为99.68%,SD大鼠存活率为95.83%。结论使用改良后的一次性静脉输液针,实施SD大鼠尾静脉采血并补充生理盐水的方法安全有效、灵活方便,适用于连续时间点采集SD大鼠静脉血的实验研究。

静脉留置针在大鼠尾静脉注射中的方法和技巧

目的探讨大鼠尾静脉注射的方法和技巧,旨在提高注射效率和成功率.方法使用一次性静脉留置针对90只SD雄性大鼠连续7 d进行尾静脉穿刺注射.结果穿刺注射操作准确、快捷,第一针穿刺成功率达90%以上,总成功率达99%,而且在连续7 d(1次/d)的穿刺注射过程中,都能保证高效快捷的完成.结论采用的静脉留置针进行大鼠尾静脉穿刺注射技术准确、高效,具有提高实验效率和成功率的价值.

大鼠尾静脉注射法

大鼠尾静脉注射是药理、毒理实验中常用的注射方法．有些实验要求注射时快速、准确。我们在长期的动物实验技能操作中，总结出一种新的大鼠尾静脉注射方法，具体方法介绍如下。

一种小鼠尾静脉注射的操作方法

目的为小鼠尾静脉注射提供一种实用的装置与使用方法。方法利用自制装置上的恒温部分、照明部分以及固定部分进行小鼠尾静脉注射操作,对比使用装置进行操作前后注射的难易程度及完成时间的差别。结果使用自制装置进行尾静脉注射更准确更快速。结论该自制装置在小鼠尾静脉注射操作过程中能明显提高注射成功率,缩短注射时间。

大鼠尾静脉注射方法的比较

目的比较24号套管针尾静脉注射法和0.5号针头尾静脉注射法的注射成功率,建立一种准确可靠的大鼠尾静脉注射方法。方法 Wistar大鼠60只分别采用24号套管针和0.5号针头进行尾静脉注射,观察针头置入成功率和注射成功率。结果套管针置入成功率和0.5号针头置入成功率差异无统计学意义,套管针尾静脉注射成功率高于0.5号针头。结论大鼠套管针尾静脉注射法优于0.5号针头尾静脉注射法。