铁缺乏对红细胞膜带3蛋白结构相关酶的影响

方法：测定了１０种红细胞酶。结果：１．缺铁性贫血大鼠红细胞中大多数胞浆酶活力呈代偿性增高，而带３膜绑酶无显著增高表现。２．酶的稳定性在胞浆酶和膜绑酶均明显下降，稳定性测值可作为反映红细胞寿命的一项指标。３．铁缺乏使与ＣＤＢ３结合的ＰＦＫ、Ｇ３ＰＤ的活力与稳定性显著下降；带３蛋白分子降解、含量下降可能是缺铁红细胞膜绑酶病变的直接原因。４．适当的铁剂治疗对于缺铁红细胞酶稳定性的恢复有肯定作用。

人类红细胞膜带3蛋白C端域Lys892～Phe895在Cl^-转运过程中作用的研究

采用酵母表面展示系统 ,表达带 3蛋白膜段结构域 (Gln4 0 4～Val911)至酵母细胞膜 ,功能研究表明 ,表达后的膜段结构域具有离子转运的活性 ,同时 ,带 3蛋白抑制剂 4 ,4′ 二异硫氰 2 ,2′ 二黄酸芪 (DIDS)能够抑制其离子转运的功能 .利用PCR方法 ,以 pFAST Bac mdb3为模板扩增出带 3蛋白膜段结构域的 4种截断突变体 ,分别去除带 3蛋白C端域后 4个 (Ala90 8～Val911)、 16个 (Asp896～Val911)、 2 0个 (Lys892～Val911)、 32个(Asn880～Val911)氨基酸序列 ,测序后将其克隆至表达载体 pYD1上 ,构建酵母表达质粒 pYD1 Trunc4、pYD1 Trunc16、pYD1 Trunc2 0和 pYD1 Trunc32 ,诱导 4组突变体的蛋白质表达 .然后测定Cl-的转运活性 ,结果发现去除后 2 0个 (Lys892～Val911)氨基酸残基后 ,离子转运活性明显下降 ,而去除后 32个 (Asn880～Val911)后 ,离子转运没有进一步下降 ,说明Lys892～Phe895 4个氨基酸残基在带

带3蛋白的表达对红细胞骨架的影响

将免疫金银法应用于扫描电镜以研究带３蛋白（ｂａｎｄ３）在正常红细胞（ＲＢＣ）及缺铁性贫血（ＩＤＡ）的表达、分布以及与ＲＢＣ骨架的关系。结果显示：ＲＢＣｂａｎｄ３呈强阳性表达且分布较均匀。ＩＤＡ阳性表达与细胞变形程度有关。提示，ＩＤＡ可导致ｂａｎｄ３的缺乏以及影响ＲＢＣ骨架的稳定。

红细胞膜带3蛋白与运动研究展望

红细胞运输氧和二氧化碳的基础是带 3蛋白介导的Cl- /HCO3- 转运。带 3蛋白还有调节红细胞糖酵解速率、变形能力和介导红细胞清除功能。运动引起的血乳酸、自由基、内环境变化和能量消耗可影响带 3蛋白的功能。

恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白表达及其对K562细胞生长的影响

背景与目的:带3蛋白介导Cl-/H CO3-的跨膜交换,从而调节细胞内pH值。有学者证实,Cl-/H CO3-交换的异常可引起细胞内pH值明显改变,使细胞发生增殖或凋亡。本研究旨在探讨红细胞膜带3蛋白的表达及其对K562细胞生长的影响。方法:以SPQ为荧光探针测定8例恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性,W estern blot检测带3蛋白表达。转染带3蛋白膜段结构域cDNA至K562细胞,观察带3蛋白膜段结构域表达后对K562细胞阴离子转运活性及细胞增殖的影响。结果:7例恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的离子转运活性明显增强,5例蛋白质表达增强。同时发现带3蛋白膜段结构域表达于K562细胞膜后,对K562细胞生长有一定促进作用。结论:带3蛋白在部分恶性肿瘤患者红细胞膜表达增强,可作为恶性肿瘤的一种潜在标志物。

长期运动训练对大鼠红细胞膜带3蛋白磷酸化的影响

对长期运动训练大鼠红细胞带3蛋白磷酸化的变化进行研究,为运动训练导致红细胞溶血增加提供理论依据。实验结果表明长期大强度递增负荷跑台运动引起运动组大鼠红细胞参数显著降低,呈现运动性低血色素状态;运动组红细胞膜带3蛋白磷酸化与安静组比较非常显著性增加(P<0.01),表明长期大强度递增负荷跑台运动导致红细胞膜结构和功能受到严重影响,从而影响红细胞膜骨架,进而使红细胞溶血增加。

表达血型糖蛋白A和带3蛋白膜段基因的杆状病毒转移载体的构建

用RT-PCR方法从K562细胞中扩增了410 bp的血型糖蛋白A基因,以含有带3蛋白全长基因的质粒为模板扩增了1.5kb的带3蛋白膜段基因,分别克隆到pMD18-T载体上,筛选到阳性重组子pMD18-T-GPA和pMD18-T-B3m。再将基因分别亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHisB中,随机筛选得到重组病毒转移载体pBacGPA和pBacB3m,为表达和进一步研究血型糖蛋白A和带3蛋白的相互关系打下基础。

稀土离子对带3蛋白阴离子转运活性及血影膜流动性的影响

测定了Ｌａ２＋、Ｇｄ３＋、Ｔｂ３＋及Ｙｂ３＋四种稀土离子对带３蛋白阴离子转运活性及对血影膜脂流动性的影响。结果如下：（１）稀土离子可强烈抑制带３蛋白的阴离子转运活性，抑制程度随稀土离子浓度增加而增加，最高达到６３．７％。（２）不同的稀土离子对带３蛋白的抑制程度不同，抑制程度从大到小的顺序为Ｙｂ＞Ｔｂ＞Ｇｄ＞Ｌａ。（３）稀土离子可显著降低血影膜流动性，并且在脂双层的全部厚度内都降低，降低的程度随稀土浓度的增大而增大。（４）不同的稀土离子对血影膜流动性的影响不同，作用从大到小的顺序与它们对带３蛋白活性抑制程度大小的顺序一致。（５）稀土离子对血影膜流动性的影响特征与稀土离子抑制带３蛋白活性的特征完全相符，带３蛋白中承担阴离子转运功能的部分是贯穿性膜蛋白，并且在阴离子转运过程中要发生显著的构象变化，因此稀土离子可能是通过作用于膜脂再影响带３蛋白活性的。

放疗对恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白表达和功能的影响

[目的]研究放疗对恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的表达和功能的影响。[方法]随机抽取8例恶性肿瘤患者并取其治疗前后的红细胞,应用Clˉ荧光探针6-甲基-3-磺丙基-1-喹啉-水化合物(SPQ)检测其治疗前后红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性,并通过Westernblot检定治疗前后带3蛋白表达量的变化。[结果]8例恶性肿瘤患者放疗后红细胞膜带3蛋白的离子转运活性均明显减弱,其中6例患者红细胞膜带3蛋白表达减少。[结论]带3蛋白的表达和功能与肿瘤细胞的增殖和凋亡相关。

非小细胞肺癌红细胞膜带3蛋白功能的观察

目的观察早晚期非小细胞肺癌患者红细胞膜带3蛋白功能变化。方法正常对照组:健康成年人15名;早期组:Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌15例;晚期组:Ⅳ期非小细胞肺癌15例。应用Cl-荧光探针6-甲基-3-磺丙基-1-喹啉-水化合物(SPQ)分别检测3组红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性。结果晚期组患者红细胞膜带3蛋白的离子转运活性明显比早期组升高。结论晚期非小细胞肺癌红细胞膜带3蛋白的离子转运活性升高。提示带3蛋白的阴离子转运活性与非小细胞肺癌的发生、发展有关。

人红细胞带3蛋白胞质段的克隆及其表达

人红细胞带３ 蛋白胞质段（ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｄｏｍａｉｎ ｏｆ ｂａｎｄ ３，ｃｄｂ３） 起着将膜与膜骨架、细胞内环境相联系的重要作用．以带３ 蛋白全长基因为模板， 用ＰＣＲ方法扩增出ｃｄｂ３ 片段， 克隆至ｐＲＳＥＴ表达质粒上， 转化大肠杆菌ＢＬ２１ （ＤＥ３） ． 转化菌经诱导表达出较高含量的ｃｄｂ３ 蛋白， 纯化后，

人带3蛋白对红细胞携氧过程调控的研究进展

带3蛋白（band 3 protein,Band3）是一种红细胞膜蛋白,因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳时分布于第3条带而得名。Band3在红细胞膜中含量约为膜蛋白的25%,其属于糖蛋白的一种,在质膜中穿越12~14次,是多次跨膜蛋白。

人卵透明带3蛋白的二级结构和B细胞抗原表位预测

目的：预测并综合分析人卵透明带3（human zona pellucida 3,hZP3）蛋白的二级结构及其B细胞抗原表位。方法：以hZP3蛋白的基因序列为材料,采用Garnier-Robson法、Chou-Fasman法和Karplus-Schulz法预测其结构蛋白的二级结构及蛋白骨架区的柔韧性,采用Kyte-Doolittle法对蛋白的亲水性进行分析,Emini法预测蛋白的表面可能性,Jameson-Wolf法预测蛋白的抗原指数。结果：hZP3蛋白含有较多的β折叠和转角结构。该蛋白第27～31、36～46、114～133、140～151、237～240和324～329区段可能是α-螺旋中心;hZP3蛋白分子第52～54、60～67、74～78、100～111、158～169、181～185、190～193、210～218、226～229、311～317、335～349和353～360区段可能是β-折叠中心。hZP3蛋白具有多处抗原指数较高的区段,其中近中部区段和近羧基端的第92～95、132～137、171～178、239～245、252～255、279～286、292～305和319～324区段含有潜在的B细胞优势抗原表位。结论：以蛋白质的二级结构预测作为辅助手段,用抗原指数、亲水性参数和表面可能性参数预测hZP3蛋白的B细胞抗原表位,为实验确定hZP3蛋白的B细胞抗原表位并以此进行免疫避孕研究奠定基础。

带3蛋白6种跨膜截断体阴离子转运功能的研究

目的 探寻带 3蛋白膜段域不同跨膜片段在带 3蛋白离子转运过程中的作用。方法 构建编码带 3蛋白膜段域片段的重组质粒 ,将其转入酵母细胞诱导表达 ,并以蛋白免疫印记及荧光探针的方法检测目的蛋白。结果 拥有前 1 0个跨膜α螺旋的带 3蛋白片段TM1 1 0具有氯离子转运活性 ,而TM1 8,TM1 9则完全失去功能。此外 ,删除C末端后 1 6个氨基酸的带 3蛋白膜段域片段功能与拥有全长膜段域的带 3蛋白相仿。结论 TM1 0在带

紫草多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜流动性与带3蛋白的影响

目的:观察紫草多糖对S180荷瘤小鼠瘤重、红细胞膜流动性和带3蛋白含量的影响。方法:采用荧光探针DPH标记法测定红细胞膜的荧光偏振度P,计算微黏度(η)与膜脂流动性(LFU);电泳法测定红细胞膜带3蛋白含量。结果:紫草多糖中剂量组抑瘤率达43.05%;且各剂量组对红细胞膜膜脂流动性、带3蛋白均有影响,以中剂量组效果最佳,与对照组相比P<0.01,P<0.05。结论:紫草多糖通过影响荷瘤小鼠红细胞膜流动性和带3蛋白恢复红细胞的正常功能发挥其抗肿瘤作用。

衰老红细胞与带3蛋白

循环系统里的成熟红细胞在其生命过程里经历着氧化性衰老 ,相应细胞组份出现血红蛋白变性、膜蛋白交联、带 3蛋白聚集以及带 3蛋白降解等多种修饰 .这些修饰作为红细胞膜上的衰老信号参与构成衰老细胞抗原 ,由此启动与IgG自身抗体 (主要为带 3蛋白抗体 )的结合以及补体的沉淀 ,最终是免疫吞噬系统对异常细胞的识别清除 .现就衰老红细胞与带 3蛋白的关系作一综述 .

红细胞膜带3蛋白酪氨酸磷酸化的研究进展

生理红细胞膜带 3蛋白磷酸酪氨酸因受PTKs及PTPs作用而处于低水平 ,体外某些因素通过作用于PTKs及PTPs来改变酪氨酸的磷酸化状态 ,而酪氨酸磷酸化的增强是细胞膜骨架、形态、代谢乃至带

红细胞膜带3蛋白的研究进展

正常红细胞呈双凹圆盘状,形态柔顺,在循环血流中能抵抗血管和脏器壁的切应力而不致碎裂,能把氧气运输给组织的各部位,再从各部位运送出代谢产物二氧化碳,是机体不可缺少的＂运输队＂。红细胞特有的柔韧性和变形性源自本身的膜结构和细胞骨架支撑,根据膜蛋白在红细胞超微结构上功能的不同,膜蛋白分为骨架蛋白、整合蛋白和锚定蛋白。带3蛋白是整合蛋白的代表性蛋白,对红细胞结构的稳定性和生理功能的正常发挥起着至关重要的作用。

人带3蛋白结构和功能的研究进展

带 3蛋白是一种多功能嵌膜蛋白 ,其跨膜区的拓朴形一直是研究的热点 ,相继有 1 4 ,1 2和 1 3次跨膜模型之说。带 3蛋白除了执行阴离子交换功能外 ,在稳定红细胞形态、调节血红蛋白携氧能力、调节和保护糖酵解酶活性、介导衰老红细胞的清除和肾小管酸分泌等方面都有重要作用。