一株产异淀粉酶栖热菌的生长和产酶初步研究

异淀粉酶是一类在工业中有重要应用价值的淀粉酶,从云南梁河温泉水样中分离筛选到1株产异淀粉酶的菌株,初步鉴定为栖热菌(Thermus).该菌在8～19 h为对数生长期,17 h生长最快,20 h后进入稳定期,产酶伴随菌体生长同时发生,进入稳定期后产酶迅速提高,39 h产酶量达最高,初始酶活达4.14 u/mL.

异淀粉酶改性玉米淀粉胶囊的研制及性能研究

以玉米淀粉为主料,聚乙烯醇、海藻酸钠、甘油及卡拉胶等为辅料制备异淀粉酶改性玉米淀粉胶囊,并对其吸湿性、崩解性等进行测定。结果表明:经0.2m L 10mg/m L的异淀粉酶处理5min后得到的玉米淀粉在溶胀、糊化等一系列过程中操作可控性增强,改性后溶胶的粘度降低了约42%。通过添加辅料3.0%卡拉胶、0.2g KCl、1.0%甘油、0.5%海藻酸钠及0.2%聚乙烯醇,所得淀粉植物胶成膜性、阻水性及强度均明显增强,相比于明胶胶囊崩解时限缩短。

微波与NTG复合诱变育种Klebsiella高产异淀粉酶突变株

从原始菌克雷伯氏菌(Klebsiella)出发,经过微波与NTG复合诱变后,筛选、初筛分离得高产异淀粉酶的菌株NCP-03,酶活力由原来的28U/mL提高到210U/mL,比原始菌种产酶活力提高了近7倍。并对NCP-03发酵产酶条件进行了初步优化。

异淀粉酶在饲料工业中的应用价值

在动物体内,营养物质的消化和吸收过程中,酶起着非常重要的促进作用。一般情况下,动物自身能分泌消化酶—蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等,进入消化道,对其摄入的蛋白、脂肪和淀粉等营养物质进行降解,成为能被吸收的小分子。

水稻异淀粉酶基因ISA1及其启动子的表达特性分析

利用实时定量RT-PCR方法研究了水稻异淀粉酶基因ISA1在各组织及不同发育阶段籽粒中的表达模式,结果表明该基因只在发育籽粒中表达。同时,克隆了ISA1基因起始密码子上游1.1kb和2.1kb两个不同长度的启动子片段,并分别与GUS报告基因融合,经农杆菌介导转入水稻中。对转基因水稻植株中GUS活性的定性与定量结果表明,2.1kb的ISA1启动子具有很好的胚乳表达特异性,与内源基因定量表达分析的结果一致;而1.1kb的ISA1启动子则不具备该表达特性,它在胚乳、茎、茎节及谷壳中都有很高的表达。这可能是因为2.1kb启动子中含有抑制目的基因在茎等组织或器官中表达的顺式作用元件。

三株异淀粉酶酶源菌株的筛选分离及部分酶学性质研究

从云南温泉中分离鉴定了3株产异淀粉酶的芽孢杆菌，经16SrDNA序列比对分析及主要生理生化研究，初步鉴定为：Bacillus amyloliquefacie LCEP-1、Bacillus subtilis DL-34—2、Bacillus subtilis DMJS-2—1。GeneBank登录号分别为：gb．GQ199589、gb．GQ199593、gb．GQ199594。3株菌所产的异淀粉酶都能降解玉米支链淀粉。酶解反应的最适pH分别为pH6．8、5．4和pH7．8；最适温度分别为60、55、60℃。优化条件下，最高酶活分别为：36．5、18．89、11．08μ／mL。3株菌的酶对不同金属离子有不同的反应，金属螯合剂EDTA对酶活又有较强的抑制作用，推测可能都属于金属酶。3株菌能在偏酸性至中性的pH范围内（pH4．4～8．0）保持稳定，可以在pH变化较大的条件下保持较高的酶活，在偏酸性、中性和弱碱性环境中都能有效地水解淀粉质底物。3株菌所产异淀粉酶，底物专一性强，最适pH可低至5．4。

酸性异淀粉酶产生菌的筛选及鉴定

从淀粉厂附近的土壤中分离出产脱枝酶的菌株,通过初筛和复筛,得到1株产偏酸性异淀粉酶活力较高的菌株YDF30。其发酵56h时酶活力最大,达到16．4U/mL。所产生的异淀粉酶最适反应温度为55℃,最适pH值为5．2,在低于50℃和pH5．2～9．6条件下较稳定。依据其形态特征和生理生化实验结果,初步鉴定该菌株为芽孢杆菌(Bacillus sp．)。

用异淀粉酶改进淀粉膜的研究

用异淀粉酶可使淀粉中的支淀粉脱支而形成链淀粉,从而提高淀粉膜的成膜性能及强度。本文用正交试验法研究异淀粉酶对马铃薯淀粉脱支的作用条件,并描绘了异淀粉酶的作用时间与膜的抗张强度、伸长百分率、耐折度、透湿性、链淀粉含量的关系曲线,为制取性能好的食用淀粉膜提供依据。

异淀粉酶水解豌豆淀粉及其在玻纤浸润中的应用

该文研究了豌豆淀粉的异淀粉酶水解过程,并将其水解产物用作玻纤浸润剂。结果表明,异淀粉酶对豌豆淀粉的水解采用点蚀和劈裂两种方式进行。水解对淀粉颗粒聚集行为有影响,具体表现为粒度、X射线衍射强度和黏度的波动。当酶解温度为50℃,酶解时间30 h,所得酶解淀粉液表面张力可降至40 mN/m,与玻纤临界表面张力30 mN/m接近。同时,酶解破坏使更多的淀粉羟基被暴露出来,因此,水解产物可以在玻纤表面轻易铺展,并与玻纤表面牢固结合。直接以水解淀粉悬浊液为浸润剂,玻纤拉丝过程可顺利进行,且能在玻纤表面形成均匀的保护膜,所得68 tex玻纤断裂强力平均达到25.0 N。

酸性异淀粉酶产生菌的产酶条件优化

从淀粉厂附近的土壤中分离出产偏酸性异淀粉酶的细菌YDF30,诱变处理后得到一株高产酶突变株HY19。利用单因素法及正交实验对HY19进行了液体发酵条件的研究。最佳的培养基组成和培养条件为:玉米淀粉2.0%、蛋白胨1.0%、酵母粉0.5%、MgSO_4·7H_2O 0.07%、K_2HPO_4 0.1%。培养基的初始pH为6.5,接种量为10%,250mL三角瓶中装液量为20mL,34℃,200r/min,培养64h。经发酵条件优化后,酶活力达到298.5U/mL。

异淀粉酶法高直链银杏淀粉的制备

通过单因素实验考察了酶用量、淀粉溶液pH值、反应温度、反应时间等4个因素对水解产物中直链淀粉含量的影响;在此基础上采用Box-Behnken实验设计,优化了异淀粉酶法制备高直链银杏淀粉的工艺。结果表明:在异淀粉酶用量130 U/L、pH值4.8、反应温度47℃、反应时间210 min条件下,水解产物直链淀粉质量分数为76.32%,与理论预测值之间误差仅为0.78%,表明采用响应面法优化得到的高直链银杏淀粉制备工艺参数准确可靠。淀粉和碘复合物紫外–可见吸收光谱分析表明,水解产物中生成了大量的直链淀粉,证实异淀粉酶对银杏淀粉具有较强的脱支作用,是制备高直链银杏淀粉的良好途径。

产气气杆菌异淀粉酶高产菌株的选育

该文以产气气杆菌为出发菌株,经紫外线和甲基磺酸乙酯(EMS)复合诱变,从大量突变株中筛选出一株产酶稳定且酶活较高的菌株UV2-10-6,酶活由最初的2.9592U/mL提高为14.82U/mL,提高了4倍。并探讨了一种高效的异淀粉酶产生菌的选育方法,为下一步培养基优化打下基础。

用异淀粉酶改进淀粉膜的研究

异淀粉酸可使淀粉中的支淀粉脱支而形成链淀粉,从而提高淀粉膜的成膜性能及强度。本文用正交试验法研究并淀粉酶对马铃薯淀粉脱支的作用条件,并描绘了异淀粉酶的作用时间与膜的抗张强度,伸长百分率、耐折度、透湿性、链淀粉含量的关系曲线,为制取性能好的食用淀粉膜提供依据。

SPSS软件在黑曲霉产异淀粉酶培养基优化中的应用

在固态发酵条件下,研究了碳源、氮源对黑曲霉(Aspergillus niger)淀粉酶系的影响,探索糖化酶、酸性α-淀粉酶及异淀粉酶的分泌规律;采用正交实验进一步优化产酶培养基,其方差分析和S-N-K法分析结果表明:黑曲霉产异淀粉酶的优化培养基分别为麸皮7.5g,葡萄糖0.06g,支链淀粉0.24g,酵母粉0.5g,营养盐8m L;在此基础上,缩短了异淀粉酶最高酶活形成时间,同时糖化酶、酸性α-淀粉酶最高酶活分别降低了36.7%和166%,这为异淀粉酶分离纯化提供了基础。

黄杆菌产异淀粉酶的性质研究

从淀粉厂附近的土壤中筛选得到1株产异淀粉酶的黄杆菌菌株D15。本试验将其发酵液通过硫酸铵盐析后研究其产异淀粉酶的性质,结果表明：该酶在pH值6.4~8.2范围内活力较高,酶反应的最适pH值为7.0;在40~55℃范围内酶活力较高,酶反应的最适温度为45℃;在低于50℃及pH值5.2~8.8的条件下较稳定存在。

用紫外诱变及紫外+硫酸二乙酯复合诱变方法选育高产异淀粉酶菌株

以兰州市淀粉厂附近的土壤中分离到的地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis)为出发菌株 ,经过紫外线诱变及紫外线 (UV) +硫酸二乙酯 (DES)复合诱变方法 ,从大量突变株中进行筛选 ,最终成功地选育出一株高产、稳定、中温的异淀粉酶生产菌株UV - 6 -DI,其产酶活力由出发菌的 3 3 5U mL提高到 7 3 7U mL ,提高了 1 2 0 %。

异淀粉酶产生菌的分离纯化及生长特性

自然界是微生物的大本营,工业微生物几乎都是从自然界选育来的。我们从兰州市淀粉厂附近的土壤中分离到产异淀粉酶的菌株,将样品于富集培养基中进行富集养后,分离、纯化筛选出酶活较高的菌株,对其进行了鉴定。依据新版伯杰细菌鉴定手册,鉴定该菌株为地衣芽胞杆菌(BacillusLicheniformis),与文献[1,2]中所报道的异淀粉酶菌的产生菌是一致的对该菌株的生长特性进一步研究的结果是2-18小时是该菌的对数生长期,在16小时时菌体生长最快,18小时以后菌体生长进入稳定期。菌体32℃摇瓶发酵培养不同时间后能在540nm处测其OD值计算其酶活发现该菌的产酶是伴随着菌体的生长同时发生的,当菌体生长达稳定期后,产酶量迅速增加,到48小时,产酶量达最多,48小时以后产酶量逐渐趋于稳定。

异淀粉酶性质研究

以兰州市淀粉厂附近土壤中分离到的地衣状芽孢杆菌 (BacillusLicheniformis)为菌株 ,经过诱变选育出一株高产异淀粉酶菌株 ,并对其产生的异淀粉酶的性质进行了研究 ,结果表明酶作用的最适条件为 5 0℃ ,pH为 6 .8;在 5 0℃以下 ,pH 5 .0～ 8.0条件下较稳定 ;酶活性受Ca2 + 、Mg2 + 、Mn2 + 激活 ,Mn2 + 的激活作用较强 ,但受到Fe2 + 和Cu2 + 的严重抑制 .

响应面法优化黑曲霉产异淀粉酶的培养条件

在液态发酵条件下,采用单因素实验确定了Aspergillus niger PZ331产异淀粉酶的最适碳源和氮源,分别为蔗糖和硝酸铵。在上述基础上利用Plackett-Burman设计对影响产异淀粉酶的因素进行评价,并筛选出硝酸铵、接种量、培养温度3个主要因素;继而利用响应面设计优化了最佳硝酸铵浓度、接种量和培养温度。最终确定了最优培养条件为:蔗糖10 g/L,硝酸铵10 g/L,磷酸氢二钾3 g/L,硫酸亚铁0.01 g/L,硫酸镁1 g/L,起始p H值4.2;接种量2%(孢子浓度为107cfu/m L),30℃培养72 h,酶活达137.3μ/m L;比基础培养基的提高了1.71倍左右。

短杆菌异淀粉酶产生菌选育及酶作用性质研究

研究和讨论了一株短杆菌异淀粉酶的筛选,诱变,产酶条件及部分酶学特性。结果是摇瓶发酵液中酶活单位最高可达520u/ml.酶作用最适pH可低至5.0,最适温度可高至55℃。该酶对多种不同的含α-1,6-葡萄糖苷键的底物皆具有良好的水解作用。水解产物的分子量分布情况类似于假单胞菌异淀粉酶。