氟暴露对大鼠心肌组织凋亡的影响

目的:探究慢性氟中毒对心肌的毒性作用及其对JNK介导的凋亡影响。方法:将Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照组及不同浓度的氟化钠溶液(50、100、200 mg·L^(-1) NaF)处理组,各处理组大鼠自由饮用各自浓度的氟化钠溶液,对照组大鼠饮用去离子水。4个月后获得慢性氟中毒大鼠模型,通过HE染色法比较不同浓度NaF对大鼠心肌组织结构的影响,观察心肌组织的损伤情况;使用Western blot法对心肌组织凋亡相关蛋白的表达进行检测,观察NaF对凋亡蛋白表达量的影响,主要包括p-JNK、Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达情况。结果:4个月后建立了慢性氟中毒大鼠模型,氟中毒各组大鼠心肌组织出现肌纤维结构紊乱、肌纤维断裂、肌细胞萎缩、肌间隙增宽、横纹消失等;Western blot检测的结果表明,与对照组相比,慢性氟中毒各组大鼠心肌Bcl-2蛋白表达量明显降低(P<0.05),Bax、Caspase-3和p-JNK的蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:慢性氟中毒可能通过激活JNK信号通路引起心肌凋亡,细胞凋亡参与了氟对心肌组织的损伤。

心不藏神不寐大鼠海马与心肌组织中凋亡相关蛋白表达及细胞凋亡情况研究

目的探讨心不藏神不寐与海马和心肌组织细胞凋亡的关系。方法将14只SPF级雄性SD大鼠随机分为模型组与正常组,每组7只。模型组大鼠采用咖啡因+对氯苯丙氨酸腹腔注射方法构建心不藏神不寐模型,正常组大鼠给予同等剂量生理盐水腹腔注射。注射10 d后处死2组大鼠,RT-PCR法检测海马和心肌组织中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达情况;免疫组化染色观察海马和心肌组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白阳性表达情况;TUNEL染色观察海马与心肌组织细胞情况,并计算凋亡率。结果模型组大鼠海马组织中Bax、Caspase-3 mRNA相对表达量和心肌组织中Caspase-3 mRNA相对表达量均明显高于正常组(P均<0.05),海马组织和心肌组织中Bcl-2 mRNA相对表达量均明显低于正常组(P<0.05);模型组大鼠海马和心肌组织细胞均出现凋亡,细胞凋亡率均明显高于正常组(P均<0.05)。结论心不藏神不寐大鼠海马与心肌组织细胞发生明显凋亡,心不藏神不寐的发生发展与海马和心肌组织细胞的过度凋亡有关。

基于LC-MS/MS的鹿角方中红景天苷在慢性心力衰竭大鼠心肌组织中的分布

目的分析鹿角方中红景天苷在慢性心力衰竭大鼠心肌组织中的分布。方法45只SPF级雄性Wistar大鼠,6~8周龄,采用简单随机抽样法选取8只作为假手术组,假手术组大鼠只暴露腹主动脉不结扎;其余大鼠行腹主动脉缩窄手术,以血管结扎处明显缩窄示手术成功,术后将存活的32只模型大鼠按体重进行区组随机分组,分为模型组(n=8)、鹿角方低剂量组(1.100 g/kg,n=8)、鹿角方中剂量组(2.200 g/kg,n=8)、鹿角方高剂量组(4.400 g/kg,n=8),药物灌胃干预30周。末次灌胃给药2 h后麻醉大鼠,腹主动脉取血,采集心肌组织,LC-MS/MS法分析不同剂量鹿角方组红景天苷在大鼠左、右心室壁的分布。结果红景天苷在1.195~1195.000 ng/ml范围内线性关系良好(r>0.999),精密度RSD%<15%,准确度为90.817%~106.500%,相对回收率为95.222%~100.814%,基质效应RSD%<15%,样品冰浴放置1 h、前处理后室温放置6 h及自动进样器放置48 h内红景天苷的稳定性良好。红景天苷在右心室壁含量与给药剂量线性拟合值R2为0.983,在中、高剂量鹿角方组中红景天苷在左心室壁的含量分别为右心室壁含量的(47.383±12.156)%、(43.805±9.644)%。结论建立的分析方法具有可行性,红景天苷在慢性心力衰竭大鼠左、右心室分布存在差异。

当归补血汤对射血分数保留型心力衰竭大鼠心肌组织铁死亡的影响

目的观察当归补血汤对射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)大鼠心肌组织铁死亡的影响。方法将大鼠随机分为对照组、模型组和当归补血汤组,模型组和当归补血汤组给予8%高盐饲料饲养8周,造模成功后当归补血汤组灌胃给予4 g/kg当归补血汤,每天1次,连续4周;对照组给予0.3%低盐饲料饲养12周。给药结束后,采用超声心动图检测大鼠左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左心室舒张末期内径(LVIDD)、舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd);HE、Masson染色观察大鼠心肌组织病理变化;透射电子显微镜观察心肌组织线粒体改变;ELISA法检测血清BNP、NT-proBNP水平,心肌组织Fe 3^(+)水平,血清和心肌组织ROS、MDA、LPO、GSH水平及SOD活性;免疫荧光染色和Western blot法检测心肌组织铁死亡标志蛋白GPX4、FTH1、xCT表达。结果与模型组比较,当归补血汤组LVEF、LVFS升高(P<0.01),LVIDD、LVPWd降低(P<0.05,P<0.01);血清BNP、NT-proBNP水平降低(P<0.01);心肌细胞形态改善,纤维化减少;心肌组织Fe 3^(+)水平降低(P<0.01);血清和心肌组织MDA、ROS、LPO均降低(P<0.01),GSH水平及SOD活性均升高(P<0.01);心肌组织铁死亡相关蛋白GPX4、FTH1、xCT蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01)。结论当归补血汤可能通过抑制心肌组织铁死亡的发生,减轻氧化应激反应,保护HFpEF大鼠的心脏功能。

CMR增强扫描对艾滋病患者心肌组织和心功能改变评估价值

目的 探讨心脏磁共振(CMR)增强扫描分析获得性免疫缺陷综合征(简称艾滋病)患者心肌组织和心功能改变情况。方法 选择艾滋病患者56例(观察组),其中男性42例,女性14例;年龄21.2~57.6岁,平均年龄40.50岁;身体质量指数18.3~26.1 kg/m^(2),平均身体质量指数22.21 kg/m^(2)。同时选择人类免疫缺陷病毒(HIV)感染患者56例(对照组),其中男性40例,女性16例;年龄20.5~59.4岁,平均年龄39.69岁;身体质量指数18.0~25.8 kg/m^(2),平均身体质量指数22.15 kg/m^(2)。两组均给予CMR增强扫描,比较各组患者CMR检查参数差异。结果 观察组心脏损伤发生率为37.50%,高于对照组(P <0.05)。观察组左心室心肌质量(LVM)、心肌灌注曲线下面积、相对峰值信号强度为(80.15±11.43) g、(48.82±5.12)%、(40.05±5.09)%,明显低于对照组(P <0.05),而左心室重构指数(LVRI)、达峰时间和MRI延迟强化成像(LGE)占左心室质量比例分别为1.51±0.12、(40.84±6.18) s和(3.72±0.96)%,明显高于对照组(P <0.05);观察组左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室搏出量(LVSV)、左心室射血分数(LVEF)、右心室舒张末期容积(RVEDV)、右心室收缩末期容积(RVESV)、右心室搏出量(RVSV)和右心室射血分数(RVEF)与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。观察组不同病程患者LVEDV、LVESV、LVSV、LVEF、LVM、LVRI、RVEDV、RVESV、RVSV和RVEF比较,差异无统计学意义(P> 0.05);观察组病程≥12个月患者心肌灌注曲线下面积、相对峰值信号强度分别为(47.31±5.02)%、(37.91±5.12)%,明显低于病程<12个月患者(P <0.05),而达峰时间、LGE占左心室质量比例分别为(42.85±5.93) s、(3.92±0.93)%,明显高于病程<12个月患者(P <0.05)。观察组不同病毒载量患者LVEDV、LVESV、LVSV、LVEF、LVM、LVRI、RVEDV、RVESV、RVSV、RVEF、心肌灌注曲线下面积、相对峰值信号强度、达峰时间和LGE占左心室质量比例比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 艾滋病患者心肌组织和心功能有所改变,CMR检查能早期评估患者心肌损伤情况。

miR-182调控线粒体凋亡通路对冠心病模型大鼠心肌组织细胞凋亡的影响

目的 探究微小RNA(miR)-182调控线粒体凋亡通路对冠心病模型大鼠心肌组织细胞凋亡的影响。方法 选取健康SD成年大鼠30只,8~10周龄,15只作为假手术组,15只建立冠心病模型,建模成功后获取建模大鼠心肌组织细胞,经培养、转染后分为上调miR-182a、下调miR-182组、对照组。采用RT-PCR技术检测miR-182、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)相关基因表达,观察3组细胞增殖、凋亡变化,免疫组化法检测心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,Western印迹检测Bcl-2、Bax表达水平。结果 在1、3、6 h与对照组比较,下调miR-182组GSH-PX、SOD、Bcl-2表达水平较高,足细胞凋亡率、细胞增殖密度值、miR-182、MDA、Bax表达水平较低,上调miR-182组GSH-PX、SOD、Bcl-2表达水平较低,足细胞凋亡率、细胞增殖密度值、miR-182、MDA、Bax表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);与下调miR-182组相比,上调miR-182组GSH-PX、SOD、Bcl-2表达水平较低,足细胞凋亡率、细胞增殖密度值、miR-182、MDA、Bax表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-182通过下调表达水平调控线粒体凋亡通路Bcl-2、Bax水平低表达,从而抑制冠心病模型大鼠心肌组织细胞凋亡,对心肌细胞具有一定保护作用。

替罗非班经冠状动脉或静脉注射给药对急性心肌梗死患者心肌组织灌注与心肌损伤的影响

目的探讨替罗非班经冠状动脉或静脉注射给药对急性心肌梗死患者心肌组织灌注与心肌损伤的影响。方法以2021年6月至2023年1月河北北方学院附属第二医院收治的急性心肌梗死患者108例为研究对象,采用随机数字表法并根据组间基线特征匹配的原则分为静脉给药组(54例)和冠脉给药组(54例)。所有患者均采用经皮冠状动脉介入术治疗,在此基础上,静脉给药组通过静脉注射替罗非班,冠状动脉给药组通过冠状动脉注射替罗非班,两组均观察7天,后随访3个月。对比分析两组患者3个月后的临床疗效、术后30min心肌组织灌注情况、随访期间心脏不良事件发生情况、血清细胞因子、心肌损伤指标水平、心功能指标及治疗前和随访3个月后生活质量。结果冠脉给药组患者随访3个月后总有效率及术后30min心肌梗死溶栓治疗血流分级、心肌灌注分级3级患者占比分别为92.59%、90.74%、88.89%,显著高于静脉给药组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。治疗7天后,两组患者血清人软骨糖蛋白39、脂蛋白相关磷脂酶A2、正五聚蛋白3、髓过氧化物酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶水平及左心室舒张末期内径、左心室收缩末期内径均明显降低,并且冠脉给药组低于静脉给药组,组间差异有统计学意义(P<0.05);两组患者左心室射血分数均升高,且冠脉给药组高于静脉给药组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。随访3个月后,两组患者心理健康、躯体功能、生活环境、社会关系评分均升高,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。随访期间,冠脉给药组心脏不良事件总发生率为9.26%,低于静脉给药组的25.93%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论替罗非班静脉注射给药或冠状动脉注射给药均可有效改善患者生活质量,但通过冠状动脉注射给药对细胞因子、心肌组织灌注、心肌损伤及心功能的改善效果更好,可降低心脏不良事件发生率,具有较好的临床疗效。

一种新型的适用于大鼠心肌组织形态学研究的灌注固定装置及方法

介绍一种改良的适用于心血管效应机理研究中大鼠心肌组织灌注取材的新型实验装置及方法。其创新之处在于将离体心脏主动脉插管逆行灌注的原理与传统灌注方法相结合,设计出的这款新型装置可避免常规在体心脏灌流固定取材时应用主动脉夹及针头导致大鼠心肌组织夹伤破损的问题,且结构简单、易于操作。制作出的心肌组织切片完整、美观,镜下心肌组织结构清晰,荧光免疫组化染色效果理想。通过该装置及方法的应用,有利于针灸、药物或针药结合心血管效应机理研究相关的形态学观察及结果展示。

秦皮乙素对大鼠心肌组织抗氧化能力的影响

目的:探讨秦皮乙素(esculetin,ESC)对多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导心肌细胞氧化应激的影响。方法:将SD大鼠分为对照组、DOX组、ESC低、高剂量+DOX组,检测各组大鼠心肌组织中SOD、MDA及血清心肌酶变化;通过Masson染色,比较各组心肌组织中胶原纤维的量的变化;Western blot法检测抗氧化相关蛋白的表达。结果:ESC可升高DOX诱导后心肌组织中SOD水平,同时降低由DOX所致心肌酶及MDA升高(P<0.05);DOX干预后心肌组织中胶原纤维明显增多,而ESC预处理后的心肌组织胶原纤维明显减少;ESC可降低由DOX引起P53含量的增多(P<0.05),并上调心肌组织中的抗氧化酶HO-1(P<0.05)、MDM2(P<0.05)和Nrf2(P<0.05)的表达。结论:秦皮乙素可改善多柔比星诱导的心肌组织氧化应激损伤,并对心肌组织起保护作用。

环状电极电脉冲消融下心肌组织电场分布仿真结果与分析

电脉冲消融作为一种心房颤动新的消融能源,具有更高的组织选择性以及生物安全性,因此应用前景广阔。目前有关多极电极进行组织学电脉冲仿真消融的研究非常有限。在COMSOL5.5平台构建肺静脉环状多电极消融模型进行仿真研究。研究结果显示,当电压幅值达到约900 V即可使得部分位置达到透壁性消融,而电压幅值达到1 200 V形成的连续消融区域深度可达3 mm。当增加导管电极与心肌组织间距为2 mm时,至少需要约2 000 V的电压使连续消融区域深度达3 mm。通过环状电极电脉冲消融仿真,该研究结果可为电脉冲消融的临床应用时的电压选择提供参考。

右美托咪定预处理通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对心肌缺血再灌注大鼠心脏损伤和心肌组织自噬的影响

目的:探讨右美托咪定预处理通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路对心肌缺血再灌注大鼠心脏损伤和心肌组织自噬的影响。方法:60只SD大鼠随机分为假手术组(n=20)、心肌缺血再灌注组(n=20)和右美托咪定预处理组(n=20),建立心肌缺血再灌注损伤模型。假手术组仅接受假手术而不造成心肌缺血,右美托咪定预处理组输注右美托咪定。比较各组大鼠心脏损伤、心肌细胞自噬、PI3K/Akt/mTOR表达、氧化应激及炎症指标。结果:与假手术组比较,右美托咪定预处理组、心肌缺血再灌注组血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平依次升高,且右美托咪定预处理组心肌梗死面积百分比明显小于心肌缺血再灌注组(均P<0.05)。与假手术组比较,右美托咪定预处理组、心肌缺血再灌注组心肌组织中LC3、Beclin、P62蛋白表达依次升高(均P<0.05)。与假手术组比较,右美托咪定预处理组、心肌缺血再灌注组心肌组织中PI3K/Akt/mTOR表达依次下降(均P<0.05)。与假手术组比较,右美托咪定预处理组、心肌缺血再灌注组血清髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平依次升高,血清超氧化物歧化酶(SOD)水平依次下降(均P<0.05)。与假手术组比较,右美托咪定预处理组、心肌缺血再灌注组血清白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平依次升高(均P<0.05)。结论:右美托咪定预处理能够保护心肌缺血再灌注损伤大鼠心脏功能,可抑制炎症因子表达、减轻氧化应激反应,其作用机制可能与下调心肌细胞自噬蛋白表达,从而激活PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

利舒康胶囊通过Nrf2/HO-1途径减轻模拟高原缺氧大鼠心肌组织损伤

目的研究利舒康胶囊对模拟高原缺氧损伤大鼠心肌组织的保护作用及其机制。方法建立高原缺氧大鼠损伤模型,将60只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、阳性药红景天胶囊组(420 mg/kg),以及不同浓度利舒康胶囊组(280、420、560 mg/kg),每组10只。正常对照组和缺氧模型组给予等体积的灭菌注射用水,连续给药7 d。第7天给药50 min后除正常对照组外,其余各组均放入大型低压低氧动物实验舱模拟高原海拔8000 m缺氧12 h,12 h后将海拔降至3500 m安乐死大鼠,取心肌组织进行超微病理结构观察,Western blot法检测各组大鼠心肌组织胞质中Nrf2、HO-1的表达变化及胞核中Nrf2表达。结果透射电镜结果显示,与正常对照组相比,缺氧模型组大鼠心肌细胞线粒体外膜破坏,明显肿胀,心肌损伤严重,组织Nrf2、HO-1表达增加(P<0.05或P<0.01);与缺氧模型组相比,红景天胶囊组和利舒康高剂量组心肌损伤明显改善,心肌细胞肌丝完整,线粒体结构完整,组织Nrf2、HO-1表达降低(P<0.05),利舒康低、中、高剂量组均有降低趋势,且利舒康高剂量组与缺氧模型组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论利舒康胶囊对高原缺氧所致心肌损伤具有保护作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。

ST段抬高型心肌梗死患者PCI术后心肌组织灌注情况及相关影响因素分析

目的探讨ST段抬高型心肌梗死(ST segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)术后心肌组织灌注情况及相关影响因素。方法回顾性分析2018年10月—2021年10月因STEMI于邹城市人民医院行PCI手术的256例患者的临床资料。根据术后心肌组织灌注情况将其分为心肌组织灌注良好组(n=154)和心肌组织灌注不良组(n=102)。比较心肌组织灌注情况,分析影响因素。结果单因素分析显示,性别、年龄、体质量、合并高血压、病变血管数量、冠状动脉是否为左前降支、血栓抽吸导管使用情况与STEMI患者PCI术后心肌组织灌注情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);吸烟、合并糖尿病、心肌组织再灌注时间、术中复流情况与STEMI患者PCI术后心肌组织灌注情况比较,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,吸烟(β=0.580,OR=1.786,95%CI=1.068~2.988)、合并糖尿病(β=0.861,OR=2.365,95%CI=1.418~3.944)、心肌组织再灌注时间(β=0.924,OR=2.519,95%CI=1.934~3.282)、术中无复流(β=1.270,OR=3.561,95%CI=2.088~6.074)均为STEMI患者PCI术后心肌组织灌注的影响因素(P<0.05)。结论STEMI患者PCI术后心肌灌注与吸烟、合并糖尿病、心肌组织再灌注时间、术中无复流等均相关,临床需加强对危险因素的重视,采取针对性预防干预措施,以改善患者预后。

低氧和运动干预对肥胖小鼠心肌组织Ghrelin-GHSR通路及相关蛋白的影响

目的:探究低氧和运动干预改善肥胖小鼠心肌损伤程度和对胃饥饿素-生长激素促分泌激素受体(Ghrelin-GHSR)通路及相关蛋白的影响。方法:50只雄性C57BL/6J小鼠随机分为普通对照组(N组,n=8,饲喂普通饲料)和高脂膳食组(H组,n=42,饲喂高脂饲料8周以建立肥胖模型)。将建模成功后的肥胖小鼠随机分为肥胖对照组(HN组,n=7)、肥胖常氧运动组(HE组,n=7)、肥胖低氧暴露组(HHN组,n=8)和肥胖低氧运动组(HHE组,n=7)。HE和HHE组进行1 h/次/天、速度12 m/min的跑台训练;HHN和HHE组进行11.2%O_(2)暴露,8 h/次/天,6次/周。4周后,测试血糖血脂水平;HE染色观察心肌组织形态,免疫组化染色观察Ghrelin蛋白水平和分布;RT-PCR和Western blotting法分别检测心肌组织中Ghrelin、GHSR-1a、Ghrelin O-酰基转移酶(GOAT)、心肌肌钙蛋白I3基因(TNNI3)、神经肽Y1R(NPY1R)、血管内皮生长因子A(VEGFA)mRNA和蛋白的表达。结果:(1)HE和HHN组体重较HN组显著降低(P<0.05);HN组血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著高于N组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著低于N组(P<0.05);HE和HHN组GLU水平显著低于HN组,HHN组TC水平显著低于HN组(P<0.05);HHE组GLU和TC水平显著低于HE组,LDL-C水平显著低于HN组(P<0.05);HE、HHN和HHE三组FFA水平显著低于HN组,HDL-C水平显著高于HN组(P<0.05)。(2)HN组较N组出现心肌细胞肥大和心肌纤维形态改变及强嗜酸性染色,损伤评分显著升高(P<0.05);HHE组心肌形态明显改善,且损伤评分显著低于HN组和HE组(P<0.05);HHN组损伤评分高于HE组(P<0.05);HHE组Ghrelin在心肌组织中表达量显著高于HN组(P<0.05)。(3)HN组心肌Ghrelin和GHSR-1a mRNA表达水平较N组显著降低(P<0.05);HE组Ghrelin、GHSR-1a、GOAT和VEGFA mRNA水平显著高于HN组(P<0.05);HE组TNNI3 mRNA表达水平显著低于HN组(P<0.05);HHE组Ghrelin、GHSR-1a和VEGFA mRNA表达水平分别显著高于HHN和HE组,TNNI3和NPY1R mRNA水平分别显著低于HHN组和HE组(P<0.05)。(4)HN组心肌Ghrelin和VEGFA蛋白表达量显著低于N组,NPY1R和TNNI3显著高于N组(P<0.05);HE组Ghrelin、GHSR-1a和VEGFA蛋白水平显著高于HN组(P<0.05);HE组和HE组TNNI3表达量显著低于HN组(P<0.05);HE组Ghrelin、GOAT和VEGFA蛋白表达量分别显著高于HHN组和HE组,NPY1R蛋白表达量显著低于HE组(P<0.05)。(5)肥胖小鼠心肌Ghrelin和VEGFA蛋白水平分别受运动和运动×低氧影响,GHSR-1蛋白水平受运动影响,GOAT和NPY1R蛋白水平受运动×低氧的影响,TNNI3蛋白水平分别受运动和低氧影响(P<0.05)。结论:低氧和运动干预可改善肥胖小鼠的心肌形态及减轻其心肌损伤程度,可能机制之一是低氧和运动干预上调心肌组织Ghrelin-GHSR信号通路相关基因和蛋白的表达。

右美托咪定对脓毒症大鼠心肌组织水通道蛋白-1及炎症细胞因子水平的干预作用

目的：研究脓毒症大鼠心肌组织水通道蛋白-1（AQP-1）水平的变化规律，并比较AQP-1与心肌细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）及心肌组织含水量的相关性，探讨右美托咪定对脓毒症大鼠心肌的保护作用及可能机制。方法将90只雄性SD 大鼠按随机数字表法分为假手术组、脓毒症模型组和右美托咪定组，每组30只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制大鼠脓毒症模型；假手术组仅开腹、关腹，不行CLP。右美托咪定组于术前0.5 h静脉注射右美托咪定1μg/kg，浓度为2μg/mL，模型组和假手术组大鼠术后皮下注射生理盐水5 mL/kg。于术后2、12、24、48、72 h处死6只大鼠取出心脏，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各时间点心肌组织匀浆中AQP-1含量及炎症细胞因子TNF-α、IL-6水平，利用干湿重法检测心肌组织含水量，并比较AQP-1与TNF-α、IL-6及心肌组织含水量的相关性。结果模型组术后2 h起心肌组织AQP-1、TNF-α及IL-6水平均较假手术组明显升高；随时间延长，AQP-1水平及心肌组织含水量有所降低，但TNF-α及IL-6水平却持续增高。右美托咪定组除术后72 h心肌组织含水量外，从术后2 h起上述各指标即均较模型组明显降低〔AQP-1（ng/g）：9.29±0.15比9.73±0.26，TNF-α（pg/g）：109.47±8.41比128.13±7.36，IL-6（pg/g）：232.95±20.56比279.71±22.24，心肌组织含水量：（74.82±6.37）%比（75.62±6.39）%，均P＜0.05〕，但仍高于假手术组。相关性分析显示，脓毒症大鼠AQP-1与早期心肌组织含水量（r＝0.418，P＝0.001）和晚期心肌组织含水量（r＝0.235，P＝0.022）的变化呈正相关，与早期（术后2 h）细胞因子TNF-α（r＝0.235，P＝0.021）及IL-6（r＝0.345，P＝0.003）浓度变化呈正相关，与晚期（术后72 h）细胞因子TNF-α（r＝-0.408，P＝0.037）及IL-6（r＝-0.276，P＝0.002）浓度变化呈负相关。结论脓毒症大鼠早期即出现明显心肌损伤，导致AQP-1的过度表达，从而引起心肌细胞水肿；右美托咪定可通过减少心肌组织AQP-1的表达及心肌炎症细胞因子水平进而减轻心肌细胞水肿，而发挥心肌保护作用。

大鼠心血瘀阻证心肌组织代谢组学的研究

目的寻找心血瘀阻证大鼠心肌组织代谢产物谱,以及养心通脉方干预后表型的变化,分析大鼠心血瘀阻证心肌组织的代谢途径。方法采用结扎大鼠冠状动脉左前降支复制急性心肌梗死(AMI)心血瘀阻证模型,同时采用养心通脉方干预模型,运用GC-MS检测模型组、养心通脉方组、假手术组和空白对照组4组大鼠心肌组织代谢产物,每组8只,通过对不同组之间代谢产物含量的变化进行主成分分析、偏最小二乘法分析。结果主成分分析:四组样本主成分得分分析,模型组、养心通脉方组与正常组、假手术组分聚于椭圆形散点图的3个区域。因子载荷图显示模型组甘氨酸、延胡索酸、苹果酸、谷氨酸、葡萄糖、磷酸、吡喃半乳糖、赖氨酸发生了改变。偏最小二乘法分析:PLS回归模型显示,模型组与养心通脉方组存在明显的线性关系,证明模型建立是合理的。药物干预与甘氨酸、苹果酸、谷氨酸、葡萄糖高度正相关,与尿素、琥珀酸高度相关,与赖氨酸负相关。按照VIP值依次排列各变量与药物干预的密切度依次是苹果酸、谷氨酸、甘氨酸、葡萄糖、延胡索酸、尿素、半乳糖、酪氨酸、乳酸、丙氨酸。差异性分析:明显变化的代谢产物差异性分析表明,甘氨酸等10种代谢产物在模型组中显著下降,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01)。药物干预后甘氨酸、延胡索酸、苹果酸、谷氨酸、半乳糖、葡萄糖、酪氨酸、尿素、乳酸、丙氨酸等含量增加与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。其中苹果酸、谷氨酸、酪氨酸、尿素上升幅度较小,与正常组比较差异仍有统计学意义。赖氨酸经药物干预后均数显示有轻度下降,但与模型组比较差异无统计学意义。大鼠AMI心血瘀阻证与心肌组织代谢产物苹果酸、谷氨酸、甘氨酸、葡萄糖、延胡索酸、尿素、吡喃半乳糖、乳酸、丙氨酸、酪氨酸等含量的改变密切相关。结论心肌组织代谢产物谱显示AMI心血瘀阻证代谢途径与缺氧后的糖代谢紊乱密切相关,养心通脉方可以有效干预这一过程。

超声微泡造影剂对心肌组织的生物学效应及介导VEGF基因转染大鼠心肌的实验研究

目的 探讨超声微泡造影剂对心肌组织的生物学效应及其介导VEGF基因转染大鼠心肌的有效性。方法 18只健康雄性Wistar大鼠 ,取 3只采用超声波在鼠胸壁破坏微泡造影剂 ,观察对心肌组织显微结构的影响。将另 15只急性心肌梗死 3天后的雄性Wistar大鼠分为 3组 ,每组 5只。第一组采用超声破坏微泡造影剂的方式 ,将pcD2 VEGF12 1基因转染大鼠心肌至造影剂不再显影 (约 6min) ;第二组尾静脉输入同等剂量携pcD2 VEGF12 1基因的造影剂 ;第三组为对照。 2周后 ,取缺血心肌组织行VEGF免疫组织化学染色 ,观察心肌组织血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白表达情况。结果 超声波破坏微泡造影剂能使心肌组织充血 ,产生大量空泡 ,并有部分心肌细胞坏死。采用超声微泡造影剂介导的VEGF基因转染 ,能明显增强大鼠心肌组织VEGF蛋白的表达。结论 超声微泡造影剂能明显增强对组织的空化效应 ,其介导的VEGF基因治疗是一种无创、新型、高效的基因转移方法。

Se和VE对大鼠心肌组织TGF-β_1mRNA表达的影响

目的探讨Se和VE对大鼠心肌组织TGF鄄β1mRNA表达的影响。方法通过Se和VE缺乏的半合成人工饲料喂养大鼠,采用RT鄄PCR检测TGF鄄β1mRNA在心肌组织的表达特点。结果Se和VE联合缺乏组大鼠心肌可见散在微小灶状心肌坏死。与补Se补VE组比较,Se或VE单项缺乏组TGF鄄β1mRNA表达已有所增高(P<0.01),Se和VE联合缺乏组TGF鄄β1mRNA表达增高最显著(P<0.001)。结论Se和VE缺乏可诱导大鼠心肌组织TGF鄄β1mRNA表达上调,TGF鄄β1可能亦参与了Se和VE联合缺乏所致心肌损伤的病理过程。

糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中氧化应激相关基因和能量代谢相关基因的表达及其意义

目的 比较正常大鼠和糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中基因表达的差异 ,探讨糖尿病性心肌病的发病机制。 方法 ( 1)实验大鼠分为 2组 ,正常对照组 6只 ,糖尿病性心肌病组 6只 ;( 2 )从心肌组织中抽提mRNA ,经逆转录分别用Cy3、Cy5荧光标记 ,获得两组动物来源的cDNA探针 ;( 3)cDNA探针与基因表达谱芯片杂交 ,结果由扫描仪扫描并用软件进行分析统计。 结果 氧化应激相关基因和能量代谢相关基因的表达水平在糖尿病性心肌病时明显下调。 结论 氧化应激和能量代谢障碍在糖尿病性心肌病发病机制中起重要作用。

大鼠心肌组织中网状纤维组织学构筑及增龄变化

目的观察大鼠心肌组织发育过程中网状纤维的组织学构筑特点和增龄变化，为探讨心肌组织重构特点奠定基础。方法利用石蜡切片、Gomori银染，光镜下观察胎鼠（孕约19d）、新生（9d）、青年（8个月）、老年（14个月）sD大鼠心肌组织网状纤维的组织学构筑特点，Westernblotting检测Ⅲ型胶原蛋白随年龄变化的表达差异。利用图像分析系统对心室肌组织内网状纤维进行定量分析。结果网状纤维分为粗、细纤维，围绕在心肌细胞周围。胎鼠心肌细胞周围网状纤维呈细小线状或缺如，新生鼠的心肌细胞周围网状纤维逐渐增多，形成连续的网状纤维膜，相邻肌细胞之间出现间隙，随年龄而增宽，网状纤维近平行分支填充于间隙内。网状纤维所占面积百分比随年龄增加发生改变。Ⅲ型胶原（网状纤维）表达量随年龄增加发生改变，新生鼠到青年鼠是急剧增加阶段。结论大鼠心肌组织中网状纤维构成肌细胞周围的粗、细纤维鞘成分，并发出分支充填于心肌细胞之间和心肌细胞与间质之间的间隙内，Ⅲ型胶原蛋白量随年龄的变化发生改变。