不同核酸提取方法对HBV-DNA检测性能验证情况分析

目的评估2种乙型肝炎病毒(HBV)-DNA提取方法及2家检测试剂的性能,有助于选择优化提取试剂和检测试剂。方法2023年4月采用达安全自动核酸提取仪提取法(磁珠法)和手工提取法(一步法),并用达安和圣湘2种HBV-DNA试剂检测,对其进行精密度、正确度、线性范围、检出限及抗干扰能力等性能进行验证和评价。结果达安全自动核酸提取仪提取达安试剂检测、手工提取达安试剂检测和手工提取圣湘试剂检测在精密度、正确度、线性范围、检出限方面验证结果均达标;达安全自动核酸提取仪提取圣湘试剂检测在低值检测中变异系数大于5%,最低检测限验证不合格;抗干扰能力方面,全自动核酸提取仪提取的2.0 g/dL血红蛋白浓度的样本用达安和圣湘试剂检测结果均不受影响。手工提取甘油三酯浓度达3000 mg/dL的样本用达安和圣湘试剂检测的结果均不受影响。结论不同厂家的提取和检测试剂避免混用,达安和圣湘试剂对HBV-DNA定量检测的结果均符合要求。

胶乳增强免疫比浊法NSE诊断试剂盒性能验证及临床应用

目的对胶乳增强免疫比浊神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)试剂盒进行性能验证。方法按照CNAS-GL037:2019《临床化学定量检验程序性能验证指南》、WS/T492-2016《临床检测定量测定项目精密度与正确度性能验证》并结合试验工作,重新设计了检验方法,在贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析对北京九强金斯尔NSE胶乳增强免疫比浊法试剂盒的正确度、精密度、线性范围、可报告范围和生物参考区间等性能进行验证和评估,并与对应罗氏电化学发光法试剂盒进行方法学比对。测试结果与厂家所给出的产品分析性能以及美国国家卫生委员会临床检测中心(National Center for Clinical Laboratories,NCCL)的相关指标进行了对比。结果5个水平的正确度偏倚分别为1.74%、-1.42%、-0.88%、-3.09%和-0.90%;2个水平的批内及批间精密度的变异系数(coefficient of variation,CV)分别为1.85%和0.88%(判断标准CV<7.5%),4.99%和3.34%(判断标准CV<10%);线性范围(3.5~148.1ng/mL)验证回归系数a值为0.9894,R2=0.9978;最大稀释倍数为8倍,临床可报告上限为1165.2ng/mL;厂家提供的生物参考区间为0~16.3ng/L,符合率R为100%,各性能均通过验证。此外,与罗氏电化学发光试剂盒进行方法学比对,其相关性分析结果为:两种方法的相关性(R2=0.989)、一致性(CCC=0.984)均较好,在临床判定效果上同Roche的电化学发光试剂盒相比,免疫增强比浊方法阳性符合率为95.74%,阴性符合率为96.23%,两者测定值接近,相关系数达0.9894。结论基于全自动生化分析平台测定的NSE胶乳增强免疫比浊试剂盒,各性能均可以较好地满足临床使用要求,且与电化学发光法检测结果一致性较好,有望进一步推进NSE国产体外诊断试剂盒的临床应用。

罗氏cobas e801免疫分析仪检测血清抗缪勒管激素的性能验证

目的:对罗氏cobas e801免疫分析仪检测血清抗缪勒管激素(AMH)进行性能验证,评估其是否能够满足临床需求。方法:参照美国临床和实验室标准协会文件,对罗氏cobas e801免疫分析仪检测血清AMH的精密度、准确度、线性范围、携带污染率进行性能验证。结果:罗氏cobas e801免疫分析仪检测低值、高值AMH的批内精密度变异系数分别为4.8%、3.7%,批间精密度变异系数分别为3.5%、5.1%,符合厂家要求临床应用批内精密度、批间精密度<10%的标准。室间质评5个样品检测结果与靶值进行比对,相对偏倚分别为0.81%、-0.22%、0.85%、-2.73%、1.77%,符合厂家准确性相对偏倚的要求范围±10%。AMH的携带污染率为0.39%,符合厂家≤2.0%的要求。AMH的线性回归方程为Y=0.980 9X+0.658 8,斜率a为0.980 9,R2为0.996,结果符合厂家要求,a值1±0.05,R2值≥0.95。结论:罗氏cobas e801免疫分析仪检测AMH的精密度、准确度、携带污染率、线性范围均通过验证,检测结果准确可靠,可以满足临床的需求。

基于自动化提取HCV RNA荧光定量检测系统的性能验证

目的 基于Stream SP96全自动核酸提取仪、ABI7500实时荧光定量PCR仪对丙型肝炎病毒(HCV)RNA定量检测系统的性能指标进行验证。方法 依据《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T 420-2013性能验证方案,采用Stream SP96全自动核酸提取平台及ABI7500荧光定量PCR仪检测HCV RNA,对其准确度、精密度、线性区间、检测限、定量限和抗干扰能力等进行方法学性能验证。结果 低、高浓度标准物质的均值与靶值的误差分别为0.20和0.25,均小于靶值对数值±0.4 log;低浓度样本的批内、批间不精密度变异系数值分别为0.79%、1.01%,高浓度样本的批内、批间不精密度变异系数值分别为0.52%、1.22%,均<5%;线性相关系数r>0.980,线性区间可达20~1.0×10^(8),呈良好线性(R^(2)=0.997 3);检出限为20 IU/mL,最低定量限为50 IU/mL;含胆红素(300 mg/L)、血红蛋白(300 g/L)、甘油三酯(3 000 mg/L)的干扰物质对样本检测结果无影响。结论 HCV RNA实时荧光PCR定量法检测系统准确度、精密度、线性范围、检出限、定量限、抗干扰能力均符合厂家声明,能够满足临床对HCV RNA定量检测的需求。

安图A2000全自动化学发光分析仪检测IGFBP3的性能验证及与IGF-1相关性研究

目的:对安图A2000全自动化学发光仪检测血清胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)的性能进行评价,并探讨其在矮小症、性早熟及垂体性病变中与IGF-1的相关性。方法:对安图A2000系统检测IGFBP3的精密度(CV)、线性范围、可报告范围、参考区间进行验证。选取2023年1月-2023年9月在本院诊断或治疗的矮小症21例、性早熟10例、垂体性病变19例,回顾性分析其胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-1)和IGHBP3水平,并进行Spearman相关性分析。结果:IGFBP3高低水平质控品批内CV为2.019%、2.931%,批间CV为3.818%、4.137%;测定结果在0.3~16.0μg/mL范围内呈线性,线性回归方程为Y=0.9995X~0.0213,R2=0.9974;临床可报告范围为0.3~32.0μg/mL;18~70岁和>70岁健康体检者检测结果均在厂家提供的参考区间内;IGFBP3和IGF-1在矮小症、性早熟和垂体性病变患者中具有较好的相关性(r=0.81,P<0.0001)。结论:安图A2000检测血清IGFBP3的性能能够满足实验室质量要求,且与IGF-1具有较好的相关性。

迈瑞BC-7500全自动血细胞分析仪的性能验证

目的:对迈瑞BC-7500全自动血细胞分析仪进行性能评价,确保仪器检测数据的准确性。方法:参照WS/T406-2012《临床血液学检验常规项目的分析质量要求》等行标要求,进行迈瑞BC-7500全自动血细胞分析仪本底计数、携带污染率、批内精密度、日间精密度、线性范围、正确度、参考范围、不同吸样模式的结果可比性、实验室内部的可比性、仪器间五分类比对、人机五分类比对的验证分析。结果:迈瑞BC-7500全自动血细胞分析仪本底计数、携带污染率、精密度、线性范围、正确度、参考范围、不同吸样模式的结果可比性、实验室内部的可比性、仪器间五分类比对、人机五分类比对验证均符合行标要求。结论:本实验室使用的迈瑞BC-7500全自动血细胞分析仪经验证其性能符合行标要求,检测结果准确可靠,可满足临床需求。

自建微流控-芯片法检测布鲁氏菌的性能验证及评价

目的采用自建微流控-芯片法检测系统对本实验室于2021年5月至2022年8月期间收集保存的布鲁氏菌阳性菌株、阳性血清、阴性血清进行检测,验证自建系统检测布鲁氏菌核酸的主要性能是否满足相关标准。方法依据CNAS-GL039:2019《分子诊断检验程序性能验证指南》、《实验室自建分子诊断项目基本要求专家共识》、《布鲁菌病诊疗专家共识》相关要求,对自建微流控-芯片法检测系统的符合率、重复性、检出限、交叉反应、抗干扰能力、敏感性及特异性进行验证及评价。结果自建检测系统与经血培养鉴定为布鲁氏菌阳性菌株、体检者阴性标本检测结果的阳性符合率为100%,阴性符合率为100%,总符合率为100%;1.50×10^(8)CFU/mL、500 CFU/mL布鲁氏菌阳性标本重复性检出率均为100%;检出限浓度(1000 copies/mL)企业参考品20次重复检测结果均为阳性;七种交叉反应病原体标本检测中,布鲁氏菌核酸结果均为阴性;在混有干扰物质的弱阳性布鲁氏菌标本检测中,布鲁氏菌核酸结果均为阳性;在布鲁氏菌感染检测中的敏感性和特异性分别为89.88%、95.74%。结论微流控-芯片法检测系统的符合率、重复性、检出限、抗干扰能力、交叉反应、敏感性及特异性性能指标均符合相关标准及检测要求,可用于临床检测工作。

基于我国WS/T促甲状腺激素受体抗体检测方法的性能验证

目的 基于我国卫生行业标准(WS/T)对迈瑞高敏磁微粒化学发光法(CLIA)检测TRAb进行性能验证。方法 参照最新WS/T文件,以Roche Cobase 601电化学发光法(ECLIA)作为已验证的检测方法,对迈瑞CLIA的精密度、基于患者血清的正确度、线性、检出限、参考区间进行验证,评价迈瑞与Roche的诊断符合率。结果 迈瑞CLIA检测TRAb的批内CV为1.56%~4.60%,实验室内CV为1.65%~5.19%;与Roche ECLIA的实验室相对差值为-3.6%;在0.02~44.00IU/L范围内线性拟合方程Y=1.040X+0.636,线性系数R2=0.990;24个检出限临界值数据22个(91.7%)≤0.3IU/L;20个健康体检者血清TRAb检测结果仅1个超出参考区间≤1.9IU/L;与Roche ECLIA的诊断总符合率90%,阳性符合率75%,阴性符合率100%,Kappa检验值0.7826(P<0.001)。结论 迈瑞高敏磁微粒CLIA的精密度、基于患者血清的正确度、线性范围、检出限均符合厂家声明,参考区间经验证可转移至我实验室使用,与Roche的诊断符合率较好,该方法性能能满足本医院临床检验需求。

呼吸道病毒核酸六重联检试剂的性能验证及评价

目的对一种呼吸道病毒核酸六重联检试剂的主要性能进行验证及评价,以满足临床检测需要。方法依据中国合格评定国家认可委员会发布的《分子诊断检验程序性能验证指南(CNAS-GL039):2019》文件要求,对临床实验室使用的呼吸道病毒核酸六重联试剂的符合率、精密度、最低检出限、交叉反应和抗干扰能力进行验证和评价。结果该检测试剂盒精密度良好,CV<5%;对6种病原体随机组合的检出符合率均为100%;最低检出限为1.0×10^(3)copies/mL;与临床常见病原体,如新冠病毒、EB病毒、肺炎支原体、人博卡病毒无交叉反应;干扰物加入25%的血液、0.15mg/mL的奥司他韦和142ng/mL的利巴韦林,检测结果与对照样本无显著差异。结论呼吸道病毒核酸六重联检试剂的主要性能指标满足相关标准要求,可常规应用于临床检测。

磁微粒化学发光法测定VEGF的性能验证和临床应用效果评估

目的分析磁微粒化学发光法测定血管内皮生长因子(VEGF)的性能并评估临床应用效果。方法选取2023年8月于复旦大学附属中山医院确诊为实体恶性肿瘤患者80例作为癌症组,良性病变患者80例作为良性疾病组,另选取于该院体检的表观健康者20例作为健康对照组。采用磁微粒化学发光法测定VEGF的水平,并验证其正确度、重复性、中间精密度、线性范围、可报告范围、参考范围及抗干扰能力。比较3组患者VEGF水平并绘制VEGF诊断恶性肿瘤的受试者工作特征(ROC)曲线。结果低值样本重复检测20次的变异系数(CV)为4.38%,高值样本重复检测20次的CV为1.32%,符合国家卫生健康委员会临床检验中心室间质量评价标准中公布的肿瘤标志物不超过总允许误差(TEa)的1/4的要求(≤6.25%)。低值样本测量10次的CV为2.38%,高值样本测量10次的CV为1.92%,中间精密度符合不超过TEa的1/3的要求(≤8.33%)。重复检测3次国际标准品Z1、Z2的偏差分别为1.43%和-1.45%,其绝对值均未超出目标偏差(≤15%)。线性范围为40~3200 pg/mL。可报告范围为40~16000 pg/mL。20例表观健康人群检测结果均在厂家声明参考范围内,参考范围验证通过。加入干扰物质后,检测结果偏差均符合产品说明书声明的偏差(≤15%),抗干扰验证通过。癌症组VEGF水平高于健康对照和良性疾病组(P<0.05),以160 pg/mL为最佳截断值时,VEGF诊断恶性肿瘤的曲线下面积为0.90,灵敏度为0.69,特异度为0.95。结论磁微粒化学发光法测定VEGF的重复性、中间精密度、正确度、线性范围、可报告范围、参考范围、抗干扰能力均符合实验室质量管理要求,能保证检测质量,满足临床使用需求,可用于恶性肿瘤的辅助诊断。

vWF:Ag国产试剂盒的性能验证研究

目的评价国产vWF:Ag(胶乳免疫比浊法)试剂盒在进口血凝检测系统上的检测性能。方法共收集2023年4月至7月北京友谊医院西城院区157例住院患者和40例表观健康人员的枸橼酸钠抗凝血浆样本。vWF:Ag试剂检测质控在靶值宣称的范围内,再进行试剂的性能验证。选取vWF:Ag国产试剂质控品进行精密度评价;选取北京九强公司的工作校准品进行正确度验证;选取高、低值临床样本进行线性范围评价;选取表观健康人群样本进行参考区间验证;选取50例高、中、低值均匀分布临床样本,将国产试剂和进口试剂的结果进行比对,并计算两者相关性和相对偏差;对国产试剂盒对干扰物质(直接胆红素、间接胆红素、血红蛋白、脂肪乳)的抗干扰性能进行验证。结果vWF:Ag国产试剂高、中、低3个质控浓度的批内精密度CV、批间精密度CV和总精密度CV均<10%。正确度两个水平的工作校准品与靶值的偏倚分别为-2.0%和3.3%,均<±10%。线性范围相关系数大于0.995,偏差<±15%,验证的线性范围为10%~253%。O型血人群参考范围为47.8%~138.5%、非O型血人群参考范围为76.5%~163.0%,验证通过。干扰物质胆红素≤40mg/dL,血红蛋白≤150mg/dL,脂肪乳≤600mg/dL,回收率在90%~110%之间,相对偏差<±10%,满足试剂要求。结论在沃芬全自动血凝分析仪ACL TOP500检测系统上,vWF:Ag(胶乳免疫比浊法)国产试剂盒性能良好,符合实验室检测质量要求,满足临床检测需求。

基于PCR毛细电泳检测13种呼吸道病原体的性能验证

目的本研究旨在验证一种基于聚合酶链式反应(PCR)毛细电泳的13种呼吸道病原体多重检测试剂盒的主要性能。方法参照中国合格评定国家认可委员会(CNAS)的CNAS-GL039《分子诊断检验程序性能验证指南》,对13种呼吸道病原体多重检测试剂盒的准确性、特异性、最低检测限、抗干扰能力进行验证及评价。结果16个阳性参考品均检测出相应的病原体特征峰;特异性参考品未检测出病原体特征峰,未出现任何交叉反应;最低检测限参考品在24次重复检测中,结果均呈阳性;阳性标本在添加干扰物质的条件下,检测结果未受影响。结论基于毛细电泳的呼吸道病原体多重检测试剂盒可以准确、快速地检测出多种呼吸道病原体,其准确度、特异性、抗干扰能力、灵敏度均显示出良好的性能,符合产品要求,具有临床应用前景。

流式微球捕获芯片技术检测血浆细胞因子方法学性能验证

目的对流式微球捕获芯片技术检测血浆中多种细胞因子方法学的性能进行验证。方法依据中华人民共和国卫生行业及美国临床和实验室标准协会的标准文件,应用流式微球捕获芯片技术检测血浆中的白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)6种细胞因子,并对其精密度、准确度、线性范围、参考区间、最低检测限、抗干扰能力进行评价。结果6项细胞因子批内精密度变异系数(CV)为1.50%~8.83%,批间精密度CV为2.48%~6.75%,准确度相对偏差≤±15%,IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α在2.5~5000.0 pg/mL的浓度范围内,IL-2R在5~7500 U/mL的浓度范围内,线性范围良好。生物参考区间验证结果显示,90%的结果在厂家提供的生物参考区间范围内。IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α的最低检出限为≤2.5 pg/mL,IL-2R最低检出限为≤5 U/mL,干扰物质(甘油三酯10 mmol/L、血红蛋白5 mg/L和胆红素258μmol/L)对试剂盒检测结果无影响。结论在mindray Bricyte E6流式细胞仪上应用流式微球捕获芯片技术检测血浆细胞因子的方法性能较好,可为临床提供准确可靠的6种细胞因子的定量检测结果。

胶体金法便隐血检测试剂性能验证及应用

以《临床免疫学定性检验程序性能验证指南》(CNAS-GL038)为依据对我院某国产便隐血(FOB)检测试剂(胶体金法)进行性能验证并评价。方法 检出限验证取0.5毫升新鲜全血(HIV、HCV、HBsAg,TP阳性的患者除外)采用SysmexXN-1000全自动血细胞分析仪检测Hb水平为120mg/mL,用去离子水稀释为4000μg/mL、2000μg/mL、1000μg/mL、100μg/mL、10μg/mL、1.6μg/mL、0.8μg/mL、0.4μg/mL、0.2μg/mL、0.1μg/mL、0μg/mL的11个不同水平样本并分别检测,记录结果;特异性验证检测浓度为500ug/ml的猪血红蛋白、牛血红蛋白、鸡血红蛋白、羊血红蛋白、兔血红蛋白、和浓度为2000ug/ml的辣根过氧化酶;方法符合率验证,选取2024年1月我院健康体检的无胃、肠疾患检测结果为阴性的样本10份、消化内科就诊患者便隐血检测结果为阳性的标本10份,与经CNAS认可的、性能验证符合设定标准,每日进行室内质控,参加室间质评/能力验证合格的外院全自动粪便分析仪法检测便隐血(FOB)比较。结果 胶体金法便隐血检测试剂的粪便检出限、特异性、方法符合率符合评价标准。结论 某国产便隐血(FOB)检测试剂(胶体金法)检测粪便隐血结果稳定可靠、操作简便、适合临床应用。

超低温冰箱性能验证方案

超低温冰箱在众多领域被广泛应用,其性能表现直接影响被储存物品的质量、安全及实验结果的可靠性。本文介绍了一种超低温冰箱性能验证方案,能客观准确地评估超低温冰箱的性能,且用户可根据验证结果制定可靠、高效的冷藏方案,制造商可针对验证结果对产品进行优化。同时,通过持续不断地验证和改进,超低温冰箱将持续发挥在各个领域的重要作用,为科研、医药和食品等领域的发展提供有力的支持。

一种便携式气体自动进样装置的研制及性能验证

根据JJG 700-2016《气相色谱仪检定规程》对火焰离子化检测器(FID)和热导检测器(TCD)的检校要求,设计并研制一种便携式气体自动进样装置。该装置可实施气体的连续自动进样,进样体积范围覆盖(0.1~5.0)mL,且性能验证实验测得的连续7次峰面积重复性(RSD)为0.9%。同时,装置自身的稳定性和操作的便利性,能有效提高气相色谱仪的计量质量和效率。

口鼻吸入给药系统在GLP体系下性能验证方法的建立

目的 建立口鼻吸入给药系统在药物非临床研究质量管理规范(Good Laboratory Practice,GLP)体系下的性能验证方法。方法 通过吸入试验相关文献中吸入系统的检测参数、质量控制关注点,以及结合仪器性能要求,在精准气溶胶吸入给药系统上建立口鼻吸入给药系统性能评价的方法,验证内容包括系统压力、进气流量可靠性、暴露浓度均一性、暴露系统稳定性等。结果 系统压力偏差为-1.52%~1.00%;系统进气流量CV值在-1.84%~3.40%范围内;液态吸入给药暴露浓度孔间RSD为7.70%,粉末吸入给药暴露浓度孔间RSD为15.75%;连续雾化30min,液态暴露浓度RSD为5.50%,粉末暴露浓度RSD为7.22%,温度、湿度、O_(2)浓度、CO_(2)浓度均在合格标准范围内,精准气溶胶吸入给药系统在本实验验证条件下各项性能指标均符合仪器使用的要求。结论 上述性能指标验证方法准确可靠,能够满足药物安全性评价的需要,可以为口鼻吸入给药系统在GLP体系下的性能验证提供参考。

血液筛查核酸检测系统的性能验证及评价研究

目的:对一种国产血液核酸检测系统用于血液筛查的主要性能指标及其应用价值进行评价,以确保血站系统血液筛查的安全。方法:收集2022年1月廊坊市中心血站20份阴性血浆样本,同时收集2022-2023年廊坊血站采集的无偿献血者6703例血液标本,并依据《血站技术操作规程(2019)版》与医药行业标准《核酸扩增检测用试剂(盒)》要求,对核酸检测系统的稳定性、分析特异性、灵敏度、精密度、抗干扰能力、抗交叉污染能力的性能进行验证,进行临床应用分析。结果:该血液筛查核酸检测系统对20例血浆样本阴性检测的结果符合率为100%;乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)、丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)、人类免疫缺陷病毒核糖核酸(1+2)(HIV 1+2 RNA)的灵敏度检测结果符合率均为100%,精密度变异系数百分比(CV%)分别为1.57%、0.75%、1.49%。该系统进行核酸检测时,血红蛋白浓度水平为400 mg/dl的溶血血浆及甘油三酯浓度水平为3000 mg/dl的脂肪血标本对低浓度水平的HBV-DNA(9.0 IU/ml)、HCV-RNA(30.0 IU/ml)和HIV-RNA(135.0 IU/ml)标准物质的分析性能均无显著影响。10份高浓度(1000 IU/ml)的阳性样本与11份阴性样本交叉排列进行检测时无交叉污染现象。6703例标本混样模式下经核酸检测技术(NAT)共检测出16例反应性标本,占0.24%。结论:核酸检测系统在投入使用前要做性能验证以保证血液筛查的安全。目前的国产核酸检测系统能够满足血液安全筛查的要求。核酸检测系统的性能验证对于保证血液筛查安全具有重要价值。

全自动化学发光免疫分析仪检测甲状腺激素三项的性能验证

目的对普门全自动化学发光免疫分析仪eCL9000检测促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和游离甲状腺素(FT4)进行性能验证。通过分析普门eCL9000与罗氏Cobas e801检测结果的一致性,以评估普门eCL9000在甲状腺功能判定上的应用价值。方法参照CLSI EP15-A3、CNAS-CL02等文件对普门eCL9000检测甲状腺激素的准确度、精密度、线性范围、参考区间和灵敏度进行验证和评价,并通过方法学比对验证与罗氏cobas e801检测结果的一致性和符合率。结果甲状腺激素批内精密度变异系数(CV)为0.52%~3.75%,均小于1/4TEa;批间精密度CV为0.68%~3.75%,均小于1/3TEa;各项目准确度比对偏倚范围为-2.32%~2.77%,均小于1/2TEa;TSH的线性验证斜率为1.0035,R2≥0.990;95%的健康者检测结果均在厂家标注的生物参考区间范围内;最低检出限符合说明书要求;普门eCL9000检测甲状腺激素三项的分析性能与厂家声明一致,符合CLIA’88和ISO15189实验室认可标准要求。以罗氏Cobas e801作为参比仪器,普门eCL9000与罗氏cobas e801对TSH、FT3和FT4的检测结果具有良好的相关性,且检测结果偏差在临床可接受的范围内。结论普门eCL9000能够满足临床需求,可应用于临床实验室。

叶酸代谢能力评估及亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性检测试剂盒性能验证

目的对江西诺德医疗器械有限公司生产的叶酸代谢能力测定试剂盒进行性能验证,评估该试剂盒能否满足江苏省常熟地区患者对亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因A1298C(rs1801131)及C677T(rs1801133)两个多态性位点的检测需求。方法收集10例临床样本进行测序,将结果作为“金标准”,同时采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)对标本的MTHFR基因多态性位点进行检测,与“金标准”结果比较,验证试剂盒的准确性。选择测序确定的C677T多态性位点CC及TT基因型标本各1份,A1298C多态性位点AA及CC基因型标本各1例,重复测定5次以验证试剂盒的精密度。同时对以上4份不同基因型的标本进行DNA浓度测定,根据试剂盒说明书中的性能描述,稀释至最低检出浓度5 mg/L,每例标本各检测3次,要求基因分型结果一致且符合测序分型结果,验证试剂盒的检测下限。结果所有标本的MTHFR基因多态性位点检测结果与测序结果完全一致,准确率达到100%;对不同基因型的4例标本反复检测5次的结果完全一致,且循环阈值(Ct值)的变异系数(CV)≤5%;而稀释到检测下限的4例标本经过3次重复检测后,仍能准确进行基因分型。结论采用MTHFR基因A1298C及C677T两个多态性位点检测试剂盒进行基因分型的结果准确、稳定、可靠,能满足实验室对MTHFR基因多态性检测的要求。