过表达溶质载体家族1成员5和敲低慢病毒载体构建及稳定转染RAW264.7细胞株

背景:溶质载体家族1成员5(solute carrier family 1 member 5,SLC1A5)在多种疾病中发挥了潜在作用,但确切作用机制尚不清楚。构建稳定的SLC1A5过表达和敲低细胞模型可为深入研究SLC1A5在疾病中的确切作用机制以及发现潜在治疗靶点提供有力的实验工具。目的:构建小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体,以建立稳定转染的RAW264.7细胞株,为深入探讨SLC1A5在炎症中的作用提供实验基础。方法:根据SLC1A5基因序列设计合成引物并使用聚合酶链反应扩增该基因片段。将目的基因定向接入经Age I/Nhe I酶切的载体质粒GV492中构建重组慢病毒质粒,对阳性克隆进一步筛选后测序比对结果;pHelper1.0质粒载体、pHelper2.0质粒载体、目的质粒载体与293T细胞共同培养并转染,获得慢病毒原液进行包装和滴度测定;在此基础上,通过体外培养RAW264.7细胞,确定嘌呤霉素工作质量浓度;不同滴度的慢病毒分别与RAW264.7细胞共同培养,根据荧光强度确定转染效率;用嘌呤霉素挑选出稳定转染细胞,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹方法检测稳定转染细胞株的SLC1A5基因和蛋白表达水平。结果与结论:(1)测序序列与目的序列一致提示重组慢病毒载体构建成功;(2)过表达SLC1A5慢病毒的滴度为1×10~9 TU/mL,敲低SLC1A5慢病毒的滴度为3×10~9 TU/mL;(3)确定RAW264.7细胞嘌呤霉素工作质量浓度为3μg/mL;(4)过表达/敲低SLC1A5慢病毒转染RAW264.7细胞的最佳条件皆为HiTransG P转染增强液且感染复数值等于50;(5)过表达SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量明显上调,而敲低SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量显著下调。结果表明,成功构建了小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体并获得稳定转染的RAW264.7细胞株。

农村集体经济组织成员资格认定的逻辑脉络及其展开

农村集体经济组织成员资格认定是农村集体产权制度改革的基础性工作,集体所有权主体的确定是该问题研究的逻辑起点。集体所有权不具有共有和总有等所有权构造类型的特征,同时投资关系说和类比国有资本授权经营体制论都不能对农村集体经济组织的产生渊源进行合理解释。在民法规范语境下,应将农村集体经济组织确定为集体所有权主体。就成员资格和成员权利的关系而言,两者相伴而生,成员资格实质上是从权利主体角度对成员权的描述,为成员权在主体面向的表达。基于此,集体成员资格认定的法律实质是对农民所享有的集体经济组织成员权予以确权。我国农村传统经营方式决定了农户是基本经营单位,从逻辑上应当将家庭成员与以家庭为单位取得权益的关系确定为按份共有,集体经济组织成员权主体应为集体经济组织成员而非农户。城乡二元体制导致户籍这一本质上与成员权利取得不具因果关系的因素被纳入认定标准之中,其证明作用不应被忽视。在传统路径下,应构建以出生事实为核心、其他亲缘关系为辅助的主体判断路径,同时明确列举其他除外情形,形成正反双向的认定机制。在农村集体产权制度改革背景下,基于股权类型设置,集体固有成员与股份经济合作社股东在范围上并非完全一致,未来应以恢复农村集体经济组织和集体成员权的私法属性为目标,分阶段对农村集体经济组织成员权制度进行渐进性改革。

中国式现代化视域下农村集体经济组织成员身份认定规则解析

农村集体经济组织成员的身份认定、丧失及身份丧失后的权益保留,关系到农村居民的切身利益,科学的制度设计是引导乡村善治、助推共同富裕、实现中国式现代化的保障。《农村集体经济组织法(草案二次审议稿)》(以下简称《草案二次审议稿》)关于农村集体经济组织成员身份的定义及认定应以户籍为基础,但不宜强制要求成员的基本生活保障需以成员集体所有的土地等财产提供,也不应把二者之间形成稳定的权利义务关系作为成员身份定义的必要条件。丧失成员身份的规定中,可以用“户籍+财政负担工资福利”的类型划分方式,把公务员、事业编制人员等群体排除在组织成员之外。对于务工、经商、服役、就学等原因“暂时离开”的成员,其土地承包权、宅基地使用权等核心财产权益的保留时间不宜一概而论,可根据权益性质确定合理的保留期限。《草案二次审议稿》可通过细化、完善涉及成员身份的相关规定,保护农村居民合法权益,提升农村居民参与自我管理的积极性,促进乡村治理体系和治理能力现代化。

数字化转型背景下G7成员国数字教育政策比较研究——基于政策主体、工具与主题的三维分析

教育数字化转型正推动着教育体系变革和劳动力市场重塑,以G7成员国为代表的发达国家通过政策调整以适应这一新形势。基于政策文本分析视角,以G7成员国的七份数字教育政策为样本,构建“政策主体—政策工具—政策主题”分析框架,对文本逐篇编码,多维度分析各国数字教育政策趋势与异同。研究显示:政策主体维度,各国已基本形成多主体参与的网络治理结构;政策工具维度,供给型、环境型和需求型政策三种政策工具整体运用相对均衡,但内部结构呈现出重供给型、轻需求型的失衡状态;政策主题维度,各国关注点多样,旨在利用现代数字技术来改变教育的组织架构、教学模式和学习方式,解决教学质量问题实现教育可持续发展。借鉴G7成员国数字教育政策经验,可从推动多主体共同参与、理性挑选政策工具箱、动态性调整政策内容等方面持续优化数字教育政策。

多团队成员身份对个体创新绩效的双刃剑效应研究

根据角色理论与个人-工作匹配框架,并基于知识密集型企业员工有效样本多时点问卷数据的实证分析,探究个体多团队成员身份通过角色整合和工作繁荣(积极路径)以及角色冲突和工作疏离(消极路径)对个体创新绩效的整合影响,同时,考察认知灵活性在其间的边界条件作用。研究结果表明:个体多团队成员身份既通过角色整合与工作繁荣对个体创新绩效有显著正向间接作用,又通过角色冲突与工作疏离对个体创新绩效有显著负向间接作用;对于高认知灵活性的员工而言,多团队成员身份通过角色整合和工作繁荣对个体创新绩效的积极影响更强;对于低认知灵活性的员工而言,多团队成员身份通过角色冲突和工作疏离对个体创新绩效的消极影响更强。

领导-成员交换理论述评与研究展望——多层次的视角

对领导成员交换理论40年的发展进行回顾和展望,有利于理论的深化与完善。以领导成员交换理论研究层次为分类依据,将已有文献进行归类并进行分析。个体层次在构念内涵、量表、前因变量、结果变量和情景变量等方面的研究成果最为丰富,但量表仍需继续完善,部分前因变量与结果变量的研究结果尚需进一步深入探索,纵向研究方法需更多地被研究者采用。在对子内个体层次、群体内个体层次和群体层次的研究尚处于起步阶段,学者们可以在不同的理论层次对相应构念(如RLMX)的内涵、前因变量与结果变量进行深入研究。

国内领导-成员交换理论研究进展

领导-成员交换理论由于其强大的理论解释力受到国内外学者的关注,在近十年成为学术界和实务界聚焦的热点理论之一。本文从概念深化与维度开发、形成机制、前因效应、中介效应、调节效应和衍生类型等六个方面系统地回顾了该理论的国内相关研究进展,梳理了主要研究脉络和研究发现。基于对国内相关研究的述评,提出了未来的研究方向,以期为今后更深入地推进该理论的研究提供借鉴。

我国中小企业全球价值链嵌入分析——基于RCEP成员国的比较分析

RCEP协定对中小企业作用于区域经济发展的意义给予充分肯定,并就完善成员国中小企业市场准入、加强中小企业全球价值链参与进行合作。本文从中小企业全球价值链嵌入率、中小企业全球价值链嵌入行业分布及中小企业全球价值链嵌入模式和地位等角度对中国与RCEP各成员国中小企业全球价值链(GVC)嵌入现状进行比较分析。研究发现:融资约束及自主创新、新技术使用方面的不足导致我国中小企业全球价值链嵌入率较低;政府对中小企业的政策支持差异导致我国与发达成员国中小企业全球价值链嵌入存在国家之间、行业之间的差距;全球价值链重构背景下我国中小企业全球价值链嵌入行业和方式造成中小企业不仅面临价值链攀升的难题,也面临被排除在全球价值链之外的局面。为此,我国中小企业应注重自身学习能力、创新能力、数字化能力等GVC参与能力建设,在更高水平对外开放背景下及政府相关政策措施和完善的服务体系支持下,抓住RCEP协定带来的机遇,积极完善全球价值链参与,在分享RCEP协定红利的同时促进区域内经济发展。

论农村集体经济组织成员资格确认标准

农村集体经济组织成员的资格确认标准必须既有理论解释力,又具备可操作性。探寻成员资格实质所依据的土地社会保障标准、法律行为标准和财产对价标准缺乏可操作性,且理论解释力不足;而以可操作性见长的户籍或者户籍优先标准、固定生产生活标准和综合标准,很少讨论成员资格的理论依据且其实践适用优势逐渐丧失。同时具备两项要求的现有土地权利标准,以现有土地权利的双重属性作为成员资格确认的理论基础,以土地权利证书所载家庭成员名单作为可操作的制度资源,能够实现推进成员资格确认。可行的方案是尊重土地承包经营权确权成果,确认证书所载的土地权利人为农村集体经济组织成员,可以实现占多数的一般成员的资格确认,也能够解决特殊人员的资格确认难题。

自然杀伤细胞家族2成员D受体-配体轴在血液瘤中的作用研究进展

自然杀伤细胞家族2成员D(NKG2D)受体通过表达在自然杀伤(NK)细胞和细胞毒性T淋巴(CTLs)细胞上激活这些免疫细胞对抗肿瘤。肿瘤细胞通过降低自然杀伤细胞家族2成员D配体(NKG2DLs)的表达来逃避免疫系统的监视,从而促进肿瘤的免疫逃逸。最新的研究揭示了NKG2D受体-配体轴在血液瘤的发展、免疫监视和治疗中的关键作用,尤其是在阐明免疫逃逸机制和开发新的治疗策略方面显示出巨大潜力。现从NKG2D受体-配体轴在血液瘤发病机制、免疫监测及治疗中的作用进行阐述,在加深对血液瘤病理机制理解的同时,为提升治疗效果开辟了新的策略。

自然杀伤细胞2组成员A、程序性死亡因子配体1表达检测对PD-L1阻断免疫治疗肌层浸润性膀胱癌反应性的预测价值

目的:探究自然杀伤细胞2组成员A(NKG2A)及程序性死亡因子配体1(PD-L1)表达检测对PD-L1阻断免疫治疗肌层浸润性膀胱癌反应性的预测价值。方法:选取100例肌层浸润性膀胱癌患者作为研究对象,对其行PD-L1阻断免疫治疗后,根据治疗反应性将其分为缓解组和未缓解组;对缓解组患者随访3个月,将其分为复发组和未复发组。比较两组患者NKG2A和PD-L1在CD4^(+)和CD8^(+)上的表达水平,采用ROC曲线分析NKG2A和PD-L1预测膀胱癌患者治疗反应性的价值。结果:100例研究对象中,缓解组患者72例(72.00%),未缓解组患者28例(28.00%),两组性别、年龄比较无统计学差异(均P>0.05),但缓解组患者肿瘤直径小于未缓解组,NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)表达水平均低于未缓解组(均P<0.05)。膀胱癌患者NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)表达预测免疫治疗后缓解的AUC值分别为0.771、0.724、0.710;联合诊断的AUC为0.836。72例缓解患者中,出现复发29例(40.28%),未出现复发43例(59.72%),两组性别、年龄以及肿瘤直径比较无统计学差异(均P>0.05),但复发组NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)表达水平均高于未复发组(均P<0.05)。NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)表达预测膀胱癌患者缓解后复发的AUC值分别为0.775、0.740、0.728;联合诊断的AUC为0.874。结论:NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)在不同治疗反应性肌层浸润性膀胱癌患者外周血中表达水平不同,三者对于膀胱癌患者PD-L1阻断免疫治疗反应性均有一定的预测价值,且三者联合预测效能最佳。

妊娠期糖尿病患者血清分泌性卷曲相关蛋白-5、热休克蛋白60、溶质载体家族16成员11的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨分泌性卷曲相关蛋白-5(sFRP5)、热休克蛋白60(HSP60)、溶质载体家族16成员11(SLC16A11)在妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中的表达及其与胰岛素抵抗的关系。方法选取2022年1月—2023年12月在本院就诊的120例GDM患者为研究组,另选取同期120例健康孕妇为对照组。检测血清sFRP5、HSP60、SLC16A11表达水平;检测并计算胰岛素抵抗相关指标[空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]的水平;采用Pearson法分析血清sFRP5、HSP60、SLC16A11与胰岛素抵抗的相关性;采用Logistic回归分析法与受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sFRP5、HSP60、SLC16A11与GDM的相关性。结果研究组血清sFRP5表达低于对照组,血清HSP60、SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清sFRP5与HSP60、SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR呈负相关(P<0.05);血清HSP60与SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P<0.05);血清SLC16A11与FBG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,HSP60、SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR是妊娠期患者发生GDM的影响因素,sFRP5是保护因素(P<0.05)。血清sFRP5、HSP60、SLC16A11联合诊断妊娠期患者发生GDM的曲线下面积(AUC)为0.924,3项指标联合诊断价值优于各指标单独诊断(P均<0.05)。结论GDM患者血清sFRP5水平降低,HSP60、SLC16A11水平升高;3项指标均为妊娠期患者发生GDM的影响因素,且与胰岛素抵抗相关;3项指标联合对GDM具有较高的诊断效能。

农村集体经济组织成员代表诉讼释论

集体成员代表诉讼是《农村集体经济组织法》借鉴股东代表诉讼而设立的全新制度,对维护农村集体经济组织及其成员的合法权益具有重要意义。集体成员代表诉讼适用于农村集体经济组织理事会成员、监事会成员或者监事、主要经营管理人员,以及农村集体经济组织外部人员侵害农村集体经济组织合法权益的情形。集体成员提起代表诉讼须经过前置程序,但在紧急情况下,人民法院有权豁免该程序。集体成员代表诉讼的适格原告为10名以上具有完全民事行为能力的集体成员,适格被告为侵害农村集体经济组织合法权益的理事会成员、监事会成员或者监事、主要经营管理人员及其他外部人员,农村集体经济组织为辅助型无独立请求权的第三人。在集体成员代表诉讼的案件审理中,管辖法院的确定、诉讼时效的适用、诉讼权利的限制、诉讼结果的效力及诉讼费用的承担等,是需要重点关注的问题。

数智时代领导-成员交换对“后改革一代”员工反馈规避行为的影响研究

基于社会交换理论和资源保存理论,以“后改革一代”员工为研究对象,考察数智时代领导—成员交换对员工反馈规避行为的影响,检验工作意义感和心理安全感的中介效应以及宽容氛围的调节效应。研究结果表明:领导—成员交换对“后改革一代”员工反馈规避行为有显著负向影响;工作意义感和心理安全感在以上二者之间具有部分中介作用;宽容氛围在以上二者之间起负向调节作用,宽容氛围能够弱化领导—成员交换通过心理安全感负向影响员工反馈规避行为的中介效应。研究结论揭示了领导—成员交换与员工反馈规避行为之间的作用机制,为数智时代背景下的企业如何减少“后改革一代”员工反馈规避行为提供了理论支撑和实践启示。

领导-成员交换组合对追随力的影响--传统性和感知人力资源管理强度的调节作用

随着员工地位提升,员工追随力的激发成为组织关心的议题.从员工和领导对彼此关系质量(LMX)感知存在不对等的现象入手,基于角色理论,本研究构建了员工和领导的LMX组合对追随力影响的理论模型并考察了传统性和感知人力资源管理强度的边界作用.通过收集75位领导和350位员工的配对样本数据,并进行潜在剖面分析、多项式回归和响应面分析,研究发现:员工和领导之间存在四种LMX组合.具体来说,“高-高”组合比“低-低”组合更容易激发追随力;“高-低”组合比“低-高”组合更容易激发追随力.同时,LMX不同组合与追随力之间的关系也受到传统性和感知人力资源管理强度的调节.具体来说,高传统性下,“高-高”组合和追随力之间的关系与“低-低”组合相比得到了增强,“低-高”组合和追随力之间的关系与“高-低”组合相比得到了增强;高感知人力资源管理强度下,“低-低”组合和追随力之间的关系与“高-高”组合相比得到了增强,“高-低”组合和追随力之间的关系与“低-高”组合相比得到了增强.研究深化了LMX组合对追随力产生的差异影响及其边界作用,为解决员工和领导关系不对等问题提供了理论依据和实证支持.

安理会制裁决议的成员国报告制度的困境及应对

安理会制裁决议的成员国报告制度乃确保联合国成员国落实制裁决议的监测措施,它要求成员国定期向安理会呈递来文,报告本国执行安理会制裁决议的情况。安理会下设的制裁委员会负责法律判断,专家小组负责事实认定。实践中,由于制裁委员会强政治性、专家小组弱司法性的矛盾未能消解,政治干预、制约缺位、标准不一等问题始终存在,最终导致成员国报告制度深陷低效性和独立性的双重困境,直接影响制裁监测的效率。切实提高成员国报告制度与制裁效率,须通过规范重构、统一报告评估准则才能达成。

集体成员诉权的组织法配置:法理、实践和解释性构造

《农村集体经济组织法》从体系性视角初步构建集体成员诉权机制,但仍然存在粗疏遗漏和诉权克减现象。运用组织法逻辑配置集体成员诉权并构设诉讼规则,纵向维度上应当尊重其不同诉讼阶段动态递进的三阶构造,横向维度上适用以诉讼目的为依据划分形成的三种类型。《农村集体经济组织法》主要沿着以撤销权保护成员权益、以代表诉权保护组织权益、以行政行为监督决议合法性的进路展开,尚存撤销诉讼规则错裂、代表诉讼规则疏漏、决议纠纷可诉性不明的问题,在司法实践的具体适用仍有极大解释空间。应结合集体成员诉权原理构设侵权诉讼、代表诉讼和决议诉讼,通过出台司法解释或法官采取扩张性解释拓展细化具体规则。

宅基地资格权回归集体成员权的实质与路径

“三权分置”背景下的宅基地资格权,是“两权分置”背景下宅基地使用权中身份性内容析出后权利化的结果,但实质上源自集体所有权及其塑造的集体对成员“户有所居”保障关系。将宅基地资格权定位为集体成员权,符合宅基地资格权探索的实践理性,是宅基地资格权向集体成员权的应然回归。宅基地资格权由集体成员组成的农户所拥有的宅基地分配请求权、宅基地使用权回复权、宅基地补助补偿权及衔接权能构成,其行使不得违背“限禁规则”。基于保障功能及其对应集体成员权实现的要求,宅基地资格权设定应当采取登记生效模式,并明确村级农村集体经济组织或村民委员会在宅基地管理中的权限,代表成员集体开展宅基地资格权认定与登记工作。将“自愿有偿”作为主体放弃宅基地资格权的强制要求,坚持宅基地资格权不得流转,并以“户有所居”保障功能实现为依据。通过相应的衔接规则,可以实现宅基地资格权与集体住房保障、国家住房保障、土地征收制度有序衔接。

集体成员资格确认需要纳入法治轨道——关于集体经济组织法的思考与建议

论文的核心观点是将群众认定集体成员资格改为依法认定,提出全面纳入法制轨道的三个步骤。2024年4月提交全国人大立法机构。同年十四届全国人大常委会第十次会议6月28日表决通过《中华人民共和国农村集体经济组织法》,删除群众认定成员资格的表述,在成员资格的认定中明确规定依法认定。本刊全文发表供学界参考。

陕西自贸区农产品出口的发展路径研究——借鉴CPTPP成员国经验

区域经贸合作的加深推动了农产品贸易,也使之成为地区经济增长新的引擎。陕西省作为农业大省,农产品出口水平却与农产业发展水平不匹配,陕西自贸区在农产品出口上有较大发展空间。为促进陕西农产品的出口,分析了陕西农产品出口现状,并对比CPTPP成员国的农产品出口结构与出口收益,探讨了陕西农产品出口存在的问题与原因。对此,借鉴CPTPP成员国农产品出口经验,指出陕西自贸区应加强农业科技支持,加强农产品品牌建设,提升产品品质,建立外向型农产品基地,并依托跨境电商与中欧班列,探索出陕西农产品出口的新路径,从而推动陕西自贸区的发展。