改良QuEChERS技术结合超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中扑草净及其代谢物残留

采用改良QuEChERS技术作为前处理方法,建立了水产品中扑草净及其代谢物残留的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品用乙腈提取,经增强型脂质去除吸附剂与Cleanert LipoNo组合净化,采用选择反应监测正离子模式测定,内标法定量。结果表明:扑草净及其代谢物在1.0~500 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,确定系数R2大于0.992,方法检出限和定量限分别低至0.20μg/kg和0.50μg/kg,在草鱼、克氏原螯虾和中华绒螯蟹等基质的加标实验中呈现良好的准确度与精密度,平均加标回收率和相对标准偏差分别为74.4%~113.7%和3.17%~11.47%。经内标法校正,5种扑草净及其代谢物在不同水产品中的基质效应不明显。方法实现了水产品中扑草净及其代谢物的识别与定量分析,并通过检测药浴扑草净的克氏原螯虾阳性样品验证了方法的适用性。

二甲戊灵、扑草净与丙炔氟草胺的配比筛选及在油莎豆田的应用效果

为探索和论证二甲戊灵、扑草净与丙炔氟草胺三者复配的合理性及三者复配制剂对油莎豆Cyperus esculentus var.sativus田杂草的防效和对油莎豆的安全性,本试验依据除草剂室内活性测定标准并借鉴除草剂防治大豆田杂草田间药效试验准则,进行了一系列试验。结果表明,二甲戊灵、扑草净与丙炔氟草胺三者联合作用对稗草Echinochloa crus-galli、苘麻Abutilon theophrasti、藜Chenopodium album 3种杂草表现为相加或增效作用,当三者混配比例为30∶30∶1时联合作用为增效,为最佳比例。此比例下的36.6%二甲戊·扑·丙炔SC对油莎豆田一年生杂草有较好的防效,试验有效剂量在1647.0~1921.0 g/hm^(2)范围内,对油莎豆出苗、生长较安全;施药后40 d对一年生杂草的防效为91.3%~97.7%。由此可见,二甲戊灵、扑草净与丙炔氟草胺三者联合研制新药剂具有可行性,能扩大杀草谱和应用范围,可用于油莎豆田杂草防控,适宜用量1647.0~1921.0 g/hm^(2)。

香根草对镉-扑草净复合污染胁迫的生理响应

以香根草(Vetiveria zizanioides)为供试材料,采用温室水培方法,研究水体中Cd(初始质量浓度为0.5 mg·L^(-1))、扑草净(初始质量浓度为1 mg·L^(-1))单一或复合污染胁迫对香根草鲜重、叶绿素含量、根系活力、抗氧化酶系统的影响。结果表明:与未添加Cd和扑草净处理(CK)相比,香根草总鲜重和鲜重增长率在单一Cd污染胁迫下没有显著差异(P>0.05),但在单一扑草净和Cd-扑草净复合污染胁迫下显著降低(P<0.05),在单一扑草净污染胁迫下分别下降32.72 g和11.66%,在Cd-扑草净复合污染胁迫下分别下降16.85 g和6.69%。香根草叶绿素a(Chla)、叶绿素b(Chlb)和总叶绿素(Chlt)含量在单一扑草净污染胁迫下呈波动下降趋势,在单一Cd和Cd-扑草净复合污染胁迫下呈波动上升趋势。除0和6 d时以外,其他培养时间单一Cd污染、Cd-扑草净复合污染和单一扑草净污染胁迫下香根草根系活力均显著高于CK。随培养时间延长,在Cd和扑草净的单一及复合污染胁迫下香根草根系和茎叶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量表现出不同的变化趋势。香根草对水体中Cd和扑草净的单一/复合污染胁迫具有较强耐受反应,能通过抗氧化酶系统间的相互调整来应对胁迫。研究结果可为筛选人工湿地植物用以修复重金属、农药的单一/复合污染提供基础理论依据。

镉和扑草净污染对蚯蚓的急性毒性效应

【目的】通过蚯蚓死亡率、体质量变化率等数据表征重金属镉和三嗪类农药扑草净单一及复合污染对蚯蚓造成的急性毒性效应,探讨污染物毒性及复合污染关系的变化。【方法】以赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)为受试生物,镉和扑草净为受试材料,采用人工土壤法对比不同污染时间和不同污染物质量分数处理下蚯蚓生理指标的变化。【结果】单一污染时,镉对蚯蚓7和14 d的半致死浓度(LC50)分别为1101.00和543.30 mg/kg;扑草净对蚯蚓7和14 d的LC50分别为91.89和54.04 mg/kg。复合污染时,随着污染时间的增加,主效应因子由扑草净转为镉,污染物毒性也随之增强。【结论】扑草净单一污染的毒性大于镉,但镉在复合污染中的毒性更大。

植物配置对水体扑草净去除效果研究

采用温室水培模拟试验,研究不同浓度扑草净污染下,香根草、菖蒲及其2∶1配置于水体中第0、6、12、24、30天扑草净含量。结果表明:不同浓度扑草净污染水体中,培育植物条件下第30天扑草净去除率为58.60%~91.69%,CK扑草净去除率为45.86%~57.48%,培育植物组显著高于CK。当扑草净初始浓度<4 mg/L时,香根草对水体扑草净污染的去除效率最高,第30天达到88.4%;扑草净初始浓度≥4 mg/L时,香根草、菖蒲生物量2∶1组合对水体扑草净污染的去除效率最高,第30天达到91.69%。研究结果可为不同浓度扑草净污染水体植物修复提供参考。

基于物种敏感度分布法——评价山东省某海湾除草剂扑草净的 生态风险

随着除草剂扑草净在我国农业和水产养殖业的广泛应用,近岸海洋环境也受到不同程度的污染。为探究其生态风险,本文系统研究了扑草净对我国近海典型生物类群的急性效应,基于现场调查分析其在近海典型海湾的分布规律,基于物种敏感度分布法评价其生态风险。结果表明,基于扑草净对我国海洋生物急性毒性数据,采用物种敏感度分布法,得到扑草净的5%物种危害浓度(HC5)为8.42μg·L^(–1),急性预测无效应浓度(PNEC)为4.21μg·L^(–1)。2020年3-10月,山东省某海湾近岸表层海水中扑草净检出率100%,检出范围为2.18~2.04×10^(3)ng·L^(–1),有明显的季节变化特征,呈现从近岸到近海辐射状递减趋势;采用商值法表征调查海域扑草净的生态风险,其风险熵(RQ)范围为0.001~0.484,除3月、5月的个别站位RQ大于0.1,具有中风险,其余站位RQ均小于0.1,为低风险。本研究可为评价扑草净在我国近岸海洋环境中生态风险提供数据参考。

乙草胺、扑草净、2,4-滴异辛酯在春玉米中的残留及膳食风险评估

为评价乙草胺、扑草净、2,4-滴异辛酯在春玉米上施用后可能产生的膳食暴露风险,通过规范的田间残留试验,检测春玉米中乙草胺、扑草净、2,4-滴异辛酯的残留量,结合中国的国家估算每日摄入量(NEDI)与可接受的每日摄入量(ADI),评估这些农药的风险商(RQ)。在0.01~0.55 mg/kg添加水平下3种有效成分及代谢物在青玉米、玉米、青玉米秸秆和玉米秸秆中的平均回收率为88%~113%,相对标准偏差为0.4%~8.6%。开展1年6地规范残留田间试验,3种有效成分及代谢物的最终残留量在青玉米、玉米、青玉米秸秆和玉米秸秆中均未检出。普通人群对3种有效成分的NEDI分别为0.035、0.032、0.28 mg/(kg bw),RQ分别为5.49%、1.29%和44.8%。膳食风险评估结果表明乙草胺、扑草净、2,4-滴异辛酯在春玉米中的残留量在可接受范围,不会对我国人体健康产生影响。

香根草对水体中镉-扑草净复合污染的吸收去除动态

在工农业生产过程中,由不合理排放的重金属和残留的农药所形成的复合污染在水体及其沉积物中普遍存在。为探讨香根草(Vetiveria zizanioides)对镉-扑草净复合污染水体的修复潜力,采用温室水培模拟试验,研究香根草对水体中Cd(初始质量浓度为0.5 mg·L^(-1))、扑草净(初始质量浓度为1 mg·L^(-1))单一或复合污染物的吸收积累和去除特征。结果表明,随着培养时间的延长,种植香根草组水体Cd^(2+)和扑草净质量浓度均显著低于未种植香根草(对照)组(P<0.05)。经过30 d的培养,单一Cd和扑草净污染处理水体Cd^(2+)和扑草净实际去除率(R 0)分别显著高于Cd-扑草净复合污染处理(P<0.05)。与对照相比,种植香根草使单一扑草净污染和Cd-扑草净复合污染处理水体扑草净半衰期(t_(1/2))和去除99%扑草净所需时间(t_(0.99))均显著缩短(P<0.05)。扑草净半衰期、去除99%扑草净所需时间和扑草净在水体中的降解速率均表现为种植香根草组显著优于未种植香根草组(P<0.05),单一扑草净污染处理显著高于复合污染处理(P<0.05)。培养期间,香根草对水体中Cd^(2+)的吸收主要富集在根系,根系Cd^(2+)含量显著高于茎叶(P<0.05),两者转移系数均小于1。单一扑草净污染处理扑草净在香根草内最大转移系数为1.90,而Cd-扑草净复合污染处理转移系数均小于1。香根草能够同时去除水体中Cd和扑草净,且对单一污染的去除效果优于复合污染,说明香根草能用来修复重金属、农药单一/复合污染水体,为筛选人工湿地植物修复重金属、农药单一/复合污染理想植物提供基础理论依据。

三嗪除草剂扑草净对海洋浮游植物群落的影响——基于对微藻种群动态、种间竞争和光合能力的分析

以三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)、海水小球藻(Chlorella pacifica)和球等鞭金藻(Isochrysis galbana)为研究对象,设置单藻培养组和双藻1:1(细胞密度比)共培养组,研究了扑草净对3种海洋饵料微藻种群动态、光合能力和种间竞争的影响.结果表明,扑草净对三角褐指藻、海水小球藻和球等鞭金藻的96h-EC50值分别为为7.65,16.67,4.11μg/L,扑草净对3种微藻的毒性大小为:球等鞭金藻>三角褐指藻>海水小球藻;扑草净通过抑制微藻的光合作用使微藻种群数量显著降低;扑草净暴露减弱了海水小球藻对三角褐指藻的竞争抑制且暴露于环境浓度(0.5和5μg/L)扑草净12d后便可导致海水小球藻和球等鞭金藻共培养体系中的敏感种球等鞭金藻全部消亡,最终使得种间作用向着更有利于硅藻的方向发展.研究结果为评估三嗪类除草剂扑草净的海洋生态风险提供了理论支撑.

超高效液相色谱-串联质谱法测定水产养殖用非规范药品及水中扑草净、阿维菌素和伊维菌素的残留量

取水产养殖用非规范药品样品1.00g,加入1.0mg·L^(-1)扑草净-d6(内标)溶液10μL和水20 mL,其中固态样品经均质、超声处理后离心5 min,液态样品经涡旋振荡混匀后离心5min,均取上清液用水定容至100 mL;养殖水样经0.45μm滤膜过滤,取滤液200 mL,加入1.0mg·L^(-1)扑草净-d6溶液10μL,振荡混匀。将上述样品溶液过NPO HLB固相萃取柱(预先用5mL甲醇、5mL水活化),用5mL水淋洗,用6mL甲醇洗脱,将洗脱液于40℃氮气吹至近干,加入体积比3∶7的甲醇-含0.1%(体积分数,下同)甲酸的2mmol·L^(-1)乙酸铵溶液混合液1.0mL复溶,经涡旋、超声振荡、离心、过滤后,采用超高效液相色谱-串联质谱法同时测定其中扑草净、阿维菌素和伊维菌素的残留量。以Waters ACQUITY UPLC C_(18)柱为固定相,以不同体积比的甲醇-含0.1%甲酸的2mmol·L^(-1)乙酸铵溶液混合液为流动相进行梯度洗脱,质谱分析采用电喷雾离子(ESI)源,正离子(ESI+)扫描及多反应监测模式,内标法定量。结果表明:扑草净标准曲线的线性范围为0.2~15.0μg·L^(-1),阿维菌素、伊维菌素标准曲线的线性范围为2.0~150.0μg·L^(-1),非规范药品样品中检出限(3S/N)分别为0.2,2.0,2.0μg·kg^(-1),水样中检出限(3S/N)分别为1.0,10,10μg·L^(-1)。按照标准加入法进行回收试验,回收率为84.8%~105%,测定值的相对标准偏差(n=6)小于9.0%。方法用于分析80个实际样品,结果显示,1个非规范药品样品中检出阿维菌素,其残留量为718mg·kg^(-1),1个水样中检出扑草净,其残留量为3.2ng·L^(-1)。

大米中扑草净残留量的测定

运用气相色谱-质谱法(SN/T 1968-2007)对大米中的扑草净残留量进行测定,实验结果表明,扑草净在0.05μg/L~4.0μg/L范围内与检测信号的峰面积呈良好的线性关系,检出限为0.125μg/kg,平均回收率为93.2%。通过实验,验证了该方法测定大米中扑草净的残留量在实验室中的适用性,为实际工作中运用此方法检测食品中扑草净的残留量奠定了基础。

扑草净对远志幼苗根系活力及氧化胁迫的影响

以远志(Polygala tenuifolia Willd.)为材料,应用组织化学和生物化学的方法研究不同浓度扑草净(0—400 mg/L)对远志幼苗生长、根系活力、膜脂过氧化、活性氧含量及抗氧化酶活性等的影响。10 mg/L扑草净对远志幼苗根系活力、细胞膜完整性及活性氧的积累几乎无显著影响,而25—400 mg/L扑草净处理则显著增加活性氧的积累,明显抑制根系活力且破坏细胞膜完整性;上述结果进一步被膜脂过氧化、质膜完整性、活性氧产生(O.2-和H2O2)的非损伤组织化学染色所证明。远志幼苗可通过多种抗氧化酶(SOD、POD、CAT、APX等)和非酶抗氧化剂(如脯氨酸)的相互协调作用,清除低浓度扑草净胁迫诱发产生的活性氧,减轻对细胞的伤害。研究结果表明,发芽期是远志对扑草净处理的敏感时期,较为安全的扑草净临界浓度为10 mg/L;25mg/L扑草净处理即引起远志幼苗氧化胁迫和膜脂过氧化,使细胞膜的完整性受到破坏,根系活力下降,抑制了远志幼苗的生长发育。该研究为远志抗除草剂胁迫机制及其栽培过程中除草剂的安全合理使用提供理论依据。

微波辅助萃取-固相微萃取联用气相色谱-质谱法测定土壤中的扑草净

研究了微波辅助萃取 固相微萃取联用、气相色谱 质谱联用测定土壤中除草剂扑草净的分析方法。采用正交设计实验优化了萃取溶剂种类和体积、微波辐射时间和微波功率等微波辅助萃取条件 ;研究了SPME萃取涂层、搅拌速度、萃取时间和解吸时间等对萃取效率的影响。方法的检出限为 0 .0 1ng/g ;线性范围为 0 .2～ 2 0 0 μg/L。在优化的条件下测定了 5和 5 0ng/g的合成土壤样品 ,回收率分别为 90 .1 %和 91 .6 % ;相对标准偏差分别为 9.4 %和 8.8% (n =6 )。本法综合了微波辅助萃取和固相微萃取的优点 ,操作简便 ,灵敏度高 。

我国水产品中农药扑草净残留超标的警示分析

由于我国水产品中扑草净频频超标,日本加强对我国水产品的命令检查,出现了严重的贸易壁垒。本文通过对国内外扑草净残留限量标准的现状、扑草净在我国的使用情况、日本对扑草净残留的研究进行分析,综合评价了扑草净超标对我国水产品出口的影响。通过分析,本文建议重点开展对鱼类、贝类及虾类等产品中扑草净含量的风险评估,为制定水产品中扑草净限量标准提供科学依据;同时强化对鱼类、贝类、虾类等产品中农药扑草净含量的监测,避免高残留产品冲击国内市场。

环境中除草剂扑草净残留分析方法的研究

建立了高效液相色谱(HPLC)法测定环境中土壤、水和小麦中除草剂扑草净残留量的分析方法。采用丙酮超声提取,硅胶柱层析净化,测定土壤中扑草净残留量;水样直接用LC-18固相萃取小柱分离、净化和富集;采用超声提取,甲醇∶水=1∶1(V/V)为提取剂,LC-18固相萃取小柱分离、净化,测定小麦样品中扑草净的残留。结果表明:HPLC法检测扑草净的线性范围为0.5～16 mg.L-1,相关系数R2=0.9999,方法的检出限为0.0125 mg.L-1。土壤的加标回收率为88.2%～102.4%,相对标准偏差为6.3%～6.4%;水样的加标回收率为81.7%～102.5%,相对标准偏差为4.5%～4.6%;小麦的加标回收率为88.4%～101.7%,相对标准偏差为3.6%～5.5%。

除草剂扑草净在海参中的生物富集与消除效应研究

本文采用超高效液相色谱-串联质谱法对进行了扑草净在海参中的生物富集规律的进行了研究。采用半静态水质接触曝污法,在15.0±1.0℃水温条件下,将海参分别浸浴于扑草净浓度1.00μg/L、10.00μg/L和200.00μg/L水中进行富集试验。结果表明,在所研究的三个浓度中,扑草净在海参中的富集速度较快,随曝污质量浓度的增加,富集量逐渐增加,呈正相关关系;分别在第1 d、3 d和4 d达到富集最大值,富集最大值分别为4.70μg/kg、43.80μg/kg和674.00μg/kg;最大富集系数分别为4.70、4.38和3.37。富集系数随曝污质量浓度的增加而减小,呈负相关关系。将达到稳定状态的海参转移至洁净水中进行消除试验,低质量浓度下,均在第2 d降至未检出,在高曝污质量浓度下,从第7 h至46 d共取样14次,测定海参中扑草净含量,其浓度范围为23.70±3.07μg/kg。本研究所得的药时曲线可为海参扑草净污染的净化提供数据支持。

除草剂扑草净和阿特拉津对海草与大型藻类的毒性比较

陆地径流等可引起海域中除草剂浓度升高,从而威胁海洋大型植物——海草和大型藻类的生长。以叶绿素荧光为主要指标测定除草剂阿特拉津和扑草净的低、中、高(1、5和25μg/L)浓度对4种常见海草:大叶藻(Zostera marina L.)、丛生大叶藻(Z.caespitosa M.)、矮大叶藻(Z.japonica Aschers.&Graebn.)、红须根虾形藻(Phyllospadix iwatensis M.)和2种常见大型藻类:孔石莼Ulva lactuca L.和海索面Nemalion helminthoides的光合抑制。结果显示,低浓度1μg/L的扑草净和5μg/L的阿特拉津即对矮大叶藻、孔石莼和海索面产生了显著的光合抑制,抑制率约而7.54%—12.97%;大叶藻、丛生大叶藻和红须根虾形藻的扑草净和阿特拉津的显著作用浓度为5μg/L,在相同浓度下,扑草净的光合抑制较阿特拉津更强,同时,矮大叶藻及两种大型藻类较其他3种海草成体对除草剂作用更为敏感。

气相色谱-质谱联用法测定紫菜中扑草净的残留量

建立了固相萃取净化与气相色谱．质谱联用技术测定紫菜中扑草净除草剂残留量的检测方法。样品由乙腈溶剂提取浓缩后，活性炭和氨基柱双柱串联固相萃取净化，由气相色谱-质谱联用技术测定。方法定量限为2μg／kg，满足国外最低10μg／kg的限量要求；方法在10，40和100μg／kg 3个添加水平和不同人员操作条件下，回收率均稳定在90％～120％之间，RSD％≤7．1％。

扑草净降解酶的固定化及其对受污染土壤的生物强化研究

提取扑草净降解优势菌 Pseudomonas FR粗酶液 ,以藻酸钠作为包埋剂将酶液固定化 ,比较固定化酶与游离酶对扑草净的作用效果 ,结果表明 ,理想条件下 ,固定化酶的活性相当于游离酶液活性的 79% ,但温度、p H值等条件的变化对固定化酶的影响很小 ;对固定化载体进行了优化 ,确定纤维系为适宜的添加剂 ,利用固定化酶对受污染土壤进行处理 ,经六周检测 ,土壤中扑草净的含量减少 85 % .

紫菜中六六六、滴滴涕和扑草净的检测

利用气相色谱-质谱联用技术测定紫菜中六六六、滴滴涕和扑草净的残留量。试样用乙腈提取,经石墨化炭黑/氨基复合柱净化,采用气相色谱-电子轰击源质谱测定,检测模式采用选择离子监测(SIM),外标法定量。研究结果显示,六六六方法定量限为5.0μg/kg,滴滴涕为2.5–5.0μg/kg,扑草净为2.5μg/kg。各组分加标回收率在78.5%–112.0%之间,相对标准偏差在3.6%–10.3%之间。结果表明,该方法简便、快速,其准确度和精密度能够满足紫菜中六六六、滴滴涕和扑草净同时检测的要求。