PDK1抑制剂GSK2334470的抗真菌活性研究

侵袭性真菌感染严重威胁人类生命健康.白念珠菌是临床侵袭性真菌感染中较为常见的菌种之一.耐药性的产生和生物被膜的形成是其临床治疗失败的主要原因.因此,亟需开发抗耐药菌和生物被膜的新型药物.课题组通过药敏筛选实验发现化合物GSK2334470(J1)单用时对耐药白念珠菌表现一定的抑制活性(MIC值范围为32~>128μg/mL),且在较高浓度时(64~256μg/mL)能明显抑制生物被膜的形成及损伤成熟生物被膜.进一步,通过棋盘式微量液基稀释法、生长实验、存活实验、纸片扩散实验、生物被膜实验等证实J1与氟康唑合用后对耐药白念珠菌和热带念珠菌均表现较好的协同抗菌作用,它们能协同抑制耐药白念珠菌的生长以及生物被膜的形成.初步的机制研究发现J1能增加耐药白念珠菌的细胞壁厚度,并且还能抑制其药物的外排.因此,进一步对化合物J1深入研究,有望发现新型抗耐药真菌先导化合物或候选药物.

N-芳基氨基甲酸苄酯的合成及抗真菌活性研究

为发现更多抗真菌药物分子,设计合成16种N-芳基氨基甲酸苄酯类目标化合物,并进行结构鉴定;以醚菌酯为阳性对照,采用菌丝线性生长速率法,测定目标化合物对常见的10种植物病原真菌的体外抑制活性,以及5种高抗菌活性的目标化合物对苹果轮纹病原菌和番茄早疫病原菌的毒力。结果发现,所有目标化合物对10种供试真菌都有不同程度的抑制活性,其中,化合物B11抗菌活性最高,对9种供试真菌的抑制率均超过80%,对马铃薯干腐病原菌的抑制率为98.1%,对番茄早疫病原菌的EC50为7.6μg/mL。构效关系研究表明,-F和-Me的引入有利于提高活性,是该类化合物的优势基团;-F和-Me的组合可大幅度提高活性,是优势基团叠加效应的结果。

剑叶龙血树中芪类化合物及其抗真菌活性的研究

目的 对剑叶龙血树含脂木材进行化学成分和活性研究。方法 采用硅胶柱层析、制备 TL C进行分离 ,运用 U V、IR、MS、1 H,1 3CNMR等光谱法鉴定化合物的结构 ,并对分得的化合物进行抗真菌活性筛选试验。结果 得到 2个类化合物 :4′-羟基 - 3,5 -二甲氧基对苯乙烯 (4′- hydroxy- 3,5 - dimethoxystillben,紫檀 )和 4′,3,5 -三羟基对苯乙烯 (resveratrol,白藜芦醇 ) ,具有抗真菌活性。

黄酮和甾体类化合物的抗真菌活性

用琼脂扩散法对从药用植物中分离到的12个黄酮和5个甾体化合物进行了抗真菌活性实验,其中黄芩甙元(baicalein)、funkioside C和胡萝卜甙(daucosterol)对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和白色念珠菌(Candida albicans)的生长均有抑制作用,对尖孢镰刀菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.112、0.217和0.108g/L,对白色念珠菌的MIC分别为0.264、0.310和0.078g/L。对其构效关系进行了初步讨论。

银杏内生真菌抗真菌活性菌株的分离和筛选

从银杏(Ginkgo biloba L．)的根、茎、叶和果实中分离获得522株内生真菌,采用菌丝生长抑制法测定 了对7种植物病原真菌的抑制作用。结果表明302株具有抗菌活性,占总数的57．85％,其中12株抗菌效果非 常明显。银杏组织中存在丰富的内生菌,不同组织内生真菌的数量存在一定差异;对病原真菌具有活性的内 生真菌比例较高;对大多数供试病原菌都可以筛选到拮抗效果较好的菌株;银杏内生真菌可以产生丰富的具 有抑菌活性的次生代谢产物,可以作为对多种病原物具有抑菌活性物质筛选的资源。

苦参碱体外抗真菌活性研究

目的研究苦参碱体外抗真菌活性。方法采用培养基药物浓度稀释法测定苦参碱对13株皮肤癣菌的最小抑菌浓度（MIC）及最小杀菌浓度（MBC）。结果苦参碱对武汉羊毛状小孢子菌、武汉白色念珠菌38253的抑制能力最好，MIC为0．78μg／mL；对上海株絮状表皮癣菌、石膏样小孢子菌、大脑状毛癣菌，武汉株猴毛癣菌、白色念珠菌32035的抑制能力次之，MIC为3．125。6．25μg／mL；对上海株羊毛状小孢子菌和武汉株近平滑念珠菌的MIC分别为12．5μg／mL和25μg／mL；而对上海株红色毛癣菌、武汉株断发毛癣菌、武汉株红色毛癣菌、武汉株紫色毛癣菌的MIC大于50μg／mL。苦参碱对13株皮肤癣菌的MBC与MIC相同。结论苦参碱有较强的抗真菌活性，能抑制和杀灭羊毛状小孢子菌、白色念珠菌等多种真菌。

仿刺参水溶性海参皂苷的分离制备及抗真菌活性的研究

利用海洋生物资源进行天然抗真菌新药的开发，从冻干海参加工废液中提取了水溶性海参皂苷，并对其抗真菌活性进行了研究。采用大孔吸附树脂法提取水溶性海参皂苷，经Libermann Burchard反应等对提取物的性质进行鉴定后，利用管碟法对所得提取物的抗菌活性进行了测定，并利用琼脂稀释法测定了所得水溶性海参皂苷对6株供试真菌的最低抑菌浓度（MIC）。提取物在Molish反应、沉淀反应和泡沫实验中均为阳性，说明提取物中确含有皂苷类成分；在Libermann Burchard反应中，液体的颜色处在红色与紫色之间，显示提取物可能是1种三萜类皂苷。水溶性海参皂苷对6株供试真菌均具有显著的抑制作用，且在浓度为0．5～4mg／mL的范围内，其抑菌活性与所用浓度之间呈明显的正相关性；在浓度为4mg／mL时，水溶性海参皂苷对6株供试真菌抑制活性的大小依次为裂殖酵母菌、啤酒酵母菌、白色念珠菌、葡萄炭疽病原菌、黄瓜枯萎病原菌和黑曲霉，海参皂苷对6株真菌的MIC值依次分别为0．002，0．016，0．063，0．063，0．125．0．250mg／mL。

麻疯树毒蛋白(curcin)的抗真菌活性研究

以植物病原真菌水稻稻瘟病菌(PyriculariaoryzaeCav.)、松赤枯病菌(Pestalotiafunerea)、玉米纹枯病菌(RhizoctoniasolaniKuha)、油菜菌核病菌[Sclerotiniasclerotiorum(Lib)deBary]为实验菌,检测了麻疯树毒蛋白(curcin)的抗真菌活性。结果表明,5μg/mLcurcin能明显抑制菌丝生长和孢子的产生。浓度提高到50μg/mL时,水稻稻瘟病菌基本不形成孢子,对松赤枯病菌的孢子形成抑制率达83.8%。光镜下可见处理菌丝明显缩小、变形。SDS-PAGE显示,处理菌丝的蛋白质条带减少。curcin对菌丝生长和孢子发育的阻碍作用可能与curcin阻碍了蛋白质合成有关。

山胡椒果挥发油的化学成分与抗真菌活性

本文采用GC-MS技术分析了山胡椒果水蒸气蒸馏和溶剂提取所得挥发油的化学成分。前者主要成分为正癸酸、大根香叶烯A、正十二烷酸、表水菖蒲乙酯和氧化丁香烯;后者主要成分为莰烯、3,6,6-三甲基-2-降蒎烯、癸酸乙酯、桉叶素和罗勒烯。体外抗真菌实验表明,前者对四种皮肤致病真菌(MIC值0.03～0.5ml/L)和五种污染霉菌(MIC值1.0～1.5ml/L)均具有明显的抑制活性,而后者活性较弱,这与其几乎不含倍半萜类或其含氧衍生物有关。

山苍子叶挥发油的化学成分与抗真菌活性

本文利用GC-MS联用技术确定了山苍子叶挥发油24种化学成分的结构与相对含量,其中α-罗勒烯(25.11％)、3,7-二甲基-1,6-辛二烯醇-3(16.85％)和橙花椒醇(13.89％)为主要组分。该挥发油具有很好的体外抗真菌活性,对供试皮肤致病菌的MIC为0.03～0.4μl/ml,对污染霉菌的MIC为1.0～2.0μl/ml。

新型三唑类化合物的合成及抗真菌活性

目的 寻找广谱、高效、低毒的新一代三唑类抗真菌药物。方法 根据靶酶活性位点的空间特征、各种力 场和关键残基分布,设计并合成了21个1 (1,2,4 三唑 1H 1 基) 2 (2,4 二氟苯基) 3 (4 取代 1 哌嗪基) 2 丙醇类 化合物,并测定了体外抑菌活性。结果 体外抑菌测试结果表明,所有化合物对8种致病真菌均有一定程度的抗真 菌活性,对深部真菌的活性明显优于浅部真菌。在哌嗪的各种取代基中,苯基和杂环取代的抗真菌活性明显优于苯 甲酰基取代。结论 有多个化合物的体外抗真菌活性明显高于氟康唑和特比萘芬,其中化合物VIII 1,4,5和IX 3 具有广谱、高活性的优点,值得进一步研究。

农抗702抗真菌活性的测定

探索农抗702的抗真菌活性。通过以农抗702为供试材料,霉菌、酵母菌以及14种植物病原真菌为供试菌,采用菌丝生长速率法和菌丝干重法测定农抗702对各种供试菌的抑制作用。结果表明农抗702对黑曲霉、青霉、毛霉、根霉、木霉、啤酒酵母、产朊假丝酵母、稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病的最低抑菌浓度(mg/L)分别为3.3、6.5、6.5、3.3、3.3、6.5、3.3、23.8、59.64、475.4。农抗702对供试植物病原真菌的EC50(mg/L)和EC90(mg/L)依次是:油菜菌核病菌为0.23和1.95,葡萄炭疽病菌为0.27和2.91,车前草穗枯病菌为0.33和8.58,烟草赤星病菌为0.89和12.02,车前草菌核病菌为1.23和4.02,小麦赤霉病菌为1.40和7.38,棉花黄萎病菌为1.53和5.07,富贵竹炭疽病菌为1.73和5.61,水稻纹枯病菌为1.89和7.03,紫荆炭疽病菌为3.21和14.17,辣椒根腐病菌为3.40和20.78,交链孢病菌为4.13和22.01,稻瘟病菌为12.51和29.36,稻曲病菌为59.42和201.80。研究表明农抗702具有较强的抗真菌活性,为农抗702的应用提供有益的试验证据。

水溶性海参皂苷的分离纯化及其抗真菌活性研究

从冻干仿刺参加工废弃液中分离纯化出水溶性海参皂苷,筛选并纯化出其强抗真菌活性组分,为利用水溶性海参皂苷研制高效抗真菌药物创造条件.先后利用大孔树脂柱层析和硅胶柱层析对水溶性海参皂苷进行了纯化,并对各种纯化组分的抗真菌活性进行了测定.在30%,50%,70%,80%,95%乙醇溶液的大孔树脂柱层析洗脱组分中,70%乙醇溶液洗脱组分对裂殖酵母菌和白色念珠菌的抗真菌活性最强.70%乙醇溶液洗脱组分经硅胶柱层析进一步纯化后,得到了SC-1、SC-2、SC-3和SC-4四种纯化样品,除SC-1无抗真菌活性外,其它3种纯化样品对裂殖酵母菌和白色念珠菌均具有显著的抗真菌活性,且组分SC-2和SC-3的抗真菌活性高于SC-4.SC-2纯化样品在高压液相柱层析(HPLC)图谱中仅显示为单一洗脱峰,且在旋转蒸发后可形成结晶,表明其纯度极高,可用于高效抗真菌药物的研制.

嗜铬粒蛋白N区抗真菌活性片段研究

为寻找高效低毒的抗真菌药物,利用PCR技术扩增了编码人嗜铬粒蛋白N端18-76、18-66和31-76位氨基酸(CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76)的DNA片段,将之克隆进枯草杆菌诱导型表达载体pSBPTQ,获得3种重组质粒pSC18-76、pSC18-66和pSC31-76,转化枯草杆菌DB1342。SDS-PAGE分析结果显示:经蔗糖诱导后,CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76片段分别在枯草杆菌工程菌中获得表达,产物分泌到细胞外。表达量分别为5.6 mg/L、5.3 mg/L和5.6 mg/L。利用孔穴琼脂扩散法检测表达产物的抗真菌活性,并与CGA1-76进行比较,发现CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76对烟曲霉菌、黄曲霉菌、石膏样小孢子菌和白念珠菌均有抑制作用,并以CGA31-76对白念珠菌的抑制作用为最强,CGA18-66对除白念珠菌之外的另3种测试真菌的抑制作用较强,而CGA18-76对测试真菌的抑制作用最弱。

五种新疆植物的抗真菌活性(英文)

对采自新疆的黄花蒿 (Artemisiaannua)、北艾 (Artemisiavulgaris)、梭梭 (Haloxylonammodendron)、盐爪爪 (Kalidiumfoliatum)和多枝柽柳 (Tamarixramosissima)抗植物病原真菌的活性进行了研究 ,植物病原真菌包括番茄灰霉病菌 (Botrytiscinerea)、棉花枯萎病菌 (Fusariumoxysporumf .sp .vasinfectum)、稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)、烟草黑胫病菌 (Phytophthoraparasiticavar .nicotianae)和瓜果腐霉 (Pythiumaphani dermatum) ,其中黄花蒿对真菌菌丝生长、多枝柽柳对稻瘟病菌孢子萌发表现出强的抑制活性。本研究为植物病害防治和新疆植物资源的开发和利用提供了依据。

三种药用植物内生真菌抗真菌活性的研究

从雪上一枝蒿(Aconitumbrachypodum)、刺五加(Acanthopanaxsenticosus)和大血藤(Sargentodoxacuneata)分离获得的162株内生真菌进行抗真菌活性检测,结果具有抗菌活性菌株有74株,雪上一枝蒿15株,刺五加23株,大血藤36株,分别占3种植物各自内生真菌的44.12%,48.94%和44.44%。将具有抗菌活性的菌株进行分类鉴定,分属于6目、7科、23属。

乳酸菌抗真菌活性及其抑制真菌毒素的效果

讨论了乳酸菌抗真菌的活性及其清除真菌毒素的3种可能机制,即①乳酸菌通过对霉菌生长的直接抑制,从而抑制真菌毒素的形成;②通过产生代谢产物抑制真菌菌株或降解真菌毒素到无毒或毒性较低的化合物,以此降低真菌毒素的危害;③借助乳酸菌细胞壁与真菌毒素(黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮)的物理结合来清除介质中的毒素危害。乳酸菌的抗真菌活性和清除霉菌毒素的能力显然受到菌株、细胞浓度、细胞处理方式和环境条件的影响。新型发酵乳菌株筛选过程中应该考虑乳酸菌菌株的抗真菌活性及其清除真菌毒素的能力。

竹叶楠叶挥发油的化学成分与抗真菌活性研究

利用 GC- MS联用技术从竹叶楠 (Phoebe faberi)叶挥发油中鉴定了 2 6个萜类化合物 ,如(Z) - (R) - (+) - 3,7,11-三甲基 - 1,6 ,10 -十二碳三烯 - 3-醇 (相对含量 39.34% )、β-丁香烯 (2 9.18% )、姜烯 (5.16 % )和氧化丁香烯 (4 .2 1% )。该挥发油具有一定的体外抗真菌活性 ,在培养基油浓度小于2 .0 μL/ m L的情况下 ,能够完全抑制新型隐球菌、申克氏孢子丝菌、羊毛状小孢子菌、石膏样小孢子菌和球毛壳霉等皮肤真菌的生长繁殖。

马铃薯糖苷生物碱抗真菌活性构效关系研究

采用平板菌丝生长抑制法测定了马铃薯糖苷生物碱茄碱和查茄碱、其酸水解产物β1-查茄碱、β2-查茄碱、γ-查茄碱和β2-茄碱及其硫酸化产物6-O-硫酸查茄碱和6-O-双硫酸茄碱的抗真菌活性,分析了糖链组成和结构与其活性的关系。结果表明,糖链的单糖组成、连接方式、连接顺序和单糖数目等对化合物的生物活性均有重要影响。

海洋放线菌BM-2菌株抗真菌活性物质的分离纯化与结构鉴定

从海洋放线菌菌株BM-1发酵液中分离抗植物病原真菌的活性物质。以对禾谷镰刀菌Fusarium graminearum的生物活性为跟踪,采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、薄层层析和HPLC等技术,海洋放线菌菌株BM-1发酵液中含有4种对禾谷镰刀菌具有抑菌作用的活性物质,对其进行分离纯化,得到了4种具有强抗菌作用的组分Aa、Ab、Ba、Ca。采用ESI-MS、1H NMR、13C NMR等波谱分析技术,对分离量较大、活性较强的活性组分Ca进行结构鉴定,鉴定Ca为邻苯二甲酸二丁酯(DBP)。