林蛙营养素含量及其营养需求研究进展

林蛙隶属于两栖纲,无尾目,蛙科,林蛙属,东北林蛙(Rana dybowskii)和黑龙江林蛙(Rana amurensis)是国家二级保护动物,森林资源的过度开发导致其数量锐减,已被列为濒危物种(崔光旭,2018;卫功庆等,2021)。林蛙具有很高的经济与药用价值,副产品包括蛤士蟆油(蛤蟆油)和活性多肽。

太行林蛙地理分布厘定

太行林蛙Rana taihangensis目前已知分布在河南、河北、北京和辽宁等地。根据采自宁夏固原和山东青岛的标本,报道宁夏回族自治区和山东省太行林蛙新分布记录。根据采集自内蒙古通辽和辽宁阜新的太行林蛙标本对其进行形态学补充描述。基于不同地区蛙属Rana标本线粒体cyt b基因的分子系统发育分析结果显示,山西省和陕西省为此前尚未记录的太行林蛙分布区。由此可将太行林蛙在中国的分布范围增加4个省(自治区),目前太行林蛙的分布范围则包括河南省、河北省、北京市、天津市、辽宁省、山东省、山西省、陕西省、宁夏回族自治区和内蒙古自治区。

基于转录组学探讨林蛙油对卵泡发育障碍大鼠的影响

目的:通过转录组学角度分析林蛙油对环磷酰胺所致卵泡发育障碍的影响,为林蛙油的雌激素样作用机制研究提供充足的理论及实验依据。方法:筛选后的雌性Wistar大鼠60只,随机分为对照组(C)、模型组(M)、阳性药组(P)、林蛙油低(ORL)、高剂量组(ORH);除对照组外,其余大鼠均腹腔注射环磷酰胺建立卵泡发育障碍大鼠模型;除模型组外,其余大鼠灌胃相应药物,连续灌胃14~16 d后测定大鼠血清性激素含量;摘取卵巢和子宫称量记录,计算器官指数;一侧卵巢与子宫做HE染色计算各级卵泡数量及子宫内膜厚度,另一侧卵巢进行转录组学分析,筛选差异基因,对差异基因进行GO和KEGG富集分析。结果:大鼠卵泡发育障碍模型成功建立。与模型组大鼠相比,林蛙油低、高剂量组大鼠子宫湿重和子宫指数显著升高(P<0.05),孕酮和雌二醇含量显著升高(P<0.05);林蛙油低、高剂量组大鼠窦前卵泡与黄体数量显著升高(P<0.05),子宫内膜厚度显著增加(P<0.01),差异有统计学意义,林蛙油低剂量组大鼠窦状卵泡数量显著升高(P<0.05);转录组结果显示,林蛙油低、高剂量组与模型组之间差异基因分别有738、572个;GO富集分析分别富集到1790、1616个条目;KEGG富集分析主要集中在PI3K/Akt信号通路与B细胞受体信号通路。结论:林蛙油能有效改善环磷酰胺所致卵泡发育障碍大鼠的血清性激素水平、卵巢卵泡发育情况、子宫内膜萎缩等情况,其分子机制可能与PI3K/Akt、B细胞受体等通路及基因有关。

东北林蛙湿窖越冬适宜温度研究

本文探究了湿窖越冬方法中温度对林蛙存活率的影响,共设置2℃、4℃和6℃3个温度梯度。结果表明:各温度处理组的林蛙存活率差异显著,2℃组存活率最高,平均为81.0%。在湿窖中其能否安全越冬的关键因素是温度和环境,湿窖越冬最适宜温度为0.3~2.5℃,同时应保持环境安静。

东北林蛙安全越冬影响因素及管理措施

本文介绍了影响东北林蛙安全越冬的几个因素(环境因素、生理因素),并提出了安全有效越冬管理措施。

东北林蛙蝌蚪期水体消毒防控疾病研究

为降低东北林蛙蝌蚪期疾病的发病率,利用蛙大夫、蛙独清和10%聚维酮碘3种消毒剂在蝌蚪饲养过程中对串水水体消毒,以串水水体不消毒为对照进行对比试验研究。结果表明:3种消毒剂有明显的杀菌预防作用,对照组与其他用药处理组的存活率有显著性差异。

江苏新记录——徂徕林蛙及其谱系地理学研究

2023年8月—2024年3月,在江苏省盱眙县铁山寺国家森林公园(118°27′30.35″E,32°45′14.17″N,海拔106 m)进行两栖爬行动物监测时,在一静水塘边采集到蛙类物种标本7号。结合形态比较和系统发生分析,确认上述标本均为徂徕林蛙Rana culaiensis,为江苏省两栖动物新记录,刷新了本种现有分布东界。结合谱系地理分支推断,徂徕林蛙可能起源于贵州、湖南两省交界的山脉,而后向北扩散跨过长江、淮河,最终抵达环渤海区域的徂徕山。江淮丘陵和淮河中下游水系为本种从大别山区向泰山山脉的扩散提供了重要的桥梁作用。本研究丰富了徂徕林蛙的分布信息,提供了其地理扩散的基本框架,厘定了徂徕林蛙及其近缘种的分布格局,为进一步研究其演化历史提供了基础数据。

人工诱导东北林蛙苏醒适应机制分析

为了探究东北林蛙在人工诱导苏醒过程中适应温度变化的生理机制,包括不同温度、不同器官或组织的冷冻保护剂含量变化及其抗氧化应激相关生理指标在苏醒适应阶段的差异,采用梯度升温方法对冬眠东北林蛙进行人工诱导苏醒,至东北林蛙摄食标记苏醒过程结束。苏醒培养期间取样,未取样林蛙持续培养,取样结束后剩余林蛙常温养殖;采用分光光度法对其肝脏、肌肉内的葡萄糖含量、尿素氮含量、总抗氧化能力进行测定。结果表明,东北林蛙肝脏内上述物质含量与肌肉内各物质的消耗趋势基本一致,但肝脏内各物质含量及其变化幅度远大于肌肉内。冬眠东北林蛙人工诱导苏醒初期葡萄糖、尿素氮含量即冷冻保护剂含量明显降低(P<0.05)、总抗氧化能力明显增强(P<0.05),而苏醒后期,各项含量趋于稳定,无明显变化。这说明肝脏是东北林蛙冬眠过程中对抗低温冷冻环境的主要器官,且冬眠状态的东北林蛙体内会积累冷冻保护剂,随着苏醒过程的进行,温度逐渐上升,机体活动逐渐恢复,葡萄糖被大量消耗,以对抗因缺少能量来源而带来的应激损伤,抗氧化应激能力也随之增强以维持内环境稳定,保证东北林蛙在0℃以下得以生存。

水体环境变化对东北林蛙生长发育影响研究

东北林蛙作为两栖类,幼体的生长发育过程都离不开水。本文对不同投饵量及换水频率下水环境变化对东北林蛙生长发育的影响进行研究,探究建立人工养殖东北林蛙的适宜水环境。经实验分析得出结论:每3天总换水量20%-35%,每天饲料投喂量为蝌蚪总重量的5%-8%;水体中微囊藻数量增幅变化可以直观表现出富营养化程度,为不具备专业检测条件的养殖户换水的增减提供参考。

山东省的长肢林蛙种组物种

前人报道天津和山东有日本林蛙的分布,但也有学者表示怀疑。本文报道采集于山东徂徕山的该类物种。从成体量度和蝌蚪唇齿式来看,与现报道的镇海林蛙和峨眉林蛙有一定差异。该物种体型大小与峨眉林蛙相近似,唇齿式为I:2-2/III.

东北林蛙提早繁育技术

东北林蛙养殖模式多样,包括全人工养殖、半人工养殖和自然散放3种养殖模式,成蛙和幼蛙从5月初开始进食,而变态蛙则从6月初开始进食。因此,变态蛙养殖时间较短,仅有4个月(从6月初至9月末)。为了延长林蛙生长期,虽然可以通过增温设施促进其生长,但养殖成本较高,不如提早繁殖经济实惠。

基于网络药理学探究林蛙油治疗慢性咳嗽的作用机制

目的利用网络药理学研究方法,探讨中药林蛙油中治疗慢性咳嗽的活性成分、作用靶点及相关通路,探究其作用机制。方法利用中国知网分别以林蛙油、哈蟆油、蛤蟆油为检索词进行检索,在已发表的相关研究文献中查找中药林蛙油的主要成分并进行筛选。利用GeneCards数据库、Online Mendelian Inheritance in Man(OMIM)疾病数据库以及Drugbank数据库查找慢性咳嗽的疾病靶点并汇总。利用String网站软件构建蛋白质相互作用网络图。利用Metascape网站对林蛙油的药物靶点进行GO分析以及KEGG通路富集分析,并构建药物-有效化合物-通路-作用靶点网络图,确定中药林蛙油治疗慢性咳嗽的关键靶点。结果林蛙油治疗慢性咳嗽的关键靶点有AKT1、IL6、EGFR等12个,关键通路PI3K-Akt、AGE-RAGE等10条信号通路。结论综合林蛙油对慢性咳嗽的治疗机制研究,利用网络药理学方法推测,林蛙油通过多成分、多靶点治疗慢性咳嗽,并且有多条通路与慢性咳嗽疾病通路相匹配,所以中药林蛙油具有一定慢性咳嗽的治疗作用。

脂多糖诱导黑龙江林蛙炎症损伤中抗氧化机制的研究

为探究在细菌脂多糖(LPS)诱导下,黑龙江林蛙(Rana amurensis)抗氧化酶活性的变化,以及铁蛋白重链亚基基因(Ferritin-H,Fer-H)参与林蛙机体抗氧化反应的作用机制,本研究以1 m L/只LPS溶液(1 mg/mL)腹腔注射黑龙江林蛙,构建LPS诱导的黑龙江林蛙炎症模型,诱导后各时间点(6 h、24 h、48 h、72 h和120 h)采集组织样品,采用HE染色法观察各组织病变,结果显示,LPS诱导下黑龙江林蛙的肝脏、皮肤以及肌肉组织均出现了损伤,LPS诱导的林蛙炎症模型可以用于后续实验。利用相应的活性测定试剂盒对采集LPS诱导后各时间点林蛙各组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)等抗氧化酶活性检测,同时采用荧光定量PCR检测黑龙江林蛙各组织中Fer-H基因转录水平的变化。抗氧化酶活性检测结果显示,和未加LPS的对照组相比,LPS诱导后黑龙江林蛙各组织中SOD、CAT的活性均极显著升高(P<0.01),而GSH活性极显著下降(P<0.01);荧光定量PCR检测结果显示,和对照组相比,在LPS诱导后黑龙江林蛙各组织中的Fer-H基因转录水平均极显著上调(P<0.01)。综上所述,各组织Fer-H基因会通过上调其转录水平参与林蛙的抗氧化应激反应。本研究首次验证了LPS诱导下黑龙江林蛙各组织会出现氧化损伤,并为探究Fer-H基因与两栖类动物抗氧化反应之间的关系奠定了基础。

温度对东北林蛙蝌蚪生长发育和性别比例的影响

为探索适合东北林蛙蝌蚪生长发育和提高雌性比例的饲养水域温度,将产期相近[(2±1)d]的东北林蛙受精卵团进行室内孵化,蝌蚪孵出后进行不通水温分组试验。统计各组蝌蚪体重、后肢长出时间、前肢长出时间、变态率、幼蛙的雌性比例等。研究结果揭示了中低温度区内东北林蛙蝌蚪的生长发育和性别形成的规律,在温度处于(17.5±0.5)℃时,林蛙蝌蚪的死亡率最低,雌蛙比例最高。研究为进一步精细化培育东北林蛙蝌蚪提供了科学依据。

林蛙油对雷公藤所致大鼠卵泡发育障碍的影响

目的:研究林蛙油对卵泡发育障碍模型大鼠卵巢中的卵泡和磷脂酰肌醇受体3-酪氨酸激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/卵蛋白激酶受体B(protein kinase B,Akt)的信号通路的影响。方法:筛选后的雌性WISTAR大鼠40只,随机分为对照组、模型组、阳性药组和林蛙油高、低剂量组;除对照组外其余各组大鼠每日灌胃雷公藤多苷溶液(40 mg/kg),阳性药组大鼠灌胃戊酸雌二醇溶液(0.1 mg/kg)和醋酸甲地孕酮溶液(0.8 mg/kg),林蛙油高、低剂量组大鼠分别灌胃林蛙油溶液(400、200 mg/kg)。第8周测定大鼠血清雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)、促黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)、促卵泡生成素(Follicle-stimulating hormone,FSH)和睾酮(testosterone,T)含量;摘取卵巢和子宫称量记录,计算器官指数;一侧卵巢做HE染色和TUNEL染色计算各级卵泡数量。另外一侧卵巢测定其中PI3K、AKT、人第10号染色体缺失的磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的mRNA相对表达量以及PI3K、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)的蛋白含量。结果:大鼠卵泡发育障碍模型成功建立。与模型组大鼠相比,林蛙油高剂量组大鼠子宫湿重和子宫指数显著升高(P<0.05);林蛙油高、低剂量组大鼠发情周期显著缩短(P<0.05),次级卵泡数量显著升高(P<0.05),卵泡闭锁率显著降低(P<0.05),血清FSH含量显著减少(P<0.05)、T和E2含量显著升高(P<0.05),PI3K蛋白含量显著增多(P<0.05),Akt蛋白磷酸化水平显著提高(P<0.05),PTEN m RNA相对表达量显著减少(P<0.05);林蛙油高剂量组大鼠卵巢中mTOR mRNA相对表达量显著低于模型组大鼠(P<0.05)。结论:林蛙油对雷公藤多苷所致大鼠卵泡发育障碍有明显的改善作用,林蛙油可以上调PI3K/Akt信号通路促进卵泡发育障碍的大鼠卵泡的生长和发育。

林蛙骨肉泥丁的研制

以林蛙为原料 ,经去皮、去头、采肉、磨骨泥、斩拌 (加入林蛙骨泥及其他配料 )、铺盘、蒸汽炊熟、切丁、烘烤后制成风味独特的林蛙骨肉泥丁。对配方进行正交试验设计 ,得出的最佳配方是 :白酱油的用量为 5 % ,果葡糖的用量为 4 % ,林蛙肉∶林蛙骨泥为 80∶2 0。

东北产三种林蛙血细胞的比较研究

应用Wright染色法对桓仁林蛙、东北林蛙和黑龙江林蛙的血细胞进行比较,将所得数据用SPSS软件统计。结果表明:桓仁林蛙、东北林蛙、黑龙江林蛙的血细胞形态、数量上存在差别,这可能与其生活环境和分类地位密切相关。

林蛙产业发展制约因素及对策——以迎春林区为例

东北林蛙和哈什蟆(黑龙江林蛙)是国家二级保护动物,20世纪支援国家建设森林资源过度开发,致林蛙资源锐减,由20世纪80年代的135亿只,减少到目前的20亿只,已经被列入世界濒危物种红皮书。林蛙在保护生态、防治虫害、提供食物链来源、维护生态多样性和平衡性。

中国特有两栖动物研究1.山东半岛林蛙的生活史(英文)

生活史的研究可以为系统发育研究和珍稀濒危物种的保护和管理对策的制定提供参考资料。林蛙是我国分布比较广泛而复杂多样的一个类群,在山东半岛的昆嵛山和崂山,分别分布有昆嵛林蛙(Rana kunyuen-sis)和中国林蛙(R.chensinensis)。本文报道我们从1997年到2006年,对这两种林蛙在山东半岛的地理分布、繁殖习性、蝌蚪特征和生长发育以及冬眠等方面的调查和观察研究结果。结果表明昆嵛林蛙和分布于崂山的中国林蛙尽管在栖息地生境方面比较相似。

徂徕林蛙(Rana culaiensis)在安徽省的分布

2021年4月至11月,笔者在江淮丘陵区和大别山区科考期间,共采集到蛙属物种标本83号.其中,大别山林蛙(Rana dabieshanensis)43号、中国林蛙(R.chensinensis)29号.其余11号标本经形态比较和系统发生分析确定为徂徕林蛙(R.culaiensis).鉴于此前安徽省内并无徂徕林蛙分布的报道,该物种应为安徽省两栖动物分布新纪录.此发现丰富了安徽省的生物多样性,并对进一步了解徂徕林蛙的地理分布格局具有重要意义.