抗枣疯病品种昌云枣的利用

昌云枣是具有高抗枣疯病的优良鲜食干制兼用新品种。2021—2023年枣庄市山亭区果业服务中心应用昌云枣进行了治疗枣疯病的应用试验。结果表明,在长红枣病株上春季插皮接或劈接昌云枣,当年昌云枣新梢多数表现无病症状,少数表现有病症状,随着新梢的生长,枣疯病症状逐渐消失,恢复正常生长发育;嫁接口之下砧树的枣疯病症状也逐渐消失,恢复正常。用昌云枣做中间砧嫁接七月鲜、伏脆蜜枣品种,再在两品种之上贴接枣疯病枝皮,两品种均未表现枣疯病症状。探索出了利用昌云枣治愈枣疯病的方法。简介了昌云枣的栽培技术。

基于MaxEnt模型预测气候变化下枣疯病植原体在中国的潜在适生区

本研究利用MaxEnt模型和ArcGIS软件预测枣疯病植原体在历史和未来气候情景下的潜在地理分布范围,同时运用ROC曲线评价MaxEnt模型的准确性以及利用刀切法对19个环境变量进行重要性分析,研究影响枣疯病植原体分布的关键环境变量及其适生区范围。结果表明,最冷月最低气温bio6、降水的季节变化bio15、最热季节平均气温bio10、等温性bio3、最湿季节降水量bio16以及最干月降水量bio14是影响枣疯病植原体分布的关键环境变量。其中,最冷月最低气温对枣疯病植原体的潜在适生区分布影响最大。建立的MaxEnt模型的AUC平均值为0.941,表明预测结果可靠性高。历史气候条件下,枣疯病植原体的总适生区面积为2.208×10^(6)km^(2),占我国陆地总面积的23%,高适生区主要分布于我国北京市中部、天津市全境、山东省中部、河南省北部、河北省东部和南部、山西省西南部、陕西省东部等省市。在SSP126和SSP585两种未来气候情景下,枣疯病植原体在我国的总适生区面积分别为2.210×10^(6)km^(2)和2.386×10^(6)km^(2);SSP126未来气候情景下与历史气候条件下相差不大,SSP585未来气候情景下与历史气候条件下相比有所增加。

河北省枣树枣疯病发病情况调查与防治技术研究

枣疯病是枣树(Zizyphus jujuba Mill.)的一种毁灭性病害,发病后常常导致树体死亡,对枣产业可持续健康发展造成严重威胁。为了明确河北省枣疯病的发病情况和特点,本研究采用重点调查与田间普查相结合的方法,对河北省枣主要产区的枣树枣疯病发病情况进行调查。本次调查涉及到7个市21个县(市),枣树种植面积占河北省枣树种植总面积的81.60%;9个枣树品种;2种地形,分别是平原区和山区(太行山区、燕山山区)。结果显示,调查的21个县(市)枣树枣疯病发病面积比例平均为2.13%,其中唐县枣树发病最重(发病面积比例最高,为12.32%),黄骅市发病最轻(发病株仅有1株);枣树品种和地形对枣疯病的发生程度影响较大,其中,婆枣发病最重(发病面积比例最高,为4.87%)、冬枣未见发病树体,山区种植的枣树发病程度(发病面积比例为3.64%,发病株率为96.88%)重于平原区种植的枣树(发病面积比例为0.17%,发病株率为3.12%)。为了探索枣疯病的防治方法,我们采用叶面喷施和树干注射2种方式施用小分子诱导剂进行枣疯病树体的治疗康复试验,结果显示,叶面喷施和树干注射小分子诱导剂均对枣疯病树体具有康复效果,树体康复有效率为50%~70%。河北省枣疯病发病情况较为普遍,发病程度与地形和枣树品种有关,小分子诱导剂有望成为治疗枣疯病的较为有效方法。

枣树枣疯病防治措施

枣疯病是危害枣树生长发育和果实品质的重要病害,严重影响枣的产量和经济效益。其病原菌为真菌,通过风媒和雨水传播。针对枣疯病的防治,要坚持“预防为主,综合防治”的原则,综合运用农业防治、物理防治、化学防治和生物防治等多种措施。加强枣园管理,改善通风透光条件,清除病枝落叶,平衡施肥等农业防治措施是基础;刮除病斑、树干涂白、夏季修剪等物理防治措施可有效减轻病害;在早春季和发病初期喷洒化学药剂,可有效控制病情;利用枣疯病的天敌昆虫和拮抗微生物,是生物防治的重要手段。在防治过程中需要加强检疫和科学用药,增强防治意识,建立完善的监测预警体系,加强技术指导与服务。只有多管齐下、协同治理,才能从根本上控制枣疯病的发生与蔓延,提高枣的产量和品质,推动枣产业的可持续发展。

枣疯病发生规律研究

枣疯病[jujube witches’-broom(JWB)]北至辽宁、南到广东都有发生,素有枣树“癌症”之称,感病枣树大幅减产,甚至枯死,严重威胁枣产业持续健康发展。枣疯病是业界研究的热点、难点和焦点,从枣疯病在我国的发生时空分布、感病枣树形态表现、田间寄主、影响因子、病原传播媒介等方面,系统总结了枣疯病发生规律研究进展,以期为枣疯病防治技术、防控对策研究奠定基础。

枣疯病的发生规律及防治

对枣疯病的发生规律、发病症状、影响因素和防治措施进行了综述。从园址、品种选择、清除病株、果园管理、防治媒介昆虫、药剂防治等方面综合介绍了枣疯病的防治方法,以期为枣生产做出指导。

几个枣树品种和婆枣单株对枣疯病抗性的鉴定

通过嫁接病皮和病枝传病的方法,在河北唐县试验地内对壶瓶枣、蛤蟆枣、婆枣、马牙枣、砘子枣、长红枣6个枣树品种和1个酸枣品种,以及从婆枣中选择的4 6个抗性单株的抗病性进行试验研究。经过1 996年以来的多次传病测定结果表明:壶瓶枣和蛤蟆枣无一发病,表现出强的抗病性;长红枣、马牙枣、酸枣、婆枣和砘子枣表现为感病,发病率分别为6 6 6 %、78 6 %、80 0 %、1 0 0 %、1 0 0 %。筛选的4 6个婆枣单株的平均发病率为81 1 %,单株间抗病表现差异明显,有4个单株经过6年6次传病而一直没有发病,说明其对枣疯病有很强的抗性,用DAPI荧光显微镜观察,尤其是PCR技术检测,基本上能在嫁接接种后未发病的抗病单株上检测到植原体的存在,说明其体内已携带了低浓度的植原体,暗示抗病材料对植原体繁殖可能有抑制作用。对酚类物质在2个层析系统进行的薄层层析分析中发现某些抗病材料与感病材料存在不同特异性的荧光斑。在对枝条组织切片自发荧光观察中,在抗病的2个婆枣材料和1个壶瓶枣材料的韧皮部至表皮区域的薄壁细胞内中发现了较多的金黄色亮斑点。

枣疯病和酸枣丛枝病植原体16S rDNA和tuf基因的序列同源性分析

【目的】枣疯病是枣树上由植原体引起的一种毁灭性病害,遍布于中国华北、西北、华东、华南等25个省(市)的枣区,造成了巨大的经济损失。【方法】经PCR扩增,分别对中国陕西的彬县、阎良、武功、佳县、杨凌,河北沧州和山东德州7个枣区的枣疯病样品和杨凌4个酸枣丛枝病样品植原体16SrDNA基因保守序列和延伸因子tuf基因进行克隆和测序。【结果】获得枣疯病和酸枣丛枝病植原体的16SrDNA基因片段均为1239bp,tuf基因均为851bp。通过序列同源性比较,结果表明中国陕西、河北、山东的枣疯病的病原一致,归属于植原体16SrⅤ-B组。由于枣疯病和酸枣丛枝病的植原体16SrDNA有5个碱基的差异,tuf基因的同源性为99.6%,推测为同一个种的不同寄主生物学型。【结论】首次报道了中国枣疯病和酸枣丛枝病植原体16SrDNA和延伸因子tuf基因的序列,确定了枣疯病和酸枣丛枝病植原体的分类地位,为研究枣疯病植原体的致病分子机理、遗传本质提供理论依据。

枣疯病病树中内源激素的变化研究

【目的】揭示枣疯植原体对枣树内源激素的影响,弄清枣疯病病树中内源激素的变化趋势。【方法】应用HPLC法分别对健株、病株和盐酸土霉素治疗后转健植株中的细胞分裂素(玉米素,Zeatin)、生长素(吲哚乙酸,IAA)、赤霉素(GA3)和脱落酸(ABA)的含量进亚周年检测。【结果】在根部,健株、治疗株和病株中IAA、GA3和ABA的含量没有明显区别,但在7、8月份病株根部中Zeatin的含量要明显高于健株;在叶部,健株、治疗株和病株中的IAA、GA3和ABA的含量也没有明显区别,但在生长后期病株叶片中Zeatin含量显著高于健株。不同患病程度叶片中激素的比较结果表明,患病程度越重,Zeatin/IAA(C/A)比值越高。【结论】植原体侵染枣树植株后致使其内源激素失衡,主要是细胞分裂素含量的增加,最终导致了枣疯病症状表现。

极抗枣疯病枣新品种‘星光’

‘星光’是从骏枣变异单株中系统选育出的高抗枣疯病新品种。在太行山枣疯病重发区,将其高接到病树上能正常生长结果。‘星光’果实大(22·9g),制干率高(56·4%),既可直接作为抗病品种进行栽培,也可用于染病植株和感病品种的高接改造。

荧光显微技术在枣疯病病原鉴定中的应用

以易感染枣疯病的阜平大枣为试材，对影响枣疯病病原荧光显微观察的主要因素进行了系统研究。结果表明：苯胺蓝（ａｎｉｌｉｎｅ ｂｌｕｅ）、 ＤＡＰＩ（４’，６－ｄｉａｍｉｄｉｎｏ－２－ｐｈｅｎｙｌｉｎｄｏｌｅ· ２ＨＣｓｄ１）和阿的平（ｑｕｉｎａｃｒｉｎｅ）３种荧光染料均可用于枣疯病病原鉴定，其中以 ＤＡＰＩ效果最佳。 ＤＡＰＩ用于定性分析的最适浓度为 ０．３μｇ·ｍＬ－１，用于定量分析的最适浓度为１．０μｇ·ｍＬ－１；对于尚未木质化或木质化程度很低的幼嫩组织切片应至少染色２０ｍｉｎ，对于高度木质化程度的组织切片应至少染色５０ｍｉｎ；带病原试材在４℃冰箱保存２０～３０ｄ，在５％戊二醛中固定４５～６０ｄ对观察结果无明显影响。以ＤＡＰＩ为染料对枣头、枣吊、叶柄、叶主脉、花梗、枝、树干皮、枣股、托叶刺、根、幼果以及接近成熟果实的组织切片进行了荧光显微观察，初步选定枝条作为最佳取材部位。

骏枣茎尖培养脱除枣疯病MLO

1 目的与材料方法 枣树(Zizyphus jujube Mill)原产我国,分布广,适应性强。骏枣是枣中名品,果硕大,肉厚味醇,可干鲜兼用。但近年枣疯病(MLO)的蔓延,严重地影响了骏枣的发展和市场供应。目前对于枣疯病的防治仍延用刨除病树、土壤消毒等常规方法,而彻底脱除MLO则是治疗枣疯病的一种积极方法。在这方面,国内已有一些研究,但尚未广泛应用于生产。我们采用骏枣茎尖分生组织及二次茎尖分生组织培养相结合的办法研究了枣疯病的脱除效果。

枣WRKY转录因子的鉴定及其对枣疯病植原体和激素处理的应答

【目的】分析枣WRKY转录因子对枣疯病植原体以及不同激素的响应,探讨WRKY基因在枣疯病发病过程中的作用,为进一步研究枣WRKY转录因子的生物学功能及枣与植原体相互作用机制奠定基础。【方法】利用同源比对从NCBI数据库以及转录组数据库鉴定出枣假定WRKY转录因子,并利用SMART等对其进行生物信息学分析;从转录组分析中挑选出差异表达的6个基因,设计定量引物,验证其在灰枣枣疯病发病过程中的表达量变化情况;以‘蜂蜜罐’枣胚培苗为材料,外源施加0.1 mmol·L^(-1)水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)后,利用实时荧光定量PCR(q PCR)技术分析枣WRKY基因的表达量变化情况。【结果】确定了69个枣假定WRKY转录因子,重新命名为ZjWRKY1-69,可分为3个组GroupⅠ、GroupⅡ和GroupⅢ,GroupⅠ含有17个成员,GroupⅡ又可细分为Ⅱa、b、c、d、e 5个亚组,分别包含3、11、15、3、9个成员,GroupⅢ有11个成员;69个枣WRKY转录因子基因中,有43个ZjWRKY基因可以定位到11条染色体上,但在染色体上呈不均匀分布,7号染色体上没有ZjWRKY基因存在;大部分ZjWRKY蛋白都包含有WRKYGQK保守序列,有2个ZjWRKY蛋白(ZjWRKY23和ZjWRKY46,GroupⅡc)变异为WRKYGKK;GroupⅠ中的WRKY转录因子含有较多的保守基序(10个),且同一个组内WRKY蛋白的保守基序类型及个数相似。从枣疯病发生过程中枣叶片的转录组数据中检测到28个ZjWRKY转录因子基因的差异表达主要集中在嫁接后38~52周。枣疯病发病过程中ZjWRKY8、ZjWRKY52、ZjWRKY61、ZjWRKY69基因表达量发生明显变化(上调)。SA处理后,ZjWRKY42和ZjWRKY52表达量显著升高;MeJA的积累诱导ZjWRKY42和ZjWRKY61的表达量发生较明显变化。【结论】初步确定了枣69个WRKY转录因子,分为3组;43个枣WRKY基因可以定位到11条染色体上,呈不均匀分布,7号染色体上尚没有发现WRKY基因的存在。枣疯病植原体侵染枣树后,诱导了ZjWRKY5、ZjWRKY8、ZjWRKY42、ZjWRKY52、ZjWRKY61基因的表达,SA和MeJA处理后分别使ZjWRKY42、ZjWRKY52和ZjWRKY42、ZjWRKY61表达量显著升高。

多重PCR法区分枣园两种菱纹叶蝉及检测其体内枣疯病植原体

【目的】目前发现,北京枣园中的凹缘菱纹叶蝉Hishimonus sellatus(Uhler)和片突菱纹叶蝉Hishimonus lamellatus Cai混同发生。已知凹缘菱纹叶蝉可以传播枣疯病,而片突菱纹叶蝉是否携带枣疯病植原体尚待证明。正确鉴别区分枣园中菱纹叶蝉的种类并测定其体内感染枣疯病植原体情况有助于阐明田间枣疯病的流行规律,从而提出有效的预防枣疯病及其媒介昆虫措施显得十分重要。传统形态学鉴定两种菱纹叶蝉种类的方法局限于雄性成虫外生殖器,本研究目的在于建立一种快速的分子生物学方法,在区分枣园中两种枣菱纹叶蝉的同时,可检测虫体内的枣疯病植原体。【方法】以凹缘菱纹叶蝉和片突菱纹叶蝉的COI基因以及枣疯病植原体的16S r DNA为扩增目标,分别设计引物,建立一种包含3对引物的多重PCR体系。测试该多重PCR体系对叶蝉总DNA的灵敏度、准确性,以及当两种叶蝉DNA同时存在时的辨别能力和对枣疯病植原体16S r DNA的灵敏度。【结果】该多重PCR可以准确区分凹缘菱纹叶蝉和片突菱纹叶蝉,并对虫体内枣疯病植原体实现检测,其对昆虫总DNA的灵敏度达到0.012 ng,对枣疯病植原体16S r DNA模板的灵敏度达到900拷贝。【结论】该方法极大方便了对枣菱纹叶蝉的田间种群发生动态及虫体中枣疯病植原体感染的监测。

抗枣疯病种质资源的筛选与应用

枣疯病是一种毁灭性的植原体病害。在全国范围内收集待鉴定抗枣疯病种质29份,采用在重病大树上高接待鉴定种质的高强度筛选方法,经过8年多的筛选和验证,从中筛选出4份抗性强且稳定的高抗单系,即骏枣单系、南京木枣单系、称砣枣单系、清徐圆枣单系。将骏枣高抗单系用于高接改造病树,已连续5年正常生长结果,未再次感染枣疯病。这些抗病单系既可直接作为抗病品种进行栽培,也可用于染病植株和感病品种的高接改造。

离体条件下进行治疗枣疯病药物筛选的可行性研究

以婆枣带枣疯病组培苗为试材,在培养基中添加不同浓度及不同次数的盐酸-四环素(TETRACYCLINE,TC)和盐酸-土霉素(OXYTETRACYCLINE,OX)药物,培养40 D后,观察其对病苗生长情况的影响,并对转健苗进行植原体特异PCR检测,结果表明,25ΜG/ML的药物浓度处理一次可使枣疯病症状消失,并完全杀灭枣疯病病原,达到理想效果;同时本研究中田间和组培条件下相同药物治疗效果的一致性进一步说明了利用组织培养技术进行药物筛选的可行性。

骏枣不同株系间的枣疯病抗性多样性

【目的】揭示骏枣品种内枣疯病抗性多样性,筛选高抗枣疯病的骏枣株系。【方法】以骏枣的16个株系为试材,通过田间调查和PCR检测,研究不同株系在嫁接侵染枣疯病后的症状表现和病原侵染情况;利用"合成-合理满意度"和多维价值理论的合并原则,对不同株系果实的相对含水率、单果重、可食率、果形指数、Vc含量、可溶性糖和可滴定酸含量等性状指标进行综合评价;采用AFLP技术对不同株系进行基因组遗传多样性分析。【结果】不同株系对枣疯病抗性表现出显著差异,可分为感病型、延迟感病型、延迟抗病型和抗病型4种类型,T15、J2、J5、J8这4个骏枣株系高抗枣疯病,其中,T15、J5和J8的果实综合性状在骏枣株系中亦居于较高水平;进一步的AFLP分析发现,不同抗性类型间在基因组水平上存在一定差异。【结论】筛选出了4个抗枣疯病骏枣株系,其中3个株系果实综合品质良好。

枣疯病植原体新疆分离物16S rDNA基因克隆与序列分析

利用植原体16SrDNA基因保守序列通用引物对新疆阿克苏地区和喀什地区的疑似枣疯病植株总DNA进行常规PCR和巢式PCR检测,分别扩增出1.5kb和1.2kb的特异性片段。对片段进行克隆、序列测定分析及系统发育树构建,结果表明,新疆枣疯病阿克苏分离物和喀什分离物的16SrDNA基因序列同源性极高,达到100%,与16SrⅤ组植原体的同源性达到98.4%以上,并且与16SrⅤ-B亚组中的枣疯病山东莱芜株系、山东龙口株系同源性最高,达到99.5%,因此归属于榆树黄化组16SrⅤ-B亚组。首次报道新疆枣疯病植原体16SrDNA的序列,确定新疆枣疯病植原体的分类地位,为枣疯病的早期诊断和检测提供依据。

枣疯病和泡桐丛枝病原植原体分离物的组织培养保藏和嫁接传染研究

分别从河北唐县赞皇大枣、辽宁凌源梨枣和河南濮阳扁核酸3个品种的枣疯病和来自山东、江西和北京的不同无性系的泡桐丛枝病树上采集丛枝枝条作为组织培养材料,获得的枣疯病和泡桐丛枝病组培苗皆表现典型的丛枝症状。其中感染植原体的赞皇大枣组培苗(Ft)和扁核酸组培苗(HPD)在未加任何激素的MS培养基和其它培养基交替继代培养1a以上仍能维持丛枝苗生长;而发病梨枣(LD)除产生丛枝外,还出现叶片黄化和植株矮化、枯梢等衰退症状。泡桐丛枝病植原体可在不同无性系组培苗上通过各种培养基交替和单纯的MS培养基继代培养,并已在实验室内连续保藏达10a,其引致丛枝症状的能力无明显的改变。用枣树Ft染病材料作接穗,以健康冬枣(DJ)和抗病婆枣(W14)砧木进行组培苗间嫁接传病试验,可使部分DJ和W14发病;而嫁接未发病的砧木多数像健苗一样正常生长。用感染山东泡桐丛枝病植原体ZD株系丛枝组培苗为接穗,嫁接健康泡桐无性系组培苗致使无性系MB33、TY2T和C125发病。用植原体16SrDNA通用引物进行PCR,确证了泡桐和枣树发病苗和嫁接发病组培苗体内存在植原体。用DAPI荧光显微镜技术比较组培苗韧皮部筛管中的植原体浓度,结果显示,Ft和嫁接发病冬枣(DJ Ft)筛管中植原体浓度相对较高,但仍低于各泡桐无性系染病丛枝组培苗;

枣疯病发病因子和防治技术研究

枣疯病病情与距侧柏林远近、间作物种类、树龄大小及品种等有关。距侧柏林近发病重,发病率达52.2%～90.6%;与小麦、玉米间作发病较重,为14.4%;与花生、红薯、芝麻间作发病轻,为3.6%;树龄小的(20a生以内)发病重,为42.9%,树龄大的(100a生)发病轻,为5.7%;品种之间抗病性和酶活性有显著差异,灰枣、扁核酸为感病品种,发病率为71.0%和70.0%,灵宝枣和九月青抗病,发病率为0.6%和4%,鸡心枣、广洋枣介于中间。田间防治试验证明,用“去丛灵”钻孔施药带和曲颈瓶施药法疗效显著,治愈率12.5%～25%,总有效率为50%～56.3%。采取综合措施和伐除重病株,可预防该病害的扩展蔓延。