桔梗总皂苷对痛风性关节炎小鼠的影响机制研究

研究桔梗总皂苷对痛风性关节炎小鼠的影响及基于NLRP3/ASC/caspase-1途径的抗炎作用。将小鼠分为空白组、模型组、秋水仙碱(1 mg/kg)组和桔梗皂苷(25、50、100 mg/kg)组,连续灌胃7 d。在第5 d灌胃1 h后,将小鼠麻醉,踝关节处消毒后将MSU注射到关节中。通过测量关节肿胀程度和检测炎症因子、过氧化物因子和相关蛋白的表达水平,阐明桔梗总皂苷治疗痛风性关节炎的抗炎作用。结果表明,桔梗总皂苷能有效减轻肿胀,降低炎症因子和过氧化物水平。桔梗总皂苷能够改变炎症区域的细胞形态,踝关节处的NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β的蛋白质水平也显著降低。因此桔梗总皂苷能有效缓解MSU引起的痛风性关节炎,其机制与NLRP3/ASC/caspase-1途径上的蛋白减少有关。

大孔吸附树脂柱色谱法分离桔梗总皂苷

为研究桔梗总皂苷的提取分离工艺 ,采用ZTC - 1大孔吸附树脂 ,利用水和 2 0 %、30 %、40 %、5 0 %、95 %的乙醇溶液洗脱提纯桔梗总皂苷 ,结果平均得率为 2 0 5 %。该法操作简单 ,得率高 ,成本低 ,为桔梗总皂苷的工业化生产提供了依据。

桔梗总皂苷体外抗肺炎支原体作用实验研究

目的:通过桔梗总皂苷对肺炎支原体(MP)的MIC、MBC及TIME-KILL曲线测定,观察其在体外对MP生长抑制及杀灭作用。方法:采用微量倍比稀释法测定MIC和MBC,利用定量PCR检测不同孵育时间,不同浓度药物对MP繁殖速度的影响。结果:桔梗总皂苷体外抗MP的MIC为16～64μg.mL-1;MBC为64～128μg.mL-1;桔梗总皂苷浓度为32到64μg.mL-1时,可以降低MP生长速度并呈现一定的量效关系,当浓度达到128μg.mL-1时可完全抑制MP在培养液中的生长繁殖。结果:桔梗总皂苷在体外具抑制MP生长繁殖作用。

桔梗总皂苷对2型糖尿病肝病大鼠糖脂代谢影响的研究

目的观察桔梗总皂苷对2型糖尿病肝病大鼠糖脂代谢的影响。方法采用高脂高糖饮食加链脲佐菌素尾静脉一次性注射法来制造2型糖尿病肝病大鼠模型,然后给予不同剂量的桔梗总皂苷来观察血糖、血脂、肝功及BMP-9mRNA等指标的变化。结果与模型对照组相比,桔梗总皂苷高剂量组的空腹血糖(FBG)水平显著降低(P<0.01),且已达正常标准,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)水平显著降低(P<0.01),高密度脂蛋白(HDL)水平显著增高(P<0.01);桔梗总皂苷中剂量组的TG、TC水平明显降低(P<0.05)。与模型对照组相比,桔梗总皂苷高剂量组的谷丙转氨酶(ALT)明显降低(P<0.05),谷草转氨酶(AST)水平显著降低(P<0.01),肝组织中骨形态发生蛋白-9(BMP-9)mRNA的表达显著增加(P<0.01);桔梗总皂苷中剂量组的BMP-9 mRNA的表达明显增加(P<0.05)。结论桔梗总皂苷能明显降低2型糖尿病肝病大鼠的血糖、改善血脂代谢紊乱、保护肝功能,上调BMP-9 mRNA的表达,从而减轻2型糖尿病肝病大鼠肝脏的损伤,随剂量增长而增强。

桔梗总皂苷对2型糖尿病大鼠肝脏并发症的治疗作用

目的观察桔梗总皂苷对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏并发症的治疗作用。方法采用高脂高糖饮食加链脲佐菌素诱发、建立T2DM肝脏并发症模型,通过桔梗总皂苷干预治疗,观察血糖、肝功、肝脏指数及TGF-β1、Smad-4 mRNA等指标的变化。结果①桔梗总皂苷治疗组与模型对照组比较,能明显降低T2DM大鼠空腹血糖、谷草转氨酶、肝脏指数和TGF-β1mRNA的表达(P<0.01);明显降低谷丙转氨酶和Smad-4 mR-NA的表达(P<0.05)。②TGF-β1与Smad-4 mRNA表达呈显著正相关(r=0.981,P<0.01)。结论①桔梗总皂苷对糖尿病肝脏并发症具有一定的治疗作用,可有效降低T2DM肝病模型大鼠的空腹血糖、谷草转氨酶、谷丙转氨酶及肝脏指数。②桔梗总皂苷能下调TGF-β1、Smad-4 mRNA的表达,从而改善肝脏功能。

桔梗总皂苷与桔梗总次皂苷祛痰作用的比较

采用小鼠酚红祛痰法比较了桔梗总皂苷及桔梗总次皂苷的祛痰作用。试验结果表明:桔梗总皂苷及黑曲霉转化的桔梗总次皂苷均能增加小鼠呼吸道酚红排泌量(P<0.05)。桔梗总皂苷及桔梗总次皂苷的高、中剂量组有较强的祛痰作用。

不同栽培年限川桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的含量比较

目的:建立测定川桔梗中桔梗总皂苷及桔梗皂苷D含量的方法,探索不同栽培年限川桔梗药材中2种指标成分的差异。方法:采用紫外-可见分光光度法测定川桔梗中桔梗总皂苷的含量;采用高效液相色谱法测定川桔梗中桔梗皂苷D的含量;比较一年生、两年生及三年生各10份川桔梗药材中桔梗总皂苷及桔梗皂苷D的含量。结果:一年生、二年生、三年生川桔梗药材中桔梗总皂苷含量的平均值分别为2.47%、3.01%、2.47%;桔梗皂苷D含量的平均值分别为0.23%、0.27%、0.33%;即一年生的样品中2种指标的含量均较低,二年生样品的桔梗总皂苷含量最高,三年生样品桔梗皂苷D的含量最高。结论:不同栽培年限的川桔梗药材的指标性成分含量具有一定差异,但二者间并未呈现相关性,建议选用栽培年限为二年生或三年生的药材。

比色法测定桔梗中桔梗总皂苷的含量

目的建立桔梗中桔梗总皂苷的含量测定方法。方法以香草醛．高氯酸为显色剂，桔梗皂苷D为对照品，采用比色法测定。结果比色法测定的线性范围为0．096～0．672mg，相关系数为0．99997，平均加样回收率为96．8％（RSD=3．87％，n=9）。结论本法测定准确，重复性好，可用于桔梗药材中桔梗总皂苷的含量测定。

桔梗总皂苷对大鼠高脂血症的影响

采用饲喂高脂饲料建立大鼠高脂血症模型 ,研究桔梗总皂苷对高脂血症的作用。结果显示 ,桔梗总皂苷具降血脂的作用 ,不同剂量的桔梗总皂苷对大鼠高血脂的降低作用差异较为显著 :大剂量 (2 0 0 mg/ kg· d)可以显著性地降低高脂血症大鼠的 TC、L DL - C、HDL - C,其作用程度超过阳性药物组 (绞股蓝 ) ;小剂量组和中剂量组仅对血脂的部分指标有影响。提示适当剂量的桔梗总皂苷对大鼠高脂血症具明显疗效。

超临界CO_2萃取桔梗总皂苷的工艺研究

采用正交试验优化桔梗总皂苷的超临界CO2萃取工艺,探讨了表面活性剂对萃取的影响。所得优化工艺为萃取温度40℃、萃取压力35MPa、萃取时间2h,夹带剂为95%乙醇,与药材投料量比例为1:1(v/w)。在95%乙醇中加入表面活性剂吐温-80或司盘-80可提高桔梗总皂苷的得率。

桔梗总皂苷对胶原性关节炎大鼠的抗炎作用及对TLR/MyD88/NF-κB通路的影响

目的:探讨桔梗总皂苷对胶原性关节炎大鼠的抗炎作用及对Toll样受体4/髓样分子因子88/核因子-κB(TLR/MyD88/NF-κB)通路的影响,阐明桔梗总皂苷对类风湿性关节炎(RA)的治疗机制。方法:将70只大鼠根据随机数字法分为对照组、模型组、桔梗总皂苷(CKS)低剂量组、CKS高剂量组、雷公藤多苷组,每组14只。采用Ⅱ型胶原建立胶原性关节炎大鼠模型。CKS低剂量组和高剂量组大鼠分别给予CKS 100 mg/kg和200 mg/kg灌胃,雷公藤多苷组大鼠给予雷公藤多苷12 mg/kg灌胃作为阳性对照组。记录给药28 d后关节炎指数。HE染色观察踝关节滑膜组织病理学变化。ELISA法测定滑膜组织IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。Western blot测定滑膜组织TLR2、TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白水平。免疫组化法测定滑膜组织NF-κB蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠踝关节滑膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),滑膜组织TLR2、TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白水平升高(P<0.05),滑膜组织NF-κB蛋白IOD值升高(P<0.05);与模型组比较,CKS各剂量组大鼠关节炎指数降低(P<0.05),踝关节滑膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),TLR2、TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白水平降低,NF-κB蛋白IOD值降低(P<0.05)。HE染色:对照组大鼠踝关节未见异常;模型组大鼠踝关节出现增生性滑膜炎表现,CKS各剂量组大鼠踝关节增生性滑膜炎表现明显减轻。CKS对各指标的影响呈剂量依赖性。结论:桔梗总皂苷可抑制胶原性关节炎滑膜组织炎症反应及TLR/MyD88/NF-κB信号通路,发挥对胶原性关节炎的防治作用。

桔梗总皂苷抗大鼠肺纤维化作用的机制

目的探讨桔梗总皂苷对肺纤维化大鼠的治疗作用及可能机制。方法 50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组及高、中、低剂量桔梗总皂苷给药组,每组10只;采用气管内注入博莱霉素法建立肺纤维化大鼠模型;高、中、低剂量给药组分别灌胃给予400、200、100 mg/kg的桔梗总皂苷,1次/d,模型组及正常对照组灌胃给予等体积的生理盐水;28 d后处死动物,取肺组织,评价桔梗总皂苷对肺组织纤维化程度、肺组织羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)水平的影响。结果模型组大鼠肺组织肺纤维化程度明显,Hyp、MDA含量升高,SOD、GSH-Px含量降低,与正常对照组比较差异显著(P<0.05);而与模型组比较,桔梗总皂苷各给药组肺纤维化程度、肺组织Hyp、MDA水平显著降低,肺组织SOD、GSH-Px水平显著升高(P<0.05)。结论桔梗总皂苷对大鼠的肺纤维化具有一定的治疗作用,该作用可能与其降低胶原合成及抗氧化作用有关。

桔梗总皂苷对2型糖尿病肝病大鼠的干预作用

目的研究桔梗总皂苷是否能改善2型糖尿病肝病肝组织的病理改变。方法采用脲尿佐菌素尾静脉注射加高脂高糖饮食法建立2型糖尿病肝病大鼠模型,然后通过给予桔梗总皂苷水溶液灌胃来观察其对血糖、血脂、肝功及肝组织病理变化等指标的影响,同时采用罗格列酮作为阳性药物对照。结果 (1)与模型组大鼠相比,桔梗总皂苷组大鼠的空腹血糖含量显著降低(P<0.01),且已达正常标准,TG、TC、LDL含量显著降低(P<0.01),HDL含量显著增高(P<0.01)。(2)与模型组大鼠相比,桔梗总皂苷组大鼠的GPT及GOT含量显著降低(P<0.01)。(3)与模型组大鼠相比,桔梗总皂苷组大鼠的肝组织病理改变明显减轻。结论桔梗总皂苷能明显改善2型糖尿病肝病大鼠的血糖、血脂代谢紊乱和保护肝功能。桔梗总皂苷能明显减轻糖尿病大鼠的肝脏组织的病理改变。

桔梗总皂苷提取工艺优化

目的采用正交设计与星点设计-效应面法两种实验设计方法,优选桔梗的最佳提取工艺。方法以桔梗总皂苷含量和干膏得率为因变量,乙醇浓度、回流时间、提取次数、溶剂倍量为自变量,优选提取工艺。结果正交实验设计确定最佳工艺是6倍量70%乙醇回流提取两次,每次180 min;星点设计-效应面优化法确定最佳提取工艺是10倍量70%乙醇回流提取两次,每次140 min。结论星点设计-效应面法在桔梗提取工艺研究中优于正交实验设计法,为其应用于中药提取工艺优化的可行性提供依据。

桔梗总皂苷对人肺腺癌细胞系A549移植裸鼠瘤生长和STAT2的影响

目的探讨桔梗总皂苷体内抑制人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤生长及其对肿瘤细胞信号传导与转录激活因子2(signal transducer and activatorot transcription2,STAT2)的影响。方法将荷人A549移植瘤BALB/c裸小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、桔梗总皂苷组1(5 mg/kg·d)、桔梗总皂苷组2(10 mg/kg·d)、桔梗总皂苷组3(20 mg/kg·d)、桔梗总皂苷组4(25 mg/kg·d),分别治疗观察30 d,测量瘤体积与质量,并用HE染色观察各组移植瘤组织的病理形态结构,用免疫组化法检测瘤体细胞STAT2蛋白的表达。结果模型组与桔梗总皂苷各组对人肺癌细胞系A549移植瘤抑制作用比较,差异均有统计学意义(P<0.05);桔梗总皂苷对移植瘤体积与抑瘤率均显示出较好作用,桔梗总皂苷组4移植瘤的体积明显小于模型组、桔梗总皂苷其它各组,差异均有统计学意义(P<0.05);桔梗总皂苷各组移植瘤体积大于环磷酰胺组,差异有统计学意义(P<0.05);桔梗总皂苷各组STAT2表达由强到弱随浓度的增加而减弱,成剂量依赖关系,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论桔梗总皂苷对A549肺移植瘤组织生长有较好抑制作用,可能通过下调移植瘤组织STAT2蛋白表达来抑制瘤组织的生长。

桔梗咸菜腌制过程中桔梗总皂苷的动态变化

目的:通过比较不同NaCl浓度、不同腌制时间对桔梗中有效成分——桔梗总皂苷含量变化的影响,确定最佳NaCl浓度和腌制时间,为桔梗的科学腌制提供理论依据。方法:对采用不同Nacl浓度、不同腌制时间处理的桔梗,采用《中国药典》2005年版一部中的方法,测定桔梗中有效成分桔梗总皂苷的含量。结果:桔梗中活性成分随Nacl溶液浓度及腌制时间的变化,其有效成分的含量呈现递减的趋势;口感随Nacl溶液浓度及液腌制时间的变化而变化。结论:经20%Nacl溶液腌制7d后,桔梗咸菜在口感和有效成分含量方面,达到最佳。

不同栽培年限及产地加工方法对川桔梗中桔梗总皂苷含量的影响

目的:建立川桔梗中桔梗总皂苷的提取方法,研究不同栽培年限及产地加工方法对川桔梗中桔梗总皂苷的影响。方法:采用紫外-可见光分光光度法测定川桔梗中桔梗总皂苷的含量。结果:通过对33批川桔梗样品中桔梗总皂苷含量进行分析,比较不同栽培年限及产地加工方法的川桔梗中桔梗总皂苷含量得出:生长年限一年和三年的样品中桔梗总皂苷含量差异不大,二年生样品桔梗总皂苷含量最高。未去皮样品中桔梗总皂苷含量明显高于去皮样品。结论:该方法简单快捷,适合于川桔梗中桔梗总皂苷的含量测定,为今后川桔梗药材的栽培年限及产地加工方法合理标准的制定提供科学、可靠的依据。

桔梗总皂苷对2型糖尿病大鼠肝脏SREBP1c和ACCα表达的影响

目的探讨桔梗总皂苷对2型糖尿病大鼠的治疗作用。方法 100只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NCG),模型对照组(MCG),以及桔梗总皂苷低、中和高剂量治疗组(PLG,PMG和PHG),每组20只。造模成功后,PLG,PMG和PHG组给予桔梗总皂苷100,200和400mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,NCG和MCG组给生理盐水灌胃,治疗4周和8周后处死大鼠各半,免疫组和Western Blot检测肝脏SREBP1c和ACCα的表达。结果 MCG组较NCG组TG和FFA明显升高(P<0.05),治疗4周后明显降低(P<0.05),治疗8周后进一步降低;免疫组化和Western Blot可见MCG组SREBP1c和ACCα表达明显升高(P<0.05),治疗4周后没有改善,治疗8周后明显降低(P<0.05)。结论桔梗总皂苷对2型糖尿病大鼠TG和FFA有明显的改善作用,这可能与其可以降低肝脏中SREBP1c和ACCα的表达有关。