HPLC-DAD法同时测定芪防败毒合剂中绿原酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量

目的建立高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法同时测定芪防败毒合剂中绿原酸(CA)和毛蕊异黄酮葡萄糖苷(CG)含量,为其质量控制提供参考。方法采用Agilent 5 TC-C18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5µm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量5µL,CA、CG检测波长分别为326、260 nm。结果CA和CG的线性范围分别为9.34~186.20µg/mL、0.56~11.20µg/mL,相关系数r分别为0.9997、0.9997;平均加样回收率分别为107.63%、103.17%,RSD分别为2.91%、2.86%。重复性、进样精密度、仪器精密度、中间精密度、稳定性试验的RSD均<3.93%。结论HPLC-DAD法快速、准确,可同时测定芪防败毒合剂中绿原酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,适用于芪防败毒合剂的质量控制。

超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、甘草酸铵的含量

建立了一种超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷和甘草酸铵含量的方法。采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱质谱,Hypersil Gold C_(18)型色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温40℃,进样量1μL;采用电喷雾离子源,正离子模式下,在质荷比100~1500范围内全扫描,通过提取待测成分的精确质量数进行定量。结果表明,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、甘草酸铵线性范围分别为0.0891~1.4250μg/mL、0.0984~12.6000μg/mL、7.4250~29.7000μg/mL(r≥0.9993),检测限分别为5.57、4.10、5.80 ng/mL,定量限分别为22.26、12.30、23.20 ng/mL,精密度、重复性及样品稳定性(24 h)良好,加样回收率91%~105%(δ_(RSD)≤5.0%,n=6)。本方法简便快捷、特异性强、灵敏度高,可同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、甘草酸铵的含量。

不同来源黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的定量分析

目的:建立黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法,并对不同来源的药材进行分析,为黄芪质量标准的制定提供依据。方法:采用HPLC-DAD法建立黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法,通过对来源于我国8个省59批黄芪药材的分析,阐明产地、生长方式、生长年限等对黄芪中异黄酮类成分的影响。结果:不同产地、生长方式及生长年限的黄芪药材,其毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量差异较大。从产地分析,以山西、内蒙古和陕西等道地产地含量较高;从生长方式分析,以半野生含量较高;从生长年限分析,年限越短,含量越高。结论:本研究建立的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法简便、准确、重现性好,可用于黄芪药材中异黄酮类成分的质量控制。

采用体外肠道菌群实验研究防风对黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷代谢的影响

目的研究防风对黄芪中主要活性成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷在大鼠肠道菌群中代谢的影响,从代谢的角度探讨黄芪-防风药对配伍应用的科学内涵。方法通过肠道菌群实验比较不同时间点黄芪组和黄芪-防风组以及毛蕊异黄酮葡萄糖苷单体组和毛蕊异黄酮葡萄糖苷-防风组中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮的浓度。结果与黄芪组相比,不同时间点黄芪-防风组毛蕊异黄酮葡萄糖苷的浓度均增高,毛蕊异黄酮的浓度均降低。与毛蕊异黄酮葡萄糖组相比,不同时间点毛蕊异黄酮葡萄糖苷-防风组毛蕊异黄酮葡萄糖苷的浓度均增高,毛蕊异黄酮的浓度均降低。结论防风能抑制黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷转化为毛蕊异黄酮的水解反应,减缓其代谢。

HPLC法同时测定参芪五味子片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、五味子酯甲和五味子甲素的含量

目的：建立HPLC法测定参芪五味子片中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、五味子酯甲和五味子甲素含量的方法。方法：采用色谱柱：Agilent ZORBAX SBC18（250 mm×4.6 mm,5μm）;以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;流速：1.0 m L·min-1;检测波长：267 nm;柱温：28℃。结果：毛蕊异黄酮葡萄糖苷的进样量在0.11～2.75μg范围内（r=0.999 1）、五味子酯甲的进样量在1.05～26.25μg范围内（r=0.999 5）、五味子甲素的进样量在1.06～26.50μg范围内（r=0.999 4）线性关系良好,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、五味子酯甲和五味子甲素的平均回收率分别为99.79%（RSD=1.43%,n=6）、99.37%（RSD=1.59%,n=6）和100.40%（RSD=2.11%,n=6）。结论：本方法简便快捷,重现性好,结果准确,适用于参芪五味子片的含量测定。

HPLC法测定含黄芪中药制剂中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量

目的:建立一种测定含黄芪中药制剂中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法。方法:以我院中药制剂养肝益水颗粒为模型药物,参照2015年版《中国药典》(一部)(简称"药典")中"黄芪"项下毛蕊异黄酮葡萄糖苷高效液相色谱(HPLC)含量测定方法,采用药典色谱条件并在此基础上,通过增加流动相甲酸比例、延长流动相大极性段洗脱时间等方法进行优化改进,建立含黄芪中药制剂中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定方法,并进行方法学考察。然后用另外2种含黄芪的中药制剂对该法进行初步验证。结果:在药典色谱条件下,模型药物中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷色谱峰不能与基线分离;优化后,得到流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液(14∶86,V/V),检测波长为260 nm,柱温为30℃,流速为1.0 m L/min的色谱条件。优化条件下毛蕊异黄酮葡萄糖苷质量浓度线性范围为5.08~81.28μg/m L;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<2.0%(n=6);平均加样回收率为100.22%(RSD=0.95%,n=6)。经该法测定的5批模型药物中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的平均含量为0.014 2%。经验证,该法也可有效分离另外2种含黄芪中药制剂中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷。结论:成功建立测定含黄芪中药制剂中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的HPLC法,且该法准确可靠,重现性好,具有一定适用性,可为后续深入研究奠定基础。

毛蕊异黄酮葡萄糖苷大鼠在体肠吸收动力学的研究

目的研究毛蕊异黄酮葡萄糖苷肠吸收动力学特征。方法以酚红为标示物,采用大鼠在体单向肠灌流实验,以超高效液相色谱法(UPLC)测定灌流液中药物的含量,研究毛蕊异黄酮葡萄糖苷在大鼠不同肠段吸收特性,并考察不同药物浓度对大鼠肠吸收的影响。结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷在十二指肠段的吸收明显高于其他肠段,增加药物浓度,毛蕊异黄酮葡萄糖苷在十二指肠的吸收速率常数基本保持不变。结论毛蕊异黄酮葡萄糖苷在整个肠段都有不同程度的吸收,且在十二指肠的吸收速率最快,其吸收机制为被动扩散。

不同产地黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的比较

通过高效液相色谱法（HPLC）测定不同产地黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,以期为黄芪药材质量评定提供依据。采用Waters Symmetry C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（81∶19）,流速:1.0 mL/min,柱温:30℃,进样量10μL,检测波长260 nm。结果表明:毛蕊异黄酮葡萄糖苷的浓度在0.145 60.698 7 mg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 7,平均加样回收率为100.35%,RSD为1.98%,所建方法快速、简便、重现性好。4个省份16个产地药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量差异较大,其中内蒙古自治区包头市所产黄芪中其含量最高。从各地平均值看,内蒙古自治区>山西省>甘肃省>黑龙江省,且内蒙古自治区与其他3个省份药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量差异显著。省内之间的差异显著性结果表明,内蒙自治区和山西省产地之间差异较大,甘肃省和黑龙江省产地之间差异较小。

黄芪经侧耳菌发酵后黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的转化

目的:考察黄芪经侧耳菌发酵后黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的变化。方法:采用薄层色谱法进行定性鉴别,高效液相色谱法进行含量测定。结果:黄芪经侧耳菌发酵后黄芪甲苷的含量降低了91%,并有新的物质产生;毛蕊异黄酮葡萄糖苷经过高温灭菌后,其含量显著降低,发酵后该成分消失。结论:黄芪在侧耳菌的作用下黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷均发生了生物转化,生成更利于人体吸收利用的物质。

毛蕊异黄酮葡萄糖苷与葛根素及其配伍对胰岛素抵抗脂肪细胞氧化应激的影响

目的:探讨毛蕊异黄酮葡萄糖苷与葛根素及其配伍对胰岛素抵抗脂肪细胞氧化应激的影响。方法:培养3T3-L1前脂肪细胞,鸡尾酒式诱导脂肪细胞分化,采用地塞米松联合胰岛素诱导成熟的脂肪细胞建立胰岛素抵抗模型,分别给予毛蕊异黄酮葡萄糖苷(200μmol/L)、葛根素(1μmol/L)、毛蕊异黄酮葡萄糖苷+葛根素(200μmol/L+1μmol/L)、吡咯列酮(100μmol/L)干预48 h,通过微板法、比色法检测培养液中一氧化氮(NO)含量,细胞上清液中一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷光甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中NOSmRNA的表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组NO、NOS、MDA、ROS水平和NOSmRNA的表达均显著升高(P<0.05),SOD、GSH活性明显下降(P<0.05)。与模型组相比,毛蕊异黄酮葡萄糖苷与葛根素及其配伍组均可明显降低NO、NOS、MDA、ROS水平,抑制NOSmRNA的表达,提高SOD、GSH水平(P<0.05)。结论:胰岛素抵抗脂肪细胞与对照组细胞相比有较高的氧化应激水平,抗氧化能力减弱。毛蕊异黄酮葡萄糖苷与葛根素及其配伍能通过降低细胞的氧化应激水平,增加细胞的抗氧化能力,改善胰岛素抵抗。

高效液相色谱法测定糖肾宝颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量

目的：建立测定糖肾宝颗粒君药黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱为 Kromasil C18柱（250 mm ×4.6 mm，5μm），流动相为0.2%甲酸－乙腈，梯度洗脱，流速1.0 mL／min，检测波长260 nm，柱温30℃。结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷进样量在0.01~0.32μg范围内与峰面积线性关系良好，线性回归方程 Y=2513055.3 X＋39095（ r2=1.00）。毛蕊异黄酮葡萄糖苷平均加样回收率为101.53%，RSD=2.85%（ n=6）。结论该方法简便、准确、专属性强，可用于测定糖肾宝颗粒君药黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。

黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的薄层鉴别

建立薄层色谱法鉴别黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷。采用70%乙醇溶液提取、D101大孔树脂富集,以硅胶GF_(254)板为吸附剂,乙酸乙酯-甲醇-水(9:1:0.5)为展开系统,碘熏显色。在该色谱条件下,分离效果好、斑点清晰。本方法可靠、重复性好,可为黄芪的质量控制提供参考。

不同产地黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的定量分析

目的通过定量分析比较不同产地黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,为黄芪药材的质量评价提供依据。方法采用HPLC法测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。色谱条件：Diamonsil C18（250mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;流动相：乙腈-0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱;流速：1.0 mL·min-1;检测波长：260 nm;柱温：30℃;进样量：20μL。结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷的浓度在9.92μg·mL-1~248.00μg·mL-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系（r=0.9995）;平均加样回收率为98.62%,RSD为1.89%。结论不同产地黄芪药材毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量存在明显差异,其中河北唐山产黄芪含量最高。利用HPLC法对指标性成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷进行定量分析,快捷准确,可广泛用于黄芪药材的质量评价。

HPLC同时测定参坤养血颗粒中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷、丹参素和党参炔苷

目的：采用HPLC梯度洗脱法同时测定参坤养血颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷、丹参素和党参炔苷的含量.方法：Hypersil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流速1.0ml·min-1;流动相A为甲醇-乙腈（3∶2）,流动相B为0.2％甲酸溶液;检测波长λ1=260 nm（检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷）,检测波长λ2=210 nm（检测黄芪甲苷）,检测波长λ3=280 nm（检测丹参素和党参炔苷）.结果：毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷、丹参素和党参炔苷分别在0.012 8 ～0.256 0 μg（r =0.999 3）、0.015 2～0.304 0 μg（r =0.999 6）、0.039 4 ～0.788 0 μg（r =0.999 4）、0.100 6～2.012 0 μg（r =0.999 9）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.19％、97.92％、98.13％、97.80％,RSD（n =6）分别为1.76％、1.41％、1.12％、1.19％.结论：该含量测定方法简便、准确、灵敏、重复性好,可作为参坤养血颗粒的含量控制方法.

黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷薄层色谱快速鉴别

目的:建立黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的薄层色谱快速鉴别方法。方法:比较不同提取方法与不同薄层色谱条件对毛蕊异黄酮葡萄糖苷的影响,确定最佳方法。结果:14批不同来源产地黄芪药材的薄层色谱图中,均检出毛蕊异黄酮葡萄糖苷。结论:本方法简便易行,可用于黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的快速鉴别。

川产道地药材梭果黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定

目的:建立梭果黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素含量测定方法,为完善梭果黄芪的质量标准提供依据。方法:Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈为流动相A,以水(含0.2%甲酸)为流动相B,梯度洗脱;检测波长260 nm;柱温30℃;流速1.0 mL/min;进样量10μL。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的线性回归方程分别为Y=30.025 X+5.1096(r=0.999 7)和Y=58.24 X-94.279(r=0.999 7);线性范围分别为5.52～110.40μg/mL和5.54～110.72μg/mL;样品中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的总量在0.0053%～0.0179%之间。结论:本实验建立的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法简便、准确,可用于梭果黄芪药材中黄酮类成分的质量控制。

HPLC测定芪卫颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量

目的：建立芪卫颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为WatersX—brigheC18柱（5μm，4．6mm×250mm）；流动相：乙腈-1g／L甲酸溶液（17：83）；检测波长为260nm。结果：毛蕊异黄酮葡萄糖苷在43．48—521．70mg／L浓度范围内，线性关系良好（r=0．9980），毛蕊异黄酮葡萄糖苷的平均回收率为98．85％（RSD=0．76％）。结论：该法快速、简便，结果准确、可靠，可用于芪卫颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定。

HPLC测定芪肾口服液中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量

目的 建立高效液相法测定芪肾口服液中黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量.方法 采用C18色谱柱,蒸发光散射检测器（ELSD）测定黄芪甲苷含量,ELSD条件：乙腈-水（32∶68）为流动相,漂移管温度102℃,载气流速2.7 L/min;采用紫外检测器（DAD）测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,DAD条件：乙腈-0.2％甲酸水为流动相梯度洗脱,检测波长260 nm.结果 黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷线性范围分别为1.1～16.5 μg,0.096～0.382 μg,平均加样回收率分别为96.73％ （RSD=2.08％）,100.70％（RSD=3.12％）.结论 该方法测定结果可靠,为含黄芪制剂质量标准建立提供参考.

膜荚黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷积累规律研究

为了解膜荚黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷的积累规律,为膜荚黄芪的种植和采收提供理论依据,测定了自然环境条件下膜荚黄芪生长中的生物量,毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,土壤温度和湿度,并分析了毛蕊异黄酮葡萄糖苷积累变化规律。总体而言,随着生物量的增加,毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量在叶中呈下降趋势,在茎中呈上升趋势,而在根中表现出先下降再上升的趋势、且与土壤温度和水分呈显著负相关,病虫害的发生则明显降低了生物量和毛蕊异黄酮苷的积累。研究得出的结论是膜荚黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷的积累具有组织特异性,其在地上部和地下部的含量受不同机制的调控,适当的低温和水分胁迫有利于根中毛蕊异黄酮糖苷的积累。

高效液相色谱法测定中草药化妆品中毛蕊异黄酮葡萄糖苷

毛蕊异黄酮葡萄糖苷为中草药化妆品中具有标志性的有效成分。建立了中草药化妆品中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的高效液相色谱检测方法,样品经前处理后,由十八烷基硅烷键合硅胶柱进行分离,梯度洗脱,流速1.0mL/min,进样量为20μL,检测波长均为240nm。线性范围为2～200μg/mL,检测限为0.2μg/g,其相对标准偏差均小于3%,回收率为88.9%～105.6%。该方法能够准确、快速对中草药化妆品进行鉴定。