芒果苷对大鼠骨髓间充质干细胞氧化应激损伤的保护作用

背景:间充质干细胞移植治疗脊髓损伤有一定效果,但仍存在局部氧化应激环境导致移植细胞存活率低、细胞移植效率不佳等问题。目的:探究芒果苷在氧化应激状态下对骨髓间充质干细胞的保护作用。方法:取第3代大鼠骨髓间充质干细胞,按浓度梯度0,20,40,80,160μmol/L加入芒果苷孵育2 h,然后加入含400μmol/L H_(2)O_(2)的无血清L-DMEM培养基及相应浓度的芒果苷继续培养12 h及24 h,以常规培养的大鼠骨髓间充质干细胞为正常对照组。MTT法检测各组细胞存活情况,按照试剂盒操作方法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶、丙二醛及过氧化氢酶水平。结果与结论:与正常对照组相比,H_(2)O_(2)组细胞的存活能力显著降低(P<0.01),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶水平显著降低(P<0.01),丙二醛水平显著升高(P<0.01);与H_(2)O_(2)组相比,芒果苷组细胞的存活能力显著升高(P<0.01),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶水平显著升高(P<0.01),丙二醛水平显著降低(P<0.01)。芒果苷在20μmol/L浓度以上表现出浓度依赖性的抗氧化应激保护活性,且在160μmol/L以下无细胞毒性。结果表明,抗氧化剂芒果苷可增加骨髓间充质干细胞的抗氧化活性,为骨髓间充质干细胞移植提供一种新的预处理策略。

高葡萄糖诱导的氧化应激和炎症反应介导髓核细胞的凋亡和细胞外基质代谢失衡

目的探讨高浓度葡萄糖处理对大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPC)凋亡和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)代谢的影响,并初步探讨可能的潜在机制。方法从雄性Wistar大鼠腰椎组织中分离NPC。将NPC分为6组:对照组,葡萄糖5、15、25 mmol/L组,葡萄糖+NAC组(25 mmol/L葡萄糖+3 mmol/L抗氧化剂NAC),葡萄糖+PDTC组(25 mmol/L葡萄糖+10μmol/L NF-κB通路抑制剂PDTC)。分别采用CCK-8、流式细胞术检测细胞活力和凋亡。采用荧光探针检测细胞内活性氧(reactive ox-ygen species,ROS)水平。酶联免疫吸附法用于检测IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。蛋白质印迹检测相关蛋白表达。结果与对照组比较,5 mmol/L葡萄糖组和15 mmol/L葡萄糖组的细胞活力和凋亡无明显变化,而25 mmol/L葡萄糖组细胞活力明显降低、细胞凋亡明显增加(P<0.05)。与25 mmol/L葡萄糖组比较,葡萄糖+NAC组和葡萄糖+PDTC组Bcl-2关联X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、基质金属蛋白酶MMP-3、MMP-9、MMP-13、金属蛋白酶AD-AMTS(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs)-4和ADAMTS-5表达均明显降低,而Bcl-2蛋白、Ⅱ型胶原蛋白(collagenⅡ,COLⅡ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)表达均明显升高(P<0.05)。与25 mmol/L葡萄糖组比较,葡萄糖+NAC组和葡萄糖+PDTC组细胞内ROS水平和上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平均明显降低(P<0.05)。与25 mmol/L葡萄糖组比较,葡萄糖+NAC组和葡萄糖+PDTC组细胞p-P65/P65和p-IκBα/IκBα水平均明显降低(P<0.05)。结论高葡萄糖处理可通过诱导氧化应激和炎症反应促进NPC的凋亡和ECM降解,这一过程涉及其对ROS/NF-κB信号通路的激活。

艾地苯醌联合舍曲林治疗老年脑卒中后抑郁的疗效及对认知功能和氧化应激的影响

目的 探讨老年脑卒中后抑郁(PSD)患者采用艾地苯醌联合舍曲林治疗的效果,并分析其对认知功能及氧化应激的影响。方法 选取2021年6月—2023年6月新乡医学院第二附属医院收治的104例老年PSD患者,采用随机数字表法分为对照组和研究组,每组各52例,分别接受舍曲林、艾地苯醌联合舍曲林治疗,疗程为8周。观察2组治疗前和治疗4、8周的汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分变化,评估临床疗效及治疗前后的认知功能[简易智力状态检查量表(MMSE)、韦氏成人记忆量表(WMS-RC)]、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)]及安全性。结果 2组HAMD评分比较组间效应、时间效应及交互效应均有统计学意义(P<0.05),治疗4、8周后研究组HAMD评分低于对照组,且研究组HAMD评分随时间延长降低趋势更为明显;研究组临床总有效率为96.15%(50例),高于对照组的82.69%(43例,χ^(2)=4.981,P=0.026);与治疗前比较,2组治疗后MMSE评分、长时记忆、短时记忆、即刻记忆、记忆商数、血清SOD及GSH-PX活性均升高,且研究组上述指标更高(P<0.05);治疗后2组MDA水平与治疗前比较均降低,且研究组更低(P<0.05);研究组不良反应发生率为9.61%(5例),与对照组(5.77%,3例)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 老年PSD患者应用艾地苯醌联合舍曲林有助于减轻抑郁症状,提高临床疗效,改善认知功能,减轻氧化应激损伤,安全可靠。

香砂六君子汤对肥胖大鼠肝脏脂代谢、氧化应激、炎症反应的影响

目的 探讨香砂六君子汤对肥胖大鼠肝脏脂代谢、氧化应激、炎症反应的影响。方法 采用高脂饲料喂养方法诱导肥胖大鼠模型,将造模成功大鼠分为模型组(n=8)、西药组(n=8)、中药组(n=8),正常大鼠10只作为正常组。西药组大鼠给予奥利司他0.048 g/(kg·d)灌胃,中药组大鼠给予香砂六君子汤7.813 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组大鼠给予管体积的0.9%氯化钠注射液灌胃,时间为6周。检测大鼠体质量、附睾周围脂肪质量、肾周脂肪质量,并计算附睾和肾周脂/体比,检测空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、脂肪酸(FFA)含量;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测大鼠肝脏肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA);实时荧光定聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝脏核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3) mRNA表达,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肝脏病理变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量、附睾脂肪质量、肾周脂肪质量和脂/体比,血清FPG、TC、TG、LDL-C、FFA含量,肝脏TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量,肝脏TLR4、NF-κB、NLRP3 mRNA表达均升高(P<0.05),血清HDL-C含量,肝脏T-AOC、SOD、CAT、GSH-Px水平,肝脏Nrf2 mRNA表达均降低(P<0.05),HE染色显示肝脏出现明显脂肪变性;与模型组比较,中药组和西药组大鼠体质量、附睾脂肪质量、肾周脂肪质量和脂/体比,血清FPG、TC、TG、LDL-C、FFA含量,肝脏TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量,肝脏TLR4、NF-κB、NLRP3 mRNA表达均降低(P<0.05),血清HDL-C含量,肝脏T-AOC、SOD、CAT、GSH-Px水平,肝脏Nrf2 mRNA表达均升高(P<0.05),HE染色显示肝脏脂肪变性减轻;中药组和西药组大鼠上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 香砂六君子汤可以减轻肥胖大鼠体质量和脂肪含量,改善脂代谢,减轻氧化损伤和炎症反应。

自锁托槽矫治改善患者口腔健康及氧化应激反应的研究

目的探究正畸治疗患者使用自锁托槽矫治对口腔健康状况、龈沟液氧化应激及炎性因子的影响。方法纳入本院正畸治疗共60例患者进行随机分组(2022年4月至2024年4月),依据随机数字表法划分两组各30例。对照组均采取结扎托槽矫治,观察组均采取自锁托槽矫治。基于口腔健康评分、龈沟液氧化应激指标、龈沟液炎性因子水平,分别在治疗前及治疗4周时对其综合评价。结果两组治疗后中文版口腔健康影响程度量表(OHIP-49)得分较治疗前减少(P<0.05);同时观察组OHIP-49得分比对照组更低(P<0.05)。治疗后两组龈沟液丙二醛(MDA)水平和治疗前对比更低,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GXH-Px)水平和治疗前对比更高(P<0.05);同时观察组MDA比对照组更低,SOD、GXH-Px比对照组更高(P<0.05)。两组治疗后龈沟液前列腺素E_(2)(PGE_(2))、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平较治疗前均上升(P<0.05);但观察组上述指标仍比对照组更低(P<0.05)。结论正畸治疗患者使用自锁托槽矫治能调节牙周组织氧化应激反应,减轻炎症反应状态,提升口腔健康水平。

308 nm准分子激光联合火针对白癜风皮损改善情况及抗氧化应激能力的影响

目的探讨308 nm准分子激光联合火针对白癜风皮损改善情况及抗氧化应激能力的影响。方法选取2022年1月至2023年3月于濮阳市安阳地区医院门诊部就诊的白癜风患者98例,根据随机数字表法将98例白癜风患者分为联合组(49例)和光疗组(49例)。光疗组采用308 nm准分子激光疗法,联合组在光疗组的基础上同时给予火针疗法,两组患者每周治疗2次,共治疗8周。观察两组治疗前后皮损面积、皮损色素积分以及细胞内活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的变化情况,比较两组治疗8周后的临床疗效,记录两组治疗期间不良反应发生情况。结果联合组治疗总有效率高于光疗组总有效率(P<0.05);治疗前,两组患者皮损面积、皮损色素积分以及ROS、SOD、GSH-Px水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,两组皮损面积、ROS水平降低(P<0.05),且联合组小于光疗组(P<0.05),两组皮损色素积分、SOD、GSH-Px水平升高,且联合组高于光疗组(P<0.05);治疗期间联合组不良反应总发生率低于光疗组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论308 nm准分子激光联合火针疗法对白癜风患者有理想的治疗效果,能够减少白癜风患者的皮损面积,提升患者皮损部位色素沉着,有效降低ROS水平,提高SOD、GSH-Px水平,改善患者抗氧化应激能力。

黄芪甲苷抗高糖受损内皮祖细胞氧化应激损伤的机制研究

目的:研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对高糖诱导的内皮祖细胞(EPCs)氧化应激损伤的保护机制,为AS-Ⅳ的临床开发应用奠定基础。方法:取足月新生儿脐带血,采用密度梯度离心法分离出单个核细胞,采用Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1双荧光染色法鉴定出EPCs,将鉴定成功的人EPCs分别用30 mmol/L的葡萄糖干预120 h,制成高糖诱导氧化应激损伤细胞模型,实验分为黄芪甲苷+高糖受损EPCs组、黄芪甲苷+高糖受损EPCs+ML385(Nrf2抑制剂)组、高糖受损EPCs组和正常EPCs组(5 mmol/L的葡萄糖干预120 h),用流式细胞术检测活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测氧化应激相关蛋白的表达和Nrf2、Keap1及NFE2L2/ARE依赖性信号通路蛋白的表达。结果:与正常EPCs组比较,高糖受损EPCs组细胞内ROS水平显著升高,GSH-Px、CAT、SOD活力均明显降低,LDH活力明显升高,Nox2、Keap1表达显著升高,Nrf2、HMOX1、xCT、GPX4表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与高糖受损EPCS组比较,黄芪甲苷+高糖受损EPCs组细胞内ROS水平降低,GSH-Px、CAT、SOD活力升高,LDH活力降低,Nox2、Keap1表达降低,Nrf2、HMOX1、xCT、GPX4表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。黄芪甲苷+高糖受损EPCs+ML385组各项检测指标与高糖受损EPCS组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高糖能诱导EPCs出现氧化应激损伤,而黄芪甲苷能通过介导NFE2L2(Nrf2)/ARE信号通路发挥抗氧化应激作用,保护高糖诱导氧化应激损伤的内皮祖细胞。

黄芪熊竹素对脂多糖诱导肺泡上皮细胞氧化应激损伤的改善作用

目的探讨黄芪熊竹素对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞A549氧化应激损伤的改善作用,以及对核因子-红系2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响。方法实验设空白对照组(DMEM培养基)、模型组(DMEM培养基+LPS 200 ng/mL),地塞米松组(DMEM培养基+LPS 200 ng/mL+地塞米松200 ng/mL)及黄芪熊竹素低、高剂量组(DMEM培养基+LPS 200 ng/mL+黄芪熊竹素400、800 ng/mL)。于570 nm波长处检测吸光度(OD)以计算细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;检测氧化应激因子活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;RT-PCR法及Western blot法分别检测细胞Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达水平。结果与模型组比较,各给药组细胞OD值,细胞存活率,单细胞克隆形成数目,SOD水平,Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高,细胞凋亡率,ROS、MDA水平均显著降低(P<0.05)。结论黄芪熊竹素对LPS诱导的A549细胞氧化应激损伤有显著改善作用,其机制可能与促进细胞Nrf2、HO-1的高表达有关。

胸腔内注射凝血酶对难治性气胸患者氧化应激、肺损伤因子的影响

目的探讨胸腔内注射凝血酶在难治性气胸中的治疗效果及对患者氧化应激、肺损伤因子及预后的影响。方法选取2020年1月至2021年12月邯郸市第一医院收治的92例难治性气胸患者,男性54例,女性38例,年龄(59.89±5.38)岁,年龄范围为33~85岁。将患者按不同治疗方法分为对照组(n=42)与研究组(n=50),对照组患者行持续胸腔闭式引流,研究组患者行持续胸腔闭式引流联合胸腔内注射凝血酶。比较两组患者的治疗效果、治疗相关指标[漏口闭合时间、总带管时间、住院时间及视觉模拟评分量表(VAS)评分]、患者氧化应激反应情况[皮质醇、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛]、肺损伤因子[肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)、人克拉拉细胞蛋白(CC16)]水平、患者并发症发生情况及复发率。结果研究组患者治疗有效率高于对照组;漏口闭合时间、总带管时间、住院时间、术后72 h VAS评分均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3周后,研究组患者血清皮质醇、丙二醛水平低于对照组;SOD水平高于对照组;血清SP-D低于对照组;CC16水平高于对照组;治疗1年后复发率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论持续胸腔闭式引流联合胸腔内注射凝血酶可提升难治性气胸的治疗效果,有助于减轻疼痛程度,降低氧化应激与肺损伤,预防患者复发。

芦荟素减轻大鼠心肌细胞缺氧损伤:抑制氧化应激和铁死亡

背景:心肌细胞缺氧损伤与氧化应激和铁死亡密切有关。既往研究表明芦荟素具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种作用。目的:探讨芦荟素对缺氧诱导的H9C2细胞氧化应激及铁死亡的影响。方法:利用H9C2细胞构建缺氧模型,首先通过检测细胞活性,确定芦荟素无细胞毒性及最佳干预浓度。随后,利用试剂盒、超氧化物阴离子荧光探针及MitoSOX^(TM)Red荧光探针,分别评估芦荟素对缺氧诱导的H9C2细胞乳酸脱氢酶释放、活性氧产生以及线粒体氧化应激的影响。为了验证芦荟素对铁死亡的影响,采用荧光染色和流式细胞术,分别检测细胞内Fe^(2+)的含量和脂质过氧化程度。接着,利用蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR技术,检测铁死亡调节因子(谷胱甘肽过氧化物酶4、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4和核因子E2相关因子2)的表达。最后,通过运用铁死亡诱导剂Erastin,进一步确认铁死亡在芦荟素介导心肌保护过程中的重要作用。结果与结论:(1)与对照组相比,缺氧组H9C2细胞活力显著降低,乳酸脱氢酶释放、活性氧水平、线粒体氧化应激程度、Fe^(2+)含量及脂质过氧化程度显著上升,谷胱甘肽过氧化物酶4、核因子E2相关因子2的mRNA和蛋白表达明显降低,酰基辅酶A合成酶长链家族成员4的mRNA和蛋白表达显著升高(均P<0.05);(2)与缺氧组比较,芦荟素低、高剂量组逆转了上述指标变化(均P<0.05);(3)与缺氧+芦荟素组相比,缺氧+芦荟素+Erastin组H9C2细胞活力明显下降,乳酸脱氢酶释放显著升高(均P<0.01)。结果表明,芦荟素对缺氧处理的H9C2细胞具有保护作用,且呈剂量依赖性,主要通过抑制氧化应激和铁死亡实现的。

Compound 3k治疗骨关节炎:调控氧化应激通路改善软骨细胞糖酵解的作用机制

背景:骨关节炎现已被认为是一种代谢性疾病,既往研究表明糖酵解在骨关节炎的发生发展中起重要作用。Compound 3k作为一种新型糖酵解小分子抑制剂,具有抗炎及抗肿瘤等功效,因此可靶向糖酵解,有望为骨关节炎治疗提供新的思路。目的:基于缺氧诱导因子1α/活性氧的氧化应激通路探究Compound 3k在糖酵解过度活跃所导致的骨关节炎中的作用机制。方法:取对数生长期的ATDC5成软骨细胞,用10 ng/mL白细胞介素1β作用24 h诱导骨关节炎体外细胞模型,以CCK-8法检测不同浓度(0.25,0.5,1,2.5,5,10,15μmol/L)Compound 3k的细胞毒性,选出合适浓度进行后续实验。将软骨细胞随机分为对照组、模型组、治疗组,模型组以10 ng/mL的白细胞介素1β诱导,治疗组以Compound 3k预刺激2 h后与白细胞介素1β共培养,用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;用ELISA试剂盒检测各组细胞炎症水平;用试剂盒检测各组细胞活性氧、细胞外乳酸脱氢酶及葡萄糖含量;qRT-PCR及Western blot检测相关炎症因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α及糖酵解相关基因葡萄糖转运蛋白1、甘油醛3-磷酸脱氢酶、单羧酸转运蛋白1和缺氧诱导因子1α的表达水平。结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞增殖活性下降、糖酵解水平活跃,表现为细胞外乳酸脱氢酶含量增加(P<0.001),葡萄糖含量减少(P<0.001),相关炎症因子白细胞介素6(P<0.0001)及肿瘤坏死因子α(P<0.001),糖酵解相关基因葡萄糖转运蛋白1(P<0.001)、甘油醛3-磷酸脱氢酶(P<0.001)、单羧酸转运蛋白1(P<0.001)及缺氧诱导因子1α(P<0.001)的表达水平均上调,并伴随氧化应激,活性氧过量产生。②与模型组相比,Compound 3k的治疗有效提高细胞增殖活性,抑制过度活跃的糖酵解水平的同时,抑制了骨关节炎软骨细胞炎症(P<0.001)及糖酵解相关基因的表达(P<0.001),且抑制氧化应激,缺氧诱导因子1α的表达水平下调(P<0.0001),活性氧水平下降。③上述结果证实,Compound 3k抑制了白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症,其机制可能与糖酵解及缺氧诱导因子1α/活性氧介导的氧化应激有关。

天然产物调控氧化应激治疗脊髓损伤

背景:脊髓损伤是一种严重的神经系统疾病,常导致神经功能严重受损。在脊髓损伤后的病理过程中,氧化应激是一个重要环节,导致神经细胞死亡和功能丧失。近年来,天然产物因来源广泛、结构多样且生物活性丰富,逐渐在脊髓损伤后的氧化应激治疗中展现出潜在的应用价值。目的:讨论部分天然产物在脊髓损伤后氧化应激过程中的治疗作用以及相关作用机制,以期为脊髓损伤的抗氧化治疗提供新的思路和方向。方法:以“spinal cord injury,oxidative stress,anti-oxidation,natural products,natural compounds,polyphenols”“脊髓损伤,氧化应激,抗氧化,天然产物,天然化合物,多酚”为关键词,在PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane、维普、CBM、万方和中国知网数据库检索自建库以来至2024年5月的相关文献。制定纳入和排除标准,通过阅读文献标题、摘要及全文内容进行筛选,最终纳入97篇相关文献。结果与结论:①天然产物如多酚类等可以依靠其结构中的酚羟基发挥直接清除氧化自由基的作用,减轻脊髓损伤后的氧化应激反应;②一些天然产物可以通过调控某些信号转导通路增强体内相关抗氧化酶的活性,减轻氧化应激;③部分天然产物可以通过增强自噬的方式减弱脊髓损伤后的氧化应激;④利用天然产物调控氧化应激可能成为今后临床上治疗脊髓损伤的有效工具。

虫草素通过抑制氧化应激与铁死亡减轻庆大霉素诱导的肾损伤

目的探讨虫草素(cordycepin,COR)减轻庆大霉素(gentamicin,GEN)肾毒性的作用及其抑制GEN诱导的氧化应激和细胞铁死亡的分子机制。方法将SD大鼠分为对照组、GEN组与GEN+COR组3组,动物模型构建成功后,检测各组大鼠血清肌酐和尿素氮水平,HE染色评价肾脏组织损伤程度。另外,检测各组SD大鼠肾脏组织中丙二醛和谷胱甘肽含量,并通过Western blot的方法分析细胞铁死亡标志蛋白GPX4、SLC7A11表达。结果与对照组相比,GEN组大鼠血清肌酐、尿素氮明显升高(P<0.01),同时给予50 mg·kg-1 COR后有效降低肌酐与尿素氮水平,HE结果也显示COR能够缓解GEN造成的肾脏组织损伤;COR可逆转GEN造成的大鼠肾脏组织中丙二醛水平升高与谷胱甘肽水平下降。同时,COR能够恢复GEN诱导的GPX4、SLC7A11蛋白水平下降。结论COR能够通过减轻细胞氧化应激与铁死亡缓解GEN造成的肾损伤。

骨关节炎的氧化应激相关基因和免疫浸润分析

背景:目前对于骨关节炎的发病机制尚不清楚,缺乏有效控制疾病的手段,且研究多集中在免疫领域,对氧化应激领域研究较少。目的:探索氧化应激与免疫浸润在骨关节炎中的作用,并预测相关miRNA和治疗药物。方法:从GEO数据库中获取GSE55235数据集(10例骨关节炎样本和10例健康对照样本)和GSE55457数据集(10例骨关节炎样本和10例健康对照样本)进行合并,获取差异表达基因,并结合氧化应激基因得到差异表达氧化应激基因。对差异表达氧化应激基因进行KEGG、GO富集分析,并使用GSEA富集分析评价骨关节炎通路和生物过程。使用STRING在线平台和Cytoscape软件建立了蛋白质相互作用网络,运行Degree算法得到关键基因,从GEO数据库中获取GSE1919作为验证数据集,对关键基因进行差异分析及受试者工作特征曲线分析,得到核心基因。此外,用CIBERSORT对免疫浸润进行评估,并探索核心基因与免疫细胞的相关性,使用TargetScan对核心基因进行miRNA预测及使用DSigDB数据库对靶点药物进行预测。结果与结论:①确定了65个差异表达氧化应激基因和5个核心基因(IL1B、CXCL8、MYC、NFKBIA、JUN);②富集分析结果显示,差异表达氧化应激基因的主要聚焦点包括氧化应激、白细胞介素17、破骨细胞分化、流体剪切应力以及动脉粥样硬化等通路;③5个核心基因的受试者工作特征曲线下面积均>0.85,说明对诊断骨关节具有良好的特异性和敏感性,且与免疫细胞密切关联;④miRNA的预测结果是hsa-miR-3937,治疗小分子药物包括二甲双胍、离子霉素和塞来昔布等。结果表明:骨关节炎中存在氧化应激与免疫浸润,且免疫浸润参与激活氧化应激。核心基因及预测的miRNA可作为诊断骨关节炎的新型标志物,预测的小分子药物可治疗骨关节炎。

六味地黄丸调节肠道微生物组平衡抑制卵巢早衰小鼠的氧化应激

背景:研究表明,卵巢早衰患者肠道菌群结构发生变化,肠道菌群失调可能是卵巢早衰发生的重要机制之一。目的:探讨六味地黄丸对环磷酰胺诱导卵巢早衰小鼠氧化应激和肠道微生物群的影响。方法:45只雌性ICR小鼠随机分为3组:空白组(正常小鼠)、模型组(卵巢早衰小鼠)、六味地黄丸组,后2组小鼠一次性腹腔注射环磷酰胺(120 mg/kg)制备卵巢早衰小鼠模型,造模成功后六味地黄丸组小鼠连续灌胃六味地黄丸(1.56 g/kg)28 d,其余2组灌胃等量生理盐水28 d,灌胃结束后取材。每周记录小鼠体质量,计算卵巢指数,苏木精-伊红染色观察小鼠卵泡的发育情况,ELISA法检测血清抗苗勒管激素、雌二醇、促卵泡激素、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和丙二醛水平,并通过16S rDNA测序检测所有小鼠的肠道微生物组。结果与结论:(1)模型组小鼠的毛发疏松,活力及抓力下降,体质量几乎无增长,卵巢指数下降;六味地黄丸治疗后小鼠的体质量高于模型组,卵巢指数也随之升高(P<0.05)。(2)模型组小鼠动情周期紊乱;六味地黄丸能恢复卵巢早衰小鼠的发情周期,减少闭锁卵泡数量。(3)模型组小鼠血清中促卵泡激素、丙二醛水平显著升高(P<0.01),血清雌二醇、抗苗勒管激素、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平显著下降(P<0.01);六味地黄丸组小鼠血清促卵泡激素、丙二醛水平显著降低(P<0.01),雌二醇、抗苗勒管激素、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平升高。(4)根据16S rDNA测序结果,六味地黄丸可调控肠道微生物群的丰度和多样性,可增加有益菌的相对丰度,KEGG通路分析显示,肠道微生物群与代谢途径、次生代谢产物的生物合成、不同环境中的微生物代谢、氨基酸的生物合成等通路受六味地黄丸的调控。(5)结论:肠道微生物组的改变可能是六味地黄丸治疗卵巢早衰的潜在机制之一。六味地黄丸能调节肠道微生物组结构,增加有益菌数量,减少有害菌数量,从而改善肠道微生态平衡。这种调节作用有助于降低氧化应激水平,进一步抑制卵巢早衰小鼠卵巢氧化应激。

4-萜品醇对氧化应激断奶仔猪肺脏、脾脏、胰腺抗氧化功能的调节作用

本文旨在研究4-萜品醇对过氧化氢诱导的氧化应激断奶仔猪肺脏、脾脏和胰腺抗氧化功能的调节作用。试验选取32头28日龄的健康“杜×长×大”断奶仔猪,平均体重(8.53±0.42)kg,随机分为4个组,每组8头猪。对照组和过氧化氢组仔猪饲喂基础饲粮,4-萜品醇组和过氧化氢+4-萜品醇组仔猪饲喂基础饲粮+60 mg/kg 4-萜品醇。预试期3 d,正试期21 d。正试期第15天和第18天,过氧化氢组和过氧化氢+4-萜品醇组分别腹腔注射1 mL/kg BW的10%过氧化氢,对照组和4-萜品醇组分别腹腔注射等量的0.9%无菌生理盐水。结果表明:1)与对照组相比,过氧化氢组血清丙二醛(MDA)含量显著提高(P<0.05),总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)活性显著降低(P<0.05);与过氧化氢组相比,过氧化氢+4-萜品醇组血清MDA含量极显著降低(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)活性和T-AOC显著提高(P<0.05),CAT活性极显著提高(P<0.01)。2)与对照组相比,过氧化氢组肺脏MDA含量极显著提高(P<0.01),CAT活性显著降低(P<0.05),T-AOC极显著降低(P<0.01);与过氧化氢组相比,过氧化氢+4-萜品醇组肺脏MDA含量极显著降低(P<0.01),CAT活性极显著提高(P<0.01)。3)与对照组相比,过氧化氢组脾脏MDA含量极显著提高(P<0.01),CAT活性显著降低(P<0.05),T-AOC极显著降低(P<0.01);与过氧化氢组相比,过氧化氢+4-萜品醇组脾脏MDA含量极显著降低(P<0.01),CAT活性极显著提高(P<0.01)。4)与对照组相比,过氧化氢组胰腺MDA含量极显著提高(P<0.01),SOD活性显著降低(P<0.05),CAT活性和T-AOC极显著降低(P<0.01);与过氧化氢组相比,过氧化氢+4-萜品醇组胰腺MDA含量显著降低(P<0.05),CAT活性极显著提高(P<0.01)。综上所述,饲粮中添加4-萜品醇可以缓解过氧化氢诱导的氧化损伤,进而缓解断奶仔猪内脏器官的氧化应激。

卵泡直径对牛卵母细胞早期胚胎发育和氧化应激的影响

为了探究卵泡直径对牛卵母细胞早期胚胎发育及氧化应激的影响,试验从新鲜健康牛卵巢分离卵泡,按照卵泡直径大小将卵泡分为较大卵泡组(L组,5 mm≤卵泡直径<10 mm)和较小卵泡组(S组,1.8 mm≤卵泡直径<5 mm),分别从不同组卵泡中分离卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)并进行分级,分析不同卵泡直径对卵母细胞成熟率、卵裂率及GV期和MⅡ期卵母细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平及抗氧化基因(SOD1、SOD3、SRIT2和GPX1)表达量的影响。结果表明:COCs分为A、B、C、D、E 5级,各级占比在L组和S组间差异不显著(P>0.05)。L组卵母细胞成熟率与S组差异不显著(P<0.05),但卵裂率显著高于S组(P>0.05),其中L组和S组卵裂率分别为62.67%和50.67%。在卵母细胞GV期时,L组卵母细胞的ROS水平显著低于S组(P<0.05),GSH水平显著高于S组(P<0.05);在MⅡ期时,L组卵母细胞的ROS水平显著高于S组(P<0.05),GSH水平显著低于S组(P<0.05)。在卵母细胞GV期和MⅡ期时,L组卵母细胞的SOD1、SOD3、SIRT2、GPX1基因mRNA相对表达量均显著高于S组(P<0.05)。说明较大卵泡中的卵母细胞具有较好的抗氧化性能和发育潜能。

二肽基肽酶-4抑制剂西格列汀的抗炎及抗氧化应激机制研究

2型糖尿病患病率呈现逐年上升的趋势,目前已知氧化应激和炎症反应可参与糖尿病的发生、发展。二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂可以通过抑制DPP-4而增强肠促胰岛素效应,从而起到降糖作用,现已广泛应用于糖尿病患者的治疗中。目前已有研究显示DPP-4在多种炎症性疾病中表达上调,提示其可能参与炎症的发生。然而,关于DPP-4抑制剂在炎症及氧化应激中的作用机制的相关报道较少,因此本文通过综述DPP-4抑制剂西格列汀的抗炎及抗氧化应激机制,提出西格列汀在其他疾病的治疗中具有一定的应用前景,为后续相关研究开展提供借鉴。

基于线粒体能量代谢及氧化应激探讨育肾养卵方治疗肾精亏虚型卵巢储备功能减退的临床研究

目的基于线粒体能量代谢及氧化应激探讨育肾养卵方治疗肾精亏虚型卵巢储备功能减退(DOR)的临床疗效。方法选取2023年9月至2024年6月于上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院妇科就诊的诊断标准符合肾精亏虚型DOR的患者70例,按照随机数表法分为试验组和对照组各35例(各脱落1例),试验组服用中药育肾养卵方,对照组服用中药安慰剂,2组疗程均为3个月。治疗前后比较2组患者基础窦卵泡数(AFC)、中医证候积分以及血清抗苗勒管激素(AMH)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))值及活性氧(ROS)、三磷酸腺苷(ATP)水平变化情况。结果治疗后,2组肾虚型中医证候积分均较前降低(P<0.05,P<0.01),试验组优于对照组(P<0.01)。治疗后试验组FSH较治疗前降低(P<0.05),AMH较治疗前升高(P<0.05),窦卵泡数(AFC)较治疗前升高(P<0.01),试验组优于对照组(P<0.05,P<0.01)。治疗后试验组患者血清ROS含量降低(P<0.01),ATP值上升(P<0.01),试验组优于对照组(P<0.01)。结论育肾养卵方能提高肾精亏虚型DOR患者的卵巢功能,改善中医证候积分,可能与提高线粒体能量代谢,降低氧化应激有关。

Hemin调控小鼠软骨细胞氧化应激的线粒体途径

背景:研究显示线粒体氧化应激在膝骨关节炎发生发展中具有重要作用,Hemin可以调控线粒体相关蛋白的表达。目的:研究Hemin对小鼠软骨细胞氧化应激的调控及其在膝骨关节炎中的干预作用及机制。方法:①体外细胞实验:提取C57BL/6小鼠的原代软骨细胞,采用10 ng/mL的白细胞介素1β诱导构建体外骨关节炎软骨细胞模型,使用CCK-8法确定Hemin(0,1,10,20,40,80,160μmol/L)干预小鼠软骨细胞的最适浓度。将软骨细胞随机分为正常组、模型组(白细胞介素1β)、Hemin组(白细胞介素1β+Hemin)。检测各组软骨细胞的活性氧、线粒体膜电位和凋亡情况。②动物体内实验:将成年C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组(骨关节炎),Hemin(骨关节炎+Hemin)组,每组8只,Hemin治疗4周后观察小动物行为学及膝关节病理组织形态学变化,检测软骨组织细胞外基质相关蛋白表达及软骨组织细胞凋亡的变化,检测软骨组织Nrf2/HO-1蛋白的表达水平。结果与结论:①体外细胞实验:Hemin作用于原代软骨细胞的最适浓度为40μmol/L,经过Hemin处理的白细胞介素1β诱导的软骨细胞相对于模型组活性氧水平明显较少,线粒体膜电位明显有改善,软骨细胞凋亡减少。②动物体内实验:Hemin治疗4周后,与模型组比较,Hemin组的小鼠下肢功能明显转好,组织病理学评分显著改善,膝关节软骨细胞凋亡明显减少。③结果表明,Hemin可以缓解白细胞介素1β诱导下的小鼠软骨细胞氧化应激,恢复线粒体功能,减少细胞凋亡。Hemin可以改善膝骨关节炎细胞外基质降解、促进软骨细胞合成代谢、降低分解代谢及减少软骨细胞凋亡,可能是通过激活炎症环境中软骨细胞Nrf2/HO-1信号通路发挥的作用。