浅水藕—泥鳅综合种养生态高效生产技术

寿光市双王城生态经济园区发挥当地自然资源优势,采用浅水藕—泥鳅生态混养模式,高效地利用立体空间,实现了良好的生态循环,让特色产业成为发展优势,取得了显著的生态效益和经济效益,具有一定的推广价值。

人工诱导泥鳅雌核发育的细胞学研究和诱导参数优化

为培育泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)全雌品种,研究通过细胞荧光染色后进行细胞学观察确定人工诱导泥鳅雌核发育的热休克起始时间,并进一步利用核型和流式细胞分析等方法对人工诱导雌核发育泥鳅进行鉴定。结果显示,二倍体泥鳅受到灭活的鲤(Cyprinus carpio)精子刺激后,第二极体与卵核分开的时间在人工授精后3—5min;卵子在人工授精后3.5min后再热休克2min的诱导孵化率达到10.26%。通过分析野生型泥鳅胚胎、人工诱导雌核发育泥鳅胚胎、泥鳅×鲤杂交胚胎和单倍体泥鳅胚胎的发育,发现部分雌核发育的胚胎可以正常发育,而杂交胚胎和单倍体胚胎会出现明显的发育障碍。核型和流式细胞检测分析表明利用本研究获得的热休克参数进行处理可得到二倍体雌核发育子代,二倍率达64.71%。研究从细胞学层面获得泥鳅雌核发育的诱导参数,可为利用人工诱导雌核发育开展全雌泥鳅育种提供指导。

氨氮胁迫对两种泥鳅急性毒性及抗氧化功能的影响

为研究氨氮胁迫对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)和大鳞副泥鳅(Paracheilus dabryanus)急性毒性及抗氧化功能的影响,采用静态毒性试验方法,以平均体质量为(8.13±1.04)g的泥鳅和平均体质量为(8.72±1.33)g的大鳞副泥鳅为试验对象,得到氨氮对泥鳅和大鳞副泥鳅72 h半致死浓度分别为610.45、516.90 mg/L,对应的非离子氨(NH_(3))浓度分别为5.04和4.26 mg/L。基于半致死浓度,研究了100 mg/L氨氮暴露对两种泥鳅肝脏和肌肉组织的抗氧化功能的影响,发现氨氮胁迫后MDA含量,以及SOD、LZM和GPx活性均出现不同程度的升高,且泥鳅的抗氧化酶活性略高于大鳞副泥鳅。试验结果表明,泥鳅的抗氧化功能强于大鳞副泥鳅。

甲苯咪唑对大鳞副泥鳅肝脏氧化损伤的毒性作用

为了探究甲苯咪唑对大鳞副泥鳅肝脏氧化损伤的毒性作用,将大鳞副泥鳅暴露于浓度为0(对照)、0.004、0.02、0.1 mg·L^(-1)的甲苯咪唑溶液中,分别于24、72、144 h测定大鳞副泥鳅肝脏谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性和总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明:24 h时GOT活性随着甲苯咪唑浓度的增加呈下降趋势,72 h和144 h时则呈先升高后下降趋势;低(0.004 mg·L^(-1))、中(0.02 mg·L^(-1))和高(0.1 mg·L^(-1))浓度组GPT活性在甲苯咪唑整个暴露过程中均低于对照组;SOD活性除了中浓度组在72 h时显著高于对照组外(P<0.05),各浓度组SOD活性整体上呈现出不同程度的抑制趋势;在甲苯咪唑的整个暴露过程中,GPx活性和T-AOC水平均受到显著抑制(P<0.05),而MDA含量受到不同程度的诱导;24 h时各浓度组中AChE活性均显著低于对照组(P<0.05),72 h和144 h时AChE活性则随着甲苯咪唑暴露浓度的增加而升高,低浓度组受到显著抑制(P<0.05),而高浓度组受到显著诱导(P<0.05)。研究表明,甲苯咪唑暴露可对大鳞副泥鳅肝脏组织产生氧化胁迫和损伤作用,干扰神经递质系统,并对鱼类机体产生神经毒性效应。

泥鳅早期生长特征及不同投喂策略对仔稚鱼生长性能的影响

实验通过研究不同投喂策略对泥鳅仔稚鱼时期生长发育的影响,以期筛选出理想的饵料组合,通过对泥鳅早期生长曲线的拟合分析,初步探究泥鳅早期生长的特点,为泥鳅苗种培养和健康养殖提供参考。用蛋黄、轮虫、卤虫及配合饲料的不同组合分阶段投喂均重为0.01 g左右的泥鳅,并在15dph、40dph和55dph时对各组称重并测量全长,比较不同饵料组合对泥鳅仔稚鱼生长性能的影响,采用SPSS 26.0进行方差分析及生长曲线拟合和回归分析。在15—40dph期间,轮虫+卤虫+蛋黄组SGR(9.50±0.18)%显著高于轮虫+蛋黄组(7.40±0.13)%及卤虫组(5.75±0.04)%(P<0.05);在41—55dph阶段,饲喂卤虫+配合饲料组SGR最高,为(8.89±0.49)%,显著高于轮虫+卤虫+蛋黄及卤虫+蛋黄+配合饲料组(P<0.05)。终末全长、末均重及WGR变化与SGR趋势相同。对仔稚鳅前期15—40dph投喂轮虫+卤虫+蛋黄,后期41—55dph投喂卤虫+配合饲料组进行生长曲线拟合及回归分析,全长和日龄之间的关系符合三次函数:TL=1E–05x^(3)–0.0007x^(2)+0.0679x+0.4071(R^(2)=0.995);体重与日龄之间的关系符合三次函数:BW=5E–06x^(3)–0.0002x^(2)+0.0048x–0.0125(R^(2)=0.958);全长与体重之间的关系符合幂函数,关系式:LWR=0.0062x^(2).7838(R^(2)=0.988)。实验表明泥鳅仔稚鱼期前期15—40dph投喂轮虫+卤虫+蛋黄,后期41—55dph投喂卤虫+配合饲料可获得较佳生长性能。泥鳅仔稚鱼体重与全长之间呈显著的幂函数关系:LWR=0.0062x^(2).7838(R^(2)=0.988),b值显著小于3(P<0.05),为负异速生长模式。

miR-140-3p在大鳞副泥鳅雌雄性腺中的差异表达和调控功能的研究

miR-140-3p是在不同物种性腺组织中广泛表达的一种miRNA。本研究利用qRT-PCR方法检测miR-140-3p在大鳞副泥鳅性腺中的雌雄表达差异并预测其生物学功能。结果显示:miR-140-3p在大鳞副泥鳅雌雄鱼的性腺组织中均有表达,且精巢中的表达量显著高于卵巢(P<0.01);KEGG pathway分析表明,靶基因CPEB4和GDF9参与卵母细胞成熟分化过程,富集在与性腺发育、繁殖功能相关的孕激素介导卵母细胞成熟通路、卵母细胞减数分裂通路、卵巢类固醇生成通路。荧光定量结果显示CPEB4和GDF9在卵巢中表达量显著高于精巢(P<0.01),且表达量与miR-140-3p的表达呈显著负相关,说明miR-140-3p和CPEB4、GDF9具有潜在的靶标关系。这为进一步探索miR-140-3p在鱼类性腺发育和繁殖过程中的作用奠定了基础。

泥鳅扰动对稻田土壤孔隙水中砷的影响

为探究不同养殖密度(低密度、中密度、高密度)泥鳅扰动对土壤孔隙水中砷(As)含量的影响,采集湖南浏阳稻田表层土,以泥鳅为扰动生物,对泥鳅扰动土壤孔隙水中As含量变化进行研究,为进一步开展土壤-水环境中As循环研究提供基础数据。结果表明:泥鳅扰动后,土壤pH随时间先升高后降低,扩散层变宽,并逐渐向深层土壤扩散,泥鳅组土壤pH表现为:中密度组>低密度组>高密度组,低密度组和中密度组土壤溶解氧(DO)显著高于对照组和高密度组(P<0.05),中密度组土壤DO略高于低密度组,推测中密度组的扰动能力较其他密度组强;土壤-水界面pH和DO梯度变化明显,低密度组和中密度组土壤-水界面DO变化梯度较高密度组大,分层现象明显,各处理土壤体系DO表现为:土壤上覆水>土壤-水界面>土壤;泥鳅扰动促进了As由土壤向土壤上覆水迁移释放,显著增加了土壤上覆水As含量,其中低密度组促进效果较中密度组和高密度组显著;各处理土壤孔隙水As含量随时间逐渐减小(淹水期除外),从土壤深处向土壤-水界面迁移,总体呈现为土壤表层小于深层,泥鳅扰动能显著减少土壤孔隙水As含量,尤其对低密度组和中密度组土壤孔隙水As含量减少具有一定促进作用,同时也促进了土壤中As向土壤-水界面迁移释放;第7天时,泥鳅组土壤孔隙水As含量变化最显著,贯穿于整个土壤深度,低密度组As含量显著小于中密度组和高密度组,说明低密度组促进效果较中密度组和高密度组显著,这与土壤上覆水结果一致。研究表明,泥鳅扰动显著减少了土壤孔隙水As含量,其中低密度组和中密度组对不同深度土壤孔隙水As含量减少具有一定的促进作用,同时也促进了土壤中As向土壤-水界面迁移释放。

饲料中添加丙氨酰-谷氨酰胺对大鳞副泥鳅生长性能、血清生化指标、肝脏抗氧化能力以及肠道消化酶活性和形态结构的影响

本试验旨在探讨丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln)对大鳞副泥鳅生长性能、血清生化指标、肝脏抗氧化能力以及肠道消化酶活性和形态结构的影响。选用初始体质量为(4.07±0.01) g的大鳞副泥鳅幼苗1 440尾,随机分为6组,每组4个重复,每个重复60尾,各组分别饲喂添加0(对照)、0.25%、0.50%、0.75%、1.00%、1.25%Ala-Gln的饲料。常规饲养8周。结果表明:饲料中添加不同水平Ala-Gln显著影响大鳞副泥鳅的增重率、特定生长率和蛋白质效率,其中,与对照组相比,0.25%~1.00%组均显著升高(P<0.05),与对照组相比,0.75%组达到最大值;与对照组相比,饲料中添加0.75%Ala-Gln显著提高大鳞副泥鳅肝体比和脏体比(P<0.05)。0.75%组血清总抗氧化能力(T-AOC)和免疫球蛋白M(IgM)含量显著提高(P<0.05)。与对照组相比,在饲料中添加0.25%~1.00%Ala-Gln能显著提高大鳞副泥鳅肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),添加0.50%~1.00%Ala-Gln能显著提高肝脏过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),添加0.50%Ala-Gln能显著提高肝脏谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.05),添加0.75%、1.00%Ala-Gln能显著提高肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性(P<0.05),其中,SOD和GPX活性在1.00%组达到最大,CAT活性在0.75%组最大,GSH活性在0.50%组最大;各组肝脏MDA含量在添加Ala-Gln后均显著降低(P<0.05),其中0.75%组最低。在肠道消化酶中,与对照组相比,0.75%和1.00%组胰蛋白酶活性显著升高(P<0.05),且在0.75%组达到最大。与对照组相比,饲料中添加0.75%~1.25%Ala-Gln能显著提高大鳞副泥鳅肠道绒毛高度(P <0.05),添加0.25%~1.25%Ala-Gln能显著提高绒毛宽度(P<0.05),均在添加量为0.75%时达到最大。综上所述,饲料中添加Ala-Gln能促进大鳞副泥鳅生长,提高抗氧化能力和免疫能力,改善肠道形态,促进消化吸收,其中以0.75%添加量效果最佳。

铜和锌对泥鳅外周血红细胞微核率的影响初步研究

为了解铜和锌对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)的遗传毒性,在通过急性毒性试验测定铜和锌对泥鳅48 h的半致死浓度并求得对应的安全浓度基础上,分别设置6个铜处理组(Cu^(2+)浓度为0.00、0.02、0.04、0.08、0.10、0.20 mg/L的硫酸铜溶液)和7个锌处理组(Zn^(2+)浓度为0.0、0.2、0.6、1.1、3.0、5.0、7.0 mg/L的硫酸锌溶液)对泥鳅进行染毒,并分别在染毒后第1天、第3天和第6天时采血制片,研究了铜、锌对泥鳅外周血红细胞微核率的影响。结果表明,泥鳅经硫酸铜和硫酸锌染毒后,其红细胞微核率较对照组都有一定变化,硫酸铜和硫酸锌都能不同程度地引起泥鳅红细胞微核率的升高,而且具有明显的剂量和时间效应。在一定的浓度范围内,微核率与硫酸铜和硫酸锌的浓度呈正相关;但当浓度过高时,微核率反而随浓度的升高而降低。

鄱阳湖泥鳅黑斑形成观察及mitfa表达分析

本研究观察了孵化后1~60日龄泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)中色素细胞的形成、分布和主要类型。孵化后3 h,在泥鳅卵黄囊内首次观察到幼体型黑色素细胞;从仔鱼期到21日龄,泥鳅体表可见幼体型黑色素细胞;从22日龄的幼鱼到成鱼阶段,泥鳅体表可见成体型黑色素细胞。虹彩细胞首先在1日龄泥鳅仔鱼的眼睛中出现,直到12日龄才在体表被观察到。7日龄稚鱼体表出现黄色素细胞。在孵化后2~21d内,泥鳅的黑色素细胞为幼体型黑色素细胞,其形状由星状变化成雪花状,进一步变化成黑点状。从22 d开始,3种花斑类型的泥鳅体表形成不同形态的成体型黑色素细胞。在大花斑泥鳅体表,菊花状黑色素细胞有规律地聚集成大花斑;在小花斑泥鳅体表,圆形和树枝状黑色素细胞聚集形成小花斑;在无花斑泥鳅体表,树突状黑色素细胞分布均匀。利用生物信息学和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对泥鳅色素沉着相关基因mitfa进行了分析,结果显示,小眼畸形相关转录因子a基因(microphtalmia-associated transcription factor a,mitfa)编码的MITFa蛋白含408个氨基酸,相对分子质量为45.68kDa,预测等电点为7.16,包含MITF_TFEB_C_3_N、bHLH-Zip和DUF3371结构域。与各种鱼类的mitf基因序列相比,mitfa保守性较好,序列相似度较高(58.8%~83.2%)。qRT-PCR结果显示,mitfa mRNA在胚胎发育的受精卵阶段达到峰值,背部皮肤的表达水平高于腹部皮肤。本研究初步探究了鄱阳湖泥鳅色素和体表花斑的形成及mitfa基因的表达,为进一步了解泥鳅体色形成的遗传机制奠定了基础。

原花青素对泥鳅生长、免疫功能及抗氧化能力的影响

研究旨在探究原花青素(Oligomeric proanthocyanidins,OPC)对泥鳅生长、免疫功能及抗氧化能力的影响。在基础饲料中分别添加0、100、200、400 mg/kg和800 mg/kg OPC[分别记为对照(CON)、OPC100、OPC200、OPC400、OPC800组],饲喂300尾初始体重为(2.13±0.01)g的泥鳅。进行8周的饲养试验后,测定泥鳅的生长性能、血清免疫指标及肝脏、肠道中抗氧化酶活性。结果表明:随着OPC添加量的增加,泥鳅的特定生长率(SGR)、终末体质量(FBW)、增重率(WG)和蛋白质效率(PER)显著升高(P<0.05),饲料系数(FCR)显著下降;OPC400组泥鳅肥满度显著下降(P<0.05),OPC200、400组的泥鳅肝体比显著降低(P<0.05);OPC400、800组的泥鳅血清中的谷草转氨酶(AST)显著降低(P<0.05);OPC200、400、800组泥鳅血清中的谷丙转氨酶(ALT)显著降低(P<0.05),显著提高血清中补体4(C4)和溶菌酶(LYS)水平(P<0.05),且各组补体3(C3)含量均显著升高(P<0.05);OPC400、800组的肝脏中过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性显著升高(P<0.05);OPC200、400、800组的肠道中CAT、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、GST、超氧化物歧化酶(SOD)及肝脏中SOD和谷胱甘肽(GSH)活性显著高于对照组(P<0.05),且各组肠道中GSH活性均显著提升(P<0.05),而所有组肝脏和肠道的丙二醛(MDA)含量显著下降(P<0.05);综上,饲料中添加200~400 mg/kg OPC能够增强泥鳅生长、改善免疫能力和提高抗氧化能力。

碳酸盐碱度对大鳞副泥鳅胚胎发育和仔鱼活力的影响

为探究大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)胚胎及仔鱼对碳酸盐碱度的适应性,将发育至囊胚期的胚胎分别放置于碳酸盐碱度为0、10、20、30和40 mmol·L^(-1)的水体中培养,记录胚胎的孵化率、孵化时间,统计仔鱼的畸形率、成活率、特定成长率及卵黄囊吸收率,并测定初孵仔鱼的不投饵存活系数(Survival activity index,SAI)。结果显示:1)碳酸盐碱度为10 mmol·L^(-1)时,胚胎孵化率最高,但与对照组差异不显著(P>0.05),碳酸盐碱度在10~20 mmol·L^(-1)时,孵化时间显著短于对照组(P<0.05);2)初孵仔鱼的畸形率随碳酸盐碱度的增加而逐渐升高,3日龄(Days after hatching,dah)仔鱼成活率则随碳酸盐碱度的增加逐渐降低;3)初孵仔鱼全长随碳酸盐碱度的增加先下降后上升,而3 dah仔鱼全长随碳酸盐碱度的增加先上升后下降,其特定生长率及卵黄囊吸收率均呈先升后降的趋势;4)随着碳酸盐碱度的增加,仔鱼SAI先升后降,其中10 mmol·L^(-1)组达到最大值。结果表明,碳酸盐碱度在0~10 mmol·L^(-1)范围内适宜大鳞副泥鳅的胚胎发育及仔鱼生长。

台湾泥鳅精子超低温冷冻保存技术研究

为建立台湾泥鳅精子超低温冷冻保存方法,采用显微镜观察精子活率,流式细胞术检测质膜完整性,研究4种稀释液[Hank′s平衡盐溶液(HBSS)、D-15、D-17、鱼用任氏液],5种抗冻剂(甲醇、乙二醇、丙二醇、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺)在4个体积分数(2.5%、5.0%、7.5%、10.0%),不同平衡时间、熏蒸高度和时间、解冻温度和时间对台湾泥鳅精子超低温冷冻保存的影响。试验结果显示:以Hank′s平衡盐溶液为稀释液的精子活率最高,为(45.28±5.75)%;以5%甲醇作为抗冻剂的台湾泥鳅精子活率和质膜完整比例最高,分别为(51.25±5.03)%和(81.70±2.35)%;最佳平衡时间为30 min,最佳熏蒸高度和时间为9 cm和10 min,最后将冻精在37℃水浴锅中解冻10 s的解冻效果更佳。用冷冻复苏的台湾泥鳅精子进行人工授精,受精率达(68.94±6.22)%。综上,用Hank′s平衡盐溶液稀释台湾泥鳅鲜精,与甲醇1∶1混合至终体积分数为5%,放于4℃平衡30 min,而后装入麦管,在液氮面上方9 cm处熏蒸10 min后投入液氮保存可作为台湾泥鳅精子超低温冷冻的保存方法,解冻时在37℃水浴锅中解冻10 s,可获得更好的解冻效果。

泥鳅抗氧化活性肽的制备、鉴定及其生物活性

泥鳅是亚洲常见的淡水鱼,具有较高的营养和药用价值。本研究采用短小芽孢杆菌4SP5分泌的蛋白酶水解泥鳅肉糜,超滤获得不同分子质量的水解产物。其中,分子质量小于5 ku的组分的抗氧化活性最强。经G25色谱过滤纯化,LC-MS/MS测序和鉴定过滤组分,获得6种潜在的生物活性肽。其中寡肽AFRVPTP具有良好的DPPH自由基清除活性(IC5037μg/mL)、羟自由基清除活性、超氧阴离子清除活性(IC500.73 mg/mL)。此外,该寡肽还具有抑制α-葡萄糖苷酶的作用,IC50为15.86 mg/mL。经在线预测,该寡肽无毒性和致敏性。分子对接结果表明,AFRVPTP通过与α-葡萄糖苷酶催化域的关键氨基酸结合而发挥作用,其可与Keap1活性口袋中的关键氨基酸残基(Asn387、Arg415、Tyr334、Arg380、Gln530、Tyr525、Arg483和Ser508)相互作用,表明该寡肽具有调节体内抗氧化作用的潜力。研究结果为泥鳅的精深加工提供参考依据。

除草剂丁草胺对泥鳅体内6种代谢与免疫相关酶的抑制作用

目的研究除草剂丁草胺对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)体内重要器官过氧化物酶(POX)、非特异性酯酶(NSE)、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和腺苷三磷酸酶(ATPase)等6种代谢与免疫相关酶活力的影响。方法将泥鳅暴露在不同浓度的丁草胺中96 h,解剖取其心脏、肝胰脏、鳃、头肾、胃和肠等6种器官,采用冰冻切片、酶组织化学及光密度分析技术检测酶活力变化。结果POX在头肾中活性显著较高,其余器官中活性均较低;高浓度丁草胺显著抑制头肾POX活性,但显著促进肝胰脏、胃和肠POX活性。NSE在肝胰脏中活性显著较高,心脏中活性显著较低;高浓度丁草胺对除心脏和胃以外的体内器官NSE活性具有显著抑制作用。ALP在胃中活性显著较高,心脏和头肾中未检测出明显的酶活性;高浓度丁草胺显著抑制胃和肠ALP活性,对肝胰脏和鳃ALP活性无显著影响。ACP在胃和肠中活性显著较高,心脏中活性显著较低;高浓度丁草胺显著抑制肝胰脏、鳃、头肾、胃和肠ACP活性,对心脏ACP活性无显著影响。SDH在心脏中活性显著较高,鳃和头肾中未检测出明显的酶活性;高浓度丁草胺显著抑制心脏、肝胰脏和胃SDH活性,对肠SDH活性无显著影响。ATPase在心脏中活性显著较高,头肾和肠中活性显著较低;高浓度丁草胺显著抑制心脏、肝胰脏和头肾ATPase活性,但对胃和肠ATPase活性具有显著促进作用。结论丁草胺可能通过抑制心脏SDH和ATPase活性影响泥鳅的血液循环,通过抑制胃和肠ALP和ACP活性降低泥鳅对营养物质的消化和吸收能力,通过抑制肝胰和头肾NSE、ACP和ATPase活性损害泥鳅的解毒与免疫防御功能。

泥鳅抗菌肽制备及其抑制致鳗弧菌作用

为提升泥鳅开发利用价值,开发新的抗菌活性成分,利用胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶对泥鳅肉糜进行酶解,通过分离和超滤提取泥鳅酶解产物。结果表明,木瓜蛋白酶的酶解产物M1(<5 kDa组分)对常见致病菌嗜水气单胞菌、副溶血性弧菌、哈维氏弧菌、鳗弧菌、温和水气单胞菌等具有抗菌作用。抗菌物质的分子量小于5 kDa,其抑制鳗弧菌的IC50值为15.76 mg/mL,可抑制鳗弧菌生物膜的形成。推测其通过破坏鳗弧菌的细胞膜发挥其抗菌作用。

杀菌剂甲基托布津和多菌灵对泥鳅的急性毒性及肝脏酶活性的影响

为了解甲基托布津(Methyltobuzine,TM)和多菌灵(Carbendazim,BCM)对水生动物的毒性效应,在水温(25±2)℃下,将平均体长(6.3±0.7)cm和平均质量(2.4±0.5)g的6月龄泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)置于65 mg·L^(-1)、85 mg·L^(-1)、112 mg·L^(-1)、146 mg·L^(-1)、191 mg·L^(-1)TM和26 mg·L^(-1)、34 mg·L^(-1)、45 mg·L^(-1)、58 mg·L^(-1)、76mg·L^(-1)BCM下,采用半静水实验法,研究TM和BCM的24 h、48 h、72 h、96 h的半致死浓度(LC50)和24 h安全浓度(SC);并在0.05 mg·L^(-1)、0.50 mg·L^(-1)、5.00 mg·L^(-1)TM和0.02 mg·L^(-1)、0.10 mg·L^(-1)、0.50 mg·L^(-1)、2.50 mg·L^(-1)BCM中胁迫7 d、14 d、21 d、28 d,检测泥鳅肝脏过氧化物酶(POD)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性变化。结果表明,TM对泥鳅的24 h、48 h、72 h、96 h LC50分别为35.48 mg·L^(-1)、26.98 mg·L^(-1)、17.25 mg·L^(-1)和10.03 mg·L^(-1),24 h SC为6.16 mg·L^(-1);BCM对泥鳅的24 h、48 h、72 h、96 h LC50分别为23.53 mg·L^(-1)、17.66 mg·L^(-1)、6.54 mg·L^(-1)和3.58 mg·L^(-1),24 h SC为3.98 mg·L^(-1);TM和BCM胁迫下POD、GOT、GPT活性随浓度升高呈现先上升后下降的趋势,随着胁迫时间延长各参数的活性呈下调趋势。BCM处理组较TM处理组变化趋势更显著。综上所述,TM对6月龄泥鳅具有低毒性作用,BCM对6月龄泥鳅则具有中等毒性作用;一定剂量TM和BCM长期胁迫对泥鳅造成严重影响,对POD、GPT、GOT活性具有明显抑制作用,随胁迫时间延长抑制加剧,其中BCM较TM抑制作用更强。

低酯果胶和玉米淀粉对泥鳅肌原纤维蛋白凝胶特性的影响

该研究旨在探讨外源添加物对肌原纤维蛋白凝胶特性的影响,以改善淡水鱼糜的性能。将泥鳅肌原纤维蛋白与不同含量(0%~25%)的低酯果胶和玉米淀粉混合制备复合胶,采用质构仪、色差分析仪、扫描电子显微镜和红外光谱仪对其性能进行研究。结果表明,加入低酯果胶后,凝胶硬度、强度和持水力显著升高,蒸煮损失显著降低;添加玉米淀粉后,凝胶强度和持水力显著提高。同时,低酯果胶添加量和玉米淀粉添加量分别为25%和10%时,凝胶网络结构最紧凑有序。红外结果显示,添加低酯果胶和玉米淀粉能促进热凝胶过程中β-折叠结构的形成。该研究结果可为泥鳅鱼糜的加工提供理论指导。

低盐驯化对台湾泥鳅抗氧化能力的影响

台湾泥鳅对低盐度具有一定的耐受性,探讨通过低盐驯化来提高其耐盐特性的可行性。实验分为盐度骤变实验(0,4,8,12)和盐度驯化实验(每7 d增加盐度4,分别标记为0,4,4-8,4-12,4-8-12)两个部分,测定其肌肉组织在不同时间点的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及过氧化氢(H_(2)O_(2))与丙二醛(MDA)含量。实验结果表明:(1)盐度骤变实验中,各盐度组的SOD与CAT活性在1 d内呈先升高后下降趋势;盐度8与12组的SOD活性第6 d时显著低于对照组(P<0.05),而CAT活性与对照组没有差异(P>0.05);各个盐度处理组的H_(2)O_(2)含量呈缓慢上升趋势;MDA含量在6 h内快速上升,随后下降并在第3 d时恢复至正常水平。(2)盐度驯化实验中,盐度4-12组的H_(2)O_(2)与MDA含量、SOD与CAT酶活性在1 d内显著高于盐度4-8-12组(P<0.05)。结果表明,盐度升高对台湾泥鳅生理具有显著的影响,并随盐度升高产生了一定的氧化胁迫作用。同时台湾泥鳅可以通过生理调节表现出较强的耐盐能力和适应性;多级盐度驯化有利于缓解高盐度的氧化胁迫。因此,以适当方式提高养殖水体盐度,有利于促进台湾泥鳅适应低盐度水体的能力,提高其在盐碱水体中的成活率和产量,从而为盐碱水体的综合利用提供一个新的养殖品种。

杂交3倍体泥鳅鳍细胞系染色体组构成研究

通过天然4倍体(4n=100)和2倍体(2n=50)泥鳅杂交创制不同子代杂交组合(4n♀×2n♂、2n♀×4n♂)。以传代20次的杂交3倍体泥鳅鳍细胞系为材料,采用常规冷滴片法制备染色体标本,通过吉姆萨染色确定数目及核型;通过银染法及CMA_3/DA/DAPI三重荧光染色技术对其进行带型分析。结果显示:正反交3倍体鳍细胞系的染色体分裂相数目为3n=75,核型公式15m+6sm+54t,NF=96;正反交3倍体泥鳅鳍细胞系的染色体分裂相中显示有3个银染点,均位于第1组中部着丝粒染色体(M1)短臂的端部区域;正反交3倍体泥鳅鳍细胞的染色体中期分裂相中显示有3个CMA_3荧光信号点,均位于M1区域。研究表明:杂交3倍体泥鳅鳍细胞经细胞培养传代20次后的染色体组成未发生改变,其染色体数目、核型和带型与3倍体泥鳅其他体细胞结果一致。