溴化乙锭标记DNA电化学探针的研究

以乙基 -( 3 -二甲基丙基 )碳化二亚胺盐酸盐 ( EDC)为偶联活化剂 ,将电化学活性物质溴化乙锭( Ethidium bromide,EB)成功地标记在人工合成的含有 2 1个碱基的寡聚 DNA片段上 ,制备成 EB标记 DNA探针 ;用电化学方法将待测样品 DNA片段固定在石墨电极表面 ,在一定的温度、p H值和离子强度条件下与EB标记 DNA探针进行杂交反应 ,从而对靶序列 DNA片段进行识别和测定 .此外 ,还讨论了该探针的电化学性质、荧光光谱、待测 DNA片段在石墨电极表面的电化学固定、 DNA链碱基长度对 EB标记 DNA电化学探针的影响以及探针的选择性、重现性和寿命 。

溴化乙锭探针研究劳氏青莲与脱氧核糖核酸的相互作用

用光谱探针溴化乙锭对劳氏青莲与脱氧核糖核酸的作用机制进行了研究。通过对体系的荧光光谱、吸收光谱及共振光散射光谱等方面的研究,结果表明,在pH为7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,劳氏青莲与脱氧核糖核酸之间存在着嵌插作用,其结合常数为1.0×105L.mol-1。

黄连素、溴化乙锭、十二烷基硫酸钠对痢疾杆菌耐药质粒的消除作用

比较了黄连素二硫酸盐 (BDH)、溴化乙锭 (EB)、十二烷基硫酸钠 (SDS)不同浓度、不同处理时间和方式对痢疾杆菌耐药质粒的消除作用。结果表明 :BDH对痢疾杆菌耐药质粒的消除作用较小 ;EB对痢疾杆菌的耐药质粒有较好的消除作用 ,以连续培育法处理 1 2 0 h,消除率可达 85% ;SDS对痢疾杆菌的耐药质粒有一定的消除作用 ,以高温高浓度双重处理交替培养 ,消除率可达 2 7%。

溴化乙锭与DNA相互作用的电化学及紫外-可见光谱研究

研究了溴化乙锭在浸蜡光谱石墨电极上的电化学行为 ,用电化学循环伏安法及紫外 -可见光谱法对溴化乙锭与 DNA的作用进行了研究 ,得出溴化乙锭与

小檗碱和溴化乙锭与DNA的光谱学作用研究

利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、琼脂糖凝胶电泳方法研究了小檗碱(berberine)和溴化乙锭(EB)与ct-DNA的光谱学作用.在ct-DNA存在时,berberine和EB的荧光强度都有较大的提高,pH的改变对二者荧光光谱的发射峰位与强度影响不大;紫外-可见吸收光谱随ct-DNA浓度的增加,表现出减色效应;二者都使ct-DNA的圆二色谱正负峰的吸收强度有所增加;琼脂糖凝胶电泳实验表明,EB-DNA体系的发光强度高于berberine-DNA体系.在DNA的定量测定中,可用无毒、副作用的小檗碱代替有致癌性的溴化乙锭,为安全、无环境污染、定量测定DNA提供了新试剂使用基础.

改良溴化乙锭染色法快速检测基因组DNA

目的探讨一种耗时少、检出率高的基因组DNA检测方法。方法采用改良的溴化乙锭染色法检测提取到的样本基因组DNA。采用分光光度仪进行敏感性验证,聚合酶链式反应确认该方法能否用来检测PCR产物。结果改良的溴化乙锭染色法显著减少基因组DNA的上样量,提高基因组DNA的检测敏感性,节省操作时间,无需loading buffer,并可粗略估计基因组DNA浓度。结论改良的溴化乙锭染色法只适用于初筛样本基因组DNA,不能用于评估DNA片段的长度。

高效液相色谱电化学法检测PCR实验室环境中溴化乙锭残量

目的：建立检测分子生物学及临床PCR实验室环境中溴化乙锭残量的高效液相色谱电化学法。方法：以正己烷为采样载体对PCR实验室中的操作台、仪器载面等区域进行采样，样本用HCl酸化处理，以CLEAN—UP氧化铝固相萃取柱对样品进行固相萃取，乙腈-乙酸钠溶液作为流动相从Symmetry C8柱上分离和测定溴化乙锭，并借助于电化学检测器于＋750 mV检测。结果：标准曲线的线性范围为5．0～500．0ng／L，平均相对标准偏差为4．8％，检出限为2.9ng／L，平均回收率为87．2％～106．2％。结论：此方法准确、简单、快速、灵敏，适用环境中溴化乙锭残量的检测。

核酸与溴化乙锭相互作用的光谱研究

DNA自身的荧光强度很弱，实验中常常采用荧光探针来获得DNA的结构和含量的信息。溴化乙锭是一种具有平面结构的小分子物质，它能嵌入DNA的双链中，改变DNA分子构型，进而破坏其模板作用，阻碍DNA的复制。已对溴化乙锭作为DNA的荧光探针进行了大量研究。本实验研究了DNA与EB共存时的紫外和荧光光谱，探讨了两者相互作用机理。

活性炭搭载TiO_2降解溴化乙锭的试验研究

不同光源、光照时间、催化剂的用量和溶液的pH来分析降解溴化乙锭(EB)的效率,同时比较了纳米TiO2降解EB、掺杂Fe3+的TiO2降解EB和负载活性炭的TiO2降解EB的效率.实验结果表明:TiO2对EB的降解具有较好的效果.而在制备TiO2催化剂的时候,将TiO2负载到活性炭上对EB的降解效果最好,而且便于催化剂的回收.对于20 mL,1μg/mL的EB溶液,用60mgTiO2/AC作为催化剂、溶液pH=9.6、在紫外灯下照射2.5h,能达到最佳的降解效果.

基于CdTe量子点和溴化乙锭-DNA共振能量转移的核酸检测

目的:基于CdTe量子点和溴化乙锭-DNA共振能量转移的核酸定量检测。方法:通过EDC交联法制备了量子点-核酸探针,该探针与溴化乙锭-DNA通过DNA的互补配对形成荧光共振能量转移模型,借助这个模型进行核酸的定量检测。结果:该法对核酸目标链检测的线性范围为0.025-0.188μmol/L,其相关系数为0.997,最低定量限为0.025μmol/L。结论:基于CdTe量子点和溴化乙锭-DNA共振能量转移模型可以用于DNA的定量检测。

分子生物学实验室中溴化乙锭的安全使用与管理

本文阐述了分子生物学实验室中溴化乙锭(EB)使用存在的问题,以及如何落实管理措施来保障实验室的安全运行,避免操作不当,造成EB对环境的污染和对实验人员的健康危害。

溴化乙锭诱导的脱髓鞘模型大鼠胼胝体内MCT1表达的形态学观察

目的:观察单羧酸转运体-1(monocarboxylate transporter-1,MCT1)在溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)诱导的脱髓鞘模型大鼠胼胝体(corpus callosum,CC)内的表达变化。方法:选用正常成年SD大鼠,随机分为正常组、溶剂组和EB组,将0.05%的EB注射到大鼠胼胝体制作脱髓鞘模型,Luxol Fast Blue(LFB)染色观察胼胝体中的髓鞘是否脱失,免疫荧光组织化学染色技术检测注射位点MCT1的表达情况。结果:与正常组相比,注射EB14 d后注射部位胼胝体的LFB染色极浅且不均匀;通过MCT1分别与环核苷酸磷酸二酯酶(cyclic nucleotide phosphodiesterase,CNPase)和GFAP免疫荧光双标可以看出,在正常大鼠胼胝体中,大部分表达MCT1的细胞为CNPase+的少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs),少部分表达MCT1的细胞是GFAP+细胞;注射EB14 d后,EB注射部位胼胝体中CNPase的表达明显减弱,且CNPase+细胞中MCT1的表达也减弱,而GFAP的表达则增强,且所有GFAP+细胞都表达MCT1。结论:在正常SD大鼠胼胝体中,MCT1主要在少突胶质细胞中表达,EB诱导胼胝体脱髓鞘后,MCT1主要在星形胶质细胞中表达。

溴化乙锭对吸水链霉菌产生除莠霉素的影响

从南京土壤中分离到一株吸水链霉菌，命名为ＮＡＰ－０５，该菌株能产生除莠霉素，并且在菌体细胞内存在另一种初步鉴定为聚醚类抗生素的物质。该菌还能分泌淀粉酶。用嵌入染料如溴化乙锭（ＥＢ）等处理该菌株，发现ＥＢ处理株大部分仍保持产抗能力，而用吖啶橙（ＡＯ）处理亲株后，大部分的处理株失去除莠霉素产生能力。用原生质体再生方法处理ＮＡＰ－０５，发现多数再生株的产抗能力下降，提示ＮＡＰ－０５菌株的除莠霉素生物合成调节可能受到染色体外因子的影响。

散射共振光谱法优化DNA去除溴化乙锭污染物

文章利用紫外吸收光谱研究了DNA与溴化乙锭(EtBr)的相互作用、散射共振光谱研究了二者的相互作用强度及影响因素,最后通过磁珠分离EtBr-DNA复合物以去除EtBr污染物。紫外可见吸收光谱结果表明DNA与EtBr的结合模式为.嵌插结合。散射共振光谱和EtBr去除实验结果表明,CaCl_(2)、SDS、CTAB、葡萄糖和尿素能够促进二者的结合,使DNA结合饱和值变大,提高EtBr的去除效率;NaCl抑制二者的结合,使DNA结合饱和值变小,降低EtBr的去除效率。研究为高效去除EtBr污染物提供新见解。

碲化镉量子点光催化降解溴化乙锭的研究

以巯基乙酸为稳定剂,水相合成出不同粒径的碲化镉量子点,对其进行适当的光照处理,以提升其光学性质和稳定性.将其用作光催化剂,以紫外灯为光源,降解具有强诱变作用的常用核酸荧光染料——溴化乙锭.考察了光照时间和溶液pH对降解率的影响.以溴化乙锭在620 nm处的特征荧光发射峰为参数表征降解率,在反应4 h后.对15 mg/L溴化乙锭水溶液的降解率近90%,同时,对琼脂糖凝胶中的溴化乙锭也有降解作用.

纳米ZnO光催化降解溴化乙锭(EB)的初步研究

对ZnO光催化降解溴化乙锭(EB)中的光源、反应介质、pH值、光催化剂用量、光照时间及氧化剂的加入等因素进行了考察.结果表明,在日光和紫外光照射下,EB都能得到较好的降解.在EB初始浓度50mg·l-1,pH9的水溶液中,紫外光照射240min,ZnO(80mg)光催化降解EB的降解率可达到92·9%.

溴化乙锭对布鲁姆综合症解旋酶生物学特性的影响

目的研究溴化乙锭(EB)对BLM解旋酶的生物学特性的影响。方法应用荧光偏振技术研究EB对BLM解旋酶的DNA结合活性与解链活性的影响;应用自由磷检测技术研究EB对BLM解旋酶的ATPase活性的影响;应用紫外吸收光谱法研究EB对BLM解旋酶的构象的影响。结果EB可完全抑制BLM解旋酶的DNA结合活性,当双链DNA与单链DNA作为底物时,Ci值分别为(21.3±0.7)μmol.L-1和(3.3±0.3)μmol.L-1;可完全抑制BLM解旋酶的解链活性,Ci值为(9.0±0.3)μmol.L-1;对BLM解旋酶的ATPase活性有抑制作用,但差异无显著性;可改变BLM解旋酶的构象,最大吸收峰发生红移。结论 EB可以结合BLM解旋酶并改变其构象,抑制其与DNA的结合,从而抑制BLM解旋酶的生物学活性。

Fe^(3+)/TiO_2光催化降解溴化乙锭的研究

The possibility using anatase titanium dioxide as a photocatalyst for the degradation of EB was investigated in this article. Factors including light sources, pH, irradiation time and the usage of catalyst that influenced the process were investigated. The technique established has been employed for the treatment of EB present in discharged water and electrophoresis gel with satisfied result, indicating that this method is not only simple, but also effective, and can be possibly applied in practice.

溴化乙锭诱导发光细菌暗变株回复突变的研究

从明亮发光杆菌（A2）中分离得到一种自发暗变株（S1），其表型发光强度小于A2的1／10000。溴化乙锭（EB）（0．6μg／ml）在24h内能强烈地诱导S1回复发光，引起S1的回复发光突变，显著提高了S1的回复发光突变率。其发光突变株具有稳定的遗传学性质。研究表明这种突变是在DNA或DNA的转录水平上发生的。用S1可以简便、快速、灵敏地检测出EB的致突变作用。

用溴化乙锭改良脐带血染色体制备方法

目的用溴化乙锭改良脐带血染色体制备。方法采用标本放置过夜,加入一定量的溴化乙锭等方法。结果改良法脐带血染色体分散良好、长度适中、G显带深浅带纹清晰,提高了染色体核型分析结果的准确性和可靠性。