单抗介导牛海绵状脑病免疫组化检测方法的建立及其应用

中国鲁西黄牛重组 PrPc成熟蛋白免疫 PrPc基因敲除小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,经免疫组织化学试验筛选出单抗4C11可特异识别牛海绵状脑病标准阳性牛脑样品上PrPSc核心片段。以单抗4C11为核心试剂,建立了单抗介导牛海绵状脑病免疫组织化学检测方法,并已颁布成为中华人民共和国国家标准 GB/T19180-2003(牛海绵状脑病诊断技术)。已应用于中国牛海绵状脑病的持续监测,至 2002 年底共检测了全国各地 3344 份牛脑样品,结果全为阴性,且每批次所设的阳性对照样品检测结果均呈阳性,与 Roche 公司单抗 6H4 检测结果的符合率为 100%。

免疫印迹法检测牛海绵状脑病和羊瘙痒病

用大肠杆菌表达的牛朊病毒正常成熟蛋白 (BoPrPC)免疫新西兰白兔 ,获得了与朊病毒蛋白 (PrP)反应的抗体T1。根据致病型朊病毒 (PrPSC)能抵抗蛋白酶消化的特性 ,用蛋白酶K消化脑组织提取物 ,以抗体T1进行免疫印迹反应 ,结果表明从接种羊瘙痒病朊病毒 2 6 3K的金黄地鼠脑组织提取物内检测到抗蛋白酶K消化的致病型PrPSC ,而正常金黄地鼠脑组织中没有抗蛋白酶消化的蛋白。以我国正常牛羊为材料 ,制备其脑组织提取物 ,用上述方法和抗体T1进行检测 ,结果没有发现抗蛋白酶K的任何蛋白存在 ,说明没有牛海绵状脑病和羊瘙痒病存在。用 1A8抗体也获得了同样的结果。这些结果表明可以用自制的抗血清检疫牛海绵状脑病和羊瘙痒病 。

牛海绵状脑病几种免疫学检测方法的比较

本文对免疫组化、免疫转印（Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）３种牛海绵状脑病（ＢＳＥ）免疫学检测方法进行了综合比较。通过比较发现免疫组化及免疫转印法与标准品真实情况的符合率均为１００％，ＥＬＩＳＡ的符合率稍差。免疫组化法操作简单、结果容易判断、价格低廉，是较适合我国使用的检测方法。用该方法对我国部分样品进行检测，结果均为阴性。

全球牛海绵状脑病流行特点及防控概况

为增强牛海绵状脑病防范的针对性,本文全面介绍了1986年以来全球BSE的流行情况;简要分析近年来全球BSE流行的总体趋势和特点,如BSE发病国家持续增多,每年发病国家和病例数逐渐减少,BSE病例年龄持续增大,非典型病例持续增多等;总结BSE防控的主要措施,如禁止进口风险动物及其产品、严格执行饲料禁令、剔除特殊风险物质、开展BSE监测以及进行宣传培训等;简述了BSE风险状况认证以及变异型克雅氏症vCJD(人类BSE)发生情况;最后对全文进行小结,提出进一步防范BSE传入的建议。

中国牛海绵状脑病风险评估简报

为进一步完善疯牛病风险防范工作,保护养牛业健康和公共卫生安全,促进牛及其产品国际贸易,按照国际动物卫生组织关于疯牛病风险评估步骤、内容、原则和要求,对我国疯牛病风险状况进行评估。传入风险方面,2006—2012年间,我国共进口反刍动物源性肉骨粉、牛羊脂肪、活牛、油渣、牛内脏等风险产品分别为539209吨、2194135吨、393974头、20872吨、41570吨,均来自未发生疯牛病或疯牛病风险可忽略国家或地区,同时从26个国家和地区进口其他配制的动物饲料535072吨,均不含有反刍动物源性成分;暴露风险方面,我国实施了完全饲料禁令政策,禁止在反刍动物饲料中使用动物源性成分,制定了完善的防止动物源性物质进入反刍动物饲料链的法律法规体系并得到有效执行,结合我国牛群结构、饲养方式及传统的社会消费习惯,判断反刍动物源性物质进入我国牛群生产体系且循环的可能性极低;BSE监测与监视方面,我国将疯牛病列为一类强制性报告疫病,通过大量宣传培训工作确保了监测体系发现疯牛病病例的敏感性,连续13年开展疯牛病监测没有发现病例,近7年监测分值达43.5万分,超过OIE规定的标准。综合评估认为,我国已经达到了OIE规定的疯牛病最低风险等级——风险可忽略国家标准。

加拿大牛海绵状脑病防控状况简介

2005年世界动物卫生组织(OIE)将各国发生牛海绵状脑病(BSE)的风险划分为BSE风险可忽略国家,BSE风险可控制国家,BSE风险不确定国家,2007年5月OIE认定加拿大为疯牛病风险可控制国家。文章结合实地考察情况和相关文献资料,从牛和牛产品的进口政策、BSE监测、饲料禁令、特殊风险物质的去除、牛身份识别体系以及目前加拿大的牛和牛肉贸易状况等方面介绍了加拿大疯牛病防控措施。

新型克-雅氏病是人的牛海绵状脑病

本文在概述人朊病毒的基础上 ,重点阐述新型克 -雅氏病与早先已知的各种人朊病毒病的区别和它是由牛海绵状脑病朊病毒引起的证据 ,并对牛海绵状脑病并非源于痒病而是原于牛散发性朊病毒病。

牛海绵状脑病

牛海绵状脑病(Bovine Spongiform Encephalopathy,BSE),又称'疯牛病”,是由传染因子引起的牛的一种进行性神经系统疾病[1].该病的主要特征是牛脑发生海棉状病变,并伴随大脑功能退化,临床表现为神经错乱、运动失调、痴呆和死亡.

牛海绵状脑病（俗称“疯牛病”）（BSE）──WHO关于BSE与V－CJD相关的专家研讨会

牛海绵状脑病（俗称“疯牛病”）（ＢＳＥ）──ＷＨＯ关于ＢＳＥ与Ｖ－ＣＪＤ相关的专家研讨会徐兆炜摘译ＷＨＯ于１９９６年４月２日在日内瓦召开了专家研讨会，会上各国专家讨论了ＢＳＥ公共卫生问题和新型海绵状脑病─—克罗伊茨费尔特一雅可夫氏病（Ｖ－ＣＪＤ）出现...

非典型牛海绵状脑病研究进展

非典型牛海绵状脑病为新发现的一种朊病毒病,通常发生于老牛,与典型牛海绵状脑病在病理表型、分子表型和生物表型方面不同。本文结合已发表的文献,对非典型牛海绵状脑病的发现、病原特性、流行病学、检测、发病机理、动物模型研究和实验感染等方面的最新研究进展进行了概述,以期增强人们对该病的认识,并为我国防控该病提供借鉴。

免疫组织化学方法检测牛海绵状脑病(BSE)和羊痒病(Scrapie)

按照本实验室建立的牛海绵状脑病免疫组织化学方法 ,将自制单克隆抗体4C11与PK酶消化处理的牛海绵状脑病阳性切片和羊痒病阳性切片进行反应 ,发现单抗4C11不仅能与牛海绵状脑病阳性切片发生强烈的免疫反应 ,而且也能与羊痒病阳性切片发生强烈的免疫反应。从阳性切片和阴性切片的实验来看 ,单克隆抗体4C11没有非特异性染色反应 ,并且也没有背景染色。用瑞士进口单抗6H4进行的对照实验获得了同样的结果。因此 ,可以用自制的单克隆抗体4C11替代昂贵的进口单抗6H4来监测我国的牛海绵状脑病和羊痒病。

朊病毒与牛海绵状脑病

朊病毒是一种裸露的、小分子量、有侵染性的RNA或蛋白质分子。人和哺乳动物的多种神经系统疾病与朊病毒有关。牛海绵状脑病(Bovin spongiform encephalopathy,BSE)病毒与目前在英国发现的一种新型的人防病毒(vCJDV),是同一种病毒。