茶多酚对0~18周龄狮头鹅生长性能、屠宰性能及肌肉品质的影响

本试验旨在探究饲粮中添加茶多酚对0~18周龄狮头鹅生长性能、屠宰性能、肌肉品质及抗氧化能力的影响。试验采用单因素完全随机试验设计,选取1日龄体重相近的健康雄性狮头鹅360只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复20只鹅。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ和Ⅱ组分别在基础饲粮中添加500和1000 mg/kg茶多酚,试验期18周。结果表明:1)与对照组相比,各试验组13~18周龄料重比均显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,各试验组腹脂率均显著降低(P<0.05)。3)与对照组相比,各试验组胸肌24 h红度(a*)值、腿肌45 min a*值均显著提高(P<0.05),胸肌剪切力显著降低(P<0.05);试验Ⅱ组腿肌pH 45 min和pH 24 h显著提高(P<0.05),腿肌24 h亮度(L*)值和胸肌滴水损失显著降低(P<0.05)。4)与对照组相比,各试验组胸肌和腿肌粗灰分含量均显著降低(P<0.05),试验Ⅱ组胸肌水分含量显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,各试验组胸肌和腿肌中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均显著提高(P<0.05),腿肌谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性显著提高(P<0.05),胸肌丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);试验Ⅰ组胸肌总抗氧化能力(T-AOC)显著提高(P<0.05),试验Ⅱ组腿肌T-AOC显著提高(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加茶多酚可提高狮头鹅饲料报酬,改善肉品质,降低腹脂率,并提高肌肉抗氧化能力。在本试验条件下,在0~18周龄狮头鹅饲粮中添加1000 mg/kg茶多酚的应用效果相对较优。

二代基因组测序鉴别狮头鹅拷贝数变异及其与体重体尺关联

【背景】许多研究报道拷贝数变异(copy number variation,CNV)是一种长度在50 bp至5 Mb之间的缺失或插入,可以影响基因的表达,从而影响动物的生长发育特征,与畜禽重要经济性状有紧密的关联,是一种重要分子遗传标记之一。狮头鹅是世界体型最大鹅种之一,原产地为广东饶平,为广东卤鹅的原材料。但是,至今还没有关于狮头鹅CNV与体重体尺的全基因组关联研究报道。【目的】通过二代基因组测序数据鉴别狮头鹅的CNV和拷贝数变异区域(copy number variation region,CNVR)在基因组上分布情况,通过CNV与体重体尺性状的关联分析,挖掘显著影响体重体尺的CNV及候选基因,为狮头鹅后续的分子育种研究提供参考。【方法】试验共收集了来自汕头市白沙禽畜原种研究所的111只狮头鹅,其中公鹅20只,母鹅91只。所有鹅均采用统一标准饲养管理。对111只鹅进行体重体尺测定,体尺性状包括体斜长、胸深、胸宽等9个指标。本试验对111只鹅进行体重体尺测定和二代基因组测序(5×)。测序数据利用SOAPnuke进行质控,软件Speedseq中的BWA模块进行序列比对,采用Speedseq中的LUMPY和CNVnator模块检测结构变异(structure variation,SV),从SV中筛选CNV。本试验用软件SVtools对CNV进行基因分型,然后采用单标记混合模型开展分型CNV与体重体尺的关联分析。采用染色体显著性水平(即0.05/染色体CNV数目)作为定义与性状显著关联CNV的阈值,对显著CNV位点及上下游50 kb进行基因注释,找到影响狮头鹅体重体尺关联的候选基因。用R包CNVrd2对物理距离小于1 Mb的染色体水平显著CNV和染色体水平显著SNP做连锁不平衡(linkage disequilibrium,LD)分析。【结果】对于111只狮头鹅,共检测出99158个CNV,其中缺失型94560个,重复型4598个,CNV平均长度11858 bp,大部分(74.06%)CNV长度位于50—1000 bp区间。CNVR共5225个,包括缺失型5029个,重复型110个和混合型86个,CNVR平均长度为7136 bp,大部分(81.03%)CNVR长度位于50—1000 bp区间。功能注释发现46.92%CNVR位于基因间区域,10.30%位于基因上游,9.35%位于基因下游。准确进行基因分型的CNV有6217个,通过10个体重体尺性状与这些CNV关联分析,共检测55个染色体显著性水平的CNV位点,注释到45个候选基因。在45个候选基因中,发现SETD2、UBR7、G2E3等10个基因同时影响两个及两个以上性状。染色体水平显著CNV独立于染色体水平显著SNP影响体重体尺性状(r^(2)<0.02)。【结论】通过二代基因组测序首次报道狮头鹅基因组CNV和CNVR分布及CNV和体重体尺关联的情况。本试验共发现影响体重体尺的45个候选基因,其中11个已被报道与畜禽生长信号通路有关,分别是SETD2、UBR7、ASB1和HDAC4参与肌肉的增殖、分化和代谢;G2E3、P3C2B、NOVA1和PDE1B参与脂肪生成和肥胖;ILKAP与调节生长因子有关;KIF1B参与骨代谢;ZFP37参与糖原代谢。这些为后续狮头鹅生长性能的分子遗传机制解析和分子标记挖掘奠定基础。

狮头鹅群体遗传多样性和体重体尺全基因组关联分析

旨在探究狮头鹅群体遗传多样性和体重体尺性状全基因关联分析。本试验随机选取2年龄休产状态的狮头鹅111只(公鹅20、母鹅91只),进行体重和体尺指标表型测定和二代基因组测序(5×),对测序数据进行SNPs位点检测,计算狮头鹅群体遗传多样性指标,利用单标记回归混合模型开展SNPs与体重体尺性状的关联分析。本试验采用Bonferroni法校正,即全基因组水平阈值(0.05/总SNPs)和染色体水平阈值(0.05/染色体SNP数目),确定显著性SNPs位点,并对染色体水平显著性SNPs位点上、下游50 kb进行基因注释。经过质控,共计获得7577552个有效SNPs用于进一步分析。群体多样性分析显示,历史有效群体含量、最小等位基因频率、多态信息含量、观察杂合度、期望杂合度和近交系数分别为234、0.25、0.34、0.26、0.34和0.22。共检测出6164个连续纯合片段,长度在1.0~2.0 Mb的纯合片段占比最多(74.4%)。体重体尺性状的全基因组关联分析发现38个染色体水平显著性SNPs,涉及90个基因。其中影响生长发育相关的基因有7个,即D 2HDH、THAP4、ESPNL、EPT1、TNPO3、MCF 2L、AIP 1。本研究利用二代基因组测序数据发现,狮头鹅群体存在一定程度近交现象,挖掘出与狮头鹅体重和体尺性状相关的7个候选基因,可为后续狮头鹅群体保种、功能基因研究和分子育种开展提供重要参考。

付晶:牢记使命 砥砺前行 助力潮州 狮头鹅产业高质量发展

“奋进百千万,有我轻骑兵”。去年12月12日,在“2023广东省农技服务‘轻骑兵’高质量发展论坛”上,仲恺农业工程学院(以下简称“仲恺学院”)付晶教授荣颁2023年广东省农技服务轻骑兵“十大先锋人物”奖项。作为农村科技特派员,付晶这名东北籍“鹅”教授长期驻扎在潮州市饶平县狮头鹅产业一线,坚持将科技攻关和技术服务“一竿子插到底”,与农民同吃同住同劳作,致力于解决基层农技推广“最后一公里”和农产品上行“最先一公里”问题,在实施“百县千镇万村高质量发展工程”中走在前、做表率,为潮州狮头鹅产业高质量发展作出了重要贡献。

狮头鹅种质资源概述及保护与开发利用建议

狮头鹅原产于中国广东省潮州市饶平县浮滨镇溪楼村,为广东省四大地方灰羽鹅种之一,是中国最大的鹅种,也是世界上体型最大的鹅种之一,具有独特的体型外貌特征与很高的经济价值。该文介绍了狮头鹅的品种特征与性能、品种形成历史与饮食文化、品种保护和利用现状,分析了其存在的品种纯度下降、缺乏统一饲养管理标准等问题,并就品种资源保护和开发利用提出了相关建议,以期促进狮头鹅种质资源的保护和开发利用。

深化产学研合作“狮头鹅”育种开启新征程

狮头鹅是我国著名的水禽类地方品种,主要产于广东潮汕地区,因成年公鹅肉瘤发达头部形似雄狮而得名,是我国唯一的大型鹅种,也是世界上最大型鹅种之一,享有“世界鹅王”的美称。近年来,随着种业振兴行动的深入开展,狮头鹅品种资源的保护与利用工作进入新阶段,开辟了狮头鹅育种新天地。

狮头鹅PRL基因的克隆及原核表达

为了进一步研究PRL对狮头鹅繁殖性能的生理调节机制,采用RT-PCR方法从狮头鹅脑垂体组织扩增获得PRL基因的cDNA序列,克隆至pMD18-T载体获得重组质粒pMD18-PRL,并进行序列测定和分析。将测序正确的cDNA序列定向克隆到pET32a(+),构建表达载体pET32a-PRL,并转化至BL21(DE3)大肠杆菌表达目的蛋白,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测和Western Blot分析。狮头鹅PRL基因编码区含有600个核苷酸,编码199个氨基酸(GenBank No.GQ856665),与其它禽类PRL具有高度保守性;狮头鹅PRL蛋白二级结构由多个α螺旋和β转角及无规卷曲构成,推测N端70～76、95～102、150～155和207～213区段为其抗原表位的优势区。SDS-PAGE检测表明狮头鹅PRL基因在大肠杆菌中获得了高效表达,可溶性表达产物约占全菌总蛋白的53.6%,融合蛋白分子量约41ku,并用镍柱亲和层析法分离纯化融合蛋白。Western Blot分析证实了所获的融合蛋白具有较强抗原性。试验结果为进一步研究PRL基因的生物功能及其对狮头鹅就巢、产蛋等生产性状的影响奠定了基础。

狮头鹅α-干扰素基因的克隆与遗传分析

从狮头鹅外周血细胞中提取基因组DNA,采用巢式PCR方法扩增α-干扰素基因片段（d-Go-IFN-α）;同时从新城疫病毒（NDV）刺激培养外周血淋巴细胞提取总RNA,用RT-PCR方法扩增α-干扰素基因片段（m-Go-IFN-α）,将上述扩增片段分别克隆到pGEM-T载体并进行序列测定。结果表明,α-干扰素基因全长均为576 bp,编码192个氨基酸,比较d-Go-IFN-α和m-Go-IFN-α的核苷酸序列,可见155位核苷酸由A突变为G,相应地52位氨基酸由M突变为R,提示狮头鹅α-干扰素基因存在单链核苷酸多态性;狮头鹅与其它家禽品种α-干扰素基因的核苷酸序列同源性介于41.2%~98.3%之间,其推导的氨基酸序列同源性为13.0%~96.4%,不同鹅品种的α-干扰素具有极为相似的二级结构。

不同饲养方式下狮头鹅的生长曲线分析

对不同饲养方式下狮头鹅9周龄的体重变化进行了曲线方程拟合。结果,不同饲养方式下狮头鹅体重增长趋势符合Logistic生长曲线,拟合优度R2均在0.995以上。舍饲条件下,狮头鹅的周平均日增重明显地高于放牧加补饲的鹅。

VIP基因在狮头鹅繁殖周期下丘脑-垂体-性腺轴中的表达变化

为了探索狮头鹅繁殖周期下丘脑-垂体-性腺轴中VIP mRNA的表达规律,选取产蛋期、就巢期、休产期狮头鹅母鹅各6只,采用荧光定量PCR方法分别测定了各时期下丘脑、垂体及卵巢VIP mRNA的表达水平。结果表明,狮头鹅就巢期血清催乳素(PRL)质量浓度为30ng/mL,明显高于产蛋期和休产期(P<0.01),下丘脑就巢期VIP mRNA的表达量较其他繁殖周期高(P<0.05),而垂体产蛋期VIP mRNA的表达量最高(P<0.01)。提示狮头鹅下丘脑-垂体-性腺轴中VIP mRNA的表达水平与PRL分泌密切相关,PRL是狮头鹅就巢行为维持和发展的关键激素。

不同周龄狮头鹅精液品质的比较

狮头鹅是分布于我国广东省及周边地区的著名大型肉鹅品种，但由于其就巢性强，产蛋率低，大大限制了狮头鹅产业的快速发展。另外，狮头鹅体型硕大，难以和产蛋高但体型较小的四川白鹅等品种自然交配进行杂交配套生产利用。为了探讨狮头鹅繁殖率低下的可能原因，同时为提高狮头鹅的人工授精成绩以为开发狮头鹅与高产鹅种杂交配套服务，本试验连续检测了3个不同生物学年度公鹅射精量、精子活力、精子密度、

日粮蛋白质水平对狮头鹅繁殖性能及相关激素水平的影响

采用不同蛋白质水平日粮饲喂产蛋期狮头鹅,研究对其繁殖性能、血清激素水平、FSHβ及其受体表达量的影响。结果发现:日粮蛋白质水平能提高狮头鹅的产蛋率和孵化率,当蛋白质水平达到16%之后,产蛋数显著高于低蛋白质(13%)水平组;16%、17.5%和19%蛋白质组血清ALT活性均显著高于低蛋白质组(P<0.05),且随着日粮蛋白质水平增加,血清尿酸浓度呈上升趋势;16%、17.5%和19%蛋白质组的血清雌二醇浓度、垂体FSHβ表达量及卵巢FSHR表达量均显著高于13%蛋白质组,与产蛋数和孵化率呈现一致的变化趋势。试验结果显示,日粮蛋白质水平可通过调节狮头鹅的内分泌及相关基因表达提高其繁殖性能。

实时荧光定量RT-PCR检测狮头鹅繁殖周期中PRL mRNA的表达

以就巢性极强的狮头鹅为研究对象,选取不同繁殖阶段的狮头母鹅各6羽,采用荧光定量RT-PCR方法测定下丘脑-垂体-性腺轴中PRL mRNA的表达水平。结果表明:PRL mRNA在狮头鹅下丘脑、垂体和卵巢中均有表达,垂体PRL mRNA的表达量最高(P<0.01),下丘脑最低;在整个生殖周期内,就巢期PRL mRNA的表达水平高于非就巢期,休产期最低。由此可见,下丘脑-垂体-性腺轴中PRL mRNA的表达水平与狮头鹅的繁殖周期密切相关,PRL是就巢行为维持和发展的关键激素。

狮头鹅生长发育模型的研究

在家养条件下选用狮头鹅80只,测定了12周龄前的体重、体斜长、胸深、龙骨长、骨盆宽和胫长,并对各指标进行生长曲线拟合。结果表明,公、母鹅各指标在5周龄前生长状况基本一致,5周龄后公鹅生长速度明显快于母鹅。其中Logistic模型、Bertallanffy模型和Gompertz模型均能很好地拟合出狮头鹅各指标的生长曲线。

狮头鹅不同繁殖阶段血清生化指标的测定研究

为了完善狮头鹅的品种特征数据,探讨就巢性极强的狮头鹅繁殖周期的血清生化指标变化规律。选取健康成年狮头母鹅45只,对其产蛋期、就巢期和休产期的血清钙、磷、总蛋白、葡萄糖等11项生化指标进行测定。结果表明:产蛋期血钙、血磷水平较高,而就巢期和休产期差异不显著;血清ALP水平在产蛋期较高,分别比就巢期和休产期提高39.49%(P<0.05)和12.70%;3个时期血清TP、CREA、UA和CHO含量差异均不显著,BUN含量在就巢期较低,分别比产蛋期和休产期低24.49%(P<0.05)和34.69%(P<0.05)。试验建立了狮头鹅不同繁殖阶段血清生化指标参考值,为其饲养管理、保种选育、疾病防治等方面提供依据。

饲粮赖氨酸水平对1～21日龄狮头鹅生长性能、血清生化指标及蛋白沉积的影响

【目的】主要研究不同赖氨酸水平的饲粮对1～21日龄狮头鹅生长性能、血清生化指标及蛋白沉积的影响．【方法】选用828只1日龄的健康狮头鹅，随机分为6组，每组6个重复，每个重复23只．对照组赖氨酸添加水平（ w）为0.75％，各处理组赖氨酸水平分别为0.90％、1.05％、1.20％、1.35％、1.50％．试验期21 d．【结果和结论】1）随赖氨酸水平升高，1.05％～1.50％处理组的狮头鹅21日龄的平均日增质量显著高于对照组和0.90％组（ P＜0.05）；赖氨酸1.05％～1.50％处理组耗料增质量比均显著低于对照组和0.90％组（P＜0.05）．2）对狮头鹅血清总蛋白、白蛋白、球蛋白的影响趋势相近，均在1.20％组达到最高，并显著高于0.90％、1.05％和1.35％组．血清尿酸和三酰甘油的浓度均在1.05％组最低，但各组之间差异不显著．血清碱性磷酸酶浓度在1.20％组达到最大值，显著高于1.05％、1.35％和1.50％组（ P＜0.05）．血清生长激素、胰岛素样生长因子1质量浓度各组间差异不显著．3）狮头鹅蛋白绝对沉积、相对沉积随饲粮赖氨酸水平的升高而升高，并且在赖氨酸为1.20％时达到较好的效果．研究表明，饲粮中添加赖氨酸可以有效地提高狮头鹅的生长性能，1～21日龄狮头鹅饲粮赖氨酸适宜水平为1.05％．

狮头鹅体尺性状与精液品质的相关性分析

对53、90周龄狮头鹅公鹅进行了体尺性状测量和精液品质分析,并对体尺性状和精液品质进行相关性分析。结果表明:狮头鹅公鹅胸围与射精量呈显著负相关(P<0.05);跖围与精子密度呈显著正相关(P<0.05),与畸形率呈极显著负相关(P<0.01)。在保证公鹅体质量与增重的前提下,选择胸围值小而跖围值、跖长值大的公鹅,可提高射精量,增加精子密度和活力,同时降低畸形率。

狮头鹅大肠杆菌分离鉴定、药敏试验及灭活疫苗的制备

为了分析广东某狮头鹅种鹅场鹅卵黄性腹膜炎的病原,从病死雌性种鹅中分离得到1株菌株。通过细菌培养形态、镜检、生化鉴定以及16S r RNA基因序列同源性比对,确定分离的菌株为大肠杆菌。抗生素和中草药水提取物对分离菌株的药敏试验结果表明,恩诺沙星、头孢噻肟和中草药丁香对分离菌株的抑制和杀灭效果最好。用分离菌株制备的灭活疫苗,经无菌检测、试验动物安全性和免疫效果检验,结果表明,该疫苗是安全的,并对试验动物具有一定的免疫保护作用。

狮头鹅、莱茵鹅和灰雁mtDNA RFLP分析

用ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ＨｉｎｄⅢ、ＨｐａⅠ、ＭｌｕⅠ、ＰｓｔⅠ、ＰｖｕⅡ、ＳａｃⅠ、ＳａｃⅡ、ＳｃａⅠ、ＳｍａⅠ等１３种限制性内切酶对狮头鹅、莱菌鹅和灰雁的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）进行了单酶消化．结合我们前期的工作，结果表明：狮头鹅和中国鹅其他几个品种的限制性类型完全相同；莱茵鹅和郎德鹅的限制性类型也完全一致；狮头鹅和莱茵鹅间，ＥｃｏＲⅤ、ＳｃａⅠ的限制性类型存在差异；狮头鹅和灰雁间，ＳｃａⅠ的限制性类型不同；而莱茵鹅和灰雁间，ＥｃｏＲⅤ、ＳｃａⅠ的限制性类型也不同．提示：狮头鹅是中国鹅的品种之一，可能由鸿雁驯化而来；莱茵鹅和郎德鹅可能由同一种雁驯化而来，但尚不能确定其为灰雁．

狮头鹅GH基因内含子2多态性与生长和屠宰性状的相关性

根据鸭生长激素基因内含子2序列设计3对引物,利用PCR-SSCP方法对狮头鹅进行了单核苷酸多态性分析。结果表明：狮头鹅GH基因内含子2内存在多态性,得到3种基因型EE、EF和FF,其中EE基因型为优势基因型,且等位基因E的频率较高。卡方检验结果表明,基因型分布符合H ardy—W e inberg平衡。基因型对6~10周龄体重、屠体重、半净膛重等11个性状有显著（P〈0.05）或极显著（P〈0.01）的影响,且在各个性状上,EE基因型个体的均值均高于EF和FF基因型个体。故初步推断EE基因型可以作为地方鹅种高生产性能的分子标记。