猴痘病毒实时荧光LAMP检测方法的建立

为建立一种特异性强、灵敏度高、操作简单的猴痘病毒(Monkeypox virus, MPXV)检测方法,试验针对MPXV保守区OPG002基因片段设计特异性引物,通过优化环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)反应体系中内引物、环引物体积及反应温度建立了一种MPXV实时荧光LAMP检测方法,对该方法的特异性和灵敏度进行了分析,并应用该方法检测了临床样品和模拟样品。结果表明:建立的MPXV实时荧光LAMP检测方法于64℃恒温反应60 min即可完成DNA检测;该方法能特异性地检出MPXV,最低检出限为25 copies/μL,灵敏度是普通PCR方法的20倍;该方法对12份临床样品的检测结果均为阴性,可检测出质粒浓度为0.5×10~2~0.5×10~6 copies/μL的模拟阳性样品。说明建立的MPXV荧光LAMP检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单的优点,可用于MPXV的快速鉴别诊断。

男男性伴同患猴痘合并HIV阳性及梅毒二例

本文报道两例猴痘,系男男性伴关系,均伴HIV感染。两例患者均出现典型皮损、高热、发病前均有男男无保护性行为史,猴痘病毒qPCR(+)。

广西南宁地区33例猴痘患者临床特征分析

目的:分析广西南宁地区猴痘患者的流行病学及临床特征。方法:回顾性分析我院2023年7月至2024年3月确诊为猴痘的33例患者的临床资料,对其人口学特征、流行病学、临床表现等进行分析。结果:33例患者均为男性,经PCR检测猴痘病毒均阳性,29例(87.88%)为男男性行为者。主要症状为丘疹、丘疱疹(100%)、发热(57.58%)、瘙痒(42.42%)。皮疹主要分布于肛门、会阴及生殖器(81.82%)、躯干和四肢(51.52%)、头面部(21.21%)。22例猴痘住院患者中HIV阳性14例,HIV组与非HIV组猴痘病毒CT值(疱疹液)、皮疹结痂时间、住院时间无统计学差异(均P>0.05)。结论:广西南宁地区猴痘的感染人群以男男性行为者为主,皮疹主要分布于肛门、会阴及生殖器。猴痘患者HIV阳性组与非HIV阳性组,病情的严重程度相似。

南京市猴痘感染状况分析

目的:分析南京地区猴痘患者的临床特征及实验室指标,为猴痘疫情的防控提供依据。方法:对南京市2023年7~9月88例就诊患者的人口学资料和实验室指标进行回顾性分析。结果:88例排查患者中有45例确诊为猴痘感染,其中男44例,女1例。36例(81.82%)男性近期有同性性行为。25例(55.56%)合并HIV感染,17例(37.78%)合并梅毒。39例(86.67%)患者有皮疹表现,主要分布于会阴部及肛周(29/39);27例(60.00%)有发热;12例(26.67%)有淋巴结肿大。33例(73.33%)患者C反应蛋白升高,39例(86.67%)降钙素原升高,41例(91.11%)白介素6升高。就诊患者筛查样本以肛拭子的阳性率最高(63.49%),猴痘患者的样本以疱液拭子阳性率最高(79.71%)。结论:南京地区主要感染对象为男男性行为者,高危人群筛查时可优先采集肛拭子,确诊患者监测病情可优先采集血液标本或疱液拭子。

云南省首例女性感染猴痘病例的发现与调查处置

目的对云南省昆明市1例女性感染猴痘病例进行调查处置,为全国预防控制猴痘疫情,特别是女性感染猴痘疫情的早期发现和调查处置提供科学依据。方法按照《猴痘诊疗指南(2022版)》对病例进行诊断,依据《猴痘防控方案(2023版)》开展流行病学调查分析和处置,采集相关标本开展实验室检测。结果经流行病学调查,患者发病前与新婚丈夫发生过1次性行为,其丈夫向其隐瞒男男同性恋史及男男性行为史;该女子及其丈夫实验室检测结果为“猴痘病毒核酸阳性”;该女子及其丈夫均出现典型出疹等临床症状。结论结合流行病学调查、临床症状表现及实验室检测结果,及既往云南省猴痘疫情材料,确认该女子为云南省首例女性感染猴痘病例,可疑暴露为早于其发病的男性配偶。

七例猴痘临床特征分析

对上海市浦东新区人民医院2023年7~12月收治的7例猴痘患者临床症状及实验室检查等资料进行分析。7例患者皮疹部位和咽拭子标本猴痘病毒核酸检测阳性。7例猴痘患者均为MSM人群,年龄26~41岁;发病前21天内均有男男性行为史;6例患者首发部位为阴阜或生殖器区域,1例患者首发部位为口周及肛周;6例出现发热;6例伴有其他性传播疾病;病例发现方式均为主动就诊。

非典型猴痘一例

本文报道一例24岁非典型猴痘男性患者,3天前包皮及龟头出现环状丘疹,无发热、咽痛等系统症状,发病前有无保护男男性行为。皮肤科查体:包皮、龟头可见数个绿豆、黄豆大小的环状丘疹,中央凹陷可见结痂,躯干、四肢及头面无明显皮疹。猴痘病毒检测阳性。对症治疗后皮疹逐渐消退。本例猴痘患者仅出现生殖器皮损,与常规猴痘表现不相同,在临床中容易误诊。

脊髓灰质炎疫苗脑内法猴体神经毒力试验的神经病理研究

目的 探讨脊髓灰质炎疫苗猴体神经毒力试验毒力返强对神经免疫反应的影响及病理机制。方法Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)的原液(≥7000 lgCCID50/L)以及10-1稀释各型脊髓灰质炎疫苗采用脑内法进行神经毒力试验,观察脊髓灰质炎的病理变化,并利用免疫组织化学法检测脊髓灰质炎病毒受体CD155以及CD4^(+)T淋巴细胞、CD20^(+)B淋巴细胞和CD68^(+)小胶质细胞的分布。结果 发生脊髓灰质炎的猴体出现脊髓炎症细胞浸润,少量神经元变性,脊髓神经元变性坏死、卫星现象、噬神经细胞现象、血管周围炎症细胞袖套状浸润和胶质细胞增生;主要为CD4^(+)T淋巴细胞、CD20^(+)B淋巴细胞和CD68^(+)小胶质细胞大量浸润在血管袖套和增生的胶质结节中;在发生和未发生脊髓灰质炎的猴体中,CD155分布未见明显差别,均表达在神经元和胶质细胞,而血管内皮细胞未见表达。结论 脊髓灰质炎疫苗毒力返强导致典型病毒性脑脊髓炎。

猴痘累及直肠1例

背景猴痘病毒(monkeypox virus,MPXV)感染通常表现为典型皮肤病变,但在本案例中发现其可致直肠占位样改变,临床少见,易造成误诊.病例简介本例患者主诉肛门坠胀疼痛伴黏液脓血便,肠镜检查发现直肠占位样改变,初步疑诊直肠肿瘤.经详细检查与猴痘病毒核酸检测,最终确诊为MPXV感染所致.予抗病毒等对症治疗后,患者症状逐渐缓解,直肠占位样改变显著改善.结论本例猴痘患者表现为直肠占位样改变,拓宽了我们对MPXV感染临床表现的认识.面对不典型症状的猴痘病例时,临床医生要拓宽思路,保持警惕,若条件有限时尽快转至传染病医院治疗.

基于超声诊断对中老年食蟹猴心脏结构和功能的基础研究

目的 针对10岁以上中老年食蟹猴开展心脏结构和功能基础研究,为研究老年疾病动物选择提供基础数据。方法 本研究选取144只10岁以上中老年食蟹猴作为研究对象,分为10~15岁组雌性37只、雄性66只,16~20岁组雌性21只、雄性20只,通过一般指标(身体质量指数、血压、心率)、血液生化指标(血糖、血脂和离子指标)、心脏结构和功能指标比较分析,获得中老年食蟹猴心脏结构和功能相关基础数据。结果 10~15岁组和16~20岁组,一般指标比较,随着年龄增加,雌猴和雄猴血压和心率升高,雄猴血压变化具有显著性差异。两组血液生化指标比较,随着年龄增加,雌猴和雄猴血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血钙、血钠、血钾都显示升高,其中,血糖、甘油三酯(雄)、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(雄)、低密度脂蛋白胆固醇(雄)、血钙、血钠、血钾变化具有显著性差异;乳酸脱氢酶显示下降,具有显著性差异。两组心脏收缩功能比较,随着年龄增加,雌猴和雄猴左房前后内径都下降,具有显著性差异;雌猴室间隔收缩末径,左心室舒张和收缩末径显示减小,左心室舒张末容积,左心室收缩末容积,左心室质量指数下降,具有显著性差异,雄猴变化不显著。两组心脏舒张功能比较,随着年龄增加,雄猴二尖瓣舒张晚期速度下降,具有显著性差异;雌猴左室侧壁舒张早期速度升高,具有显著性差异。对雌猴和雄猴代谢指标与心脏结构和功能指标进行相关性分析,结果雌猴代谢指标与心脏结构和功能指标的相关性较弱,Γ绝对值最高不超过0.39,雄猴代谢指标与心脏结构和功能指标的相关性相对较强,Γ值绝对值最高达到0.66。结论 基于超声诊断结合代谢指标对食蟹猴心脏功能进行研究,建立中老年食蟹猴心脏结构和功能相关指标基础数据,随着年龄的增加,食蟹猴的血糖、血脂指标升高,心脏收缩和舒张功能有下降趋势,与中老年人群变化相似,为开展心脏功能相关的老年性疾病研究动物选择提供数据支撑。

食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1的毒性研究

目的:考察食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1后的体内毒性,探索安全剂量范围,为后续临床试验提供参考信息。方法:30只食蟹猴随机分成3组,包括溶媒对照组和低、高剂量(1.0×10^(8)、4.0×10^(8)pfu)组,每组10只,雌雄各半。采用肌肉注射给药,每周给药2次,连续给药6周,恢复期8周。试验期间,每天观察动物的临床症状和摄食量,每次给药后1~2天观察注射部位症状,每周称量体重。分别在检疫期、首次给药后、给药期结束、恢复期结束的不同时间点进行安全药理(体温、血压、心电图)测定、临床病理(血液学、血凝、血清生化、尿生化)检查、免疫学(T淋巴细胞、细胞因子、免疫原性)测定、组织病理学检查和脏器称重。结果:给药后,动物未见异常症状、注射部位刺激性、体重和摄食量改变,未见安全药理和临床病理指标有意义的变化。与溶媒对照组比较,第41天,低剂量会引起动物CD3^(+)CD4^(+)T细胞比例升高,高剂量未见明显变化。第13至97天,低、高剂量均能引起动物产生抗载体结合抗体、抗抗体,以及个别动物检出hPD-1表达产物。证明药物在体内产生免疫活性和介导免疫原性。组织病理学检查显示,给药期结束时,低、高剂量组动物注射部位极轻度至中度混合细胞浸润,高剂量组动物坐骨神经极轻度髓鞘/轴突变性;恢复期结束时注射部位病变减为极轻度,坐骨神经病变未见恢复趋势。低、高剂量组动物未见组织脏器重量改变。结论:食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1后,动物体内耐受良好,受试物未见毒性反应剂量(NOAEL)是1.0×10^(8)pfu。上述研究结果为药物开展临床试验提供了数据支持。

HIV阳性与HIV阴性猴痘患者临床特征分析

目的分析人HIV阳性与HIV阴性猴痘患者的临床和影像特征,为临床诊疗提供参考。方法回顾性分析2023年6月1日至11月30日首都医科大学附属北京佑安医院收治住院的36例确诊猴痘患者的临床和影像资料,按照是否合并HIV感染分为HIV阳性组和HIV阴性组。观察比较两组人群临床和影像特征。结果36例猴痘患者均为男性且为男男性行为者(men who have sex with men,MSM),平均年龄(31.5±6.4)岁;HIV阳性组28例,HIV阴性组8例。主要表现为皮疹、发热、淋巴结肿大。皮疹的首发部位(24例,66.7%)和最主要的分布部位(30例,83.3%)均为生殖器和肛门,以丘疹和脓疱疹为主。合并其他性传播性疾病14例(38.9%,14/36);合并细菌感染21例(58.3%,21/36),主要为皮肤软组织感染和肛周感染。影像检查结果异常者均为HIV阳性组患者。4例(11.1%,4/36)肺炎CT表现以磨玻璃影、实变、多发结节为主;2例并发肠梗阻,影像表现以胃肠道扩张为主,2例直肠炎表现为直肠壁增厚,肠腔狭窄。两组患者的流行病学资料、临床特征、皮疹分布及性质和实验室检查结果比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论36例猴痘患者以青壮年MSM人群为主,且多为HIV感染者;生殖器和肛周是皮疹首发和最多发部位,溃疡样皮疹仅见于HIV感染者;轻症患者预后良好,重症患者可合并细菌性感染、肠梗阻和直肠炎。并发肺炎者CT主要表现为实变和磨玻璃影,并可见两肺多发、随机分布的实性结节。

磁共振细胞外容积分数联合PDFF成像在NAFLD食蟹猴模型中对早期肝脏纤维化的诊断价值

目的探讨肝脏磁共振细胞外容积分数(extracellular volume,ECV)及质子密度脂肪分数(proton density fat fraction,PDFF)在非酒精性脂肪性肝病早期肝纤维化(F1期)食蟹猴中的诊断价值｡方法纳入经肝穿病理证实的早期肝纤维化食蟹猴104只(F1期组)和10只健康对照组,对比两组肝ECV和PDFF值差异及对早期肝纤维的诊断效能｡结果F1期组ECV､PDFF值均高于对照组(P<0.001)｡ECV和PDFF与肝NAS评分呈中度相关(rECV-小叶炎症评分=0.432 P<0.001,rPDFF-脂肪变性评分=0.628 P<0.001),ECV在早期肝纤维､PDFF在脂肪定量评估中均具有良好的诊断效能(AUCECV=0.884,P<0.001,AUC-PDFF=0.991,P<0.001)｡结论MRI-ECV联合PDFF成像在NAFLD食蟹猴中对早期肝纤维化及脂肪定量评估具有巨大潜力.

雌性恒河猴月经周期异常与肠道微生物的相关性研究

目的以健康雌性育龄期恒河猴为研究对象,采用16S rRNA宏基因组方法探讨雌性恒河猴月经周期异常与肠道微生物组成的相关性。方法将27只健康雌性恒河猴分为月经规律和不规律两组,分别采集两组实验猴卵泡期(follicular phase,FP)、排卵期(ovulatoryperiod,OP)和黄体期(lutealphase,LP)粪便样品,对16SrRNA基因的V3~V4高变区测序,分析比较两组实验猴月经周期肠道菌群结构及多样性。结果在门水平,规律组和不规律组猕猴在卵泡期、黄体期和排卵期3个不同时期均以厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)为主要菌群,占比总和超过98%;在属水平以普雷沃菌属_9(Prevotella_9)、瘤胃球菌(Ruminococcaceae_UCG-002)、乳杆菌属(Lactobacillus)、普雷沃菌属_2(Prevotella_2)、考拉杆菌属(Phascolarctobacterium)、瘤胃球菌_UCG-005(Ruminococcaceae_UCG-005)、链球菌属(Streptococcus)、布劳特菌属(Blautia)、普雷沃菌属_NK3B31(Prevotellaceae_NK3B31_group)、理研菌属(Rikenellaceae_RC9_gut_group)为主;在黄体期规律组厚壁菌门(Firmicutes)占比高于不规律组,而拟杆菌门(Bacteroidetes)刚好相反。规律组3个阶段,螺旋体门(Spirochaetes)均高于不规律组(P<0.05)。结论月经周期规律与月经周期不规律的两组猕猴肠道微生物组成存在一定差异,为研究肠道细菌与排卵障碍提供一定的参考依据。

我国的珍稀濒危野生动物 金丝猴

金丝猴在动物分类上属于猴科仰鼻猴属(又称金丝猴属),其显著特征是鼻孔大且上翘,全球共5种。我国有4种,其中3种为我国特有:川金丝猴(约25000只,分布于川、陕、甘、鄂)、滇金丝猴(约4000只,分布于滇、藏)、黔金丝猴(约700只,分布于黔);1种为我国(约300只,分布于滇)和缅甸都有的怒江金丝猴。金丝猴主食植物,具类似反刍动物那样的胃,其肠道微生物参与消化和发酵纤维素。猴群社会组织形式具多个组成层级:由一只成年雄猴和几只成年雌猴及未成年猴组成基本社会单元,基本社会单元组成小群,小群再聚集成大群。我国的金丝猴都被列为国家一级保护野生动物,也都成为保护旗舰种,其多数生境已得到保护,种群也在缓慢恢复。

艾滋病合并猴痘临床病理分析

本文分析了近期确诊的3例艾滋病合并猴痘患者临床表现和皮损组织学特征。3例患者均为青年男性,生殖器周围皮疹为首发表现,后扩散至全身,2例伴发热、1例有腹股沟淋巴结肿大,外周血HIV抗体阳性。咽拭子、皮疹拭子及肛拭子等标本猴痘病毒PCR检测均阳性;活检皮肤病理组织学表现一致:局部表皮全层及真皮浅层碎屑状坏死,坏死周围表皮细胞水肿及气球样变、多量中性粒细胞浸润伴核尘,表皮细胞胞质见嗜酸性小体,真皮层多量淋巴细胞、中性及嗜酸性粒细胞浸润。

江苏省23例猴痘病例病毒基因组特征分析

目的分析2023年6月至9月江苏省23例猴痘病例病毒全基因组序列并研究其分子进化特征。方法收集猴痘病例口咽拭子、痘疱液、痘疱渗出物拭子等样本,以实时定量PCR进行病毒核酸检测,利用扩增子测序技术捕获猴痘样本中病毒全基因组,通过MiniSeq高通量测序仪进行二代测序,对序列进行病毒进化和变异分析。结果23份样本的平均测序深度907.30×~11578.58×,基因组覆盖度(测序深度≥10×)95.50%~99.94%。系统发育分析显示,病毒均属于MPXVⅡb C.1(2023)谱系,与来自同时期日本、韩国、葡萄牙和中国的序列同属一个分支,并分布于3个聚类簇中。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNPs)分析共发现60个SNPs,包含59处碱基替换和1处碱基缺失,其中非同义突变26个,分别影响宿主免疫调控、膜蛋白和病毒转录调控功能。26个非同义突变中有25个SNPs为载脂蛋白B mRNA编辑催化多肽样(APOBEC3-like)突变,且23份样本中的6个共享突变均为APOBEC3-like突变。样本23010与23011只有C177833T一个突变位点的区别,且C76450T和G80405A位点均只在这两个样本中出现。结论江苏省2023年6月至9月23例猴痘病毒均为Ⅱb进化分支C.1(2023)谱系,病毒来源为多个源头输入,应持续开展猴痘病毒全基因组监测和研究,密切关注病毒来源和在本地传播后的变异进化方式。

环尾狐猴弓形虫感染诊治

四川某饲养单位于2022年7月起陆续发现环尾狐猴开始出现精神萎靡、不好动、食欲废绝等症状,且病程短、死亡率较高。通过实验室检测诊断为弓形虫感染,选择林可霉素、螺旋霉素、磺胺类等药物进行防治,取得了一定的治疗效果。

基于多方法的猕猴种群数量县域快速调查与人猴冲突分析:以贵州长顺为例

近年来,猕猴(Macaca mulatta)在多地种群增长迅速且人猴冲突事件频发。摸清猕猴种群数量及其人猴冲突状况是开展有效管理的前提。本文以贵州长顺县为例,综合利用非诱导式访问、样线(带)与定点观测、红外相机配合夜宿地调查以及无人机调查等方法对贵州长顺县猕猴种群数量及人猴冲突现状进行调查分析。结果显示:(1)以95%的可靠性和62%的调查精度表明,长顺县域共分布有猕猴群体20群,总数351±138只,并集中分布于南部区域;(2)应用的调查方法各有优缺点,其中,样线(带)与定点观测法发现猴群几率较大,访问调查法较为便捷,多方法综合使用能有效弥补单一调查方法获取数据的局限性;(3)猕猴危害作物高峰期发生在6—7月,与当地主要受害作物种类玉米成熟期时间一致,同时观测到靠近山林和水源的作物更易遭受猕猴危害;(4)原住民对猕猴保护态度各有不同,其中,有47.92%的受访者对猕猴保护政策持积极态度,52.08%的受访者持消极态度,其保护态度主要受受访者主要收入来源、受教育程度和猕猴危害造成的损失程度3个因素影响。本研究可为西南山地区域性猕猴种群快速调查与保护管理决策提供有益参考。

北京市海淀区猴痘疫情流行病学特征分析

采用描述性流行病学方法分析2023年6月10日至2024年4月30日海淀区猴痘确诊病例的流行病学和临床特征等资料,以了解北京市海淀区猴痘病例流行特征。共分析20例猴痘病例,均为男性,85.0%(17/20)为男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)。年龄M(Q1,Q3)为28(26.5,32.5)岁。临床特征以皮疹(95.0%,19/20)、发热(65.0%,13/20)、淋巴结肿大(35.0%,7/20)为主,皮疹多发于生殖器及肛周(65.0%,13/20)。合并HIV感染者和合并梅毒者各3例(15.0%,3/20)。报告病例医院主要为传染病医院(84.21%,16/19),报告科室主要为皮肤科(57.89%,11/19)和发热门诊(36.84%,7/19)。7条猴痘病毒(monkeypox virus,MPXV)序列均属于猴痘病毒西非型IIb分支,C.1家系。海淀区猴痘病例呈散发传播,MSM人群为高危人群。