复方制霉菌素软膏中新霉素微生物检定法研究

为了提高复方制霉菌素软膏中新霉素微生物检定法的准确性和可靠性,对其进行了细化和完善。通过试验菌株制备、抗生素浓度范围及双碟制备等方面明确了复方制霉菌素软膏中新霉素微生物检定法各检测指标,并对所得方法进行了验证。结果显示复方制霉菌素软膏中新霉素微生物检定法在4.58~21.84 U/mL范围内线性关系良好,高中低三个浓度的准确度在97.07%~102.63%之间,方法重复性及中间精密度良好(RSD分别为1.5%、1.4%),且方法耐受性和稳定性较优。因此该方法可以作为复方制霉菌素软膏常规质量控制方法。

抗生素微生物检定法测定红霉素肠溶片含量的不确定度分析

目的:对抗生素微生物检定法测定红霉素肠溶片的含量进行不确定度分析。方法:依据《测量不确定度评定与表示》(JJF1059.1—2012),建立数学模型,确定影响不确定性的因素。结果:测量不确定度的扩展不确定度为U=1.01%(k=2)。结论:测量结果显示测量不确定度主要来源为标准品称重和仪器引入的不确定度,其次为标准品和供试品的稀释体积,应从以上4个操作过程加强控制,以减少试验误差。

用生物检定法研究力达霉素在小鼠和犬的药代动力学

目的 用生物检定法测定力达霉素活性浓度和研究其药代动力学。方法 体外细胞毒检测法测定血清力达霉素浓度。结果 方法学确证基本符合药代动力学研究要求。小鼠iv力达霉素100,50和10μg·kg-1后浓度曲线符合二房室模型,α和β相1/2分别是0.77～1.8 min和5.6～7.2 min。AUC分别是2 851.3,887.8和166.4μg·min·L-1,随剂量非线性增加。AUC增加和抑瘤疗效增长趋势相似。犬iv力达霉素12 μg·kg-1后浓度低并迅速下降,AUC仅16μg·min·L-1,比小鼠浓度低和消除快。首次给药后15 d进行第2次给药,第2次给药浓度低于首次。结论 用生物检定法成功测定血清力达霉素浓度和研究其药代动力学。力达霉素药代动力学存在种属、单次及多次给药差别。

微生物检定法测定替考拉宁及注射用替考拉宁的含量

目的 建立替考拉宁及其注射用制剂的含量测定方法。方法 管碟法。中国药典Ⅱ号培养基 ,pH 6 .5～ 6 .6 ;pH 6 .0磷酸盐缓冲液 ;检定菌为枯草芽孢杆菌 [CMCC(B) 6 35 0 1];培养温度为 (36± 1)℃ ;培养时间 14～ 16h ;高、低剂量分别为 40和 2 0u·mL-1。结果 抑菌圈大小适中、边缘清晰 ;在 17.17～ 41.91u·mL-1范围内 ,线性关系良好 (r =0 .99996 ) ;重现性好 (RSD=0 .6 % ,n =6 ) ;回收率为 10 0 .2 % (RSD =1.9% ,n =6 )。

中国药典2005年版微生物检定法的增修订情况及要点

介绍中国药典2005年版附录的抗生素微生物检定法的增修订情况,并与美国药典、英国药典、欧洲药典和日本药局方收载的抗生素微生物检定法进行比较。对中国药典2005年版微生物检定法新增的浊度法的原理及操作要点进行探讨。

影响抗生素微生物检定法(管碟法)测定准确性的常见原因分析

目的总结抗生素微生物检定法(管碟法)中影响测定结果准确性的常见系统误差并加以控制。方法梳理10余年来中检院仲裁复验的案例,对共性问题进行整理,找出可能原因,并采用单一变量实验设计的方式加以确证。结果估计效价和浓度比的错误计算、点样顺序和点样时间规范性和熟练程度、试验标准菌株的变异均会对管碟法测定结果产生影响。结论通过细化实验操作规范,可以避免或尽量消除此类系统误差的影响。

不同免疫学抗体和生物检定法测定血清肿瘤坏死因子衍生物(rhTNFαDa)的方法学比较

研究了两种免疫学方法及生物检定法测定血清肿瘤坏死因子衍生物（ｒｈＴＮＦαＤａ）的方法学，并对三种方法测定的药代动力学样本数值进行了相关分析。ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍＢｉｏｃｈｅｍｉｃａ（ＢＭ）公司药盒的灵敏度和线性范围分别为０．０４２μｇ／Ｌ和０．０４２～３．４４μｇ／Ｌ；邦定药盒的灵敏度、线性范围、重复性和回收率分别为２２．４４μｇ／Ｌ、２．４４～６２５μｇ／Ｌ、ＣＶ＜７．２％和８８．７～１０２．９％；生物检定法分别为０．９μｇ／Ｌ、０．９～２２２μｇ／Ｌ、ＣＶ＜３０．６％和７５．８～８５．１％。三种方法都基本上不受正常血清的干扰，特异性较好。用三种方法测定的药代动力学样本的数值间都有高度的相关性，说明在测定ｒｈＴＮＦαＤａ时，免疫法可以部分地反映生物活性，免疫法与生物检定法之间有一定的可比性。

HPLC与微生物检定法测定阿奇霉素滴眼液含量的比较研究

目的运用微生物检定法与HPLC法测定阿奇霉素滴眼液的含量,并比较其适用性。方法不同时间点抽取3个批号的阿奇霉素滴眼液,同时采用微生物检定法与HPLC进行检测阿奇霉素质量浓度。微生物检定法参照中国药典2005年版;HPLC法采用反相ODS-C18柱色谱柱,流动相为乙-腈0.1 mol·L-1磷酸二氢钾水溶液（30∶70）,流速为0.5 mL·min-1,柱温40℃,紫外检测波长为215 nm。结果室温留样观察12个月,经抗生素微生物检定法（效价法）检测,阿奇霉素滴眼液中阿奇霉素含量下降了8.53%~12.39%;经HPLC检测,阿奇霉素含量下降了17.29%~23.50%。结论高效液相色谱法与微生物检定法相比差异较大,前者只适用于阿奇霉素的检定,微生物检定法更能准确的反映阿奇霉素滴眼液的抗菌活性,在应用时应根据具体情况选择合适的检定方法。

恩拉霉素微生物检定法的研究

以枯草芽孢杆菌为检定菌,检定培养基Ⅰ号为试验用培养基,采用双碟法进行恩拉霉素样品测定。通过浸提溶液组成、浸提时间、检定菌浓度考察,优化了检定条件。在此基础上,确立了恩拉霉素浓度的对数值与抑菌圈直径的线性范围,并对所建立的微生物检定法进行准确度、最小检出限等考察。结果表明,采用丙酮浸提液B、浸提恩拉霉素样品80min,恩拉霉素浸提较完全。在检定菌浓度106个/mL的条件下,恩拉霉素浓度在0.56～35.79U/mL之间,其浓度的对数值与相应的抑菌圈直径呈直线相关,相关系数r为0.9960。将建立的恩拉霉素微生物检定法用于恩拉霉素样品测定,回收率为95.90%,相对标准偏差(RSD)为1.95%。本方法可用于含恩拉霉素的样品测定。

阿奇霉素微生物检定法的改进

阿奇霉素（Ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ）是南斯拉夫Ｐｌｉｖａ公司创制的第一个１５元环大环内酯类抗生素［１］。该药具有对酸稳定、抗菌谱较红霉素广、生物利用度高等优点，在９０年代被广泛应用。其质量标准ＵＳＰⅩⅩⅢ已收载（原料、胶囊），含量测定采用的是ＨＰＬＣ...

莫能菌素微生物检定法的改进

本试验对莫能菌素微生物检定条件的影响因素、微生物检定所用的菌种及培养基成分进行了改进。实验结果表明，采用枯草芽孢杆菌代替短小芽孢杆菌以及培养基中（ｐＨ６．５～６．６）加入适量的磷酸氢二钾用于莫能菌素微生物检定法测定效价，所得到的抑菌圈清晰，边缘光滑，无双圈，从而提高了效价测定的准确性。

微生物检定法测定注射用盐酸博莱霉素含量

目的 建立微生物检定法测定注射用盐酸博莱霉素含量的方法。方法 按中国药典 2 0 0 0年版二部附录抗生素微生物检定法 ,采用金黄色葡萄球菌 [CMCC(B) 2 6 0 0 3]为实验菌 ,依其检测条件 ,注射用盐酸博莱霉素浓度为 30 ,15u·mL-1。结果 金黄色葡萄球菌对博莱霉素敏感 ,抑菌圈清晰 ,实验结果可信限率 (FL % )低 ,符合微生物检定法要求。

抗生素微生物检定法测定黄霉素预混剂的含量

采用抗生素微生物检定法测定黄霉素预混剂的含量,方法的线性范围为1.832～8.736单位/mL,r=0.9993,加样回收率为99.3%,RSD为0.8%(n=10)。本方法具有专属性、准确性、重现性好等优点。

菌种与培养基在抗生素微生物检定法中的应用分析

目的考察菌种、菌种传代培养基及抗生素检定培养基对抗生素微生物检定法的影响,确定抗生素微生物检定法的系统适用性条件。方法选择美国菌种保藏中心标准菌株ATCC6633和中检院标准菌株CMCC(B)63501,分别用A、B企业的营养琼脂培养基传代培养制得四种菌悬液,选择卷曲霉素标准品配制测定溶液,分别采用上述菌悬液和五种不同品牌检定培养基进行抗生素微生物检定管碟法试验,考察不同来源菌种、不同品牌传代培养基及不同品牌检定培养基对实验的影响。结果采用相同品牌传代培养基和相同品牌检定培养基进行试验,I号标准菌株生长相对较好;采用相同来源标准菌株和相同品牌检定培养基进行试验,A企业的传代培养基制备的菌悬液菌层生长较好;采用相同来源标准菌株、相同品牌传代培养基和不同品牌检定培养基进行试验,并对检定培养基进行综合评分,结果B企业的检定培养基质量较差,C企业的检定培养基质量较好。结论标准菌株、菌种传代培养基及抗生素检定培养基的来源对效价测定均有影响,而菌种在法定标准中有明确规定,因此在抗生素微生物检定法中应选择最适传代培养基与检定培养基作为效价测定的系统适用性条件;目前国内培养基质量参差不齐,应对培养基质量进行严格控制。

微生物检定法测定血浆和脑脊液中左氟沙星的浓度

通过对左氟沙星片口服后人体血浆、脑脊液中药物浓度测定，建立了左氟沙星体液浓度测定的微生物检定法，该方法的回收率为（９０ ．４３ ±４ ．１６） ％ ～（９６ ．７１ ±３ ．２７） ％ ，精密度试验ＲＳＤ为２ ．４７％ ～４ ．４２ ％ ，最低检测浓度为０ ．０５ μｇ／ｍＬ；并对１０ 例开频手术病人用药后血、脑脊液样品各７０ 份进行了微生物检定法和高效液相色谱法测定，经配对ｔ 检验和相关性分析，表明两方法测定结果差异无显著性，且相关性良好。

基于微生物检定法的黄连、黄连上清丸质量标准的研究

目的研究黄连微生物检定法的适用剂量范围,建立标准曲线和它们对敏感菌株的剂量效应曲线,并且根据黄连量效曲线去测定不同厂家黄连上清丸的效价,从而建立黄连和黄连上清丸的质量标准。方法采用菌敏试验考察黄连水提液对五种标准菌株(大肠杆菌[CMCC(B)44103]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、枯草芽胞杆菌[CMCC(B)63 501]、藤黄微球菌[CMCC(B)28 001]白色念珠菌[CMCC(F)98001])的抑菌性。利用黄连提取液对敏感菌的抑菌圈直径大小和浓度建立标准曲线,根据量效曲线测定不同厂家产地的黄连和黄连上清丸的效价。然后采用中国药典(2005版)一部黄连和黄连上清丸项下的薄层扫描法、HPLC法,对以上不同产地批次黄连及黄连上清丸中的盐酸小檗碱进行测定以验证以上效价结果。比较用生物检定法和药典传统方法作为质控指标的异同。结果当黄连的浓度在0.0256 g/mL^0.1526 g/mL范围内时,黄连的对数剂量和反应效应呈线性关系,且相关性好(r=0.9912);生物检定法和HPLC法作为质控指标得出质量评价结果基本相同。结论采用微生物检定法建立黄连、黄连上清丸的质量控制方法是可行的、合理的。它可以有效配合传统检验方法对黄连药材进行质量监控。

中药及其制剂质量的生物检定法

文章对中药及其制剂质量的生物检定法的涵义进行了界定,以清热解毒类方药生物检定法的研究为例,提出了建立中药质量生物检定法的步骤、方法和注意事项,指出中药及其制剂质量生物检定法的存在问题,并对此法进行了展望。

放线菌素23-21微生物检定法及HPLC法比较

采用微生物检定法测定放线菌素２３－２１的抗菌活性，检定菌为枯草芽孢杆菌。当放线菌素２３－２１的浓度为０．９１～４．３７μｇ／ｍｌ时，其抑菌圈直径与反应剂量有线性关系。经生物学统计分析，实验结果可靠。并与高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）进行对照检测，实验结果基本吻合。

基于基因修饰细胞系的生物检定法研究进展

以药物的作用机制为基础,采用细胞与分子生物学技术构建特定基因修饰细胞系并开发相应的检测方法,可用于相关产品的生物检定。这种基于基因修饰细胞系的生物检定法在药物的质量控制领域具有广泛的应用前景。本文探讨了基因修饰细胞系的构建策略及检测方法的基本原理,并概述了基于基因修饰细胞系的生物检定法在重组蛋白类、疫苗类、基因治疗类等不同产品质量评价中的研究进展及应用情况。