血清可溶性白介素2受体在判断新生儿呼吸窘迫综合征严重程度和预后中的临床价值分析

目的探讨血清可溶性白介素2受体(sIL-2R)在判断新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)严重程度和预后中的临床价值。方法选取2019年5月至2022年5月临沂市妇幼保健院收治的116例NRDS患儿作为观察组,根据疾病严重程度分为轻度组(Ⅰ~Ⅱ级,n=77)、重度组(Ⅲ~Ⅳ级,n=39)。另选取同期于本院产科出生的120名健康新生儿作为对照组。比较观察组与对照组血清sIL-2R水平,统计患儿预后情况,比较不同预后患儿血清sIL-2R水平,单因素及多因素Logistic回归分析影响NRDS患儿预后的危险因素。结果重度组血清sIL-2R水平高于轻度组、对照组,且轻度组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。住院期间,116例NRDS患儿存活99例,死亡17例。死亡患儿血清sIL-2R水平高于存活患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。血清sIL-2R预测NRDS患儿预后的AUC为0.894(95%CI:0.844~0.944),截断值为62.92ng/L,特异度为84.16%,灵敏度为80.79%。存活与死亡患儿性别、分娩方式、宫内窘迫、新生儿窒息、母亲高龄、母亲妊娠期高血压情况、血小板计数(PLT)、血红蛋白(Hb)水平、部分活化凝血酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fg)水平比较差异无统计学意义;存活和死亡患儿胎龄、出生体质量、母亲妊娠期糖尿病、肺部超声评分、WBC、凝血酶原时间(PT)比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,胎龄小、出生体质量低、肺部超声评分低、sIL-2R水平高是NRDS患儿预后不良的危险因素(P<0.05)。结论血清sIL-2R在NRDS患儿中呈高表达,且与疾病严重程度和预后有关,对NRDS预后的评估具有较高的临床价值。

妊高征患者血清新喋呤、白介素2及可溶性受体的变化与意义

目的:通过观察妊高征患者血清新喋呤、白介素2及可溶性受体(sIL-2R) 水平的变化, 探讨妊高征患者细胞免疫功能的变化及意义。方法: 采用酶联免疫吸附分析法与放射免疫分析法测定28例妊高征(轻、中度12例, 重度16例)和30例正常孕妇的血清新喋呤、白介素2和sIL-2R水平; 比较二组间新喋呤、白介素2和sIL-2R水平的差异; 观察新喋呤、白介素2和sIL-2R水平与妊高征病情的关系。结果: 妊高征患者血清新喋呤、白介素2和sIL-2R水平显著高于对照组(t'=4 543, P<0 .001; t=2. 946, P<0. 01; t'=2 .251, P<0. 05); 重度妊高征患者新喋呤水平显著高于轻、中度患者(t'=2 .913,P<0 .01), 重度妊高征患者与轻、中度患者组比较白介素2和sIL-2R均无显著性差异(t=0 .888, P>0 .2; t=0. 444, P>0 .5)。结论: 妊高征患者血清新喋呤、白介素2及可溶性受体水平显著增高, 新喋呤水平随妊高征病情加重而增高, 提示细胞免疫活性增强可能与妊高征的发生和发病有关。

人参茎叶皂甙调节创伤小鼠白介素2及白介素2受体基因表达的实验研究

小鼠皮下注射人参茎叶皂甙（ＧＳＬ）５０ｍｇ／ｋｇ，连续４天，可明显对抗创伤小鼠淋巴细胞白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ、ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）ｍＲＮＡ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ水平的受抑状态，并降低创伤小鼠血清、巨噬细胞、ＴＳ细胞对正常淋巴细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ、ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ的抑制作用。０．１～１００ ｇ／ｍｌ的ＧＳＬ在体外可升高创伤小鼠淋巴细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ及Ｌ－２ＲｍＲＮＡ水平，表明ＧＳＬ可增强创伤后ＩＬ－２Ｒ及ＩＬ－２Ｒ的基因转录表达。

吉兰-巴雷综合征患者外周血清白介素2、干扰素α及抗体水平的检测

目的探讨白介素2(IL-2)、抗白介素2抗体(IL-2Ab)、干扰素α(IFN-α)和抗干扰素α抗体(IFN-αAb)在吉兰-巴雷综合征(GBS)患者病理免疫机制中的作用和意义.方法采用ELISA检测了50例GBS病人和30名健康人血清IL-2I、L-2Ab、IFN-α和IFN-αAb,并进行比较.结果GBS患者血清IL-2I、L-2Ab、IFN-α和IFN-αAb均比正常对照组明显升高.结论IL-2、IFN-α及其相应抗体可能参与了GBS的免疫病理过程,IL-2Ab和IFN-αAb可能作为中和性抗体对IL-2和IFN-α起负调节作用,且可能与疾病的自限有关.

狼疮性肾炎患者血清中白介素2及可溶性白介素2受体水平的研究

目的探讨血清白介素2(IL-2)、可溶性白介素2受体(sIL-2R)与狼疮性肾炎(LN)的关系。方法IL-2、sIL-2R检测采用酶联免疫吸附实验法(ELISA)。结果(1)LN患者血清IL-2水平显著低于正常对照组,经治疗后IL-2水平上升不明显,仍低于正常对照组,(2)LN患者血清sIL-2R水平显著高于正常对照组,经治疗后sIL-2R水平明显下降,但仍高于正常对照组。(3)LN患者血清IL-2水平与抗dsDNA抗体滴度及血清补体C3无显著相关;而sIL-2R水平与抗dsDNA抗体滴度呈正相关,与血清补体C3呈负相关。结论IL-2、sIL-2R可能参与了LN的发病;sIL-2R水平与LN的活动性相关。

反复呼吸道感染儿童血清中白介素2,4,8及受体2的检测

目的 观察反复呼吸道感染 (RRI)患儿血中部分细胞因子的状况 ,了解患儿机体的免疫功能状态。方法 采用ELISA双抗体夹心法对 70例RRI患儿及 2 0例正常儿童血清中的IL2、IL4、IL8、IL2R进行检测。结果 RRI患儿血清中IL2R比正常组明显上升 (P <0 0 1) ,IL2比正常组明显下降 (P <0 0 1) ,IL4比正常组明显上升 (P<0 0 5 )。IL2与IL2R成直线相关 (r=0 2 92 ,P <0 0 5 )。结论 RRI患儿机体体液免疫功能紊乱 ,TH1/TH2细胞因子偏移与儿童RRI的发病有关。

联合使用干细胞因子、FLT3配基与白介素2,7,15体外扩增人脐血来源CIK/NK细胞

通过干细胞因子 (SCF)、FLT3配基 (FL)联合白介素 (IL) 2 ,7,15等的不同组合体系体外扩增人脐血来源的CIK NK细胞 (CB CIK NK) ,探讨不同培养方式对CB CIK NK细胞诱导、扩增产率的影响。按诱导扩增体系的不同分 3组 :A组 (SCF +IL2 +IL7+IL15 ) ,B组 (SCF +FL +IL2 +IL7+IL15 )和C组 (IL2 +IL7+IL15 ,对照组 ) ,培养 2 1天 ,检测CD3+ CD5 6 + CIK细胞、CD3- CD5 6 + NK细胞比例和扩增倍数。结果表明 :经 2 1天培养 ,A ,B及C组CIK细胞比例分别为 (19.84± 2 .93) %、(2 6 .2 0± 4 .0 5 ) %及 (2 4 .0 3± 4 .99) % ;而NK细胞的比例A、B及C组比例分别为 (4 9.6 0± 1.4 0 ) %、(5 1.16± 6 .4 5 ) %及 (30 .85± 8.12 ) %。含SCF +FL的B组扩增效率最高 ,其中CIK细胞的扩增倍数由对照组 (C组 )的 (5 75 81± 2 2 1.72 )倍增加至 (796 .0 9± 2 78.4 7)倍 (最高为 1313倍 ) ;NK细胞由对照组 (C组 )的 (30 .39± 14 .4 7)倍增加至 (6 5 .85± 30 .83)倍 (最高为 12 1.0 6倍 )。结论 :通过合适的细胞因子组合可以同时扩增CB来源的CIK NK细胞 ;联合诱导、扩增CB CIK NK细胞以采用含SCF +FL +IL2 +IL7+IL15的培养体系为佳。

不同感染状态下梅毒患者血清白介素2、10和12检测结果分析

梅毒是由梅素螺旋体（TP）引起的一种慢性性传播性疾病，可以引起全身各组织器官的损害，临床表现复杂多样。部分患者在出国、婚检、献血及手术等情况下意外发现，具体感染日期不明，且无临床表现，在排除神经梅毒后，称之为潜伏梅毒；另外部分患者经积极正规治疗，快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）滴度在早期梅毒半年、晚期梅毒1年以上不能下降或阴转，称之为血清固定：而大部分患者经治疗后RPR能够下降直至阴转。上述3类患者均无临床症状，但处于不同的感染状况。

白介素2基因佐剂协同单纯疱疹病毒1型糖蛋白D核酸疫苗免疫诱导的特异性免疫应答

目的研究白介素2(IL-2)cDNA协同单纯疱疹病毒1型(HSV-1)gD核酸疫苗免疫对机体体液免疫和细胞免疫应答的影响,以及在HSV-1病毒角膜攻击时的保护效果。方法利用pcDNA3.1载体分别构建HSV-1糖蛋白D和IL-2的真核表达质粒pgD和pIL-2,体外鉴定其表达。动物实验分为pcDNA3.1空载体对照组、pgD单独免疫组和pgD+pIL-2联合免疫组3组,具体为通过肌肉免疫接种BALB/c小鼠3次,间隔2周,每次接种质粒100μg,第3次免疫后2周,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体滴度并做亚型分析,利用3H-TdR掺入法进行Th细胞增殖实验,ELISA试剂盒检测Th细胞分泌的IL-2、IFN-γ和IL-10水平,耳廓肿胀实验检测迟发型超敏反应(DTH)反应;HSV-1病毒角膜攻击后,裂隙灯显微镜观察角膜上皮病变。结果与pgD单独免疫组相比,pIL-2的协同免疫可以显著提高IgG2a抗体滴度、Th细胞增殖反应和DTH反应,Th细胞分泌IL-2和IFN-γ水平也显著提高,IL-10水平明显下降。在动物保护实验中,pIL-2的协同免疫明显增强了pgD疫苗在病毒攻击时对角膜的保护效果。结论IL-2cDNA的协同免疫可以显著提高pgD核酸疫苗诱导的体液免疫和细胞免疫应答水平,增加核酸疫苗的免疫保护效果。

大豆异黄酮对奶牛脾脏和肠系淋巴结淋巴细胞干扰素γ、白介素2和白介素4浓度以及雌激素受体β mRNA表达的影响

本试验旨在研究大豆异黄酮对奶牛脾脏与肠系淋巴结淋巴细胞增殖、活化及细胞因子分泌的影响。采用单因素试验设计,不同浓度的大豆异黄酮[0.00(对照)、0.25、1.00、5.00、25.00和100.00μg/mL]与淋巴细胞于37℃、5%CO2下分别共育4、24和48 h,采用双抗夹心酶联免疫法测定培养上清液中的干扰素γ、白介素2和白介素4的浓度,用实时定量PCR法测定脾脏和肠系淋巴结的淋巴细胞中雌激素受体βmRNA表达量。结果表明:1)0.25和1.00μg/mL的大豆异黄酮与脾脏淋巴细胞共育一定时间后均能显著或极显著提高培养上清液中干扰素γ和白介素2的浓度(P<0.05或P<0.01),48 h后,5.00和25.00μg/mL大豆异黄酮能显著抑制脾脏淋巴细胞干扰素γ和白介素2分泌(P<0.05)。2)1.00和5.00μg/mL大豆异黄酮与肠系淋巴结淋巴细胞共育一定时间后干扰素γ和白介素2浓度均显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01);0.25μg/mL大豆异黄酮趋于增加二者浓度,但差异不显著(P<0.05);48 h后,25.00μg/mL大豆异黄酮抑制了干扰素γ(P<0.05)和白介素2(P<0.05)的分泌。3)与对照组相比,试验组脾脏淋巴细胞白介素4浓度无显著变化(P>0.05),而肠系淋巴结淋巴细胞白介素4浓度显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。4)大豆异黄酮能够提高脾脏淋巴细胞干扰素γ/白介素4,但趋于降低肠系淋巴结淋巴细胞干扰素γ/白介素4。5)大豆异黄酮显著或极显著提高了奶牛脾脏和肠系淋巴结中淋巴细胞雌激素受体βmRNA的表达量(P<0.05或P<0.01),且二者间存在正比的剂量关系。总之,大豆异黄酮能够促进奶牛脾脏和肠系淋巴结中淋巴细胞分泌干扰素γ和白介素2,提高干扰素γ/白介素4,促进雌激素受体βmRNA表达,降低白介素4浓度;低剂量(0.25～5.00μg/mL)的大豆异黄酮能够获得较好免疫促进效果,而高剂量(25.00～100.00μg/mL)更能促进雌激素受体βmRNA表达。

白介素2在小鼠分支选择损伤神经源性疼痛模型中的镇痛作用

目的研究白介素2(IL-2)在小鼠分支选择损伤(SNI)神经痛模型中的镇痛作用。方法制作小鼠SNI模型成功后,用Von Frey Filaments刺激法和冷盘法测定腹腔给予IL-2的镇痛作用,并测定阿片肽受体拮抗剂纳洛酮对其镇痛作用的阻断。结果(1)IL-2的镇痛作用在给药后30min出现,75min时消失,105min后又再次出现,可维持24h以上。(2)纳洛酮可以完全阻断IL-2的镇痛作用。结论(1)IL-2在小鼠SNI模型中具有镇痛作用,且镇痛作用呈双峰现象,持续时间较长。(2)IL-2的镇痛作用可能通过阿片受体传导。

抗人胸腺免疫球蛋白联合干扰素γ和白介素2诱导培养细胞因子诱导的杀伤细胞的效果

目的:探讨抗人胸腺免疫球蛋白(ATG)诱导培养的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的活性和功能,为CIK培养体系优化提供依据。方法:采集9例肿瘤患者外周血10 m L,分离单个核细胞,用CD3单抗或ATG(50、250、500μg/L)联合干扰素γ、白介素2诱导培养。培养至第6~10天,采用流式细胞术检测细胞增殖状况,培养至第13天,采用流式细胞术检测CIK免疫表型(CD3、CD4、CD8、CD56)、激活性表面标志(CD28、CD27、CD69、NKG2D)、抑制性表面标志(PD1、CD152)及Granzyme-B、干扰素γ分泌量。结果:4种培养方式下,细胞增殖状况无统计学意义(P>0.05)。与CD3单抗相比,ATG培养的CIK中CD3^+CD4^+和CD3^+CD8^+细胞比例较低(P<0.001),CD3-CD56^+与CD8^+CD69^+细胞比例较高,CD56^+细胞干扰素γ和Granzyme-B分泌水平较高。结论:ATG诱导的CIK免疫活性优于用CD3单抗经典方案培养的CIK,抗肿瘤能力较强。

维胃方对大鼠胃溃疡的疗效及血清白介素2影响的研究

目的观察维胃方对血清白介素-2(IL-2)的影响,探讨其治疗胃溃疡的可能机制。方法采用冰醋酸烧灼法制备大鼠胃溃疡模型。经维胃方治疗后测量胃液pH值、计算溃疡面积、观察溃疡周围病理组织切片,并采用放射性免疫法检测血清IL-2水平。结果从胃黏膜大体观察及病理切片观察,用药组大鼠胃黏膜溃疡愈合良好;与模型组比较,维胃方能恢复胃液pH值(P<0.01);用药组大鼠胃黏膜溃疡面积明显小于自愈组(P<0.01),其中维胃方中剂量组疗效最好〔(2.19±0.26)mm2〕;与自愈组相比较,维胃方各组可升高血清IL-2水平(P<0.05),维胃方中剂量组〔(0.770±0.038)ng/m〕l与雷尼替丁组存在着显著性差异(P<0.05)。结论维胃方对实验性胃溃疡具有明显的愈合作用,其作用机制可能与其改善机体细胞免疫功能,调节血清中IL-2的水平有关。

尖锐湿疣患者的白介素2、可溶性白介素2受体、γ干扰素、白介素4和白介素10的研究

目的:研究白介素2(IL-2)、可溶性白介素2受体(sIL-2R)、γ干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)和白介素10(IL-10)在尖锐湿疣发病机制中的作用。方法:采用双抗体夹心ELISA法,检测尖锐湿疣患者血清和疣体组织中的IL-2、sIL-2R、IFN-γ、IL-4和IL-10的水平。结果:尖锐湿疣组的血清和疣体组织中IL-2和IFN-γ水平都明显低于正常对照组,而IL-4和IL-10水平都明显高于正常对照组(P<0.05);复发组的血清和疣体组织中的IL-2和IFN-γ水平都明显低于未复发组,而IL-4和IL-10水平都明显高于未复发组(P<0.05)。尖锐湿疣组患者血清中sIL-2R水平明显高于正常对照组,复发组血清中sIL-2R水平明显高于未复发组(P<0.05)。结论:尖锐湿疣患者全身和皮损局部的免疫功能均有下降,可能是导致疾病发生和复发的重要原因。

商陆皂苷甲对银屑病患者外周血单个核细胞产生α肿瘤坏死因子和可溶性白介素2受体的影响

目的:研究在体外商陆皂苷甲(EsA)对银屑病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)和可溶性白介素2受体(sIL-2R)水平的影响,探讨其治疗银屑病的可能机制。方法:标本取自30例寻常性银屑病患者和20名健康献血员,利用EsA分别与脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)或植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)协同刺激PBMC,用双抗体夹心ABC-ELISA检测PBMC培养上清液中TNF-α和sIL-2R水平。结果:EsA浓度为1.0～10.0μg/mL时,呈剂量依赖性地明显抑制银屑病患者PBMC释放TNF-α(P<0.05)。EsA浓度在0.5～10.0μg/mL时,PBMC分泌sIL-2R呈轻微的下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),EsA对PHA诱导的sIL-2R释放无显著的抑制作用。结论:抑制TNF-α等炎症递质的释放可能是中国商陆治疗银屑病的机制之一。

瘤体内直接注射白介素2质粒复合物治疗小鼠肝癌

目的:研究瘤体内直接注射白介素2质粒/阳离子脂质体复合物治疗小鼠肝癌的效果。方法:将小鼠白介素2表达质粒(VR1110)与阳离子脂质体(Transfectam)按适当比例混合而形成复合物(VR1110/Transfectam)。通过瘤体内直接注射此复合物治疗小鼠肝癌模型,并和卡介苗(BCG)的治疗相比较。结果:瘤体内注射VR1110/Transfectam后,可在肿瘤组织中检测到小鼠IL-2mRNA的表达。VR1110/Transfectam治疗组以及VR1110/Transfectam/BCG治疗组肿瘤生长较其它组明显减慢,均显著提高小鼠的生存率(P<0.05),但二者相差不明显。结论:瘤体内直接注射VR1110/Transfectam复合物对小鼠肝癌的治疗作用明显,效果优于卡介苗,且方法简单,适合临床应用。

人白介素2-人血清白蛋白融合蛋白的纯化及活性鉴定

采用课题组已构建的携带人白介素2-人血清白蛋白融合蛋白(rhIL-2-HSA)基因的重组毕赤酵母Pichia pastoris GS115进行rhIL-2-HSA的分离纯化研究。发酵上清液经超滤浓缩、Blue Sepharose亲和层析、Octyl Sepharose疏水层析和DEAE Sepharose离子交换层析纯化获得较高纯度的目的产物,SDS-PAGE检测为单一条带。Western Blot分析结果显示,目的产物同时具有HSA和IL-2的抗原性,为HSA和IL-2的融合分子。经CTLL-2/MTT细胞增殖法测定,纯化的融合蛋白的生物学活性为1.147×107 IU/mg。

表达猪白介素2基因重组腺病毒的构建及其免疫增强作用

以猪白介素2基因(pIL-2)为研究对象构建表达pIL-2的重组腺病毒,并研究其作为细胞因子佐剂的免疫增强作用。用RT-PCR的方法扩增pIL-2基因,将pIL-2基因克隆到腺病毒穿梭载体AdTrack中,构建出重组腺病毒穿梭质粒AdTrack-pIL-2,然后在大肠杆菌BJ5183内和骨架载体AdEasy同源重组,获得重组腺病毒骨架载体AdEasy-pIL-2,转染HEK293细胞,包装出重组腺病毒Ad-pIL-2,并通过兔体交互试验来检测Ad-pIL-2的免疫增强作用。经PCR、RT-PCR和Western blot检测,成功构建了Ad-pIL-2,病毒滴度可以达到108.25pfu/mL,并通过兔体交互免疫试验证明Ad-pIL-2可以提高兔的抗体水平。用腺病毒构建的Ad-pIL-2在兔体上具有免疫增强作用,为下一步的猪体试验研究和细胞因子佐剂的开发奠定基础。

食管癌上皮细胞及其浸润淋巴细胞白介素2和白介素10的表达

目的观察食管癌上皮细胞及其浸润淋巴细胞(TIL)白介素-2(IL-2)和白介素-10(IL-10)的表达,探讨二者与食管癌发生、发展的关系。方法应用即用型SABC免疫组化法(SP法)观察20例食管癌上皮细胞及其TIL的IL-2、IL-10表达情况。结果全部标本的癌上皮细胞IL-2、IL-10的表达均高于对照癌旁组织,16例标本(80%)的癌上皮细胞IL-10的表达高于IL-2;癌组织中淋巴细胞(TIL)很多,大部分标本的TIL存在表达IL-2(16,80%)、IL-10(18,90%)的不同的TIL,16例标本(80%)的TIL的IL-10表达高于IL-2;对照癌旁组织中淋巴细胞均未见IL-2、IL-10的表达。结论食管癌上皮细胞表达IL-2、IL-10,可能与其发生、发展有关;食管癌组织存在表达IL-2、IL-10的异质性TIL,且呈Th2漂移;对照癌旁组织中淋巴细胞均未见IL-2、IL-10的表达。。