反相高效液相色谱测定氨溴特罗口服溶液中盐酸克仑特罗的研究

建立氨溴特罗口服溶液中盐酸克仑特罗成分含量测定的方法并开展方法学验证。采用ZORBAX SB-C18色谱柱,流动相为磷酸二氢钾溶液-甲醇,检测波长244 nm,柱温40℃,流速1.0 mL·min^(-1),进样量10μL。结果显示,盐酸克仑特罗在0.0511~0.4099μg·mL^(-1)范围内线性关系良好;平均回收率(n=9)为100.0079%,RSD为1.57%。测得盐酸克仑特罗含量为标示量的98.96%,符合药典标准。

高效液相色谱法测定复方异维倍克气雾剂中异丙托溴铵和盐酸克仑特罗的含量

目的:建立高效液相色谱法测定复方异维倍克气雾剂中异丙托溴铵和盐酸克仑特罗含量。方法:采用反相高效液相色谱法。Intersil C_(18)分析色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(16:84;含0.4%三乙胺,磷酸调 pH 为3),流速1.5 mL·mL^(-1),检测波长205 nm。结果:异丙托溴铵和盐酸克仑特罗的理论板数分别为2400和3500。异丙托溴铵回归方程Y=128458X+58038,r=0.9999,线性范围18.20～182.0μg·mL^(-1);盐酸克仑特罗回归方程 Y=1251564X+10954,r=0.9995,线性范围9.200～46.00μg·mL^(-1)。异丙托溴铵平均回收率为97.4%(n=5),RSD 为2.2%;盐酸克仑特罗平均回收率为100.8%(n=5),RSD为1.9%。异丙托溴铵和盐酸克仑特罗最低检出浓度分别为0.2μg·mL^(-1)和0.03μg·mL^(-1)。结论:方法简便,结果准确。

盐酸克仑特罗对小鼠胚胎体外发育的影响

目的:探讨盐酸克仑特罗对小鼠1-细胞胚胎和2-细胞胚胎体外发育的影响。方法:获取小鼠1-细胞和2-细胞胚胎,分别与盐酸克仑特罗10 ng/mL,3 ng/mL和1 ng/mL的3个剂量组共培养,观察胚胎各阶段的发育情况并计算胚胎的发育率。结果:1ng/mL和3ng/mL组的1-细胞小鼠胚胎,从4-细胞期到囊胚阶段的发育率与对照组相比差异显著(P<0.05),3 ng/mL组显现出比1ng/mL组更强的抑制作用(P<0.01),10 ng/mL组,2-细胞期就与对照组有差异(P<0.05,其中 4-细胞至囊胚阶段P<0.01),囊胚率只有2.4％。10 g/mL组及3 ng/mL组的2-细胞小鼠胚胎,分别从4-细胞期和8-细胞期与对照组相比差异显著(P<0.05),1 ng/mL组的各个阶段胚胎发育率与对照组相比未见统计学差异(P>0.05)。培养液中含有盐酸克仑特罗使胚胎的粗颗粒增多,部分印裂球碎裂、退化。结论:盐酸克仑特罗对小鼠胚胎的体外发育有毒性作用并呈一定的剂量效应。盐酸克仑特罗使1-细胞小鼠胚胎被抑制在2-细胞期,对处于晚2-细胞期胚胎的影响明显降低。

盐酸克仑特罗ELISA试剂盒的研制

在间接竞争酶联免疫吸附法的基础上,研制了一种可以检测尿样或食品中盐酸克仑特罗的试剂盒。ELISA检测方法的各个影响因素均通过实验进行了优化。该试剂盒具有良好的灵敏度,半抑制率(IC50)为0.6ng/ml,该抗体与肾上腺素等结构类似物的交叉反应率均小于0.3%,回收率为90%～104%,批内变异系数小于6%,批间变异系数小于10%,试剂盒在12个月保存期内稳定。可用于盐酸克仑特罗的快速定量检测。

离子色谱电化学修饰法测定盐酸克仑特罗

目的：用离子色谱电化学修饰方法测定盐酸克仑特罗,为建立这种测定方法简单,灵敏度大大提高的分析测试方法提供依据.方法：本实验采用离子色谱分离、碳纳米管修饰电极、直流安培检测,Dionex AG9-HC保护柱（2 mm×50 mm）（两根连接）,8 mmol/L碳酸钠＋10%甲醇为淋洗液测定盐酸克仑特罗.结果：该方法具有良好的重现性、线性关系和较低的检测限.修饰后,盐酸克仑特罗的检测限是0.0003 mg/L;样品测定的回收率分别为96%～103%.结论：采用离子色谱电化学修饰方法测定盐酸克仑特罗,测试结果表明,该方法的准确度、精密度均较好,满足分析测试要求,采用碳纳米管修饰电极测定,使峰高和峰面积都显著提高,从而大大地提高了检测的灵敏度,是一种简便快速、分离效果良好的分析方法.

肺气肿胶囊中微量盐酸克仑特罗的LC-MS／MS法测定

建立了LC-MS/MS法测定肺气肿胶囊中微量盐酸克仑特罗的含量。采用Phenomenex Luna(2)C18色谱柱,柱温30℃,流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液(40∶60),流速0.2ml/min,以盐酸班布特罗为内标,电喷雾离子化,选择性正离子方式检测,检测离子分别为m/z277.0/202.9(盐酸克仑特罗)和m/z368.5/294.0(内标)。盐酸克仑特罗在1～200ng/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.9992),平均回收率为98.1%,RSD为1.18%,检测限为4.4pg。

反相离子对HPLC法同时测定安喘片中马来酸氯苯那敏和微量盐酸克仑特罗的含量

目的建立反相离子对高效液相色谱法同时测定安喘片中马来酸氯苯那敏和微量盐酸克仑特罗的含量。方法采用Shim-pack VP-ODS色谱柱,以0.02mol.L-1十二烷基硫酸钠溶液(用冰醋酸调节pH值至3.0)-乙腈(46∶54)为流动相,流速:1.0mL.min-1,柱温:35℃,检测波长:210nm。结果马来酸氯苯那敏和盐酸克仑特罗分别在0.193～19.3μg与4.14～414ng范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为97.80%(RSD=0.9%,n=6)和99.56%(RSD=0.8%,n=6)。结论本法简便、结果准确,可用于同时测定安喘片中马来酸氯苯那敏和盐酸克仑特罗的含量。

动物源性食品中盐酸克仑特罗残留检测技术平台的建立及应用

目的建立动物性食品中盐酸克仑特罗残留快速检测技术,确保食品安全卫生。方法用重氮化法将小分子盐酸克仑特罗与牛血清白蛋白(BSA)偶联,将这种偶联物作为免疫抗原,免疫新西兰小白兔,获得高效价抗血清。用protein A-sepharose亲和层析柱分离纯化抗血清,再将抗体包被到96孔板上,利用直接竞争酶联免疫法,建立了β-盐酸克仑特罗酶联免疫检测试剂盒。结果该试剂盒批内变异系数(CV)为4.48%。平均回收率为89.2%。样品检测限量:尿为0.1 ng/ml;组织为0.5 ng/g。与肾上腺素、异丙肾上腺素、去甲肾上腺素的交叉反应率<1%、与沙丁胺醇交叉反应率<35%,与常用抗生素无交叉反应。该试剂盒在37℃环境中能保存一个月以上,4℃至少保存2年以上。结论该试剂盒稳定、灵敏、特异性强,达到了国家和欧美检测标准,能满足我国市场和进出口食品检测需要。

酶联免疫法测定饲料中盐酸克仑特罗含量

采用酶联免疫法测定饲料中盐酸克仑特罗的含量。方法的最低检测限为100μg/kg,线性范围0.1～2.7μg/L,r=0.9997。浓度为100、500、1000μg/kg的添加水平时,回收率分别为74％、81％和90％;板内变异系数<15.0％,板间变异系数<14.4％。此方法快速、灵敏、准确、经济,具有实际应用价值。

高效液相色谱-电化学法测定人血浆中盐酸克仑特罗浓度

目的:应用高效液相色谱法(HPLC)-电化学法检测人血浆中盐酸克仑特罗含量。方法:采用乙醚-乙醇混合液提取,用C18色谱柱,流动相为体积比7:3的0.02mol/L磷酸二氢钾-乙腈混合液,检测器为电化学检测器,电位0.80V,内标法定量。结果:本法的线性范围是1.5~120.0μg/L,回归方程Y=0.753X+0.011,r=0.9993;最低检出限0.015μg/L,RSD为2.6%~4.2%,平均回收率为93.8%。结论:本法具有灵敏、准确、快速、稳定的特点。

HPLC法测定猪血浆及组织中盐酸克仑特罗的含量

目的建立猪血浆及组织（肌肉、肝脏、肾脏）中盐酸克仑特罗含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱：ODS C18（150 mm×4.6 mm×5μm）;流动相：0.01 mol·L^-1磷酸二氢钠水溶液-甲醇（体积比65∶35）;流速：1 mL.m in^-1;检测波长：243 nm;柱温：25℃,样品提取液为0.5%（ρ）偏磷酸液-甲醇（体积比80∶20）溶液。结果盐酸克仑特罗质量浓度在0.0052.5μg.mL-1范围内与峰面积具有良好的线性关系（r=0.999 2）,平均回收率为81%以上,RSD=1.370%（n=6）,最低检测限0.005μg·g-1。结论本方法准确、灵敏、重现性好,阴性无干扰,可用于CL在实验室残留检测。

气相色谱-质谱法测定猪肝中盐酸克仑特罗的不确定度评定

对气相色谱-质谱法(GC/MS)测定猪肝中盐酸克仑特罗残留的不确定度进行评定。通过对测定过程中各变量的分析,确定了不确定度来源,建立了数学模型,计算出了各变量的不确定度,最后计算出合成不确定度。当猪肝中盐酸克仑特罗残留量为5.10μg/kg时,测定结果的扩展不确定度为0.15μg/kg(k=2)。

市售猪肉盐酸克仑特罗残留卫生学调查与卫生监督探讨

目的 了解中山市市售猪肉 (含猪内脏 )盐酸克仑特罗残留现状 ,提出卫生监督的要点。 方法 采用分层按比例随机抽样的方法 ,在全市肉菜市场以购买方式共抽取 80份市售猪肉 (含猪内脏 ) ,采用气相色谱 /质谱仪联用法(GC/MS)对抽检样品中盐酸克仑特罗残留进行检测 ,同时对市售猪肉的来源进行卫生学调查 ,提出预防控制措施。 结果 80份样品中盐酸克仑特罗阳性检出率为 5 % ,盐酸克仑特罗阳性样品全部来自一个镇区 ,其它镇区均未检出阳性样品。 结论 中山市市售猪肉 (含猪内脏 )中存在盐酸克仑特罗残留 ,但阳性率较低 ,且只在一个区域内检出 ,检出的阳性样品全部为猪内脏 ,猪肉样品阳性检出率为 0 ;非正规渠道进货样品的阳性检出率明显高于正规渠道进货样品。建议将盐酸克仑特罗在动物体内的残留列为常规食品卫生检测项目 ,制定相应的卫生标准。

高效液相色谱/质谱联用仪测定盐酸克仑特罗

利用高效液相色谱质谱检测器 ,建立了检测盐酸克仑特罗的方法。其中质谱 (SIR)检出限为 0 .0 1～ 5 μg/kg ,液相色谱中外检测器的检测限为 0 .3μg/kg ,最大吸收峰 2 96nm ,符合农业部规定动物性食品中的盐酸克仑特罗检测限 :1μg/kg。本方法可用于定量。

喘舒片中盐酸克仑特罗的含量均匀度考察

目的考察喘舒片中盐酸克仑特罗的含量均匀度。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定含量均匀度,并提取参数进行相关的方差分析。结果不同厂家生产的喘舒片中盐酸克仑特罗的含量均匀度参数之间均存在显著性差异(P≤0.01)。结论建议该制剂质量标准中增加盐酸克仑特罗的含量均匀度检查项目。

高效液相色谱法测定动物源食品中微量盐酸克仑特罗方法的研究

目的：探讨HPLC法测定猪眼、猪肝、猪肺中微量盐酸克仑特罗。方法：样品经乙醚-丁醇提取，以HPLC法进行测定。结果：本法线性范围0．5-8．0μg／ml，r=0．9997，添加回收率为76．0％-88．0％，RSD（n=6）为1．4％-3．6％，最小检测量为0．20ng。结论：本法简单实用，结果可靠，可用于市场监测、食物中毒样品溯源检验。

应用ELISA检测肉猪尿液中盐酸克仑特罗方法的研究

应用酶联免疫吸附法 (ELISA) ,检测肉猪尿液中盐酸克仑特罗残留 ,实现了肉猪活体盐酸克仑特罗快速测定。实验结果表明 ,盐酸克仑特罗的线性范围为 2 0 0～ 2 0 0 0ng/kg ,最小检出限为 10 0ng/L ,样品不用前处理可直接检测 ,1个样品的 2个平行样测定时间为 4 5min。

HPLC测定生肉中盐酸克仑特罗残留量的研究探讨

本文从实验的角度讨沦了用HPLC测定生肉中盐酸克仑特罗,比较了不同流动相对分析的影响,建立了简单、快速检测生肉中盐酸克仑特罗的分析方法。

盐酸克仑特罗检测试剂盒的研制

本研究通过将盐酸克仑特罗分别与自制血清白蛋白、牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联后 ,制成免疫原和包被抗原 ,利用单克隆抗体制备技术 ,制备了能够分泌抗盐酸克仑特罗的单克隆抗体细胞株。以自制血清白蛋白效价最好 ,且该株细胞分泌的抗体特异性强 ,与其它克仑特罗类药物无交叉反应。在筛选出盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上 ,首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒。本试剂盒的最低检测限为 0 .1ng/mL ,检测范围为 0 .1- 10ng/mL ,通过对 2 4份阳性样品检测并与德国r-biopharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验 ,阳性符合率 95 .8%。

气相色谱法测定盐酸克仑特罗片含量

盐酸克仑特罗(Clenbuteroli Hydrochloridum)是一种平喘药,主要用于防治支气管哮喘和喘息性支气管炎。化学名称是1-(4-氨基-3,5-二氯苯基-2-叔丁氨基乙醇的盐酸盐,其结构式为 其制剂(片)中含量测定卫生部药品标准和山东省药品标准均采用重氮化—偶合比色法。盐酸克仑特罗在酸性(HCl液)介质中加亚硝酸钠重氮化后,再加盐酸萘乙二胺偶合生成偶氮化合物,在500nm波长处测吸收度。由于在重氮化过程中过量亚硝酸可使偶合试剂变色,干扰显色反应。