木质素氧化酶系高产复合真菌培养体系构建

【目的】通过菌株初筛、单因素培养条件比较以及复合真菌培养体系下木质素氧化酶系酶活性的变化规律研究,获取最优产酶效率培养体系,为生物制浆预处理提供基础和科学依据。【方法】采集颐和园树木上的真菌子实体作为菌种来源,通过生长速度和愈创木酚培养基初筛得到生长快且漆酶活性高的白腐菌菌株,测定菌株木质素氧化酶系漆酶、锰过氧化物酶和木质素过氧化物酶的分泌规律。基于单因素试验探究不同碳源、氮源、pH、添加剂、金属离子、温度等条件对菌株分泌木质素氧化酶系的影响,根据产酶规律选择不同菌株构建1∶1复合真菌培养体系,分析其产酶规律和产酶效率。【结果】初筛得到1株生长快速、高漆酶活性的菌株,经鉴定为白腐菌粗毛栓孔菌(Trametes hirsute)。单因素试验结果显示,葡萄糖和酵母浸粉分别是T.hirsute产酶的最优碳源和氮源;单独添加Cu^(2+)的产酶效率优于同时添加Cu^(2+)和Mn^(2+),产酶量随金属离子浓度增大呈先升后降趋势,0.25 mmol·L^(-1)Cu^(2+)添加效果最佳;产酶量随温度升高也呈先升后降趋势,在38℃、pH=6.5且添加0.5 mmol·L^(-1)藜芦醇和0.5 mmol·L^(-1)对苯二胺条件下对T.hirsute产酶均有促进作用。在培养条件优化基础上,构建T.hirsute与密粘褶菌(Gloeophyllum trabeum)复合真菌培养体系,其产酶能力进一步提高,该体系的木质素氧化酶系3种酶最大总产酶量达1505.81 U·L^(-1),相比对照组提升约63.61%,其中漆酶活性相比对照组提高84.37%,且提前1天达到产酶峰值。【结论】通过初筛获取高漆酶活性白腐菌株T.hirsute,优化产酶条件可显著提升其木质素氧化酶系产酶量,在培养条件优化基础上构建的T.hirsute与G.trabeum复合真菌培养体系能够进一步提升其产酶能力,并促使漆酶提前1天达到产酶峰值,在生物预处理方面展现出巨大应用潜力。

深部真菌感染诊断中G实验与真菌培养联合检测研究

目的:探讨在深部真菌感染(IFI)诊断中G实验与真菌培养联合检测的价值。方法:选取2021年1月—2022年5月北京航天总医院同时做过G实验检测和真菌培养的164例患者的检测资料,取不同患者的痰液、引流液、胸腹水、尿液、肺泡灌洗液、血液和脑脊液等进行G实验和真菌培养,分别测定两种检测方法的阳性率、灵敏度、特异性等进行分析。结果:所有检测患者中,G实验阳性91例、真菌培养阳性72例、二者均阳性66例、均阴型76例。G实验的灵敏度为93.18%、特异性为83.95%、阳性预测值为85.71%、阴性预测值为93.15%;真菌培养的灵敏度为83.13%、特异度为96.3%、阳性预测值为95.83%、阴性预测值为84.78%;两种方法联合诊断的灵敏度为97.59%、特异度为97.53%、阳性预测值为97.56%、阴性预测值为96.34%。结论:在IFI的诊断中G实验在感染早期诊断有一定意义,真菌培养可以基本确定真菌感染以及感染的菌属;G实验和真菌培养联合检测对于诊断IFI具有明显的临床诊断价值。

复合真菌培养物对淮北麻鸡生长性能、血清生化指标及肉品质的影响

试验旨在研究复合真菌培养物对淮北麻鸡生长性能、屠宰性能、血清生化指标及肉品质的影响。选择960只5日龄的淮北麻鸡,随机分为4组,每组4个重复,每个重复60只。其中A组为对照组,其他3组分别在全价粉状玉米-豆粕型基础日粮中添加1.6%、2.0%、2.4%的复合真菌培养物,试验正式期120 d。试验结果表明:在淮北麻鸡10~70日龄阶段,1.6%、2.0%、2.4%组料重比均有降低,其中1.6%和2.4%组料重比显著低于其他组(P<0.05);与对照组相比,试验组的肉色、嫩度、新鲜度均有所提高;试验组的血清生化指标差异不显著,抗氧化能力提升有限。研究表明:复合真菌培养物作为淮北麻鸡的饲料添加剂,在生长性能、肉品质方面有积极影响,综合经济效益分析,复合真菌培养物推荐适宜添加量为2.0%。

痰真菌培养联合半乳甘露聚糖试验对侵袭性肺曲霉病的诊断价值

目的 评价痰真菌培养联合血清半乳甘露聚糖(GM)试验在侵袭性肺曲霉病(IPA)临床诊断中的价值.方法 选择济宁医学院附属医院2016年1月至12月收治的567例疑似曲霉感染住院患者,通过痰培养和血清GM试验测定肺曲霉菌感染的阳性率,分析单独痰培养和联合GM试验对诊断IPA的价值,并比较GM试验和传统方法(胸部CT、痰真菌培养、血培养)检测肺曲霉菌阳性率的差异.同时对发热治疗3~4 d无效患者根据病情结合辅助检查结果(胸部CT、痰真菌培养及GM试验)给予抗真菌治疗,观察抗真菌治疗的效果.结果 入选患者中,GM试验阳性85例,痰真菌培养阳性226例,两者同时阳性108例,两者同时阴性148例;确诊186例(32.8%),临床诊断107例(18.9%),拟诊131例(23.1%),排除IPA感染143例(25.2%).GM试验联合痰真菌培养诊断肺曲霉菌感染的敏感度〔98.2%(108/110)比20.4%(46/226)〕、特异度〔85.1% (148/174)比45.1%(148/328)〕、阳性预测值〔80.6%(108/134)比37.1%(46/124)〕、阴性预测值〔98.1%(148/151)比63.0%(148/235)〕均较单独痰真菌培养明显提高;GM试验检测肺曲霉菌感染的阳性率明显高于胸部CT、痰真培养及血培养等传统检测方法〔64.7%(55/85)比35.7%(35/98)、20.4%(46/226)、4.8%(14/292)〕,以GM值0.5作为阳性界值对IPA诊断有着良好的敏感度及特异度.本研究对186例患者完成抗曲霉菌治疗.随着治疗时间的延长,治疗1、2、3、6个月抗真菌治疗有效率无明显变化〔分别为75.4%(135/179)、77.1%(111/144)、77.2%(31/79)、82.6%(19/23)〕,但血清GM含量与治疗前比较明显降低〔吸光度(A)值:0.49±0.03、0.46±0.03、0.39±0.03、0.23±0.03比0.56±0.03,均P<0.05〕,阳性例数也逐渐减少(分别为186、179、144、79、23例),所以动态进行GM试验检测有助于观察疗效.结论 痰真菌培养联合血清GM抗原检测能明显提高曲霉菌感染病例的临床诊断效率.

多点接种真菌培养法在甲真菌病病原学诊断中的应用研究

目的阐明多点接种真菌培养法在实验室诊断甲真菌病的作用和意义。方法采用多点接种真菌培养法和传统的点植培养法对两组甲真菌病患者的甲屑进行致病真菌的分离和鉴定,比较两种方法检出甲真菌病致病真菌的构成比例。结果试验组和对照组培养阳性率分别为为53.04%和37.50%(P=0.029)。致病菌分离鉴定结果:试验组皮肤癣菌49.21%,酵母菌36.51%,霉菌14.29%;对照组则分别为76.92%,20.51%和2.82%(P=0.001)。试验组共检出2例混合感染,对照组则无。结论多点接种法真菌培养可以提高对甲真菌病的病原菌的检出率,尤其是对非皮肤癣菌酵母菌和霉菌的检出率,且有助于发现甲真菌病的混合感染,但对非皮肤癣菌致病性的判定有待进一步研究。

血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测和真菌培养在诊断深部真菌感染的临床价值

目的探讨血浆中(1-3)-β-D葡聚糖检测和真菌培养在诊断深部真菌感染的临床价值。方法对我院2008年4月至8月长期使用免疫抑制剂、皮质类固醇激素和/或广谱抗生素,且有感染体征的108例患者,在其发热当天抽静脉血做(1-3)-β-D葡聚糖检测,同时留取血液、呼吸道、泌尿道和肠道标本做真菌培养。通过回顾性调查,了解临床用药及患者是否症状缓解作为临床诊断标准,并以此为标准比较两者的差异。结果108例患者中使用抗真菌药物且症状缓解32例,使用抗真菌药物症状未缓解和未使用抗真菌药物并症状缓解76例。在108例患者中(1-3)-β-D葡聚糖含量检测阳性31例,阴性77例。108例真菌培养阳性59例,阴性49例。(1-3)-β-D葡聚糖含量检测与真菌培养结果对比差异显著(χ2=11.529,P<0.01);(1-3)-β-D葡聚糖含量检测与临床诊断对比差异不明显(χ2=0.0105,P>0.05);真菌培养与临床诊断比较差异显著(χ2=11.215,P<0.01)。结论血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测在诊断深部真菌感染方面的临床价值明显优于真菌培养。

甲真菌病979例真菌培养结果分析

甲真菌病是由真菌引起的指（趾）甲病变，其病原菌主要有皮肤癣菌、酵母菌和非皮肤癣菌性霉菌3类。我院是海南省最大的皮肤病专科医院，患者来自全岛各地。总结其甲真菌病病原菌的情况。对了解本病病原体在本地区流行的情况有一定代表性。我们对2011年1月-2015年5月到我院皮肤科就诊的甲真菌病患者采集病甲样本进行真菌培养，现将培养结果分析报告如下。

添加真菌培养物对人工瘤胃pH和挥发性脂肪酸产量及比例的影响

用瘤胃持续模拟技术研究玉米和稻草在瘤胃内发酵产生总挥发性脂肪酸 (TVFA)量、VFA能。结果表明 :添加A、B、C、D、E和F 6种真菌培养物发酵的玉米和稻草 0～ 72h的TVFA每 10 0mL中分别为 5 .0 7,4 .31,8.77,4 .30 ,9 75 ,3.32mmol和 4 .0 9,2 .36 ,8.6 8,7.6 6 ,9.95和 2 .94mmol。

威海地区547例甲真菌病真菌培养结果分析

目的了解山东省威海地区甲真菌病的临床分类、菌种构成等流行情况。方法对547例镜检阳性的甲真菌病患者进行真菌培养、鉴定和临床分析。结果547例患者中真菌培养阳性423例,阳性率77.3%,远端侧位甲下型甲真菌病(DLSO)295例(53.9%),白色浅表型甲真菌病(SWO)36例(6.5%),近端侧位甲下型甲真菌病(PSO)78例(14.2%),全甲营养不良型甲真菌病(TDO)138例(25.2%)。共分离出429株真菌,其中皮肤癣菌354株(82.5%),酵母菌61株(14.2%),非皮肤癣菌霉菌14株(3.3%)。结论山东省威海地区甲真菌病病原体的分布以皮肤癣菌为主,其次为酵母菌和非皮肤癣菌霉菌,红色毛癣菌是最常见的皮肤癣菌,临床类型以DLSO型居多,其他依次是TDO、PSO、SWO。就诊人群中以20～50岁年龄段为最多见。

马尔尼菲青霉病的真菌培养与鉴定

目的 :明确并检出引起马尔尼菲青霉病的病原菌为马尔尼菲青霉 (penicilliummarneffei ,PM )。方法 :取患者血液、骨髓、皮损分泌物等接种于沙保培养基 ,分别置于 2 5℃和 3 7℃孵育 ,观察PM生长情况及菌落形态 ,并涂片、固定、染色 ,显微镜下观察菌体特征。结果 :PM为双相性真菌 ,于 2 5℃为青霉相 ,在含糖培养基中产生具有特征性的红色色素 ,镜下可见典型的帚状枝 ;于 3 7℃及人体为酵母相 ,无色素产生 ,镜下可见酵母样细胞 ,形似腊肠。结论 :马尔尼菲青霉病诊断的金标准是从患者体内分离出马尔尼菲青霉。确诊时须排除组织胞浆菌病。

164例刮片镜检与真菌培养结果比较

目的通过对刮片标本直接涂片镜检与真菌培养两种方法比较真菌检出率,探讨真菌学诊断的影响因素。方法对门诊患者的164例刮片进行涂片镜检和真菌培养。结果涂片镜检阳性而真菌培养阴性有14例,涂片镜检阴性而真菌培养阳性有8例。结论两种方法相互补充,为临床正确分析真菌学检验结果提供参考。

G实验和真菌培养在艾滋病人深部真菌感染中的联合诊断

目的研究并探讨G实验与真菌培养联合诊断在艾滋病患者深部真菌感染中的诊断价值。方法于2014年6月-2016年7月,选取120例疑似合并深部真菌感染的艾滋病患者进行G实验检测、真菌培养,以临床综合诊断结果作为金标准,对单一及联合诊断对艾滋病患者深部真菌感染的诊断结果进行分析。结果 120例疑似合并深部真菌感染的艾滋病患者中,共有100例患者经临床综合诊断被证实为深部真菌感染。联合诊断的诊断敏感度明显高于单一的G实验、真菌培养(P<0.05),其特异度与单一检测结果较为接近(P>0.05),且联合诊断的Youden指数最高,说明其筛查效果最好。G实验、真菌培养与确诊结果的一致性中等,而联合诊断与确诊结果的一致性良好。结论G实验、真菌培养联合诊断可有效提高艾滋病患者深部真菌感染的诊断价值。

血浆1-3-β-D葡聚糖检测联合真菌培养对深部真菌感染诊断的价值

目的探讨血浆中1-3-β—D葡聚糖（BG）检测（G试验）联合真菌培养对深部真菌感染诊断的临床应用价值。方法收集我院2012年1月～2013年6月1010例住院患者资料，免疫比浊法检测1—3-β—D葡聚糖（G试验）含量，联合真菌培养结果，与临床诊断进行比对分析。结果136例患者确诊为DFI，真菌培养阳性率为100％，G试验阳性率（〉20μg／L）为92．65％。539例患者疑诊为DFI，真菌培养阳性率为66．23％，G试验阳性率为33．77％。335例患者排除诊断为DFI，真菌培养阳性率为0，G试验阳性率为0.1010例怀疑DFI的患者中，G试验阳性患者为308例，包括确诊DFI和疑诊DFI患者，确诊DFI患者BG含量中位数，最小值和最大值均明显高于疑诊DFI患者BG含量。G试验阴性（〈20仙g／L）患者为702例，确诊DFI患者，疑诊DFI患者和排除诊断DFI患者BG含量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论G试验联合真菌培养能用于准确确诊和排除诊断DFI，并且BG含量能反映诊断DFI的可靠程度。

痰真菌培养和涂片镜检对下呼吸道感染的诊断价值

目的分析痰真菌培养和涂片镜在下呼吸道感染中的诊断价值。方法选取2015年1月至2017年12月前来我院就诊的120例下呼吸道感染患者,所有患者均行痰真菌培养和涂片镜检检查,对比诊断结果。结果痰真菌培养其阳性检出率高于涂片镜,组间数据对比有统计学意义(P<0.05);且不同检查方法侧重点不同,痰真菌培养检测物为曲霉菌、白色假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌及热带假丝酵母菌,涂片镜检测物多为菌丝、孢子无菌丝、孢子及菌丝。结论痰真菌培养在下呼吸道感染中的诊断率高于涂片镜检查,但其操作复杂且耗时长,医者可根据患者病情结合其意愿推荐使用,以便准确为患者诊断疾病。

G试验与真菌培养结果比较及其在临床中的诊断价值

目的:探讨血浆(1-3)-β-D-葡聚糖检测(G试验)在深部真菌感染早期诊断中的应用并评价其临床价值。方法:选取98例疑似深部真菌感染的住院患者,对其血浆G试验检测结果以及不同部位真菌培养结果进行回顾性分析,比较两种方法的阳性率,并计算血浆G试验检测的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果:血浆G试验阳性率远高于真菌培养法(57.1%vs.34.7%),差异具有统计学意义(χ2=5.7,P<0.05);血浆G试验的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别73.5%、51.6%、44.6%和78.6%。结论:与传统的真菌培养法相比,血浆G试验简便,快速,阳性率高,阴性预测值较好,但在确诊深部真菌感染时仍有必要结合真菌培养结果进行判断,提高诊断的阳性预测值。

真菌培养和血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测在深部真菌感染诊断中的应用价值

目的评价真菌培养、血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测(G试验)在深部真菌感染(DFI)中的诊断价值。方法回顾性分析105例疑似DFI患者G试验检测结果、不同部位真菌培养结果,以临床综合诊断结果为准,对比上述两种方法及联合检测诊断DFI的价值。结果 105例疑似DFI患者确诊96例,G试验阳性诊断符合率为72.92%,真菌培养阳性诊断符合率为86.46%,联合G试验和真菌培养阳性诊断符合率为93.75%。一致性检验提示,G试验与临床综合诊断Kappa=0.502,真菌培养与临床综合诊断Kappa=0.618,联合检测Kappa=0.735。G试验、真菌培养、联合检测诊断DFI的灵敏度、特异度、曲线下面积分别为72.01%、70.28%、0.725;83.25%、71.02%、0.803;89.15%、76.32%、0.922。结论真菌培养和G试验对DFI均有较高诊断价值,与临床综合诊断均有较好一致性,联合检测可提高诊断DFI灵敏度、准确度和可信度。