等臂双着丝粒Y染色体胎儿的产前诊断、遗传咨询与随访

目的分析5例等臂双着丝粒Y染色体[idic(Y)]胎儿的产前诊断、遗传咨询与随访结果,为idic(Y)胎儿的临床处理提供参考依据。方法选择2018年1月至2022年8月7347例有产前诊断指征的孕妇,采用常规G显带核型及染色体微阵列分析(CMA)技术检测胎儿羊水,并用荧光原位杂交(FISH)技术验证,亲代染色体核型溯源检测。遗传咨询后跟踪随访妊娠结局。结果共诊断新发的idic(Y)胎儿5例,其中例1胎儿为单纯的idic(Yq),例2~5均为idic(Yq)与X单体的嵌合体。产前超声提示5例胎儿均为男性,除例1胎儿伴双侧马蹄内翻足可能外,其余4例均未见明显结构畸形。结合超声结果并予以个性化咨询后,例1~2选择继续妊娠,例3~5均终止妊娠。随访例1患儿至4周岁,足内翻手术效果良好,轻度发育迟缓经康复训练后好转;随访例2患儿至2周岁,暂未见异常表型;例3已再次受孕并分娩1名健康女婴;例4~5仍在备孕中。结论细胞与分子遗传学技术的联合应用有助于产前诊断idic(Y)胎儿,合理的遗传咨询及长期随访可为其后续的临床诊疗提供重要依据。

血清抗着丝粒蛋白F抗体在乳腺癌中的临床价值探讨

目的:探讨血清抗着丝粒蛋白F抗体(anti-centromere protein F antibody,anti-CENPF)在乳腺癌中的临床价值。方法:收集100例初诊乳腺癌(breast cancer,BC)患者、40例乳腺良性疾病(non breast cancer,non-BC)患者和40名健康体检者(healthy control,HC)血清,采用酶联免疫吸附试验检测血清中的anti-CENPF水平,同时化学发光法测定血清糖类抗原153(carbohydrate antigen 153,CA153)的水平。结果:BC组血清anti-CENPF水平高于non-BC组和HC组,差异有统计学意义(P<0.05)。anti-CENPF和CA153诊断乳腺癌中的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.714和0.672,两者联合检测的AUC为0.739。有淋巴结转移、远处转移或者人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)阴性的乳腺癌患者血清anti-CENPF浓度明显升高(P<0.05)。不同肿瘤大小、临床分期、分子分型乳腺癌患者血清anti-CENPF水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。组间比较显示Ⅳ期和Ⅲ期血清anti-CENPF浓度高于Ⅰ期和Ⅱ期,HER-2过表达型、Luminal B型血清anti-CENPF水平低于三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)患者。雌激素受体(receptors estrogen,ER)阳性的乳腺癌患者中,HER-2阴性组的anti-CENPF浓度高于HER-2阳性组,差异有统计学意义(P=0.026)。结论:血清antiCENPF在乳腺癌的诊断、临床分期及分子分型中发挥了重要作用,其水平可能与乳腺癌预后呈负相关,有望成为乳腺癌潜在的疾病标志物。

嵌合型Y染色体等臂双着丝粒致胎儿主动脉狭窄1例报告及文献复习

目的:通过对先天性主动脉狭窄(AS)胎儿产前诊断结果进行遗传学分析,明确其可能的致病原因。方法:1例孕25周孕妇,因“胎儿AS”行羊膜腔穿刺术采集羊水,行染色体G显带核型分析联合单核苷酸多态性微阵列(SNP-array)检测。同时采集胎儿父母外周血,行染色体核型分析。结果:胎儿核型分析,为嵌合型Y染色体等臂双着丝粒;SNP-array分析,胎儿染色体Yp11.31q11.21区段存在11.2 Mb片段的重复,同时Yq11.21q11.23区段存在14.8 Mb片段的缺失。胎儿父母均为正常核型,考虑其为新发变异。经充分遗传咨询后,孕妇及家属选择回当地引产。结论:嵌合型Y染色体等臂双着丝粒的染色体核型可能是男性胎儿表型为AS的原因,羊水细胞染色体核型分析联合SNP-array检测有助于该病的早期诊断。

着丝粒蛋白U在结直肠癌患者肠组织中的表达情况及临床意义

目的旨在探讨着丝粒蛋白U(centromere protein U,CENPU)在结直肠癌患者肠组织中的表达情况,并结合生物信息学分析其表达水平对结直肠癌患者预后的影响。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)法以及免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)实验验证CENPU在组织中的表达情况。结合患者临床病例资料,通过单因素和多因素Cox回归分析CENPU的表达与结直肠癌患者临床病例参数的相关性;然后通过绘制受试操作者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线和Kaplan-Meier生存曲线,探究CENPU的表达对结直肠癌患者预后的预测作用。最后,通过生物信息学分析CENPU的表达对结直肠癌疾病进展影响的可能分子机制。结果通过qRT-PCR、WB法以及IHC实验均发现,与正常组织比较,CENPU在结直肠癌患者癌组织中表达显著升高。Cox回归分析表明CENPU的表达与患者的年龄和TNM分期显著相关,是影响患者预后的危险因素。Kaplan-Meier生存曲线分析表明:CENPU高表达的结直肠癌患者的生存率显著降低。ROC曲线结果表明:基于CENPU的表达建立的模型具有较高的预测结直肠癌患者预后的能力。生物信息学分析结果表明:CENPI、CENPN、CENPD、CENPK、CENPP、CENPM、CENPQ、CENPH、NDC80以及ITGB3BP这10个基因与CENPU基因具有相互作用关系;CENPU参与DNA修复、MYC/TARGETS/V1以及PI3K/AKT/MTOR等信号通路。结论结直肠癌患者癌组织中高表达的CENPU与患者的不良预后显著相关,提示CENPU有望成为结直肠癌患者早期诊断及预测预后的潜在靶点。

着丝粒蛋白A在膀胱癌组织中的表达及临床意义

目的:检测着丝粒蛋白A(centromeric protein A,CENP-A)在膀胱癌组织中的mRNA和蛋白表达水平,分析其临床意义及与患者临床病理特征的相关性。方法:RT-qPCR技术检测30例膀胱癌患者外周血单个核细胞中CENP-A mRNA的表达水平;免疫组化方法检测45例膀胱癌组织中CENP-A蛋白的表达水平及其与临床病理特征的关系;ROC曲线分析CENP-A蛋白表达情况对于膀胱癌的诊断价值。结果:与对照组相比,膀胱癌组织中CENP-A的mRNA及蛋白表达显著上调,CENP-A的表达量与年龄、性别等无相关性,与肿瘤分期及肿瘤恶性程度呈正相关。对其进行ROC曲线分析,发现CENP-A对膀胱癌诊断的敏感度和特异度较高,具有较好的临床价值。结论:CENP-A在膀胱癌组织中表达上调且与膀胱癌患者的分期情况相关,可能成为膀胱癌精准分子诊断的潜在靶基因,在其诊断治疗中发挥重要的作用。

双着丝粒染色体半自动化分析估算辐射生物剂量专家共识

双着丝粒染色体(dicentric chromosome,dic)半自动化分析估算生物剂量已在国际上推广应用10余年,技术成熟度高,且国际原子能机构(IAEA)出版的技术报告和国际标准化组织发布的技术标准已推荐该方法估算剂量。但国内尚未有相关技术规范和标准。专家组结合国内30余年基于dic人工和半自动化分析估算生物剂量的实践经验,从dic半自动化分析原理、主要技术内容、影响因素分析和实用举例等方面给出dic半自动化分析估算生物剂量的技术共识,其主要技术内容与现有GB/T 28236国家标准相比,具有明显提升生物剂量估算效率,降低对专业人员技术熟练程度要求,更有利于推广应用等优势。而且dic半自动化分析与人工分析一样,可用于急性均匀、局部、迁延性照射和延迟采样等不同辐射暴露场景下的受照剂量估算与重建。dic半自动化分析估算生物剂量的推广应用,可解决目前国内生物剂量估算很难满足发生大规模核与辐射事故受照人员众多时的医学应急响应临床分类诊断需要的“瓶颈”,为进一步制定相关国家及行业标准提供技术支撑。

着丝粒蛋白A在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的:分析着丝粒蛋白A(centromere protein A,CENP-A)在宫颈癌中的表达情况,与临床病理参数相关性及临床意义。方法:GEPIA和HPA数据库分析CENP-A基因及蛋白在宫颈癌组织中的表达情况;免疫组化检测宫颈癌中CENP-A蛋白的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系;使用Linked Omics数据库寻找与CENP-A共表达基因,分析CENP-A可能参与宫颈癌发生发展的信号通路。结果:生物信息学分析显示宫颈癌组织中CENP-A基因和蛋白的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05);免疫组化结果显示宫颈癌组织CENP-A蛋白表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),且与患者的肿瘤分期及浸润程度相关。通过基因共表达分析,KIF2C、CDC20、FAM72B等基因与CENP-A表达呈正相关,PARM1、ABCA9和SYNE1等基因与CENP-A表达呈负相关(FDR<0.05),CENP-A基因参与了细胞周期、DNA复制等途径。结论:CENP-A在宫颈癌组织中高表达,与宫颈癌的预后以及发生发展相关。

着丝粒蛋白N在癌症中的研究进展

着丝粒蛋白N(centromere protein N,CENP-N)又叫做BM039、ICEN32和C16orf60,人类中该基因位于16号染色体的q23.2区域,是内层动粒的重要组成成分,在有丝分裂期间协助染色体定向转移到减数分裂的纺锤体结构,将母细胞复制的基因组信息平均传递给两个子细胞[1].如果CENP-N表达失常可能会导致染色体错配或丢失,产生病理的有丝分裂[2].研究发现,在低级别异型性组织中,病理性有丝分裂细胞比例为5%~10%,而在高级别恶变和癌变组织中,这一比例可能上升至60%~80%,这表明病理的有丝分裂可能是癌症发展的一个重要因素[3].除了作用于有丝分裂以外,CENP-N还可以通过调控有氧糖酵解、自噬、多种重要的信号通路以及肿瘤微环境中免疫细胞的功能而促进癌症的恶性进展.鼻咽癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、肺腺癌、口腔癌、食管癌中均已发现有明显的CENP-N表达失调[4-10].因此,如果能对CENP-N表达进行干预,有望实现抗肿瘤效应,为癌症治疗开辟新途径及新方法.

着丝粒蛋白F、miR-1-3p在中晚期胃癌患者血清中的表达及与预后的相关性

目的探讨着丝粒蛋白F(CENPF)、miRNA-1-3p(miR-1-3p)在中晚期胃癌患者血清中的表达及与预后的相关性。方法选取2019年3月至2020年3月我院收治的60例中晚期胃癌患者即为研究组,同期在我院体检中心体检健康的志愿者60例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组血清CENPF、miR-1-3p的表达水平;采用Pearson法分析血清中CENPF、miR-1-3p水平的相关性;采用Kaplan-Meier法分析CENPF、miR-1-3p表达与中晚期胃癌患者预后的关系;COX回归分析影响中晚期胃癌患者预后的危险因素。结果与对照组比较,研究组患者CENPF水平明显升高,miR-1-3p水平明显降低(P<0.05)。相关性分析结果显示,中晚期胃癌患者血清中CENPF和miR-1-3p水平呈负相关(r=-0.650,P<0.001)。不同TNM分期和淋巴结转移状况下CENPF、miR-1-3p水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。CENPF高表达组患者3年生存率63.33%(19/30)显著低于低表达组93.33%(28/30)(χ^(2)=7.954,P<0.001);miR-1-3p高表达组患者3年生存率96.67%(29/30)显著高于低表达组60.00%(18/30)(χ^(2)=11.882,P=0.001)。多因素COX回归分析显示,TNM分期、淋巴结转移、CENPF、miR-1-3p表达是影响中晚期胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论中晚期胃癌患者血清中CENPF水平显著升高,miR-1-3p水平显著降低,二者与预后有关。

着丝粒蛋白H在肾上腺皮质癌的表达及对肾上腺皮质癌细胞活力和迁移的影响

目的:研究着丝粒蛋白H(CENP-H)在肾上腺皮质癌(ACC)的表达,分析其与疾病进展和预后的关系;探索敲减CENP-H表达对ACC细胞活力和迁移的影响。方法:应用GEPIA2数据库分析CENP-H在76例ACC患者和128例健康对照中的mRNA表达,并分析其在不同肿瘤分期的表达及与预后的相关性;运用UALCAN数据库进一步分析CENP-H在ACC不同肿瘤分期的mRNA表达及与预后的相关性;采用免疫组织化学染色检测CENP-H蛋白在ACC和正常肾上腺石蜡切片的表达。构建敲减CENP-H表达的siRNA(siCENP-H),将人ACC细胞系H295R分为siCENP-H组和siNC组;CCK-8实验检测细胞活力的变化,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,Western blot实验检测CENP-H、p-ERK1/2、t-ERK1/2、p-P38、t-P38、p-JNK1/2和t-JNK1/2蛋白水平。结果:CENP-H在ACC中表达较健康对照显著升高,且与肿瘤分期和预后显著相关;CENP-H蛋白在ACC组织中的表达水平显著高于正常肾上腺;敲减CENP-H后,H295R细胞活力和迁移能力较对照组显著降低,p-P38和p-JNK1/2蛋白水平显著降低,以p-JNK1/2的降低尤为显著。结论:CENP-H在ACC中高表达;敲减CENP-H表达能抑制ACC细胞活力和迁移,其机制可能与抑制P38和JNK信号通路的活化有关。

着丝粒蛋白U促进肝癌细胞增殖能力的实验研究

目的研究CENPU在肝癌中的表达情况,进一步研究CENPU对肝癌细胞增殖能力的影响。方法通过GEPIA数据库和GEO数据库分析CENPU在肝癌组织和癌旁组织中CENPU的表达情况。对TCGA数据库中370例肝癌患者的临床信息进行分析并绘制生存曲线,评估CENPU的预后价值。利用UALCAN在线数据库分析CENPU对肝癌患者预后的影响。RT-qPCR方法检测3种肝癌细胞和1种人正常肝细胞系LO2中CENPU的表达情况。免疫组织化学染色检测本中心10例肝癌组织与癌旁组织标本中CENPU的表达情况。CCK8法检测CENPU对肝癌细胞增殖能力的影响。裸鼠移植瘤实验评估CENPU对肝癌细胞体内成瘤能力的影响。结果GEPIA数据库分析结果显示肝癌组织中CENPU表达量明显高于癌旁组织(P<0.05)。GSE29721、GSE45514和GSE84405数据集中肝癌组织中CENPU表达量均显著高于癌旁组织(P<0.01,P<0.001,P<0.001)。TCGA数据库肝癌数据集的生存分析结果显示,高表达CENPU的肝癌患者总体生存期短于低表达CENPU的肝癌患者。UACLAN在线数据库分析结果提示高表达CENPU的肝癌患者预后更差(P<0.05)。RT-qPCR检测结果显示3种人肝癌细胞系中CENPU mRNA表达量均高于人正常肝细胞系。10例癌旁组织中的CENPU表达量均低于肝癌组织。CCK8实验结果显示敲低CENPU后肝癌细胞的增殖能力明显受到抑制。裸鼠移植瘤实验结果提示,敲低CENPU后肝癌细胞的成瘤能力明显降低。结论CENPU在肝癌中高表达且与不良预后相关,CENPU促进肝癌细胞的增殖能力。

基于生物信息学分析着丝粒蛋白M在肾透明细胞癌中表达及临床意义

目的:基于生物信息学探讨着丝粒蛋白M(CENPM)在肾透明细胞癌(KIRC)中的表达及其临床意义。方法:通过SANGERBOX数据库进行CENPM基因的泛癌分析。通过GEPIA和UALCAN数据库分析在KIRC中CENPM的表达与肿瘤分级分期的相关性以及与肿瘤患者预后相关性。通过String数据库分析相关蛋白互作网络。通过TIMER数据库分析CENPM在肾透明细胞癌表达水平与免疫浸润水平关系。结果:CENPM基因在33种肿瘤中明显上调;与正常组织相比,CENPM基因在KIRC中呈高表达;CENPM与临床分期及肿瘤病理分级具有相关性,随着患者病理分级分期恶性程度的增高,CENPM表达水平也增高;KIRC患者预后与CENPM表达水平呈负相关,高表达的CENPM患者预后较差;CENPM与CENPU、CENPK、CENPA等蛋白具有相互作用,可能共同调控KIRC的发生和发展;CENPM的表达水平与B细胞、树突状细胞免疫浸润水平呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在KIRC中,CENPM的表达与预后及免疫浸润水平密切相关,是KIRC患者预后不良因素,有望成为肾透明细胞癌一个潜在预后生物标记物及免疫治疗的靶点。

乳腺癌患者血清丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型、着丝粒蛋白U水平及预后分析

目的 探讨乳腺癌患者血清丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型(SPINK1)、着丝粒结合蛋白(CENPU)表达水平及其与患者预后的关系。方法 选择2018年8月—2021年8月在本院确诊为乳腺癌的115例患者作为乳腺癌组,并根据2年预后将患者分为预后良好组(92例)与预后不良组(23例);另选择98名同期健康体检者作为对照组。采用ELISA检测血清中SPINK1水平,采用qRT-PCR法检测血清CENPU表达水平;ROC曲线分析血清SPINK1、CENPU水平对乳腺癌患者预后不良的预测价值;Cox回归模型分析乳腺癌患者2年预后的影响因素。结果 乳腺癌患者血清SPINK1、CENPU水平明显高于对照组(P<0.05)。有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期乳腺癌患者血清中SPINK1、CENPU水平明显高于无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ+Ⅱ期乳腺癌患者(P<0.05)。预后不良组患者血清SPINK1、CENPU水平高于预后良好组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,SPINK1、CENPU预测预后不良的曲线下面积(AUC)分别是0.844(95%CI=0.744~0.943)、0.877(95%CI=0.801~0.953),二者联合预测的AUC为0.946(95%CI=0.899~0.994)。SPINK1、CENPU、淋巴结转移、TNM分期是乳腺癌患者2年内预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论 SPINK1和CENPU水平在乳腺癌患者血清中高表达,是乳腺癌患者预后不良的危险因素,可能作为评估乳腺癌患者预后的标志物。

着丝粒与动粒的功能、结构和动态组装

确保真核生物物种的遗传信息在亲代与子代之间忠实地传递是细胞有丝分裂的一项基本任务。着丝粒是一个特殊的染色体区域,对于在有丝分裂过程中介导姐妹染色单体的排列和分离至关重要。着丝粒身份确定是由含有着丝粒蛋白A(CENP-A)的核小体这种表观遗传机制决定的。CENP-A核小体为有丝分裂期内层动粒和外层动粒组装的关联提供了基础。本文回顾了着丝粒身份确定、内层动粒功能和组装以及外层动粒功能和组装。特别是,我们关注了组成型着丝粒关联网络(CCAN)结构活性关系的最新进展。CCAN结构信息为我们对着丝粒和动粒功能以及动态组装的理解提供了新的启示。

ZW10相互作用着丝粒蛋白对神经母细胞瘤增殖的影响及机制研究

目的:探讨ZW10相互作用着丝粒蛋白(ZW10 interacting kinetochore protein,ZWINT)对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞增殖的影响及作用机制。方法:利用NB数据集分析ZWINT表达水平与NB预后及临床分期的关系。EdU实验、流式细胞术和γH2AX免疫荧光染色分别检测干扰ZWINT表达对NB细胞增殖、周期分布和DNA损伤修复能力的影响。免疫组织化学/蛋白质印记(Western blot)检测MYCN扩增和无扩增组织及细胞系中ZWINT的表达情况。荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测干扰/过表达MYCN对ZWINT表达的影响。在线预测ZWINT的启动子区域MYCN的结合位点,ChIP-PCR和荧光素酶实验验证MYCN靶向调控ZWINT表达。强力霉素诱导Tet-on MYCN SH-SY-5Y细胞过表达MYCN同时干扰ZWINT表达,检测ZWINT对MYCN介导的细胞增殖、周期和DNA损伤修复功能的影响。结果:ZWINT表达水平与NB患儿总生存率、无事件生存率呈负相关,其表达随NB分期升高而增高。ZWINT干扰组NB细胞增殖明显减少,G_(2)/M期细胞比例显著增高,γH2AX焦点的形成增加。ZWINT在MYCN扩增的NB组织/细胞系中表达水平显著高于无扩增组。MYCN与ZWINT启动子区结合,干扰ZWINT表达可显著抑制MYCN对增殖的促进作用。结论:ZWINT是NB的不良预后指标,其表达受MYCN调控,干扰ZWINT表达导致MYCN扩增的NB细胞周期阻滞在G2/M期,DNA损伤修复增加,抑制NB细胞的增殖。

玉米近缘种中玉米着丝粒序列的FISH检测

为分析玉米着丝粒卫星DNA(CentC)和着丝粒反转录转座子(CRM)在玉米种的亚种及近缘种中的保守性,采用双色荧光原位杂交检测了这两种重复序列在墨西哥玉米、二倍体多年生类玉米、多年生类玉米、摩擦禾、薏苡、高粱中的存在和分布。CentC、CRM探针在墨西哥玉米、二倍体多年生类玉米和多年生类玉米的所有染色体的着丝粒区产生了强或较强的杂交信号,而且不同染色体的杂交信号的强度存在差异,表明两种玉米着丝粒重复序列在不同着丝粒中的数量不同;此外,部分着丝粒中的CentC和CRM信号的强度存在差异,不完全重叠。CentC、CRM探针仅在摩擦禾的多数染色体的着丝粒区产生了弱的杂交信号。在薏苡和高粱中仅测检到主要分布在着丝粒区的较强或强的CRM信号。这些结果表明,CentC在玉米种的亚种间及玉蜀黍属的物种间高度保守,在与玉蜀黍属亲缘关系最近的摩擦禾属物种中也具有较高的保守性;CRM在与玉蜀黍属亲缘关系较近和较远的禾本科种属中都具有保守性。

着丝粒蛋白M在卵巢透明细胞癌中的表达及作用

目的探讨着丝粒蛋白M(centromere protein M,CENPM)在卵巢透明细胞癌(ovarian clear cell carcinoma,OCCC)组织中的表达及对OCCC中ES2细胞株增殖、迁移、凋亡的影响和作用机制。方法采用HE染色观察OCCC组织病理改变;免疫组织化学法检测OCCC组织及癌旁组织CENPM的表达;si-CENPM转染ES2细胞;Western blot检测CENPM蛋白的表达;CCK-8法、细胞划痕实验检测细胞增殖和迁移能力;流式细胞仪评价CENPM对细胞凋亡和周期的影响。结果与癌旁组织相比,OCCC组织中CENPM高表达(P<0.01);转染si-CENPM#B组ES2细胞CENPM蛋白表达水平较si-NC组降低(P<0.01);与Control组和si-NC组比较,敲减CENPM后ES2细胞的增殖、迁移能力下降(P均<0.05);敲减CENPM后ES2细胞凋亡率增高,阻滞ES2细胞的周期在S期(P均<0.05)。结论下调CENPM可抑制人OCCC中ES2细胞株的增殖、迁移并促进细胞凋亡,提示CENPM参与了OCCC的发生发展。

植物着丝粒结构和功能的研究进展

着丝粒是真核生物有丝分裂和减数分裂染色体正确分离和传递所必需的染色体区域。十多年来,已对包括拟南芥、水稻、玉米在内的一些植物的着丝粒进行了较深入的分子生物学研究。在不同的植物间,着丝粒DNA的保守性很低,呈现快速进化,但着丝粒的DNA序列类型和组织方式基本相似,一般是由夹杂排列着的卫星DNA串联重复阵列和着丝粒专一的反转录转座子构成。与着丝粒DNA相反,着丝粒/着丝点的结构性和瞬时蛋白质在包括植物在内的真核生物中保守。与其他真核生物的情况一样,拥有含着丝粒组蛋白H3(CENH3)的核小体是植物功能着丝粒染色质最基本的特征,CENH3在着丝粒染色质的识别和保持中起着关键作用。

着丝粒关联蛋白1在乳腺癌中的过度表达及其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞增殖克隆和凋亡的影响

目的 研究着丝粒关联蛋白1(KNTC1)在乳腺癌组织和细胞中的表达、功能及其发挥功能的潜在机制。方法 下载癌症基因组图谱乳腺癌中的RNA-seq数据,一般线性模型估算KNTC1在不同组间的差异。qRT-PCR检测人乳腺癌细胞MDA-MB-231、T-47D、MCF-7中KNTC1的mRNA表达水平。使用含有目的基因RNA干扰序列的慢病毒技术敲减MDA-MB-231细胞中KNTC1表达,用qRT-PCR和Western blot检测细胞中KNTC1 mRNA和蛋白质表达水平。Celigo细胞计数和克隆形成试验检测细胞生长和增殖状况;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 KNTC1在乳腺癌组织中高度表达。KNTC1在MDA-MB-231、T-47D和MCF-7细胞中的表达丰度均为高,在MDA-MB-231细胞表达最高。与对照组比较,实验组MDA-MB-231细胞中KNTC1表达后,细胞生长与增殖能力显著下降(7.82±0.73、0.89±0.04;t=17.259,P=0.003),细胞的克隆形成能力显著降低(75±2、5±2;t=121.244,P<0.001),细胞凋亡明显增加[(4.73±0.19)%、(8.86±0.12)%;t=31.506,P=0.001]。结论 KNTC1在乳腺癌组织和细胞中高度表达,干扰KNTC1表达可抑制乳腺癌细胞的增殖克隆并促进其凋亡。

着丝粒蛋白F在胶质瘤组织中的表达及预后分析

目的探究着丝粒蛋白F(CENPF)在脑胶质瘤中的表达及预后分析。方法通过对癌症基因组图谱(TCGA)和中国脑胶质瘤图谱(CGGA)数据库进行生物信息分析,比较CENPF在低级别胶质瘤(LGG)、胶质母细胞瘤(GBM)和癌旁组织中的表达差异以及与患者预后之间的关系,并在数据库中对CENPF mRNA与P53、Ki-67以及IDH-1分型进行相关性分析。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测CENPF mRNA表达水平,免疫组织化学法和Western blotting法检测癌旁组织和不同级别胶质瘤组织中CENPF表达水平。多因素COX分析CENPF与临床病理参数及患者预后的关系,并绘制Kaplan-Meier生存曲线。利用TCGA数据库对CENPF进行KEGG富集分析,探索该基因在胶质瘤中发展中可能参与的信号通路。结果CENPF表达水平与胶质瘤WHO分级呈正相关,且CENPF高表达的胶质瘤患者生存时间短于低表达患者。数据库相关性分析显示CENPF mRNA与P53、Ki-67以及IDH-1野生型呈正相关。qRT-PCR实验结果表明CENPF mRNA在胶质瘤组织中表达增高,免疫组织化学和Western blotting实验结果表明CENPF表达与WHO等级呈正相关。临床病理参数分析表明在胶质瘤组织中CENPF表达情况与胶质瘤WHO分级(P=0.002)、P53(P=0.016)、Ki-67(P<0.001)表达有关。多因素COX分析显示WHO分级(P<0.001)、CENPF表达(P=0.008)、P53(P=0.003)和Ki-67(P=0.006)表达为胶质瘤患者预后不良的危险因素。Kaplan-Meier生存曲线表明CENPF高表达的胶质瘤患者生存时间短于低表达患者(P<0.0001)。KEGG富集分析显示CENPF在参与细胞周期、DNA复制、WNT/beta-catenin、mTORC1等通路中具有显著富集。结论CENPF在胶质瘤组织中表达增高,其表达与WHO分级、Ki-67以及P53分型相关;CENPF可作为判断胶质瘤患者预后的生物标志物。