石刁柏真伪的红外快速鉴别与总皂苷、总酚酸含量测定及抗氧化活性分析

使用傅里叶红外光谱法对石刁柏样品进行定性研究,并对石刁柏进行总皂苷、总酚酸、DPPH+清除率及抗氧化活性测定。结果显示14批石刁柏样品的红外图谱峰型一致,相似度系数均在98.7%以上,可断定均为正品石刁柏;证明红外光谱技术可快速鉴别石刁柏的真伪。14批石刁柏样品的总皂苷、总多酚含量稳定,最高分别为6.340 mg·g^(-1)、2.0450 mg·g^(-1);各批次石刁柏对DPPH+均有清除作用,最佳IC50为4.57mg·mL^(-1),代表石刁柏总抗氧化能力的Vc浓度最大为2.4110 mg·mL^(-1);对测定结果进行pearson相关性分析和聚类分析,可将14批石刁柏分为5类;总皂苷、总酚酸与石刁柏的总抗氧化能力密切相关,相关系数值具有非常显著的正相关性,石刁柏具有较好的抗氧化能力。本研究为控制石刁柏药材质量、保证其安全使用和后期开发利用提供理论支持。

空间环境对石刁柏幼苗向性生长及代谢过程的影响

以石刁柏（ＡｓｐａｒａｇｕｓｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＬ．）作为实验材料，在我国空间生物学研究中，首次在空间完成了高等植物种子萌发至幼苗的生长过程。研究了空间飞行后，幼苗的光合及某些代谢过程的变化。主要结果如下：空间飞行幼苗根的生长走向明显不同于地面对照，表现出对微重力的反应。幼苗返回地面后继续培养，其生长速度快于地面对照。空间飞行样品耗氧量高于地面对照，而乙烯释放量低于地面对照。空间飞行返回地面后的植株，其光能吸收和转能效率与地面对照相比无明显变化；过氧化物酶同工酶活性有所下降，并出现一条新酶带（Ｒｆ＝０．４５）；ＡＴＰ含量低于地面对照。

石刁柏(Asparagus officinalis)花药培养与染色体倍性的观察

1988～1989年进行了石刁柏花药离体培养的研究工作,用MS为基本培养基,我们认为花药呈黄绿色,多为花粉的单核靠边期,这时培养较易诱导愈伤组织。6BA是愈伤组织分化成绿点或绿芽再生成小植株的主要因素。愈伤组织由绿芽染色体的观察,其倍数表现不一致,其中有单倍体、二倍体和多倍体等,这为单倍体的选择提供了一些有价值的材料。

微重力对石刁柏根尖组织和细胞中钙水平及分布的影响

用焦锑酸钾沉淀法进行了组织和细胞中游离钙的化学定位。用光学显微镜和透射电镜观察石刁柏幼苗在太空飞行后Ｃａ２＋沉淀颗粒在根尖组织和细胞内的分布。结果表明，太空飞行１５天后，Ｃａ２＋在各组织内的分布情况与地面对照无明显差异，但Ｃａ２＋的含量明显低于对照。Ｃａ２＋在细胞内不同区域的分布在飞行和对照样品中差异十分明显，对照细胞中Ｃａ２＋集中在液泡内，其它细胞器中很少见到。飞行幼苗的根尖细胞，液泡中Ｃａ２＋很少，并向液泡膜集结，液泡膜内侧和细胞质中的Ｃａ２＋明显增多。细胞壁中的Ｃａ２＋较对照有明显增加，高尔基体中也有少量钙存在。本文着重讨论了飞行幼苗根尖中Ｃａ２＋在细胞内重新分布的可能作用。

与石刁柏性别基因M紧密连锁的AFLP新标记

运用BSA法构建石刁柏雌雄基因池,用64种AFLP引物组合共检测到4个多态性位点,单株验证结果表明,引物组合E-ACG/M-CTT产生的多态性片段(命名为E-ACG/M-CTT-156)与M基因连锁,片段大小为156bp;连锁遗传距离为8·33cM。

石刁柏雄性连锁的AFLP及SCAR标记的建立

目的:对石刁柏雌雄株基因组差异进行分析,筛选雄性或雌性连锁的分子标记.方法:利用限制性片段长度多态性技术,设计了多个引物组合,分别对石刁柏雌雄株基因组进行扩增.结果:在使用的72个引物组合中,引物组合E-AAG+M-CAT从雄性基因组中扩增出了一个雄性连锁的标记(MLDA555),该序列长度为555bp,AT含量为59%.Blast检索未发现相似序列.根据该片段序列设计的引物将该标记转化为雄性连锁的大小为523bp的稳定的SCAR标记,经过不同基因型雄性个体的验证证明该标记广泛存在于不同基因型石刁柏雄性个体中.结论:通过AFLP扩增筛选得到了石刁柏雄性连锁的AFLP和SCAR标记,为石刁柏性别决定机制的理解及石刁柏的分子标记辅助育种提供理论资料和技术支持.

石刁柏的化学成分

目的：研究石刁柏根茎的化学成分，为阐明其有效成分提供依据．方法：利用硅胶、ODS和Sephadex LH-20柱色谱进行分离，根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构．结果：从其乙醇提取物中分离得到14个化合物，分别鉴定为：α—D—fructofuranose—1，2’：2，1’-β-D—fruclofuranosedianhyclride（1）、1，3-O-di—trans-p-coumaroylglyceml（2）、二十四烷酸（3）、山柰素-4’，7-二甲醚（4）、芦丁（5）、槲皮素（6）、5-羟甲基-糠醛（7）、L-天门冬酰胺（8）、咖啡酸（9）、阿魏酸（10）、肌苷（11）、正丁基-β-D-吡喃果糖苷（12）、乙基-β-吡喃果糖苷（13）、蔗糖（14）。结论：化合物1为新天然产物，2，4，7，10～13均为首次从该植物中分得．

石刁柏多倍体的诱导与鉴定

以石刁柏品种UC800为材料,以秋水仙素为诱变剂,用浸泡法和涂抹法处理石刁柏试管苗,进行多倍体诱导.结果表明:以0.10%秋水仙素为诱变剂,用涂抹法处理72 h的效果较佳,形态学分析显示其加倍率可达94%;对多倍体材料进行染色体鉴定,涂抹法染色体加倍效果(细胞加倍率96.1%)也优于浸泡法(细胞加倍率86.4%).

2,4-D对石刁柏愈伤组织诱导的影响

以石刁柏嫩茎为材料,研究了2,4-D对其初始愈伤组织诱导和胚性愈伤组织发生的影响。结果表明:仅仅只有2,4-D不能诱导石刁柏初始愈伤组织的发生;胚性愈伤组织的诱导需要高浓度的2,4-D,其最佳激素组合为2,4-D 10 mg/L+NAA 0.5 mg/L。

石刁柏体细胞胚胎发生过程中蛋白质及同工酶变化的研究

本文报道石刁柏胚性愈伤组织的可溶性蛋白质含量与组分、过氧化物酶和酯酶的活力及同工酶带均比其体细胞胚的要少。而在体细胞胚胎发生过程中,过氧化物酶和酯酶活力、可溶性蛋白质含量均以球形胚为最低,子叶分化期胚为最高而呈递增趋势;可溶性蛋白质组分以子叶分化期胚、成熟胚为最多,球形胚、香蕉形胚为最少;过氧化物酶同工酶带以梨形胚为最多,子叶分化期胚、成熟胚为最少;酯酶同工酶则以子叶分化期胚为最多,成熟胚为最少。胚性愈伤组织与体细胞胚均有其特异性可溶性蛋白质及同工酶带,可作为体细胞胚胎发生的分子标记。

石刁柏组织培养中体细胞胚发生的组织细胞学观察

以石刁柏(Asparagus officinalis)无菌苗的嫩茎切段为外植体,在含有1 mg/LNAA+0.5 mg/L BA的MS培养基上可100%地被诱导形成愈伤组织,在此条件下可长期继代,将继代的愈伤组织转入含有2 mg/L 2,4-D 0.5mg/L NAA的MS培养基上后,约有70%的愈伤组织块转变为胚性愈伤组织,这些胚性愈伤组织在3,4-D浓度进一步降低为0.5mg/L的条件下发育形成体细胞胚。切片观察表明:这些胚性愈伤组织是从愈伤组织的表层或近表层产生的。这些细胞核大,多核仁,细胞质浓、染色深的胚性细胞中的一些单个细胞处于与邻近细胞隔离状态,细胞壁也明显加厚。这些单细胞开始分裂,第一次分裂多为不均等分裂,形成一个大的基细胞和一个小的顶细胞,进一步分裂形成三细胞、四细胞、五细胞和具胚柄的多细胞原胚。原胚发育形成球形胚、梨形胚、香蕉形胚,由于在胚的一侧细胞分裂旺盛形成单子叶突起,最后形成子叶胚。其发育过程类似于单子叶植物合子胚的发育过程。

石刁柏及党参体细胞胚发生中的淀粉代谢动态

以石刁柏（Ａｓｐａｒａｇｕｓｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）无菌苗的嫩茎和党参（Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓｐｉｌｏｓｕｌａ）的地下嫩茎为外植体，诱导体细胞胚发生。用ＰＡＳ法研究体细胞胚发育过程中淀粉代谢的动态变化情况，实验结果表明，二种材料的体细胞胚发育中，淀粉动态情况基本相同。

石刁柏花药培养与染色体倍性变化的探讨

本文探讨了石刁柏花药离体培养中采花药的时期、培养基激素配比与愈伤组织诱导的关系；ＢＡ及活性炭对诱导愈伤组织分化的作用；愈伤组织与茎尖染色体的非单一化倍性表现及激素不同配比浓度对倍性变化的影响。

影响石刁柏种子活力的因素分析

研究种子大小、贮藏期和预处理对石刁柏种子活力的效应,结果表明：大粒石刁柏种子活力明显高于中、小粒种子。石刁柏种子在室内自然贮藏条件下,1 a后种子活力逐渐降低,种子的使用年限仅为1-2 a。吸湿-回干处理石刁柏种子12 h及用40-100 mg/L GA3和0.2%-0.8%H2O2分别浸种处理石刁柏种子,都能提高种子活力,促进种子萌发。

石刁柏的花药培养与植株再生

报道了石刁柏不同品种以及不同时期采集的花药在不同培养基上的培养效果。结果表明：１）品种间愈伤组织诱导率差异明显（其中以Ｍ·Ｗ５００最高，达３０．５％，ＵＣ１５７最低，仅７．０％）；２）适宜的花药采集期为５月中、下旬；３）在ＮＡＡ：ＢＡ为１∶１配比的培养基上能获１１．０％的再生植株和１４．８％的绿芽；４）已分化的绿芽转入１／２ＭＳ基本培养基附加０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ的培养基有助于根的分化和生长。

热处理对石刁柏的保鲜效果

研究了热处理对采后石刁柏生理和品质的影响 ,结果表明 :热处理可有效抑制石刁柏呼吸强度和乙烯释放量 ,保持SOD活性 ,抑制MDA含量的升高 ,延缓果实VC含量的降低及降低腐烂率。

石刁柏药材及不同提取物中总皂苷含量的测定

目的测定石刁柏药材及不同提取物中总皂苷的含量。方法在国内首次以石刁柏皂苷为标准品,采用分光光度法测定石刁柏药材及不同提取物中总皂苷的含量。结果石刁柏皂苷在4.25～34μg/ml范围内呈良好的线性关系;石刁柏药材及提取物的平均回收率(n=6)分别为99.1%、100.3%,RSD分别为1.57%、1.99%。结论该方法简单、快速、准确,为石刁柏的进一步开发利用提供相应的实验依据。

石刁柏胚乳愈伤组织内胚胎发生的组织细胞学观察

石刁柏(Asparagus officinalis L.)的幼嫩胚乳接种于MS+NAA 5ppm+6-BA 1ppm和MS+NAA 1ppm+6-BA 0.5ppm的培养基上诱导产生愈伤组织。将愈伤组织转移到MS+6-BA 1ppm+NAA 0.5ppm的分化培养基上,培养30天后即可形成胚状体,组织细胞学观察表明:胚状体起源于愈伤组织内或近表层的单个胚性细胞。在胚状体发生的早期阶段,观察到与柳叶菜型和藜型胚胎发育大致相似的细胞分裂方式,从而出现了T型或线型的四个细胞的原胚。在多细胞原胚及球形胚期具有单列或不规则排列的多细胞胚柄。石刁柏胚乳愈伤组织中的胚胎发生是不同步的,在同一块愈伤组织的切片中可以观察到不同发育阶段的胚状体。在外形上还可以观察到一个子叶、两个子叶或四个子叶等多种不同形态的胚状体。一部份胚状体能发育成完整小植株。

ABA与GA_3对黄瓜离体子叶和石刁柏茎生根的影响

较高比值的内源ABA/GA_S有利于黄瓜黄化子叶和石刁柏茎不定根的发生。外源ABA具有增加组织内ABA含量并降低GA_S含量而促进生根的作用,而外源GA_S则与ABA效果相反。外源GA_S浓度为10^(-5)mol/L时,外源ABA对黄瓜子叶生根的诱导被明显抑制。子叶内GA_S含量较高的黄瓜1101品系其父本发根能力明显低于母本。ABA与GA_3对不定根发生的调控作用在黄瓜子叶离体培养的第一天最明显。

CO_2激光照射对石刁柏种子活力指标的数学模拟

本文在 CO2 激光对石刁桕种子活力影响的研究基础上 ,应用多项式回归对种子活力指标进行了数学模拟。分别得到了发芽种子的胚根长、下胚轴长、发芽率、发芽指数、活力指数、出苗率与 CO2 激光照射时间的数学模型。