一种优化的桑树花芽石蜡切片制作方法

针对常规石蜡切片方法无法获得完整桑树花芽切片的问题,以“无籽大十”品种桑树花芽为供试材料,在常规石蜡切片技术基础上,对石蜡切片样品制作过程中固定、软化、脱水、透明及染色等环节进行了优化。结果表明,使用15%氢氟酸软化后,采用优化后的系列脱水、透明等步骤进行制片,可以使切片连续性、完整性得到明显提高。通过切片显微观察,可见细胞轮廓明显、裂痕较少、结构较完整,染色较清晰,并且对发育后期的花芽效果更为明显。优化后的制样流程解决了常规制片出现浸蜡不彻底、组织变脆、蜡带不连续、内部结构不完整等一系列问题。该研究可以从解剖学上为桑树花芽发育形态和花芽分化机制研究提供技术参考。

“金野”紫穗槐石蜡切片制作与显微镜观察分析

为了探究“金野”紫穗槐和紫穗槐细胞横切结构特征,观察并鉴别“金野”紫穗槐与紫穗槐组织结构的差别,掌握石蜡切片的制作方法。对“金野”紫穗槐及紫穗槐的叶片制作石蜡切片,利用体视显微镜进行染色切片观察。本研究发现,“金野”紫穗槐的叶片横切结构完整,上、下表皮细胞由1层细胞构成,细胞排列整齐、紧密,形状及大小清晰可见。栅栏组织由4层圆形细胞构成,紧密条形堆积排列,细胞间隙隐约可见。紫穗槐的栅栏组织由2层长圆柱细胞构成,形状为条形,边界清楚,排列整齐,大小均匀一致;海绵组织细胞排列分散,体积与厚度不如栅栏组织,与栅栏组织区别明显。“金野”紫穗槐的海绵组织由3~4层小圆形细胞构成;紫穗槐海绵组织较为发达,由3~4层椭圆形、排列疏松细胞构成。两个品种的维管束细胞排列方式相同、大小与形状相似,通过对结果的分析可看出“金野”紫穗槐和紫穗槐的细胞真实性及结构上的差异性。

利用TSA/Opal技术实现肾活检石蜡切片多重免疫荧光染色

肾活检病理是肾小球疾病诊断的金标准[1],诊断的手段包括光镜、免疫荧光和电镜。三种观察方法对组织处理的要求不同,因此穿刺的肾活检标本需要人为地进行分割。这一操作容易造成某一观察项目没有肾小球的情况,此外也无法在同一肾小球中同时进行光镜、免疫荧光及电镜观察。尽管在体视镜或普通光学显微镜下分割肾组织可以尽量避免没有肾小球的情况,但操作非常依赖穿刺医师的水平,且对于出现硬化或缺血肾小球的组织,即使在显微镜下辨别穿刺组织中的肾小球亦非常困难。更重要的是,对于仅表现为局灶性病变的疾病,人为分割很可能导致在一个检查项目中观察到病变,在另外的检查项目中观察不到。此外,三种观察手段的观察重点不同,免疫荧光主要观察是否存在免疫复合物及补体的沉积,光镜主要观察整体的形态学改变,电镜则主要观察超微结构异常。尽管三种观察方法是分开的,但我们需要整合三种观察内容对疾病进行整体分析,因此假如在同一肾小球中能同时获得免疫、形态学和超微结构的信息更有利于我们做出准确的诊断和开展发病机制的研究。

槲树不同发育时期胚珠石蜡切片制备体系的优化

【目的】建立并优化适宜槲树子房或胚珠石蜡切片的制作体系,为后续槲树胚胎发育学研究提供技术支撑。【方法】以不同发育时期的槲树雌花为试验材料,将材料以60 d为界分为60 d前和60 d后两部分,对材料处理方式(授粉60 d前后的材料分别进行仅保留子房与胚珠处理)、浸蜡时间(18,24,36 h)与浸蜡条件(60℃烘箱内抽真空处理0,6,8,12 h)、切片厚度(6,8,10μm)进行优化;在此基础上,以授粉70 d样品切片为材料,对染色方法(染色液分别为5 g/L苏木精、1 g/L甲苯胺蓝和10 g/L番红-固绿)及染色时间(1,2,5,10,15 min)进行优化,建立适合槲树胚珠的石蜡切片制备体系。【结果】授粉60 d前的样品仅保留子房部分,授粉60 d后的样品仅保留胚珠,两者在50℃烘箱经甘油乙醇浸泡48 h的软化处理后,所得切片效果最佳,可避免蜡带破裂等不良现象出现。将浸蜡时间延长至36 h,并于第1次浸纯蜡过程中在60℃烘箱内先进行12 h抽真空处理,可保证发育后期体积较大材料的充分浸蜡;脱蜡前将玻片进行3 h抽真空处理,可明显降低脱片率;授粉60 d前样品的切片厚度以8μm为宜,授粉60 d及以后的样品以10μm最佳。槲树胚株石蜡切片制备时,采用5 g/L苏木精染色5 min时的制片效果最好。【结论】建立并优化了槲树不同发育时期子房或胚珠石蜡切片的制备体系,采用该优化体系可获得蜡带连续、结构完整、染色均匀、背景清晰的槲树子房或胚珠切片。

免疫荧光检测石蜡切片IgA蛋白在诊断疱疹样皮炎和线状IgA大疱性皮病的应用评价

目的:评价直接免疫荧光染色检测石蜡切片IgA抗体对于诊断疱疹样皮炎(DH)和线状IgA大疱性皮病(LABD)的应用价值。方法:选取2019-2024年我院病理诊断的DH和LABD病例,入选实验组病例DH 46例,LABD 32例。采用FITC荧光标记兔抗人IgA抗体进行直接免疫荧光染色检测。结果:46例DH石蜡切片中,40例IgA在真皮乳头为阳性,阳性率86.96%。32例LABD石蜡切片中,20例IgA在表皮基底膜线状沉积为阳性,阳性率62.50%。结论:直接免疫荧光染色检测石蜡切片IgA可以作为辅助诊断DH和LABD的有效方法。

介绍一种石蜡切片机加湿器简易装置

石蜡切片机是临床病理工作及科研实验中常用仪器之一,工作环境中的温、湿度是影响病理石蜡切片质量的重要因素之一[1-2],冬、春季节,室内环境空气干燥,在石蜡切片过程中,由于摩擦产生静电,切片较为困难,影响切片速度和切片质量,病理技术人员稍有不慎将会导致制片失败,进而影响病理诊断。

快速石蜡切片技术应用于病理检验中的临床价值分析

目的探讨于病理检验中应用快速石蜡切片技术的价值。方法60例行手术治疗且实施病理检验的患者,按照数字随机法分成对照组及观察组,每组30例。对照组样本进行常规处理,观察组样本进行快速石蜡切片技术处理。比较两组患者的切片制作时间,切片质量,诊断准确率,切片制作指标(第一道浸蜡时间、第二道浸蜡时间、透明脱水时间、固定时间),满意度。结果(1)与对照组比较,观察组切片制作时间显著较短,其中对照组切片制作时间为(128.66±23.15)min,观察组切片制作时间为(42.59±4.30)min,具备统计学差异(t=20.021,P=0.000<0.05)。(2)观察组高质量切片率96.67%显著高于对照组的66.67%,低质量切片率3.33%和废片率0显著低于对照组的20.00%、13.33%,具备统计学差异(P<0.05)。(3)与对照组比较,观察组诊断准确率显著较高,其中对照组诊断准确率为80.00%(24/30),观察组诊断准确率为96.67%(29/30),具备统计学差异(χ^(2)=4.043,P=0.044<0.05)。(4)观察组第一道浸蜡时间、第二道浸蜡时间、透明脱水时间、固定时间分别为(60.96±4.24)、(90.82±6.29)、(30.90±1.22)、(60.29±2.38)min,短于对照组的(89.83±5.36)、(154.33±8.38)、(110.83±3.22)、(119.83±2.52)min,具备统计学差异(P<0.05)。(5)对照组患者满意度为73.33%,观察组患者满意度为93.33%,观察组高于对照组,具备统计学差异(P<0.05)。结论在病理检验中应用快速石蜡切片技术,其临床价值显著突出,与常规的样本切片技术比较,具有缩短时间,切片质量高等优势,利于临床对于病理的诊断,为患者的检查争取宝贵时间。

龙牙百合鳞茎生长点石蜡切片技术改良研究

为了准确观测龙牙百合鳞茎生长点的生长分化过程,以龙牙百合冷藏期间的鳞茎为试验材料,在传统石蜡制片法的基础上,对脱水、透明等步骤进行优化并筛选了最佳的甲苯胺蓝染色方法。试验获得的百合鳞茎生长点石蜡切片制作改良方法为:将百合鳞茎剥开鳞片至可观察到茎尖生长点,修整为5mm大小的立方体投入FAA固定液中,保存一周;用85%乙醇(2 h)、95%乙醇(2h)、100%乙醇(3h)进行脱水处理,再用二甲苯与乙醇等比例溶液(2h)、纯二甲苯(3h)进行透明处理;将透明好的材料放入石蜡+二甲苯溶液(体积比2∶3)中,在37℃的恒温箱中浸蜡2d,期间多次少量加入石蜡;之后在60℃恒温箱更换纯石蜡2次,每次4 h,浸蜡后的材料在60℃的操作台上包埋,再切成厚10μm的薄片,待蜡片完全伸展,将蜡片粘于均匀涂抹了赫伯特粘片剂的载玻片上,37℃烤片5h,脱蜡复水后用1%甲苯胺蓝染液稀释150倍染色3min。

SD大鼠、小鼠创面新生皮肤组织石蜡切片的制备方法

目的:探索有效的SD大鼠、小鼠创面新生皮肤组织石蜡切片的制备方法。方法:取21只雄性SD大鼠、21只雄性SD小鼠制作创伤模型,在不同愈合时间取创面新生皮肤组织制作石蜡切片,对石蜡切片制作过程中的关键步骤进行控制,包括固定、脱水、浸蜡、包埋、切片、脱蜡、复水、染色、脱水、封藏等。比较不同愈合时间皮肤组织石蜡切片的差异。结果:实验制得组织切片染色均匀,细胞排列紧密,无裂缝,细胞核染色清晰,呈暗红色,成纤维细胞、毛囊、毛细血管和肌肉组织结构均清晰可见。随着愈合时间的延长,皮肤表皮层增厚,毛囊越来越多且分化程度提高,成纤维细胞数量增加。结论:该制备方法可以有效保证石蜡切片的质量并判定皮肤愈合程度。

甲状腺冰冻切片与石蜡切片在病理诊断中的差异对比

讨论甲状腺冰冻切片、石蜡切片在病理诊断中的应用。方法 源自2022.1.1-2022.12.31的80例甲状腺疾病手术病例,都给冰冻切片/石蜡切片病理诊断,剖析检查结果和冰冻切片/石蜡切片病理检查恶性病变的结果。结果 2个诊断手段里,冰冻切片检测时间更少(P<0.05)。良性病变检查里,甲状腺冰冻切片病理检查的确诊率94.00%,零误诊,延迟诊断率6.00%。恶性病变检查里,甲状腺冰冻切片病理检查的确诊率92.86%,误诊率3.57%,延迟诊断率3.57%。结论 临床对甲状腺疾病病人诊断时,施行甲状腺冰冻切片的时间少。

鸢尾根部石蜡切片结构观察

利用石蜡切片技术,观察鸢尾根部的组织结构,外表皮、皮层、韧皮部、中柱的组织结构特征,表现为独特复杂而有序。细胞形态各异,韧皮部较发达,为其应用价值的研究提供了重要的参考依据。

基于新型固定液制备小鼠AMD模型和人胚胎眼球高质量视网膜石蜡切片

将C57/B6J小鼠分别固定于传统固定液(4%甲醛液,下同)与新型固定液中,进行石蜡切片的常规制片程序,并将新型固定液在年龄相关性黄斑变性(AMD)模型小鼠及人胚胎眼球HE染色石蜡切片中进行效果验证。用新型固定液处理的眼球石蜡切片质量优于传统固定液,且成功模拟了AMD模型小鼠视网膜各层不同时间段的变化。新型固定液在制备高质量视网膜石蜡切片方面是可行的,为后续视网膜石蜡切片的有关研究奠定了基础。

不同脱水和浸蜡程序对小鼠肝和肠道石蜡切片质量的影响

目的 比较两种脱水程序和5种浸蜡时间对小鼠肝、肠道组织石蜡切片质量的影响。方法 以BALB/c小鼠肝和肠道组织为材料,按照两种不同的脱水程序(程序一、程序二)和5种不同的浸蜡程序(浸蜡总时间为90、120、150、180和210 min)制备石蜡切片,比较其组织切片和HE染色的效果。结果 脱水程序一制作的石蜡切片容易碎裂,皱褶明显,组织中央易见空洞;脱水程序二制作的石蜡切片完整无空洞,石蜡切片经HE染色后镜下观察结构完整清晰。相较于其他4种浸蜡程序,浸蜡总时间为150 min时制作的石蜡切片染色后观察最完整清晰。结论 使用脱水程序二及浸蜡总时间为150 min时所制作的石蜡切片质量有所提升,易于镜下观察,推荐作为小鼠肝和肠道组织石蜡切片的优化程序。

快速石蜡切片技术在病理检验中的临床应用

目的探讨快速石蜡切片技术在病理检验中的临床应用。方法选择2022年1-12月泉州市第一医院病理科180例患者为研究对象,依据随机抽签法将研究对象分为对照组和研究组,各90例。对照组予以常规切片方案,研究组予以快速石蜡切片方案。比较2组检验方案操作时间、切片质量和技术诊断结果。结果研究组方案固定操作时间、第1次浸蜡操作时间、透明胶水操作时间、第2次浸蜡操作时间、切片制作时间均短于对照组(P<0.05)。研究组高质量切片占比为98.89%,高于对照组的84.44%(P<0.05);研究组技术诊断正确率为100.00%,高于对照组的88.89%(P<0.05)。结论快速石蜡切片技术在病理检验中的效果良好,可缩短各项操作时间,提升切片质量,保证检验工作质量,值得进一步推广。

3种药用植物利用石蜡切片和冰冻切片制片的效果比较研究

目的:优选出不同状态(新鲜、干燥)及不同药用部位的不同药用植物(滇重楼、密脉鹅掌柴、铁皮石斛)最适宜的制片方法,提高横切面组织装片制备效率。方法:采用不同防冰晶形成保护剂(不处理、蔗糖和甘油)处理新鲜材料并进行冰冻切片,采用甘油软化干燥材料并进行石蜡切片,比较不同前处理条件和两种制片方法的制片效果。结果:新鲜材料中,密脉鹅掌柴的茎叶,滇重楼的根茎、茎、叶采用甘油溶液做保护剂效果较佳,而铁皮石斛适用蔗糖磷酸缓冲溶液做保护剂;滇重楼的须根用石蜡切片法可获得组织结构完整的装片。此外,经甘油溶液软化,滇重楼的干燥根茎和密脉鹅掌柴的干燥叶可获得质量较好的石蜡切片。结论:质地稍硬的新鲜药材用甘油溶液处理后采用冰冻切片可以获取较为理想的效果;质地柔软的新鲜药材可不经任何处理或经蔗糖磷酸缓冲液浸泡后采用冰冻切片;干燥药材或含淀粉类药材采用石蜡切片法可获得理想的切片效果。

快速石蜡切片病理检查在宫颈癌筛查异常者诊断中的应用价值

目的:探究快速石蜡切片病理检查在宫颈癌筛查异常者诊断中的应用价值。方法:选取2019年3月—2021年12月山东省成武县人民医院收治的136例宫颈癌筛查异常者,高危型HPV (HR-HPV)阳性且宫颈细胞学检查异常,按照随机数表法1∶1配对原则分为快速石蜡切片组68例和常规石蜡切片组68例。快速石蜡切片组患者进行快速石蜡切片病理检查,常规石蜡切片组患者进行常规方式制做石蜡切片。以术后病理检查为金标准,对比两组患者制片效率、病理检查结果、诊断准确率及组织学检出情况。结果:快速石蜡切片组固定操作、第1次浸蜡操作、透明胶水操作、第2次浸蜡操作、切片制作、获取病理报告时间短于常规石蜡切片组,差异有统计学意义(t=67.408、65.771、70.571、53.056、121.438、218.619,P<0.05);快速石蜡切片组病理检查显示,炎症14例、宫颈上皮内瘤变Ⅰ(CINⅠ)15例、CINⅡ17例、CINⅢ20例、宫颈癌2例;常规石蜡切片组病理检查显示炎症16例、CINⅠ14例、CINⅡ17例、CINⅢ18例、宫颈癌3例;两组患者不同病理检查方式诊断准确率对比,差异无统计学意义(χ^(2)=1.462,P>0.05)。快速石蜡切片组诊断Kappa指数高于常规石蜡切片组;两组患者不同病理检查方式对表面上皮-间质、性索组织间质、生殖细胞等检出率对比,差异无统计学意义(χ^(2)=0.119、0.056、0.376,P>0.05)。结论:快速石蜡切片病理检查应用于宫颈癌筛查异常者诊断制片效率较高,可缩短病理报告获取时间,诊断准确率及组织学检出率可靠。

甲状腺冰冻切片和石蜡切片病理诊断的实施价值评估

术中对甲状腺疾病患者实施病理检查时采用冰冻、石蜡切片的诊断效能与意义讨论。方法:研究对象收治时间为2022.9-2023.9,均是同意采取手术方案的甲状腺疾病患者,共150例,术中病理检查诊断时采取的样本处理技术分别是石蜡切片和冰冻切片,其中,石蜡切片获取的数据为诊断金标准,对两种样本处理技术的检出数据、诊断准确性、诊断符合率、诊断时间进行分析。结果:相比石蜡切片,冰冻切片病理诊断的检出数据少,漏诊率及误诊率较高,组间比较P>0.05;冰冻切片病理检查鉴别病灶良恶性准确率与石蜡切片技术接近,组间比较P>0.05;冰冻切片检查的诊断符合率近似石蜡切片,组间比较P>0.05;相比石蜡切片检查消耗的时间,冰冻切片检查用时较短,组间比较P<0.05。结论:临床对甲状腺疾病患者实施病理检查时,冰冻切片的检查诊断时间较短,检出率、鉴别诊断准确性与石蜡切片检查近似,具有较高应用价值,推广意义重大。

乳腺肿瘤术中冰冻切片与石蜡切片病理诊断的符合率评估

探讨乳腺肿瘤疾病采取病理诊断时石蜡及冰冻两种切片制作技术的诊断符合率。方法 研究于2022.10开始,直至2023.10结束,对象是93例本院乳腺肿瘤手术患者开展研究,在此期间取病灶组织样本进行病理诊断,以石蜡切片技术和冰冻切片技术处理标本,观察不同技术方案的检查结果、诊断效能、符合率、检查用时、样本品质。结果 以石蜡切片技术的检查结果为参考可知,冰冻切片检出的例数少,但与石蜡切片技术的检查结果接近;石蜡切片技术的阳性预测值、特异度、灵敏度、准确率均理想,冰冻切片技术的诊断效能与之相比差异不明显P>0.05;石蜡切片技术可以准确鉴别诊断疾病类型,冰冻切片技术鉴别诊断疾病的符合率接近石蜡切片,P>0.05;石蜡切片技术流程复杂,因而需要较长时间,冰冻切片操作简捷,所需时间与石蜡切片相比差异突出,P<0.05;石蜡切片技术制作出的样本质量较佳,冰冻切片技术的样本质量评分与之相比P<0.05,差异突出。结论 病理诊断乳腺肿瘤疾病过程中,石蜡、冰冻切片技术均有理想检查准确率,在鉴别疾病类型方面的诊断符合率很高,但是,冰冻切片的病理检查诊断时间更少。

冰冻切片与石蜡切片诊断甲状腺肿瘤的实施价值评估

研究冰冻切片与石蜡切片的效果,评估上述方案在甲状腺肿瘤中的应用情况,分析其准确性,进而更好的为后续诊断工作提供指导。方法 限定时间:2023年01月到2023年12月;限定对象:宾阳县人民医院甲状腺肿瘤。共100例冰冻病例,用100例冰冻切片中剩余的组织再做常规切片,其中诊断金标准为石蜡切片,对上述措施的诊断价值进行评估。结果 100例冰冻病例中,良性70例,可疑恶性2例,恶性的有28例,石蜡切片中28例与冰冻诊断结果一致,诊断显示恶性共计29例;与冰冻切片相比,石蜡切片诊断所需时间较长(P<0.05);冰冻切片的诊断效能高,准确度、特异度、灵敏度,漏诊率、误诊率低。结论 在甲状腺肿瘤良恶性的诊断中,术中冰冻切片病理诊断与石蜡切片的一致性较高,均具有较高的检出率,且诊断所需时间短于石蜡切片,值得进一步推广使用。

冰冻切片与石蜡切片对甲状腺疾病的病理诊断价值分析

目的分析冰冻切片与石蜡切片对甲状腺疾病的病理诊断价值。方法回顾性分析2021年1月至2022年1月许昌医院收治的70例甲状腺疾病的临床资料,所有患者均接受常规石蜡切片检查和冰冻切片检查,以石蜡切片检查结果作为金标准,分析冰冻切片病理检查对甲状腺疾病良恶性的灵敏度、特异度,比较两种检查方式准确率、误诊率、延迟诊断率、诊断所需时间、对不同类型甲状腺疾病的检出率差异。结果冰冻切片诊断甲状腺疾病良恶性的灵敏度[91.67%(22/24)],特异度[97.83%(45/46)],准确率[95.71%(67/70)],延迟诊断率[2.86%(2/70)]和石蜡切片诊断甲状腺疾病良恶性的准确率、误诊率、延迟诊断率比较,差异无统计学意义(P>0.05);冰冻切片检查所需时间短于石蜡切片,差异有统计学意义(P<0.05);冰冻切片和石蜡切片对不同类型甲状腺疾病的检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论冰冻切片具备与石蜡切片相似的诊断效能,并且诊断所需时间短,方便快捷,具备良好的病理诊断价值。