临床分离碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌菌株的分子流行病学及碳青霉烯酶抑制剂增强试验的应用

目的:碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)的流行已成为临床抗感染治疗的巨大挑战。本研究探讨本地区CRE耐药情况及分子流行病学特征,并评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验在临床实验室的应用价值,旨在为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:收集中南大学湘雅医院临床标本中分离的非重复性CRE,最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)联合纸片扩散法(Kirby-Bauer,KB)检测菌株的药物敏感性,PCR方法检测13种碳青霉烯酶基因。使用碳青霉烯酶抑制剂增强试验对126株经PCR确定为产碳青霉烯酶的菌株进行表型检测,了解该方法与金标准PCR结果的符合程度。结果:704株CRE呈现出高度耐药的情况,经检测,501株为产碳青霉烯酶的肠杆菌目细菌(carbapenemase producing Enterobacterales,CPE);CPE菌株以肺炎克雷伯菌为主,其次为阴沟肠杆菌和大肠埃希菌;碳青霉烯酶有9种,包括肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(Klebsiella pneumoniae carbapenemase,KPC)、新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)、维罗纳整合子金属酶β-内酰胺酶(Verona integronencoded metallo-β-lactamases,VIM)、亚胺培南酶(imipenemase,IMP)、苯唑西林酶48型(oxacillinase-48,OXA-48)以及罕见的亚胺培南水解β-内酰胺酶(imipenem-hydrolyzingβ-lactamase,IMI)、阿德莱德亚胺培南酶(adelaide imipenemase,AIM)、圭亚那超广谱β-内酰胺酶(guiana extended-spectrumβ-lactamase,GES)和Bicêtre碳青霉烯酶(bicêtre carbapenemase,BIC),KPC型丝氨酸酶检出率最高,为61.7%(309/501);碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测单产A类丝氨酸碳青霉烯酶、单产B类金属酶以及同时产A类和B类酶菌株的符合率均为100%。结论:湖南省长沙市CRE菌株分布非常广泛,产碳青霉烯酶(特别是KPC型丝氨酸酶)是这类细菌对碳青霉烯类药物耐药的主要机制。在湖南省长沙市首次检出了肠杆菌目细菌携带GES、IMI型基因。碳青霉烯酶抑制剂增强试验结果显示该方法能准确检测产A类丝氨酸酶和B类金属酶的CRE,且操作简单、结果容易判读,能满足临床微生物实验室丝氨酸碳青霉烯酶和/或金属酶检测的需求,为临床精准用药提供依据。

mCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测CRE和CRPA产酶表型的方法学评价

目的综合评估改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)和碳青霉烯酶抑制剂增强试验对碳青霉烯酶检测和分型能力。方法采用mCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测中山大学肿瘤防治中心2019~2022年临床分离并保存的47株耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)和42株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa,CRPA)的产酶表型,胶体金法对检测结果进行验证比对,通过卡方检验进行统计分析,并从多角度综合评价。结果mCIM检测CRE和CRPA的阳性率分别为70.2%和35.7%,碳青霉烯酶不确定占比为25.5%和11.9%。增强试验检测47株CRE:44.7%产B类金属β内酰胺酶,17.0%产A类碳青霉烯酶,不产A或B类碳青霉烯酶的菌株占38.3%;增强试验检测42株CRPA:2.4%产B类金属β内酰胺酶,90.4%产A类碳青霉烯酶,同时产A类碳青霉烯酶和B类金属β-内酰胺酶的菌株占4.8%,不产A或B类碳青霉烯酶的菌株占2.4%。两种方法检测CRE差异有统计学意义(χ^(2)=17.803,P=0.01),检测CRPA差异无统计学意义(χ^(2)=4.632,P=0.592)。胶体金法验证:产碳青霉烯酶的阳性符合率为84.6%,产丝氨酸酶的阳性符合率为80%,产金属酶的阳性符合率为100%。结论检测CRE两种方法均适用且差异不大,CRPA更推荐碳青霉烯酶抑制剂增强试验,胶体金值得推广,临床实验室应根据实际条件选择检测方法。

碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶表型的临床应用

目的:评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶表型的临床应用价值。方法:收集六安市人民医院2020-2021年分离自临床标本的耐碳青霉烯、非重复肠杆菌目细菌共227株。采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测菌株携带的碳青霉烯酶,并以PCR试验扩增常见5种碳青霉烯酶基因为金标准,评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验对CRE菌株A类和B类碳青霉烯酶的检测价值。结果:碳青霉烯酶抑制剂增强试验结果显示,产A类酶菌株有167株,产B类酶菌株有53株,5株肺炎克雷伯菌和1株产气肠杆菌未检出A类或B类酶。与PCR方法比较,碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测单独产A类酶的灵敏度为100.0%(164/164),特异度为95.2%(60/63),对于单独产B类酶的检测,灵敏度和特异度均为100.0%,两种检测方法之间一致性高。结论:碳青霉烯酶抑制剂增强试验操作简便、结果易判读,适合临床微生物实验室普遍应用。

改良碳青霉烯灭活试验和碳青霉烯酶抑制剂增强试验鉴定肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶型别的临床价值

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)/乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(eCIM)、碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶型别的临床价值。方法收集分离自临床样本的肠杆菌目细菌130株,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)100株。首先采用微量肉汤稀释法对分离菌株进行体外药物敏感性试验,然后分别用mCIM/eCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶并分型。以聚合酶链反应(PCR)结果为标准,评价mCIM/eCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶基因型的效能。结果100株CRE对替加环素和黏菌素的敏感率>95%,对头孢他啶-阿维巴坦、阿米卡星和复方磺胺甲噁唑的敏感性分别为13.0%、50.4%、55.7%,对其他临床常用抗菌药物的耐药率均>75%,。与PCR结果比较,碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测丝氨酸碳青霉烯酶的敏感性为98.60%,特异性为100%;检测金属β-内酰胺酶的敏感性为100%,特异性为100%。mCIM/eCIM检测丝氨酸碳青霉烯酶的敏感性为97.22%,特异性为100%;检测金属β-内酰胺酶的敏感性为96.30%,特异性为100%;mCIM/eCIM无法检测同时产2种酶的菌株。结论mCIM/eCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验均都能较好地区分不同类型的碳青霉烯酶,其中碳青霉烯酶抑制剂增强试验操作更加简便,结果更易观察。

3-氨基苯硼酸联合乙二胺四乙酸碳青霉烯酶抑制增强试验检测肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的研究

目的了解3-氨基苯硼酸(PBA)联合乙二胺四乙酸(EDTA)碳青霉烯酶抑制剂增强试验(PBA-EDTA法)用于检测肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的检测结果。方法使用PBA-EDTA法测定275株经金标准PCR及DNA测序已明确为产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶结果的符合率,并与CLSI推荐的mCIM联合eCIM改良碳青霉烯灭活试验(mCIMeCIM法)检测结果的符合率比较。结果PBA-EDTA法对产KPC酶菌株的符合率为99.2%(118/119),对产金属酶菌株的符合率为100%(109/109),对产KPC+MβL复合酶的符合率为100%(13/13);但不能检出34株D组OXA酶;其检测结果与分子生物学检测结果总体符合率为87.3%(240/275)。mCIM-eCIM法检测结果显示产KPC酶菌株符合率100%(119/119);检测金属酶的符合率94.5%(103/109);未能检出13株产KPC+MβL复合酶,虽能检出34株产D组OXA酶菌株产酶特性但不能分类酶型;与分子生物学检测结果相比较,mCIM-eCIM法检测结果总体符合率为93.1%(256/275)。两种方法对于KPC酶和金属酶的检出虽有差异,但显示此差异无显著统计学意义。PBA-EDTA法对复合酶(KPC+金属酶)的检出优于mCIM-eCIM法。结论PBA-EDTA法可以检测细菌产生的A组丝氨酸碳青霉烯酶、B组金属酶以及同时产A组和B组碳青霉烯酶的菌株;操作较mCIM-eCIM法简单易行;便于临床微生物实验室使用和开展肠杆菌目细菌产生的丝氨酸碳青霉烯酶和金属酶的检测,为临床合理使用抗菌药物、精准治疗患者提供实验室依据。

新型金属β内酰胺酶抑制剂ME1071体外增强碳青霉烯类抗生素对产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的抗菌活性研究

ME1071,一种马来酸的衍生物,是新型金属β内酰胺酶抑制剂。本次研究的菌株来自1997年至2008年日本164所医院的非重复菌株,包括174株产金属β内酰胺酶的铜绿假单胞菌,其中166株产IMP-1金属β内酰胺酶,

金属碳青霉烯酶的作用机制及其抑制剂研究进展

碳青霉烯类抗生素是临床治疗革兰阴性菌感染的最后一道防线之一。近年来随着碳青霉烯类抗生素在临床的大量使用,以及耐药基因在质粒水平迅速传播,其耐药率逐年上升。造成耐药的原因主要是产生碳青霉烯酶,其中金属碳青霉烯酶属于B类碳青霉烯酶,可以水解除单环β-内酰胺类抗生素之外的几乎所有β-内酰胺类抗生素,目前尚无有效的抑制剂上市。本文就金属碳青霉烯酶的种类结构,作用机制及其抑制剂3个方面作简要综述。

基于改良碳青霉烯灭活试验(mCIM和eCIM)对耐碳青霉烯肠杆菌目(CRE)表型及分布研究

分析对耐碳青霉烯肠杆菌目(CRE)表型及分布进行改良碳青霉烯灭活试验(mCIM和eCIM)研究。从我院的患者中收集了103例,时间跨度为2021年1月至2023年1月。在进行临床细菌分离时,排除了同一患者同一部位的重复菌株,最终筛选出了138株CRE菌株。使用全自动细菌鉴定仪进行细菌分离试验,采用PCR法检测CRE耐药基因,分析了mCIM/eCIM与碳青霉烯酶抑制剂增强试验的结果。结果 我院2021年1月-2023年1月共纳入103例患者,从138株CRE菌株中分离出97株肺炎克雷伯菌(占比70.29%),15株黏质沙雷菌(占比10.87%),以及26株大肠埃希菌(占比18.84%)。这些菌株分布在不同的医学科室,其中重症医学科占比最高(56.52%),其次是神经内科重症病房(21.74%)。在这138株CRE菌株中,检测到101株产KPC-2,7株产KPC-3,23株产NDM-1,5株产NDM-5,以及2株同时产KPC-2和NDM-1。对于产KPC的108株菌株,mCIM/eCIM检测准确率为98.15%,与PCR结果的一致性为高。而对于产NDM的28株菌株和同时产KPC和NDM的2株菌株,mCIM/eCIM也能够准确鉴定,但无法区分同时产KPC和NDM的情况。与PCR结果相比,方法 的一致性Kappa值分别为1.000和0.560。在对108株产KPC的菌株进行碳青霉烯酶抑制剂增强试验时,准确鉴定了105株,敏感性为97.22%,特异性为100%。与PCR比较,一致性Kappa值为0.972。对于28株产NDM菌株,该试验准确鉴定了27株,敏感性为96.43%,特异性为100%。与PCR比较,一致性Kappa值为0.976。因此,mCIM和eCIM对CRE型检测敏感性较高,可快速准确鉴定CRE表型,操作简单,且干扰因素较少,具有较高的临床价值。

肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的实验室检测和临床报告规范专家共识(第二版)

当前,细菌耐药已成为全球公共健康领域的重大挑战,其中尤以碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)引起的感染形势最为严峻。碳青霉烯类抗生素包括亚胺培南、美罗培南和厄他培南等,是治疗多重耐药革兰阴性杆菌所致感染最有效的抗菌药物之一。随着该类药物在临床的广泛使用,CRE菌株的检出率呈逐年快速上升趋势。

肺炎克雷伯碳青霉烯酶与β-内酰胺酶抑制蛋白复合物的运动模式

肺炎克雷伯碳青霉烯酶能水解临床治疗多药耐药菌感染的碳青霉烯类抗生素,严重削弱革兰氏阴性菌感染的治疗效果.开发新型有效专一的肺炎克雷伯碳青霉烯酶抑制剂有助于提高此类抗生素的治疗有效率.β-内酰胺酶抑制蛋白能竞争性抑制肺炎克雷伯碳青霉烯酶的活性.通过粗粒化模型分析肺炎克雷伯碳青霉烯酶-β-内酰胺酶抑制蛋白复合物的运动模式.结果表明,结合β-内酰胺酶抑制蛋白后,肺炎克雷伯碳青霉烯酶的运动模式发生较大变化.使用分子对接和分子动力学模拟方法得到一系列环硼酸类β-内酰胺酶抑制剂与肺炎克雷伯碳青霉烯酶的结合模式,并从氢键和能量的角度解释该类抑制剂的识别机制与构象-抑制活性间的关系.本研究为后续基于肺炎克雷伯碳青霉烯酶结构的抑制剂设计提供了一定的理论依据.

肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的实验室检测和临床报告规范专家共识

当前,细菌耐药已成为全球公共健康领域的重大挑战,其中尤以碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)引起的感染形势最为严峻.碳青霉烯类抗菌药物包括亚胺培南、美罗培南和厄他培南等,是治疗多重耐药革兰阴性杆菌所致感染最有效的抗菌药物之一.随着该类药物在临床的广泛应用,肠杆菌目细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率呈逐年快速上升趋势.CHINET中国细菌耐药监测网历年监测结果显示[1-2],我国临床分离肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率从2005年的3%快速攀升至2019年的25%以上,上升幅度高达8倍.2018年全国细菌耐药监测网(CARSS)数据显示,全国1429所医院临床分离的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的平均耐药率为10.1%,部分省市甚至超过20%[3].由于CRE菌株通常还携带有对其他抗菌药物耐药的基因,对抗菌药物呈广泛耐药甚至全耐药的特征,使临床的抗感染治疗面临无药可用的困境[4].

南宁地区某院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶表型与基因型检测

目的了解南宁地区某院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性及碳青霉烯酶产生情况,为CRKP感染防控提供依据。方法收集2021年1月至2022年2月临床分离的CRKP共46株,用PhoenixM50全自动微生物鉴定药敏分析仪进行药敏试验,采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验进行碳青霉烯酶表型筛选,用PCR扩增碳青霉烯酶耐药基因。结果46株CRKP对厄他培南100%耐药,对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为76.1%和78.3%,对除氨曲南外的其他β-内酰胺类药物的耐药率均为100%,对替加环素耐药率为0,对多黏菌素B(4.3%)及阿米卡星(32.6%)耐药率较低;碳青霉烯酶表型筛选试验检出单产A类碳青霉烯酶菌株33株(71.7%),单产B类金属β-内酰胺酶9株(19.6%),单产D类OXA-48型碳青霉烯酶2株(4.3%),同时产A类和B类碳青霉烯酶2株(4.3%);46株CRKP均检出碳青霉烯酶耐药基因,其中,33株(71.7%)仅携带KPC-2基因,7株(15.2%)仅携带NDM-1基因,2株(4.3%)仅携带VIM-1基因,2株(4.3%)仅携带OXA-48基因,2株(4.3%)同时携带KPC-2和NDM-1基因,未检出IMP型。结论某院分离的CRKP对常见抗菌药物具有高度耐药性,主要产KPC-2型碳青霉烯酶,应加强抗菌药物合理使用、CRKP酶型检测与感染控制,有效防范院内感染。

东莞地区肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的表型与基因型分析

目的了解东莞地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)临床感染分布、耐药情况以及产碳青霉烯酶的表型与基因型,完善东莞地区耐药监测信息,为临床控制和治疗CRE的感染提供可靠依据。方法使用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定药敏系统分析仪系统对东莞耐药监测网2020年收集的40株CRE菌株进行菌种鉴定与药敏试验,采用纸片扩散法(K-B法)和E-test法测定药敏。采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测碳青霉烯酶表型,采用GeneXpert Carba-R检测和鉴定碳青霉烯酶的基因型。使用WHONET 5.6软件和SPSS23.0软件进行统计分析。结果40株CRE菌株中检出最高的是肺炎克雷伯菌27株(占67.5%),其次是大肠埃希菌10株(占25%);标本中检出率最高的是呼吸道标本(16株,占40%),其次是尿液标本(7株,占17.5%);40株CRE药敏结果显示,亚胺培南的耐药率为92.5%,美罗培南的耐药率为97.5%,替加环素的耐药率较低为40%;碳青霉烯酶型检测结果显示有37株(占92.5%)产生碳青霉烯酶,其中产A类丝氨酸碳青霉烯酶阳性24株(占60.0%),产B类金属β内酰胺酶阳性13株(占32.5%),未检出碳青霉烯酶菌株3株(占7.5%);GeneXpert Carba-R测定法检测出碳青霉烯酶基因共37株(占92.5%),检出13株blaNDM(占32.5%),24株blaKPC(占60%);携带blaKPC的CRE菌株对阿米卡星、替加环素和氨曲南的耐药率比携带blaNDM的CRE菌株的高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论东莞地区分离的CRE菌株以产A类丝氨酸碳青霉烯酶和产B类金属β-内酰胺酶的菌株为主。检出的碳青霉烯酶基因型主要为blaNDM和blaKPC,其中携带blaNDM的CRE菌株对阿米卡星、替加环素和氨曲南的耐药率较低。GeneXpert Carba-R可以快速检测并鉴定碳青霉烯酶基因型。建议实验室同时进行表型和基因型的检测,指导临床合理使用抗生素。

imCIM检测B类碳青霉烯酶的效果评价

目的评价抑制剂增强改良碳青霉烯失活法(im CIM)在B类碳青霉烯酶检测中的应用价值,并与EDTA纸片增效试验(EDPT)进行比较分析。方法收集碳青霉烯类抗生素不敏感菌株181株,其中肺炎克雷伯菌44株、大肠埃希菌44株、鲍曼不动杆菌43株、铜绿假单胞菌50株;碳青霉烯类抗生素敏感菌株83株,其中肺炎克雷伯菌25株、大肠埃希菌16株、鲍曼不动杆菌25株、铜绿假单胞菌17株。采用im CIM和EDPT对上述264株菌株进行B类碳青霉烯酶的筛查,以PCR结果作为金标准。应用一致性检验、Wilcoxon符号秩和检验、独立样本Kruskal-Wallis H检验及ROC曲线进行统计学分析。结果 181株碳青霉烯类抗生素不敏感菌株中144株PCR扩增耐药基因阳性,A、B、D类碳青霉烯酶分别为39株、77株、28株;im CIM检测70株阳性,111株阴性,其中166株与PCR结果一致;EDPT检测72株阳性,109株阴性,其中134株与PCR结果一致。碳青霉烯类抗生素敏感菌株83株,PCR扩增耐药基因、im CIM及EDPT检测结果均为阴性。im CIM敏感性和特异性分别为85.71%(66/77)和97.86%(183/187),与PCR结果一致性Kappa值为0.859;EDPT敏感性和特异性分别为66.23%(51/77)和88.77%(166/187),Kappa值为0.561。im CIM抑菌圈差值(Δdim CIM)与EDPT抑菌圈差值(ΔdEDPT)有差别,差异有统计学意义(Z=-6.941,P<0.05)。采用im CIM检测B类碳青霉烯酶的Δdim CIM水平与A、D类酶Δdim CIM总体分布位置不同,差异有统计学意义(χ2=108.887,P<0.05)。im CIM与EDPT的ROC曲线下面积分别为0.988(95%CI:0.977~0.999)和0.936(95%CI:0.909~0.963)。结论 im CIM是一种准确、高效、便捷的碳青霉烯酶表型筛选方法,敏感性、特异性较高,适合用于流行病学监测。

CIM,mCIM 和MHT筛选肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的方法评价

目的评估碳青霉烯类抑制法(carbapenem inactivation method,CIM)、改良碳青霉烯类失活法(modified carbapenem inactivation method,mCIM)和改良Hodge试验(modified hodge test,MHT)对肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型筛选能力。方法以PCR检测碳青霉烯酶基因作为金标准,对120株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant enterbacteriaceae,CRE)和50株碳青酶烯类敏感的肠杆菌科细菌,分别进行CIM,mCIM和MHT表型筛选试验,评估三种方法的表型筛选能力。结果120株CRE中,93株携带碳青霉烯酶耐药基因,表型筛选试验显示,CIM,mCIM和MHT的敏感度分别是95.6%,96.8%和95.8%,特异度分别为72.7%,92.3%和50%。三种方法筛选碳青霉烯酶,差异有统计学意义(χ^2=12.796,P<0.05)。与PCR结果相比较,CIM,MHT和mCIM的一致率分别为90%,95%和77.4%,Kappa值分别为0.898,0.949和0.771。mCIM和CIM试验与PCR高度一致。50株碳青酶烯类敏感的肠杆菌科细菌PCR检测和三种方法均为阴性。结论三种表型筛选方法均有较高的敏感度,但mCIM较CIM,MHT具有更高的特异度和一致率,是筛选CRE的有效方法。

产碳青霉烯酶泛耐药肠杆菌科细菌感染治疗药物的现况与未来

碳青霉烯类抗菌药物属于β内酰胺类，但对超广谱β-内酰 胺酶（ESBLs）和头孢菌素（AmpC）酶稳定。

耐碳青霉烯类抗菌药物革兰阴性杆菌临床分布及耐药基因调查

目的分析甘肃省人民医院2018—2020年碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌(CRO)的临床分布、耐药基因携带情况,为医院CRO的防控提供依据。方法采用飞行质谱仪进行细菌鉴定;K-B纸片扩散法和PhoenixTM-100革兰阴性杆菌药敏板进行药敏试验。从临床标本中共分离出CRO菌株60株,用WHONET 5.6软件统计CRO菌株的耐药情况及临床分布。采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)联合EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)和碳青霉烯酶抑制剂增强试验进行耐药表型检测,荧光定量PCR进行耐药基因型检测。结果60株CRO菌株经鉴定为肺炎克雷伯菌20株、大肠埃希菌11株、阴沟肠杆菌13株、雷极普罗威登菌5株、弗劳地枸橼酸杆菌2株和铜绿假单胞菌9株;主要来源于重症监护病房(ICU)、神经内科、泌尿科和烧伤科等临床科室。经耐药表型检测检出:A类丝氨酸碳青霉烯酶17株(肺炎克雷伯菌16株、弗劳地枸橼酸杆菌1株),B类金属β-内酰胺酶38株(阴沟肠杆菌12株、大肠埃希菌11株、雷极普罗威登菌5株、铜绿假单胞菌6株、肺炎克雷伯菌4株),4株(铜绿假单胞菌3株和阴沟肠杆菌1株)为阴性;另外1株弗劳地枸橼酸杆菌采用mCIM联合eCIM试验检测为B类金属β-内酰胺酶,而用碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测为混合型(A+B类酶)。经PCR检测检出KPC酶17株、NDM型32株,IMP1型酶6株,KPC+NDM混合基因型1株。结论甘肃省人民医院CRO菌株的表型耐药机制是产A类丝氨酸碳青霉烯酶和B类金属β-内酰胺酶,主要携带KPC、NDM和IMP1基因型。

三种方法筛选肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的临床价值比较

目的探讨三种方法对肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶进行筛选时的临床价值。方法54株肠杆菌科细菌,均给予改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)联合EDTA碳青霉烯失活试验(eCIM)、酶抑制剂增强试验、快速碳青霉烯酶检测方法(rCDM)进行筛选。以聚合酶链式反应(PCR)结果为金标准,比较三种方法筛选肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的灵敏度、特异度及检测时长。结果54株肠杆菌科细菌经PCR筛查,36株为阳性,18株为阴性。rCDM法筛选肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的灵敏度、特异度分别为88.89%、94.44%,均高于mCIM联合eCIM法的50.00%、50.00%和酶抑制剂增强试验的66.67%、55.56%,差异具有统计学意义(P<0.05)。rCDM法的检测时长为(0.32±0.10)d,短于mCIM联合eCIM法的(1.21±0.25)d、酶抑制剂增强试验的(0.56±0.22)d,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在对肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶进行筛选时,应用rCDM筛选的效果和效率较好,值得临床推广。

河南地区少见CRE耐药性分析及碳青霉烯酶初筛实验的临床应用

目的了解河南省直第三人民医院少见碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)检出情况及耐药特点,探讨新的CRE酶型初筛实验的临床应用,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集2019年分离自临床样本的非重复少见CRE,分析其检出情况及体外药物敏感性试验结果。从中随机选择22株,采用乙二胺四乙酸(EDTA)联合3-氨基苯硼酸(APBA)碳青霉烯酶抑制实验和胶体金免疫层析法检测其碳青霉烯酶酶型。结果共检出1111株CRE,其中阴沟肠杆菌49株(15.4%),产酸克雷伯菌14株(19.2%)、枸橼酸杆菌12株(13.8%)。CRE对亚胺培南的耐药率均为100%。肠杆菌属、产酸克雷伯菌、枸橼酸杆菌属对替加环素、多黏菌素B均敏感,对多黏菌素B及替加环素天然耐药的变形杆菌属和普罗威登斯菌属对氨曲南的耐药率分别为5.3%和14.3%。随机选择的22株CRE中检出NDM型金属酶13株、KPC型丝氨酸酶3株、OXA型丝氨酸酶1株、KPC+IMP+NDM型1株、KPC+NDM型1株。结论河南地区CRE耐药形势严峻,应及时监测,并根据药物敏感性试验结果合理用药。少见CRE产酶类型多样,应合理优化碳青霉烯酶初筛实验,为临床精准用药提供参考。

重症监护病房老年患者泌尿道感染病原菌药敏及碳青霉烯酶表型分析

目的分析重症监护病房(ICU)老年患者泌尿道感染病原菌分布、药物耐药情况及碳青霉烯酶表型,为院内感染的防控及此类患者临床抗生素经验用药提供参考。方法回顾性分析2019年9月至2021年8月,南京某老年医院ICU收治的年龄65周岁以上泌尿道感染患者中段尿培养结果信息,分析患者致病菌分布及药物耐药情况。结果共收集到符合诊断标准的合格中段尿标本400份,其中262份阳性,阳性率为65.50%;革兰阴性杆菌占63.36%,以大肠埃希菌为主,占24.81%;革兰阳性球菌占32.82%,以金黄色葡萄球菌为主,占17.56%;真菌3.82%,以白色念珠菌为主,占2.29%;革兰阴性杆菌对阿米卡星、美罗培南敏感性较好,对环丙沙星敏感性最差;革兰阳性球菌对万古霉素、利奈唑胺均敏感,对红霉素敏感性最差;真菌对所测药物均敏感;耐碳青霉烯类肠杆菌(CRE)占肠杆菌目细菌27.85%,以肺炎克雷伯菌为主;耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)以产A类丝氨酸碳青霉烯酶为主,对头孢他啶-阿维巴坦敏感性好,耐碳青霉烯酶大肠埃希菌(CREi)以产B类金属β内酰胺酶为主。结论老年患者泌尿道感染病原菌以革兰阴性杆菌为主,多重耐药菌检出率较高,应根据药物敏感性试验结果及时调整治疗方案。