香菇多糖对蛋鸡生长性能、免疫功能及禽流感疫苗免疫效果的影响

为掌握香菇多糖对蛋鸡生长性能、免疫功能及禽流感疫苗免疫效果的影响,试验将120只1日龄禽流感非免疫罗曼灰蛋鸡随机分为4组,对照组不添加香菇多糖,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别添加50、100、200 mg/kg香菇多糖进行试验,试验为期77 d。结果显示,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ平均日增重显著高于对照组(P<0.05),料重比显著低于对照组(P<0.05),Ⅲ组最佳;Ⅲ组蛋鸡血清中IL-2和IFN-γ水平显著高于对照组(P<0.05);禽流感疫苗免疫后,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组蛋鸡禽流感H5抗体水平均显著高于对照组(P<0.05),Ⅲ组抗体水平最高。结果表明,香菇多糖可以提高蛋鸡生长性能、免疫功能及禽流感疫苗免疫效果,在本试验条件下,香菇多糖的最佳添加量为200 mg/kg。

禽流感疫苗在家禽生产中的应用及免疫效果研究

禽流感是由禽流感病毒引起的一种传染性强、危害呼吸系统的人兽共患病,常常给家禽养殖业造成巨大的经济损失,同时给人类生命健康造成巨大严重威胁。目前,在生产中为了有效地预防和控制禽流感的暴发和传播,疫苗免疫接种是主要采用的防控措施,其中灭活疫苗应用较为常见。针对近年来的流行现状开发更为有效的疫苗对禽流感的防控至关重要。本文通过对禽流感疫苗的种类、禽流感疫苗免疫效果的评估和研究方法、禽流感疫苗在家禽生产中的效果评价进行阐述,为加强禽流感防控工作,提高家禽养殖业的水平具有重要意义。

禽流感疫苗新型佐剂的研究进展及未来发展方向

禽流感是一种高度接触的病毒性传染病,它对我国养殖业及公共卫生构成严重威胁。随着疫情的频发和病毒株的变异,研发更有效的疫苗及其佐剂成为迫切需求。为此,综述了禽流感疫苗新型佐剂的研究进展,包括佐剂的种类、作用机制、以及在禽流感疫苗中的应用实例,并对未来的研究方向提出了展望,这为禽流感疫苗新型佐剂的研发提供理论依据。

免疫增强剂提高禽流感疫苗效力的研究

为评价免疫增强剂（VA5）对鸡的免疫效力,将不同剂量免疫增强剂与H9禽流感抗原混合后制备疫苗,评价对SPF鸡的免疫效力.根据筛选结果,将最适剂量的免疫增强剂与H9禽流感抗原以共同混合的形式配制疫苗,并将免疫增强剂以伴侣形式与H5或H9禽流感疫苗混匀免疫商品鸡,评价免疫增强效果.结果表明,免疫增强剂与H9疫苗共同混匀,或将免疫增强剂制备成疫苗伴侣形式与H5或H9商品疫苗共同混合免疫商品鸡,均能使H5或H9疫苗免疫后抗体提前1周达到7lg2,免疫后2～3周抗体效价显著高于不含免疫增强剂的常规疫苗组.该免疫增强剂能提高H5和H9亚型禽流感疫苗对鸡的免疫效力,具有较好的应用前景.

H5亚型高致病性禽流感疫苗的免疫效力

利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因(HA)的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)和全病毒灭活疫苗免疫商品鸡,比较两种疫苗的保护效力。结果发现,利用103PFU和106PFU的rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡和含母源抗体商品鸡,HI抗体应答水平均低于灭活疫苗免疫组。利用H5亚型禽流感病毒经肌肉注射攻毒后,rFPV-HA免疫的无母源抗体商品鸡获得了完全保护(100%),高于灭活疫苗保护率(94.7%);但rFPV-HA免疫含母源抗体商品鸡诱导的保护率(11.4%～15.8%)低于灭活疫苗免疫组的保护水平(68.4%)。结果表明,rFPV-HA诱导HI抗体的能力低于灭活疫苗;但rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡的保护率完全达到灭活疫苗保护水平,显示出了良好的应用前景;灭活疫苗和rFPV-HA均受到母源抗体的干扰,不适于在母源抗体处于高峰期时使用。

金荞麦对鸭禽流感疫苗免疫效果影响

一直以来,鸭群对禽流感疫苗免疫应答效果欠佳,为解决该现状,利用金荞麦具有增强免疫力、抗癌和抑菌的功效,按照1%、2%、3%的重量比将金荞麦混合于三穗麻鸭日粮中。于不同日龄采血后分别采用血凝抑制试验、MTT法和ELISA方法,检测禽流感抗体效价、T淋巴细胞转化效率、IFN-γ和IL-2水平。结果显示,金荞麦能够促进禽流感疫苗对鸭群的体液免疫和细胞免疫水平。

鸡IL-2和IL-15基因真核表达质粒对禽流感疫苗的免疫增强作用

根据GenBank中的鸡IL-2和IL-15序列设计了2对引物,采用RT-PCR法从山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆了IL-2和IL-15基因,与pcDNA3.1连接构建了真核表达质粒pDNAIL-2和pDNAIL-15,研究了其对禽流感灭活疫苗的免疫增强作用。结果显示,免疫后第10d,pDNAIL-15+AI灭活疫苗组和pDNAIL-2+AI灭活疫苗组HI抗体水平显著高于AI灭活疫苗组(P<0.05)。免疫后第10 d,pDNAIL-15+AI灭活疫苗组CD4+淋巴细胞百分含量显著高于pDNAIL-2+AI灭活疫苗和AI灭活疫苗组(P<0.05);免疫后第23 d,pDNAIL-2+AI灭活疫苗组CD4+淋巴细胞百分率显著高于pDNAIL-15+AI灭活疫苗和AI灭活疫苗组(P<0.05)。证实pDNAIL-2和pDNAIL-15能提高禽流感灭活疫苗的免疫效果。

H_5亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律的研究

通过对父母代肉鸡、水禽禽流感病毒H5血清血凝抑制抗体水平连续跟踪监测。探讨H5亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律。结果表明:雏鸡7日龄时母源抗体水平达最大值,20日龄时母源抗体下降到极低水平,雏鸡最佳首次免疫日龄为10日龄左右,二次免疫应根据鸡群母源抗体水平于首次免疫后100d左右进行。雏鹅、鸭3日龄进行首次免疫,水禽对禽流感疫苗产生良好的免疫应答,并于免疫后25～30d达到抗体高峰,但首次免疫抗体维持时间不长,最佳二次免疫时间应在首次免疫后30d左右进行。

免疫增强剂对禽流感疫苗免疫持续期、安全性和鸡淋巴细胞转化的影响

在配制H9亚型禽流感疫苗过程中添加免疫增强剂VA5制成VA5-H9疫苗免疫鸡,或将VA5制备成油乳剂以疫苗伴侣形式与商品化H5亚型禽流感疫苗混合(VA5-H5)后免疫鸡,监测鸡的抗体持续期、疫苗安全性和鸡淋巴细胞的转化情况。抗体检测结果表明,VA5与H5或H9亚型禽流感疫苗混用能有效延长抗体持续期4周,H5抗体提前1周达到7lg2。安全性研究表明,以VA5-H9疫苗经一次单剂量、一次2倍剂量和单剂量间隔2周重复免疫这3种方式免疫鸡后,含VA5的疫苗与常规疫苗的吸收类似,说明VA5不影响鸡体对疫苗的吸收。淋巴细胞转化试验结果显示,VA5能提高免疫鸡淋巴细胞转化效率。可知,获得的VA5免疫增强剂能有效延长抗体持续期,且不影响疫苗的安全性,并提高免疫鸡的淋巴细胞转化活性。

人用H5N1禽流感疫苗免疫动物效果观察

目的将用禽流感毒种R1203株按3种生产工艺生产的疫苗进行动物接种,观察疫苗的免疫效果。方法用不同剂量的3种工艺生产的禽流感疫苗,分别免疫大鼠和家兔,肌肉接种2针(隔14 d),首针后14和28 d静脉采血,测定接种1针和2针后,动物血清中血凝抑制抗体和中和抗体的产生情况。结果大鼠的抗体反应较家兔敏感;大鼠和家兔在疫苗接种1针后14 d,都能产生血抑抗体,滴度可达1∶40,但中和抗体滴度都很低,几乎测不到;接种2针后,血抑抗体或中和抗体反应都显著高于第1针;裂解-2苗接种大鼠和家兔后的抗体反应普遍高于另2种疫苗,且家兔量-效反应明显。结论裂解-2疫苗优于其他2种;中和抗体能正确反应疫苗的质量;H5N1禽流感疫苗的效力试验可用于免疫家兔测定中和抗体和临床前研究的动物试验,用15μg血凝素(HA)接种家兔2针,血清中和抗体滴度达1:40或以上。

禽流感疫苗对禽类免疫效果的检测与分析

禽流感大流行时 ,在非疫区对禽类用 H5亚型和 H5、H9二价禽流感油乳苗进行免疫接种试验 ,并对其结果进行比较和分析。得出不同日龄的蛋鸡免疫接种 2 0 d后其 HI抗体效价不同 ,不同的饲养方式、不同种类的家禽及不同种类疫苗的免疫效果均不同。 85日龄蛋鸡产生的 HI抗体效价达到 7log2 ,鸡、鸭、鹅混养 HI抗体效价低于平养和笼养 ,H5亚型禽流感疫苗免疫鸡和鸽其 HI抗体效价达到了 5 log2以上 ,而对鹌鹑和鸭为 1log2和 3.2 log2 ;单价禽流感疫苗和二价苗对鸡群免疫的效果不同 ,二价苗的免疫效果不如单价苗。

禽流感疫苗免疫鸡群后HI抗体消长规律及免疫保护临界值的测定

禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)SD-1株(H5N2亚型)接种10日龄SPF鸡胚,收获24h后死亡的鸡胚尿囊液,按照《兽医生物制品规程》制备油乳剂灭活苗,并对200只14日龄雏鸡进行免疫,免疫后每隔1周抽取20只鸡测定HI抗体,并分别选择HI抗体水平为3log2、4log2、5log2、6log2和7log2时进行攻毒。结果表明,疫苗免疫鸡群后第8周抗体达到高峰(8log2),而后逐渐下降,第16周抗体降至5log2。攻毒试验表明,能够抵抗致死剂量AIV攻击的HI抗体临界值为5log2。

禽流感疫苗生产中病毒培养工艺研究进展

禽流感疫苗大规模生产一直备受关注,建立以生物反应器技术为基础的动物细胞大规模培养技术是禽流感疫苗生产的主流模式。目前国内外报道禽流感疫苗的病毒培养方式主要有传统的SPF鸡胚生产法、哺乳动物细胞贴壁培养法、微载体悬浮培养法、全悬浮无血清培养法。文章介绍了不同病毒培养工艺的优缺点,尤其是全悬浮无血清细胞培养法,该技术是进行大规模禽流感疫苗生产的必然趋势。

人用H5N1禽流感疫苗检定评价

目的选用H5N1禽流感毒种(R1194和R1203),按设计的生产工艺,制成的疫苗进行全面检定,选取其中较好毒株生产的疫苗,用于以后人用禽流感疫苗临床前研究的动物免疫。方法利用从国外引进2株H5N1禽流感病毒,设计生产3种疫苗(全病毒、裂解-1、裂解-2)的纯化工艺,优化纯化条件,全面检定制成的疫苗,比较2毒种生产疫苗的质量。结果2毒株在接种滴度104EID50/ml(半数鸡胚感染剂量/ml),培养温度34.5℃,培养时间3 d的条件下,病毒增殖滴度较高;检定结果证明,制成的所有疫苗中反映质量的内毒素、卵清蛋白、总蛋白、总蛋白与血凝素之比这4项指标,明显优于国家标准;3种工艺疫苗的电镜形态完全不同;经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),全病毒疫苗和裂解-2疫苗的蛋白条带形态相似,但裂解-1疫苗在32 KD左右的条带缺失;毒种R1203株疫苗的产量明显高于R1194株。结论设计的3种生产疫苗的纯化工艺,均可生产出高质量的疫苗;毒种R1203株的疫苗产量高于毒种R1194株;可用R1203毒株,按3种不同工艺生产的疫苗接种动物,观察免疫效果。

H5亚型禽流感疫苗对特禽及水禽的免疫效果观察

用H5N2亚型禽流感疫苗,分别免疫SPF鸡、乌鸡、珍珠鸡、贵妃鸡、火鸡、鸭及鹅,免疫后采血测定其HI抗体,观察我国现有的H5N2亚型禽流感疫苗对特禽及水禽的免疫效力。结果,免疫后3周,SPF鸡、乌鸡、珍珠鸡、贵妃鸡、火鸡、鸭及鹅的平均HI抗体滴度分别为27.2、27.6、24.3、24.83、24.6、26.2及25.3,乌鸡两次免疫,其中一次HI抗体为29.65。试验证明,SPF鸡、特禽及水禽用H5N2亚型禽流感疫苗免疫后,均能产生一定水平的HI抗体,但不同种类的家禽所产生的HI抗体滴度存在较大差异,以SPF鸡及乌鸡所产生的HI抗体滴度最高,而珍珠鸡、贵妃鸡及火鸡所产生的HI抗体滴度较低,水禽对H5N2亚型禽流感疫苗可产生一定水平的HI抗体。

番鸭呼肠孤病毒感染对禽流感疫苗免疫抗体应答的影响

1日龄番鸭感染番鸭呼肠孤病毒(MDRV)后,应用MTT法测定番鸭血液、脾脏和胸腺的B淋巴细胞增殖功能,应用血凝抑制方法检测禽流感疫苗免疫后抗体变化规律,探讨MDRV对B淋巴细胞功能的影响。结果显示:免疫组番鸭禽流感疫苗二免后H5和H9 AIV-HI抗体效价上升,二免后14 d HI效价最高,随后抗体效价维持在7.5 log2以上。MDRV组番鸭二免后抗体缓慢上升,二免后21 d HI效价最高,随后抗体效价维持在6.0 log2以下,HI效价与对照组差异极显著(P<0.05)。1日龄番鸭人工感染MDRV后,免疫后7 d外周血T淋巴细胞增殖指数与对照组相比明显下降(P<0.05)。免疫后14~28 d与对照组相比显著下降,差异极显著(P<0.01),表明MDRV感染抑制了B淋巴细胞增殖功能。以上结果表明MDRV感染能抑制抗体应答和番鸭外周血和免疫器官中B细胞的增殖功能作用,造成B细胞功能抑制。

禽流感疫苗免疫商品代蛋鸡免疫抗体水平和消长规律检测

将6批次的商品代蛋鸡13700羽分成6个试验组,用6种不同的禽流感疫苗分别接种商品代蛋鸡,疫苗免疫之后每间隔2周采血分离血清,检测禽流感H5和H9的抗体滴度和抗体持续期。结果表明HVK-2、SDYB、ZZZM三个试验组的H5抗体在免疫后的第2周达到4log2以上,CDJH和HVK-1两个试验组的H5抗体接近4log2,到第4周时,抗体滴度达到峰值,以后逐渐下降,而HVK-3试验组则几乎测不到H5抗体。H9抗体在疫苗免疫后2周全部达到5log2以上,HI抗体滴度普遍高于H5。对5组试验鸡分别进行了2次禽流感疫苗免疫,经过加强免疫的H5抗体水平普遍高于一免,并且抗体持续期明显延长。

免疫增强剂对不同肉鸡禽流感疫苗免疫效果探讨

试验将筛选获得的免疫增强剂与现有商品化禽流感疫苗混合后免疫10-15日龄的白羽肉鸡、黄羽肉鸡或麻鸡，在免疫后的第2、3、4周采血用于检测血凝抑制抗体效价，统计饲料用量，并在各品种鸡达到出栏日龄时，检测出栏重、料肉比和死淘率。结果显示，3种肉鸡免疫含免疫增强剂伴侣的H5亚型禽流感疫苗，抗体产生比常规疫苗提前1周达到710昏，平均HI抗体效价显著高于常规疫苗；不同疫苗免疫鸡与对照鸡在出栏重和料肉比方面无显著差异，在饲养期间无死淘情况。综合上述结果提示，免疫增强剂能显著提高禽流感疫苗在肉鸡的免疫效力，同时对生产性能无明显影响。