禽白血病病毒p27抗原ELISA检测试剂盒的比较与评估

为了更好地进行禽白血病监测与净化,研究使用由蛋清、细胞培养物、胎粪等多种样品组成的样品盘对7种禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)p27抗原ELISA检测试剂盒(国产试剂盒DA、DB、DC,进口试剂盒IA、IB、IC、IDEXX)进行比较。结果显示:从分析特性上看,试剂盒分析特异性均较好,未观察到与其他常见禽源病毒的交叉反应;与IDEXX相比,DA、IA的分析敏感性较高,DB、IC其次,DC、IB较低,对于ALV不同亚群,各种试剂盒分析敏感性差异可达2~3个稀释度;从诊断特性上看,与IDEXX相比,DB、DC和IC的诊断敏感性和诊断特异性均高于90%;DA、IA和IB与IDEXX的诊断敏感性和诊断特异性均高于80%;各试剂盒对于不同类型样品(DF-1细胞培养物、蛋清、胎粪)的诊断敏感性和诊断特异性存在差异;从重复性上看,DA和IA的批内变异系数均在15%以内。综上所述,与IDEXX相比,当前国产p27抗原ELISA检测试剂盒DA和DB、进口p27抗原ELISA检测试剂盒IA和IC的各项性能可满足禽白血病净化各阶段对不同类型样品的检测需求。

2013-2020年广西重点种鸡场禽白血病净化效果分析

按照检测-淘汰-分群-再检测-再淘汰的原则,建立“生物安全+病原监测+淘汰”模式对2013—2020年广西11家重点种鸡场的种公鸡、种母鸡、育成鸡和雏鸡采集精液、蛋清、泄殖腔拭子、胎粪等样品进行禽白血病病原检测;公鸡和母鸡同时采集血浆蛋白进行禽白血病病毒(ALV)分离。通过多方式联合净化禽白血病,ALV阳性率逐年下降,净化效果非常显著。其中公鸡精液中ALV阳性率由2013年的7.45%下降到2020年的0.14%,母鸡蛋清样本ALV阳性率由2013年12.32%下降到2020年0.23%,雏鸡胎粪ALV阳性率由2018年3.60%下降到2020年0.47%。公鸡血浆蛋白病毒检出率由2013年的3.46%下降到2020年的0.78%,母鸡血浆蛋白病毒检出率由2013年的2.22%下降到2020年的0.20%。可以看出ALV净化效果非常显著,说明所建立的禽白血病净化方法在广西行之有效。

1例土鸡禽白血病病毒与马立克病病毒混合感染诊断与分析

[目的]对安徽某土鸡场送检的疑似肿瘤病的病料进行鉴定。[方法]采集病死鸡的肝脏,提取病毒DNA,根据Genbank已登录的基因序列设计引物,通过PCR检测,对扩增出的ALV env与MDV meq基因序列进行测序和序列分析。[结果]检测到禽白血病和马立克目的条带,序列比对结果发现,禽白血病病毒为J亚群,马立克为野毒强毒株。[结论]研究结果为了解该地区禽白血病和马立克混合感染情况提供了参考数据。

江西地方鸡禽白血病流行与净化现状

为了解江西地方鸡禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)分子流行情况,2016—2023年对江西省8个地方品种鸡进行样品采集,通过对74224份血浆样品病毒分离与遗传进化分析。结果显示:J亚群ALV(ALV-J)和K亚群ALV(ALV-K)是鸡群中主要的ALV亚群,但致病性强的ALV-J阳性率及其在分离株中的占比逐年下降,致病性较弱的K亚群毒株在分离株中占比逐年递增,尤其是在进行ALV净化的鸡场中,ALV-J阳性率明显下降,表明禽白血病净化对控制ALV的流行有重要意义。在参照国际禽白血病净化“金标准”的基础上,结合江西地方品种鸡的特点,制定ALV净化方案,并在2018—2023年对3个地方鸡保种核心群开展了禽白血病净化,经过3~5个世代的ALV净化,各品种鸡群ALV阳性率均显著下降,净化效果明显。

A、B、J亚群禽白血病病毒混合感染的鉴定及gp85基因序列分析

【目的】了解湖北地区禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)亚群之间混合感染及其gp85基因遗传变异情况,为进一步研究ALV混合感染的流行病学提供参考。【方法】对来自湖北宜昌疑似感染ALV的一只病死鸡进行病理剖检,无菌采集病变组织接种DF-1细胞进行病毒分离,通过PCR、ELISA及间接免疫荧光试验(IFA)等方法进行亚群鉴定,进一步对分离株gp85基因的相似性和变异情况进行分析。【结果】剖检结果可见病死鸡肾脏、脾脏肿大,肺脏出血,表面可见灰白色肿瘤结节;组织匀浆接种DF-1细胞后,ELISA检测发现细胞上清P27抗原呈阳性;IFA检测发现,感染细胞里有特异性绿色荧光;PCR鉴定能同时扩增出A(692 bp)、B(847 bp)和J(545 bp)亚群的特异性条带。鉴定结果表明,从该病死鸡中分离到A、B和J亚群ALV毒株,分别命名为HBYC2022-A、HBYC2022-B和HBYC2022-J。分离株gp85基因核苷酸相似性分析显示,HBYC2022-A与江苏株JS-A1201相似性最高,为99.6%;HBYC2022-B与江苏株JS-B1204相似性最高,为99.7%;而HBYC2022-J与黑龙江株PK19FA01、广西株GX20YL12 J及安徽株AHaq02相似性均为100%。此外,分离株gp85基因高突变区域(hr1、hr2)氨基酸序列并未出现特殊点突变。【结论】鸡群存在A、B和J不同亚群ALV的混合感染情况,提示国内养禽场需提高警惕并加强针对ALV各亚群的流行病学调查。

不同ELISA检测方法在检测出壳雏鸡禽白血病病毒感染中的应用

通过雏鸡胎粪中群特异性衣壳蛋白27(p27)抗原检测以判定禽白血病病毒(ALV)垂直传播是实施禽白血病净化的关键步骤,为对比不同ALV-p27抗原ELISA试剂盒对我国四类广泛流行的亚群ALV垂直传播的检测效果,本试验设置ALV-A、ALV-B、ALV-J和ALV-K感染组,以无菌生理盐水作为对照组,在8胚龄时以卵黄囊接种的方式感染SPF鸡胚,建立鸡胚携带ALV-A、ALV-B、ALV-J和ALV-K的垂直感染模型。采集各组雏鸡胎粪样品和血浆样品,死亡鸡胚肝脏样品,死亡雏鸡胎粪样品、血浆样品和肝脏样品,其中血浆和肝脏样品需接种鸡胚成纤维细胞系(DF-1细胞)进行病毒分离,各样品以4家公司提供的ALV-p27抗原ELISA试剂盒进行检测,并以实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进行平行检测,比较阳性检出率和灵敏度。结果显示,4家公司的ALV-p27抗原ELISA试剂盒对于同一样品的阴阳性判定结果基本一致,但灵敏度存在差异;胎粪样品直接ELISA检测不能将ALV阳性鸡只全部检出,相对于胎粪样品,血浆和肝脏病毒分离样品ELISA检测更具有灵敏度优势。本试验所建立的对比方法不仅有助于评估4家公司ELISA试剂盒的灵敏度,还进一步评估了胎粪样品直接ELISA检测与血浆和肝脏病毒分离样品ELISA检测2种评估方法的灵敏度,为科学选择灵敏特异的ALV检测方法提供了良好评价模型。

禽白血病抗病育种研究进展

禽白血病是严重危害养禽业发展的传染病之一。该病亚型较多,传播速度快,缺乏针对性特效治疗药物和疫苗,给养禽业发展带来巨大挑战。该文对禽白血病的病原学特征、流行病学特点、免疫净化情况、病毒亚型受体的遗传多样性、抗病育种现状等进行分析总结,为防治禽白血病感染及培育抗禽白血病的品种(品系)提供参考。

禽白血病诊断方法及净化研究进展

禽白血病(Avian leukosis,AL)是由禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引发的一种种源性传染性疾病。目前,我国防治此病的基本策略为种鸡分阶段检测及根除净化。自我国实施净化方案以来已在部分品种鸡中获得可观成效,但部分地方品种鸡感染发病率仍较高。本综述主要概述了AL主要病原特性、诊断方法和净化防控现状的研究进展,旨在为ALV检测净化提供有价值的参考。

J、K亚群禽白血病病毒的分离和囊膜蛋白(gp85)基因序列分析

为了解现阶段我国禽白血病病毒(ALV)的流行特征和演化趋势,本试验于2021—2022年从国内某鸡场采集蛋清ALV衣壳蛋白(p27)抗原阳性的鸡血浆,接种鸡胚成纤维细胞(DF-1)分离病毒并进行亚群鉴定;采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增分离株的囊膜蛋白(gp85)基因片段,并对其进行测序,将基因序列与ALV不同亚群毒株进行比对和遗传进化分析;选取氨基酸变化差异较大的分离毒株进行间接免疫荧光鉴定。结果显示,共分离到7株ALV毒株(3株J亚群,4株K亚群),ALV-J分离毒株CAU4932、CAU4860和CAU2259的gp 85基因片段长度为918 bp,编码306个氨基酸,分离毒株之间gp 85基因核苷酸同源性为90.5%~95.2%,gp85蛋白氨基酸同源性为95.1%~99.3%;ALV-K分离毒株CAU7049、CAU5006、CAU7176和CAU7168的gp 85基因片段长度为1008 bp,编码336个氨基酸,分离毒株之间gp 85基因核苷酸同源性为89.4%~92.3%,gp85蛋白氨基酸同源性为94.0%~99.7%。gp85蛋白氨基酸序列同源性比对发现,分离株gp85蛋白氨基酸序列均会发生突变,但高变区hr1和hr2所占比例较多,证实了gp85的高变性。在gp85蛋白B细胞抗原表位中存在部分位点的氨基酸突变,可能导致gp85蛋白抗原性发生变化。间接免疫荧光鉴定结果显示,5株分离毒株均可在DF-1细胞内复制并存在可被抗体识别的p27抗原表位。结果表明,本试验分离的7株ALV毒株是国内ALV-J和ALV-K流行毒株的突变株,不仅丰富了ALV基因组库资源,且为后续研究ALV的遗传变异特征和流行趋势等提供参考依据。

禽白血病病毒J亚群感染鸡组织中细胞受体chNHE 1的表达分析

旨在研究鸡钠氢交换蛋白1(chicken sodium hydrogen exchanger isoform 1,chNHE1)在不同类型鸡组织内的表达情况,J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus, ALV-J)的组织嗜性及ALV-J感染后组织chNHE1的mRNA变化情况。本研究利用qPCR技术,检测了商品肉鸡、商品蛋鸡和SPF鸡脏器内的chNHE1转录量,ALV-J感染鸡后各组织的病毒载量及组织chNHE1的转录量的变化。结果显示,chNHE1在3种类型鸡的心、肝、脾、肺、肾、盲肠扁桃体、胸腺和法氏囊中均能检测到,但转录量高低存在较大差异,其中,免疫器官内的chNHE1转录量相对较高;SPF鸡接种ALV-J后,心、脾、肾和盲肠扁桃体中的病毒载量相对较高,而肝、肺、胸腺和法氏囊中的病毒载量相对较低;ALV-J感染后,脾、肾和盲肠扁桃体中的chNHE1转录量明显上调,但心中的转录量与空白对照相比无明显变化。本研究分析了3种类型鸡chNHE1的组织转录特点及ALV-J感染对组织内chNHE1转录的影响,该研究结果为探究受体chNHE1的转录与ALV-J的组织嗜性的关系提供重要的理论依据。

E3泛素连接酶FBXL8对A亚群禽白血病病毒复制的影响

【目的】制备鸡E3泛素连接酶FBXL8多克隆抗体,探究鸡源FBXL8对A亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup A,ALV-A)在鸡胚成纤维细胞(DF-1)内复制的影响。【方法】以DF-1细胞cDNA为模板,通过PCR扩增FBXL 8基因,构建鸡源FBXL8原核表达重组质粒pET-28a-FBXL8,将其转化大肠杆菌表达菌株RIL进行诱导表达及纯化,将表达产物His-FBXL8免疫10月龄新西兰大白兔制备多克隆抗体,利用Western blotting和间接ELISA分别检测抗体特异性及效价;针对已公布的FBXL 8基因序列设计过表达引物及靶向FBXL 8基因的干扰序列,构建过表达质粒psi-flag-FBXL8及干扰质粒pLKO.1-FBXL8-shRNA,使用Western blotting检测其表达效果。将构建成功的过表达质粒和干扰质粒转染DF-1细胞,24 h后感染ALV-A,通过半定量PCR、Western blotting分别检测ALV-A的结构蛋白P27、GP85表达水平。【结果】PCR成功扩增出大小为1182 bp的FBXL 8基因片段,并成功构建FBXL8原核表达重组质粒pET-28a-FBXL8,诱导表达的融合蛋白His-FBXL8大小为43 ku。Western blotting和间接ELISA结果显示,制备的FBXL8兔多克隆抗体可特异性识别外源蛋白,且抗体效价为1∶64000。成功构建了FBXL8过表达质粒和干扰质粒,其在DF-1细胞中能够实现对FBXL8的过表达和敲低。半定量PCR和Western blotting检测结果显示,过表达FBXL8可抑制ALV-A复制,而敲低FBXL8则促进其复制。【结论】本研究制备的FBXL8多克隆抗体具有良好特异性及反应性;在DF-1细胞中,FBXL8负向调控ALV-A复制,研究结果为进一步深入探究FBXL8生物学特性提供了重要参考,并为揭示FBXL8抗ALV-A感染分子机制奠定了基础。

禽白血病的病理及分子生物学诊断

【目的】了解新疆某市鸡群E型禽白血病(E-avian leukosis)的感染情况及基因分子特征,为禽白血病的诊断和防控提供参考。【方法】本研究通过病理剖检、病理组织学观察、PCR检测、克隆载体连接等对疑似禽白血病病例进行实验室诊断,并通过DNAStar软件将分离株与参考毒株进行env基因核苷酸序列相似性比对、系统进化树构建和变异位点分析。【结果】发病鸡肝脏、心脏、脾脏、肾脏、肺脏等器官肿大,有大小不一的白色结节状病灶。病理组织学观察病灶为大小一致的成淋巴细胞,呈局灶性、弥漫性分布。禽白血病病毒(Avian leukaemia virus, ALV)基因组PCR扩增结果显示,获得大小为302 bp的目的条带,为ALV阳性;对阳性样品进行分型鉴定,阳性样品出现大小为1 074 bp的ALV-E特异性条带,分别命名为AKS2101和AKS2102。序列分析结果显示,分离株与E亚群毒株序列相似性为91.6%~98.6%。系统进化树显示,所得序列与ALV-E亚群参考株处于同一分支,与A、B、C、D、J、K亚群参考株处于不同进化分支,进一步说明该鸡群存在ALV-E感染。基因变异分析显示,分离株存在24处核苷酸变异和17处氨基酸位点变异,且可变位点位于序列高变区。【结论】新疆某市鸡群存在ALV-E感染,本试验为明确该地禽白血病流行情况提供基础数据。

与鸡内皮血管瘤病例相关的禽白血病病毒K亚群分离及其gp85基因演化分析

本研究在华南地区某规模化种禽场调查中发现其部分花鸡品系头部鸡冠下缘及眼睑上缘部位出现白色、质地坚硬且形状不规则的肿块,为了解患病鸡的发病特征及致病因子而开展了实验室诊断及相关病原研究。结果表明该规模化养殖场主要发病鸡群为父母代花鸡,发病率约为2%,剖检无其他肉眼表观病变,病理组织学诊断为内皮血管瘤。RT-PCR检测肿瘤组织表明为K亚群禽白血病病毒(ALV-K)感染,无其他禽肿瘤性病毒感染。对患病鸡的血浆样品(32份)、肿瘤组织匀浆(6份)及脑组织匀浆(6份)进行病毒的分离鉴定,成功从脑组织样品中分离到4个ALV-K毒株(GXJL01~GXJL04)。使用特异性引物扩增GXJL01~GXJL04的env基因并测序,在与华南地区其他5个规模化种禽场中分离获得的7个ALV-K流行株的gp85基因的遗传演化分析中表明,GXJL01~GXJL04与日本的Km5844、Sp53等神经胶质瘤毒株(fowl glioma-inducing virus, FGV)及具有神经组织嗜性的ALV-K毒株JS15SG01同一进化分支上,与本研究其他7个ALV-K分离株的遗传进化关系较远。同时在针对ALV-K的gp85蛋白氨基酸位点突变分析中发现,GXJL01~GXJL04存在多个与FGV和JS15SG01参考株相似的氨基酸位点突变。本研究首次把地方黄羽鸡品种花鸡头部的肿块诊断为内皮血管瘤,且ALV-K为内皮血管瘤的主要相关病原,分离株GXJL01~GXJL04区别于现行华南地区ALV-K流行株且与FGV、JS15SG01等神经组织嗜性的毒株高度同源。

一例龙岩地方品种鸡禽白血病诊断及病原学分析

为掌握龙岩地方品种鸡禽白血病病毒的感染情况与流行毒株的分子特征,采用剖检、病理组织学检查以及RT-PCR等方法对疑似感染禽白血病的鸡只进行诊断,并扩增病毒的gp85基因序列进行分析。结果表明,病鸡出现肝脏和心脏肿大,且器官表面伴有针尖状出血点,腹腔积液明显,内脏器官中有大量淋巴细胞的灶性浸润;该毒株gp85基因序列与J亚群的参考毒株存在较高的同源性,与原型毒株HPRS-103的同源性为87.8%,与J亚群的HN0001参考毒株处于同一小分支。该发现对于监测龙岩地方品种鸡鸡场禽白血病病毒的流行趋势、制定有效的防控措施以及掌握病毒的遗传演变规律具有重要的参考价值。

禽白血病对广元灰鸡不同品系繁殖性能的影响

试验旨在明确广元灰鸡雌性群体的禽白血病(AL)流行情况及其对繁殖性能的影响,为广元灰鸡的保种选育奠定健康种源基础。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别对1世代广元灰鸡T1系(762只)、T2系(522只)、T3系(1028只)的种蛋蛋清开展禽白血病病毒(ALV)的抗原检测,并比较分析各品系ALV阴性、阳性广元灰鸡的繁殖性能。结果显示,各品系广元灰鸡ALV阳性率由高到低为T3(30.25%)>T1(26.64%)>T2(23.75%),平均阳性率为26.88%。与未感染ALV的各品系广元灰鸡相比,ALV阳性T1品系的广元灰鸡的首蛋日龄显著增加(P<0.05),300日龄产蛋量和300日龄平均蛋重量显著降低(P<0.05);T2的300日龄产蛋量和300日龄平均蛋重显著降低(P<0.05),T3的300日龄产蛋量显著降低(P<0.05)。ALV阴性品系间,T1的首蛋日龄、300日龄体重和300日龄平均蛋重显著高于T3和T2(P<0.05)。ALV阳性品系间,T3的300日龄平均蛋重显著高于T2(P<0.05)。研究表明,AL在广元灰鸡各品系雌性群体中普遍存在,并能够显著降低部分繁殖性能,后期需要定期开展AL检测与净化工作。

伊犁河谷地区蛋鸡禽白血病流行病学调查情况分析

为了了解禽白血病J亚群(ALV-J)在伊犁河谷的流行情况和流行特点,为禽白血病的防治提供依据。本文选取伊犁河谷地区3个蛋鸡场,采集每个蛋鸡场同一来源4个不同批次产蛋鸡的血液样本,通过ELISA和荧光PCR方法检测禽白血病发病情况。进一步对1日龄、42日龄、120日龄和180日龄的感染蛋鸡群进行采样,以探究不同日龄的感染发病规律。研究结果显示,不同批次间ALV-J感染情况存在显著差异;同时,不同来源蛋鸡中,C来源蛋鸡品质最佳,其次为B来源,A来源最差。值得注意的是,蛋鸡在产蛋上升期对ALV-J的易感性最高。

山东某种鸡群禽白血病流行情况研究

为了解山东某地方品种鸡群的禽白血病流行情况,本研究采集了种鸡的血清475份、泄殖腔棉拭子1201份和疑似病例8例,分别进行了血清学、病理学及病原学检测。结果显示,鸡群的抗原阳性率为33.39%,ALV-A/B亚群抗体阳性率为16.21%;病理学诊断结果显示肿瘤类型主要为髓细胞瘤;从疑似病例分离到8株ALV-J,病毒gp85基因同源性为97.4%~99.2%,与ALV-J原型株HPRS103gp85基因同源性为95.9%~97.2%,与其他已发表的ALV-J分离株gp85基因的同源性为94.2%~97.9%;分离到3株ALV-A,病毒env基因同源性为94.5%~97.9%。本研究结果表明,该种鸡场ALV-A和ALV-J同时存在,不能确定ALV-B是否存在,需要做进一步的调查研究。

一例五黑土鸡马立克氏病和禽白血病混合感染的诊断

近年来,随着我国城乡居民生活水平的不断提高,人们对鸡肉品质的要求不断提高,为了满足这一需求,一些育种企业充分利用地方鸡品种资源,成功培育了一些优良的配套系品种,创造了较好的经济效益。但一些免疫抑制性疾病(如马立克氏病、禽白血病等)不仅对地方鸡的种源安全构成威胁,而且容易造成免疫抑制,给养鸡业造成了巨大的经济损失。2024年4月,江苏某养鸡场饲养的五黑土鸡陆续出现发病、死亡,剖检见肝脏、脾脏、心脏等器官有不同程度的肿瘤样病变,经组织病理学观察、实验室PCR鉴定,确诊为马立克氏病和J亚群禽白血病的混合感染,现报告如下。期待为土鸡马立克氏病疫苗的免疫接种和禽白血病的净化提供参考依据。

J亚群禽白血病病毒血液核酸筛查技术的建立

为缩短J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus, ALV-J)检测周期,进一步加快禽白血病净化进程,本研究结合SYBR GreenⅠqPCR和混样检测,建立了一种适用于低ALV-J流行率场景下的快速筛检ALV-J的血液核酸筛查技术(ALV-J blood quantitative polymerase chain reaction, ALV-J-B-qPCR)。根据GenBank中ALV-J pol及env基因序列,设计ALV-J的特异性引物,并优化反应条件,建立了ALV-J SYBR GreenⅠqPCR检测方法。以ALV-J病毒分离为阳性的鸡抗凝血为实验材料,分别制备抗凝血DNA、血细胞DNA、外周血淋巴细胞DNA、外周血淋巴细胞cDNA和血浆cDNA 5类血液检测模板进行ALV-J的PCR检测,筛选最佳检测模板;进一步比较蒸馏水破裂红细胞法提取混合血液DNA的混样方法,血液混样总体积为200μL的混样方法,血液混样总体积为10μL的混样方法共3种混样方法的检测准确性,筛选最佳混样方法。综合上述qPCR方法、检测模板与混样方法,成功建立了ALV-J-B-qPCR。运用ALV-J-B-qPCR分别进行预期流行率为1%~2%、4%~5%场景下的模拟筛查试验,并与病毒分离法比较。qPCR方法的特异性、灵敏性和重复性试验显示,该方法仅特异性扩增ALV-J,对标准质粒的最低检测限度为1×10^(2)copies·μL^(-1),批内与批间变异系数均<1%。对90份临床送检血液样品的检测结果显示,该qPCR方法对ALV-J的检出率(15.6%)高于p27抗原ELISA和普通PCR的检出率(12.2%)。检测模板筛选试验中,抗凝血DNA最符合检测准确度高、操作复杂度和成本低的要求,为最佳检测模板。混样方法摸索试验中,混样总体积为10μL(混样规模<12份)的混样方法检测准确性最高,为最佳混样方法。在样本数为400份,预期流行率为4%~5%场景的模拟筛查中,ALV-J-B-qPCR检出率为6.25%,比病毒分离法高2.00%;在样本数为400份,预期流行率为1%~2%场景的模拟筛查中,ALV-J-B-qPCR检出率为2.25%,比病毒分离法高0.75%。本研究建立的ALV-J-B-qPCR技术具有灵敏性高、检测快速和节约成本的优势,为种禽场加快ALV净化进程提供了新的思路和方法。

云南省部分地方品种鸡禽白血病病毒感染情况调查及南涧乌骨鸡种鸡禽白血病净化效果评估

为了解云南省部分地方品种鸡禽白血病病毒(ALV)的感染情况并评估禽白血病(AL)净化效果,本试验于2019—2021年自云南省5个地区采集12种地方品种鸡的血清和血浆样本共3321份,通过ELISA试剂盒检测禽白血病病毒J亚群(ALV-J)抗体和ALV p27抗原阳性率,分析云南省部分地方品种鸡ALV的感染情况;于2020—2022年对南涧乌骨鸡进行连续3个世代的AL净化并评估净化效果。结果显示:被调查的12种地方品种鸡均存在ALV感染,ALV-J抗体群体平均阳性率为44.82%(765/1707),ALV p27抗原群体平均阳性率为14.06%(227/1614);在不同地方品种鸡群中,公鸡群体阳性率30.52%(405/1327)高于母鸡群体阳性率29.44%(587/1994),散养户ALV-J抗体群体阳性率47.72%(325/681)高于种鸡场ALV-J抗体群体阳性率42.88%(440/1026)。南涧乌骨鸡种鸡经过3个世代净化,与1世代ALV p27抗原阳性率[精液58.33%(658/1128)、蛋清33.71%(360/1068)、40周龄公鸡血浆22.54%(94/417)和母鸡血浆18.71%(119/636)]相比,3世代[精液16.87%(218/1292)、蛋清14.56%(285/1958)、40周龄公鸡血浆0.85%(9/1065)和母鸡血浆0.66%(11/1656)]极显著下降(P<0.01);与1世代相比,3世代商品肉鸡生产性能和种鸡繁殖性能明显提升,说明该净化方案切实可行。本试验为云南省地方品种鸡群AL的净化和防控工作提供参考依据和数据支持,为云南省地方品种鸡遗传资源保护和开发利用提供借鉴。