非强效卵巢刺激的地中海贫血患者胚胎种植前遗传学诊断助孕治疗结局

【目的】观察非强效卵巢刺激的地中海盆血(地贫)患者胚胎种植前遗传学诊断助孕治疗结局,探讨特殊助孕目的下地贫患者卵巢反应性及合适的刺激强度。【方法】收集70名因地中海贫血行胚胎种植前遗传学诊断治疗(实验组)及57名因男方因素行单精子卵胞浆内注射患者(对照组),比较其在同等强度刺激下的卵巢反应及临床结局。【结果】在基础内分泌水平及卵巢刺激强度可比情况下,实验组可移植胚胎数显著少于对照组,差异具有统计学意义(P=0.021);两组患者的获卵数、临床妊娠率、每移植周期活产率均没有统计学差异。【结论】地贫状态不影响患者卵巢反应性,在非强效卵巢刺激下,行胚胎种植前遗传学诊断助孕治疗的地贫患者也可获得满意的临床结局。

种植前遗传学诊断/筛查周期的临床资料分析

目的通过回顾性分析种植前遗传学诊断/筛查(PGD/PGS)治疗周期的资料,旨在总结PGD/PGS治疗过程中的特点及规律,为临床提供参考。方法收集行PGD/PGS助孕的283对夫妇的309个治疗周期信息,分析病因构成、治疗过程、妊娠结局及新生儿情况。结果 283对夫妇中,因染色体异常行PGD治疗的比例最高,共223例,占78.8%;比较应用荧光原位杂交(FISH)、微阵列比较基因组杂交技术(array-CGH)和二代测序技术(NGS)这3种方法的临床资料,结果显示array-CGH组的胚胎活检成功率高于另外两组,差异有统计学意义(P<0.05);FISH组的正常胚胎率高于array-CGH和NGS组,但胚胎种植率低于这两组,差异均有统计学意义(P<0.05);FISH组临床妊娠率低于NGS组,差异有统计学意义(P<0.05);不同病因行PGD/PGS临床妊娠率比较,差异均无统计学意义;通过PGD/PGS技术出生子代无出生缺陷,且FISH与array-CGH诊断方法比较,新生儿情况均差异无统计学意义。结论 PGD/PGS技术是治疗遗传病高危患者生育问题的有效措施;FISH、array-CGH和NGS这3种诊断法均是有效的胚胎诊断方法,但array-CGH法和NGS法的诊断效率较FISH高。

应用荧光原位杂交技术进行胚胎种植前遗传学诊断的临床分析

目的:探讨应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridisation,FISH)技术对染色体异常携带者进行种植前胚胎遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)的临床意义。方法:根据携带者染色体异常种类,分别选择相应的亚端粒探针和着丝粒探针或性染色体探针,进行1次或者2次杂交,对7例染色体异常携带者进行了胚胎种植前遗传学诊断。结果:7例染色体异常携带者进行了7个周期的PGD,获卵131枚,活检77枚胚胎,检出卵裂球87枚,移植20枚胚胎,4例临床妊娠,其中2例已分娩健康婴儿。结论:应用荧光原位杂交技术对染色体异常携带者的胚胎进行种植前遗传学诊断是一种有效方法。

荧光原位杂交在胚胎种植前遗传学诊断中的应用

荧光原位杂交技术(FISH)因具有快速、灵敏、准确、特异性强等特点,在胚胎种植前遗传学诊断(PGD)中发挥重要作用。随辅助生殖技术、分子生物学等相关学科的进展,FISH技术得到不断改进,出现了多重杂交、快速杂交、原位PCR、光谱显像分析等衍生技术,使PGD更灵敏、有效。现就FISH技术在PGD中应用的国外状况做一综述。

胚胎种植前遗传学诊断研究进展

目的:综述胚胎种植前遗传学诊断(PGD)研究最新进展,以指导临床实践。方法:光盘检索相关文献并进行综合分析。结果:PGD是进行优生优育的重要方法,主要采用聚合酶链反应技术(PCR)与荧光原位杂交技术(FISH)。结论:PGD具有广阔的应用前景。

对曾育21三体综合征患儿者行胚胎种植前遗传学诊断获妊娠1例

目的在体外受精-胚胎移植过程中,对高危夫妇进行胚胎种植前遗传学诊断以避免21三体综合征患儿的出生.方法常规激素替代治疗,对患者夫妇行胞母细胞质内单精子注射(ICSI),正常受精培养到第3天,对6～10细胞期胚胎活检1个细胞,利用荧光原位杂交技术(FISH)进行胚胎种植前遗传学诊断(PGD),挑选染色体数目正常的胚胎移植入患者子宫.结果共对8个胚胎进行PGD,7个有诊断结果者中6个为正常胚胎、1个为21三体胚胎.挑选3个胚胎移植,获得妊娠并产下一健康男婴.结论应用FISH对染色体数目异常的遗传疾病,如21三体综合征,进行胚胎种植前遗传学诊断是切实可行的.

单基因遗传性疾病的胚胎种植前遗传学诊断(续) 第3讲 单细胞样本的收集,PCR的条件设置、调控和PGD前预初实验

一、PGD家庭单细胞样本收集（以单淋巴细胞为例）因为SGD-PGD最终实施必须在单细胞（以单卵裂细胞为胚胎的代表,对每一胚胎诊断）中进行,所以在该家庭中建立诊断测定方法一开始就必须使用单细胞样本。在PGD前最常使用的单细胞样本是单颊黏膜细胞和单淋巴细胞。以下介绍取得单淋巴细胞的通用方法。

单基因遗传性疾病的胚胎种植前遗传学诊断——单倍体定型连锁分析的运用

单基因疾病的胚胎种植前遗传学诊断(SGD-PGD)是一种已在很多欧洲和北美洲国家建立并能提供临床服务的胚胎遗传学分析诊断程序,能为那些家庭中带有某种遗传性疾病致病基因的夫妇提供临床服务,使这些夫妇可生养出正常或隐性致病基因携带者的子代。从SGD-PGD获得的正常婴儿很有可能使该致病基因就此在这些家庭中不再下传,因此也有人认为此临床服务是遗传性疾病在基因水平上的一级预防,大有前途。在中国,人口基数巨大,遗传性疾病的发病绝对人数很高,故在中国开展SGD-PGD对提高人口素质和国计民生有重大意义。从1998年以来,笔者对35种单基因遗传性疾病作过SGD-PGD可行性评估、设计和实施。简要述评单倍体定型连锁分析在SGD-PGD中的应用。

不同性别的染色体易位携带者种植前遗传学诊断助孕结局的分析

目的分析比较不同性别染色体罗氏易位、相互易位携带者行胚胎种植前遗传学诊断(PGD)后对胚胎发育及助孕结局的影响。方法回顾性分析行PGD助孕的122个染色体易位周期(共105对夫妻),按染色体易位类型和性别分为罗氏易位组和相互易位组,每个组又分为男性携带者亚组和女性携带者亚组。分别分析比较各组的一般情况、胚胎发育情况及解冻移植后的妊娠结局。结果罗氏易位中女性携带者亚组活检结果正常率(22.8%)较男性携带者亚组(35.3%)低(P=0.048),相互易位中女性携带者亚组受精率(78.8%)较男性携带者亚组(83.8%)低(P=0.038)而每移植周期临床妊娠率(69.0%)较男性携带者亚组(41.9%)高(P=0.035)。MII卵率罗氏易位组(88.4%)比相互易位组(83.9%)高(P=0.008),尤其在男性中,罗氏易位组的MII卵率(90.3%)、活检正常率(35.3%)和每取卵周期临床妊娠率(64.7%)均显著高于相互易位组(85.0%,P=0.036;21.9%,P=0.018;31.7%,P=0.02)。结论不同性别对染色体易位携带者的胚胎发育情况及助孕结局无明显影响;在男性中,罗氏易位携带者较相互易位携带者可获得更好的妊娠结局。

遗传学诊断在胚胎移植过程中的临床价值

目的评估遗传学诊断在胚胎移植过程中的临床价值。方法采用广州军区广州总医院生殖中心2009年2月—2012年1月期间的废弃胚胎,由D2期培养到D3期,采用荧光原位杂交技术检测胚胎固定后细胞核内的X、Y、13、18和21号染色体异常情况,采用高形态学评分的D3作为对照。结果 A组D2期胚胎为多核(卵裂球核≥2个)共22枚,染色体数目异常胚胎16枚,异常率为71.98%。与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。B组胚胎D2期多核(卵裂球核=2个)21枚,胚胎染色体变异数目15枚,异常率为72.23%,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),A组与B组间比较没有统计学差异。结论 D2期多核胚胎发展到D3期异常率高,不建议使用此类胚胎进行临床移植。

变性高效液相色谱快速诊断儿童型脊肌萎缩症

目的 建立变性高效液相色谱(denaturinghighperformanceliquidchromatography, DHPLC) 快速诊断儿童型脊肌萎缩症(spinalmuscularatrophy, SMA) 的新方法。方法 (1)用二重聚合酶链反应(PCR) 扩增运动神经元成活基因(survivalmotorneurongene, SMN) 外显子7、8及周围部分内含子序列; (2) 纯化PCR产物以除去其中的引物、dNTP及缓冲液中的盐粒子等成分; (3) 采用多重引物延伸反应特异性检测能将SMN1基因与SMN2基因区分开的3个特异性位点; (4) 将延伸反应的产物用DHPLC在完全变性的条件下分析。结果 将建立的新方法与传统的PCR-酶切法进行盲法对比试验, 检测了30例标本(包含20例SMA患儿和10例正常人群外周血基因组标本) 以验证新方法的特异性和可靠性, 其诊断结果与PCR-酶切法结果完全一致。结论 多重引物延伸反应结合DHPLC分析技术是一种可用于临床SMA基因诊断、产前诊断及胚胎种植前遗传学诊断的高效、灵敏、可靠、快速、简便的新方法。

基于新一代测序的SNP单体型分析在先天性挛缩性蜘蛛样指症PGD中的应用

目的探讨基于新一代测序(NGS)的单核苷酸多态性(SNP)单体型分析在先天性挛缩性蜘蛛样指症(CCA)种植前遗传学诊断中的有效性。方法对活检的滋养层细胞采用多重置换扩增(MDA)的方法扩增全基因组,应用基于NGS的SNP单体型分析和直接测序两种方法对MDA产物进行CCA的种植前遗传学诊断(PGD)。结果应用MDA方法对活检的4枚囊胚的滋养层细胞成功地进行了全基因组扩增;通过基于NGS的SNP单体型分析发现,其中两枚是未感染CCA的囊胚,另两枚是感染CCA的囊胚;单体型分析结果与直接测序法结果一致。取卵5个月后患者移植一枚基因型正常的冷冻囊胚,于妊娠的第38周经剖宫产成功分娩一体重为2 850g的健康婴儿。结论基于NGS的SNP单体型分析是单基因病的种植前遗传学诊断的有效筛查工具。

浙江省2004年医药卫生科研进展

一、基础医学研究 1．辅助生育技术基础和临床系列研究：浙江大学医学院附属妇产科医院历时13年，对各种先进的种植前遗传学诊断的实验技术；GnRH—α诱导排卵方案对子宫内膜蛋白质和容受性的影响；超声剂对早期胚胎细胞凋亡的不良作用、卵巢颗粒细胞中2种雌激素受体的表达和功能，以及卵巢自分泌和旁分泌激素与垂体激素的调节关系等进行了研究，并对子宫内膜异位各细胞因子和相关的基因突变与发离机制的关系进行了探讨。率先提出了优化的个体化诱导排卵方案，减少了卵巢过度刺激并改善了卵巢的反应；成功建立了减胎的方法，防止多胎妊娠并发症的产生；特别是采用先进的种植前遗传学诊断技术，纠治了一批染色体异常而不能正常生育的不育夫妇。

辅助生殖技术的研究进展

自从首例试管婴儿诞生以来,体外受精(IVF)已成为治疗女性不孕症的重要方法,胞浆内单精子注射(ICSI)技术为男性不孕症的治疗开辟了一个新的领域,超促排卵方案药物的改进,胚胎培养技术的改进以及辅助孵化、囊胚培养等使妊娠率提高。种植前遗传学诊断(PGD)、核移植技术及转基因治疗的出现,预示将来会有快速发展。

试管婴儿能否屡败屡做？

试管婴儿主要分为三类：体外授精一胚胎移植术、卵母细胞单精子显微注射技术、种植前遗传学诊断。