水蓑衣提取物对裸鼠肝癌移植瘤生长的影响

目的:观察水蓑衣提取物的抗肝癌细胞增生活性,为水蓑衣提取物用于肝癌治疗提供实验依据.方法:BALB/CA雌性裸鼠24只,背侧皮下接种SMMC-7721人肝癌细胞建立荷瘤裸鼠模型,14d后随机分为对照组,低剂量水蓑衣组,高剂量水蓑衣组和羟基喜树碱组;给药20d后检测各组移植瘤的体积和质量;并观察移植瘤的组织学变化和血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和肌酐(CRE)水平.结果:与对照组相比,水蓑衣组裸鼠移植瘤的体积明显减小(P<0.05),质量显著减轻(P<0.05);低、高剂量水蓑衣组的抑瘤率分别为46%和62%(P<0.05).水蓑衣组裸鼠瘤组织病理改变与羟基喜树碱组相似;体质量和血清ALT,AST,LDH活性及CRE与羟基喜树碱组无明显差别.结论:水蓑衣提取物可显著抑制肝癌移植瘤的生长,且呈一定的剂量依赖性:其对动物整体状况及心、肝、肾功能的影响与羟基喜树碱相当.

RNA干扰Tb人舌癌细胞整合素连接激酶基因表达可抑制移植瘤生长

目的研究对Tb舌癌细胞的整合素连接激酶(ILK)进行特异性siRNA沉默后,下游信号分子Akt、GSK3β磷酸化状态及对移植瘤生长和自发性转移的变化。方法建立特异性si ILK表达载体和无同源性的对照载体,通过Lipofectamine 2000介导稳定转染人舌鳞癌Tb细胞,然后将Tb、Tb vector和Tb silk 3组细胞分别注入裸鼠皮下构建移植瘤模型,5周后检测瘤大小和质量,对裸鼠肺及瘤组织行常规病理学检查,用免疫荧光技术检测癌细胞的p-Akt和p-GSK3β等的表达,并对瘤组织内血管生成情况进行观察。结果 Tb组、Tb vector组肺组织均发现自发性转移瘤,Tb si ILK组肺组织未发现自发性转移瘤;Tb si ILK组移植瘤细胞形态较其他二组体积减小,核分裂相较少,核质比例缩小;Tb si ILK组在体内和体外实验中的p-Akt和p-GSK3β表达较其他二组均明显下降;Tb si ILK组移植瘤质量(1.68±1.35)g较Tb组(3.58±1.04)g与Tb vector组(3.64±0.65)g分别降低了53.0%和53.8%(P<0.05);Tb si ILK组移植瘤血管[(5.6±2.2)/视野]生成较Tb组[(15.3±2.3)/视野]和Tb vector组[(14.6±1.4)/视野]也明显减少(P<0.05)。结论特异性ILK表达沉默抑制Tb舌癌移植瘤的血管生成和瘤细胞增殖,可能与其抑制下游信号传导分子Akt及GSK3β的磷酸化有关,提示ILK有望成为肿瘤治疗的靶基因。

碳纳米管丙氨瑞林对人子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响

子宫内膜癌（endometrial carcinoma，EC）是女性生殖道三大恶性肿瘤之一，约占女性生殖道恶性肿瘤的20％-30％。治疗目前仍以手术为主，但对于晚期不能手术或年轻早期要求保留生育功能，并且属于激素依赖性的EC患者，可以采用激素治疗。

PTEN基因对粘液表皮样癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的研究外源野生型PTEN抑癌基因对人高转移性粘液表皮样癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法取PTEN抑癌基因转染粘液表皮样癌细胞的M3SP2-PTEN及逆转录病毒空载体转染的对照细胞M3SP2-pBp,接种于裸鼠背部皮下,测定移植瘤生长曲线,并对移植瘤进行组织学观察。结果对照组移植瘤生长迅速,肿瘤体积倍增时间为32.68h。HE染色切片显示,细胞数量多、排列紧密,核分裂相较多见;而实验组M3SP2-PTEN细胞移植瘤生长比较缓慢,肿瘤体积倍增时间延长为36.58h,肿瘤结节体积明显小于对照组(P<0.01),抑瘤率达63.82%。HE染色切片显示,细胞排列比较松散,较多的细胞出现变性和坏死,部分细胞染色体边集并出现凋亡小体。结论外源野生型PTEN抑癌基因能够显著抑制人高转移性粘液表皮样癌细胞在裸鼠体内的生长,其作用机制与PTEN基因诱导癌细胞变性和凋亡有关。

卵泡刺激素促进卵巢上皮癌移植瘤生长

目的研究卵泡刺激素(folliclestimulatinghormone,FSH)在卵巢上皮癌发生、发展中的作用。方法卵巢上皮癌细胞系OVCAR3转染FSH受体表达质粒,得到FSH刺激敏感的FSH受体稳定表达细胞系OVCAR3-FSHR。部分裸鼠去势(切除双侧卵巢),分别将OVCAR3及OVCAR3-FSHR接种到裸鼠皮下,测量肿瘤体积,免疫组化鉴定血管形成相关因子、细胞生长刺激及抑制因子受体在肿瘤组织中的表达。结果接种OVCAR3-FSHR细胞、并注射FSH的去势裸鼠(A组)移植瘤体积(302.69mm3±49.27mm3)明显大于去势、接种OVCAR3细胞(B组,130.34mm3±28.25mm3)、未去势分别接种OVCAR3-FSHR细胞(C组,76.83mm3±22.56mm3)和OVCAR3细胞(D组,32.38mm3±7.84mm3)者。A组中血管内皮细胞生长因子(VEGF)阳性细胞数明显高于其他各组,而转化生长因子β受体II(TGFβIIreceptor,TβRII)阳性细胞数低于其他各组。结论FSH可能通过促进肿瘤的血管形成、降低肿瘤细胞对生长抑制因子的反应等方式促进卵巢上皮癌细胞在移植裸鼠体内的生长。

沉默整合素连接激酶基因对TCA8113舌癌细胞移植瘤生长的影响

目的研究沉默TCA8113舌癌细胞整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因的表达,对其下游底物Akt和GSK3β磷酸化状态及对移植瘤生长和自发性转移的影响。方法通过Lipofectamine 2000介导将特异性siILK表达载体和无同源性的对照载体,稳定转染人舌鳞癌TCA8113细胞,分为TCA8113组、TCA8113 vector组和TCA8113 siILK组,将3组细胞分别注入裸鼠皮下构建移植瘤模型,5周后检测瘤质量,对裸鼠肺及瘤组织形态学行常规病理学检查,使用免疫荧光技术检测体外和体内癌细胞p-Akt和p-GSK3β等的表达,并观察瘤组织内血管生成情况。结果 TCA8113组、TCA8113 vector组肺组织均发生自发性转移瘤,TCA8113 siILK组肺组织未发现自发性转移瘤;TCA8113 siILK组移植瘤细胞形态较其他2组体积减小,核分裂象较少,核浆比例缩小;TCA8113 siILK组在体内和体外实验中的p-Akt和p-GSK3β表达较其他2组均明显下降(P<0.05);TCA8113 siILK组移植瘤质量较其他2组显著降低(P<0.05),抑瘤率分别为84%和92%;TCA8113 siILK组移植瘤血管生成较其他2组也明显减少(P<0.05)。结论沉默TCA8113舌癌细胞ILK表达可抑制其下游信号传导分子Akt和GSK3β的磷酸化,并抑制移植瘤血管生成,从而抑制移植瘤的生长。

5，4’-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮对人肺腺癌细胞及其裸鼠异种移植瘤生长的影响

摘要目的研究金雀异黄素(genistein)衍生物5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮(5，4’-Di-n-octoxyl-7-gem-difluoromethylenegenistein，DOdFMG)对人肺癌细胞系(A549)细胞生长的影响及其作用机制。方法MTT比色法测定5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮对A549和人胚肺二倍体成纤维细胞(KMB—17)增殖的影响；细胞记数法观察DOdFMG对A549细胞生长曲线的抑制作用；P1染色流式细胞术(FCM)分析DOdFMG对A549细胞凋亡和细胞周期的影响；人肺腺癌(A549)细胞裸鼠异种移植瘤模型治疗实验检测DOdFMG体内抗肺癌作用。结果MTT比色法测定结果显示，DOdFMG对A549细胞增殖有显著抑制作用，呈浓度依赖关系，半数抑制浓度(IC50值)是10．26μmol／L，对KMB-17细胞增殖抑制作用弱，IC50值为163．2μml/L，其对人肺腺癌细胞毒选择指数为15．91。细胞记数法测定结果表明，5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮对A549细胞生长具有抑制作用，在10．0／μmol/L浓度下，A549细胞群体倍增时间延长到52．7h(溶媒对照组倍增时间为31、4h)。PI染色FCM分析发现，5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮明显使A549细胞周期停滞于G1期(G1期细胞百分数由52．5％上升到74．7％，P<0．05)。裸鼠异种移植瘤治疗实验结果显示，5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮对人肺癌异种移植瘤生长具有显著抑制作用，其作用效价强度弱于羟基喜树碱(HCPT)，强于其母体化合物金雀异黄素。结论5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮具有体内外抗肺腺癌作用，其机制可能与细胞周期G1期阻滞有关。

塞来昔布干预人结肠癌原位移植瘤生长及对PGE2影响的实验研究

目的探讨选择性环氧化酶-2(cyclooxygenase-2COX)抑制剂——塞来昔布(celecoxib)对人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的抑制作用及对瘤组织前列腺素E2(PGE2)的影响。方法使用对数生长期的人结肠癌细胞(HT-29)在裸鼠皮下接种4周形成稳定的皮下移植瘤，再将皮下瘤组织原位接种于24只裸鼠盲肠浆膜下，以完成原位移植瘤模型的制备。术后随机分为对照组(C组)及塞来昔布高、中、低剂量组(H、M、L组)共四组，分别给予纯水及含有不同浓度(1500ppm、1000ppm和500ppm)塞来昔布的饮水，饲养42天后处死裸鼠，观察各组原位移植瘤的成瘤率、瘤体积、瘤重以及裸鼠实验前后的体重变化，计算抑瘤率。用放射免疫法(RIA)测定瘤组织匀浆上清中PGE2的含量。结果24只裸鼠实验期间无一只死亡，成瘤率为100％，比较荷瘤鼠实验前后体重变化在统计学上差异无显著性(P>0.05)，比较各组原位移植瘤体积和瘤重差异有显著性(分别为P<0．05和P<0．01)，L组、M组和H组的抑瘤率分别为25．30％、38．80％、76．92％，与对照组(0％)比较差异有显著性(P<0．05)，存在着明显的的剂量依赖性。测定瘤组织匀浆上清中PGE2的含量，随着给药浓度的增加，PGE2的含量逐渐降低，各组移植瘤PGE2的含量比较差异有显著性(P<0．01)，原位移植瘤PGE2含量和瘤重存在显著的正相关性(r=0．8814，P<0．01)。结论塞来昔布通过下调COX-2，抑制人结肠癌裸鼠原位移植中PGE2的产生对结肠癌生长起明显的抑制作用。

miR-24对Nod/Scid免疫缺陷小鼠中乳腺癌FE1.2细胞移植瘤生长及肺转移的抑制作用

目的探究乳腺癌FE1.2细胞高表达miR-24对Nod/Scid免疫缺陷小鼠移植瘤生长及肺转移的影响。方法通过脂质体转染法将高表达miR-24的载体及空载体分别转染大鼠乳腺癌FE1.2细胞,分别设为FE1.2-miR-24 hi组及FE1.2-v组,自身高表达miR-24的大鼠乳腺癌FE1.3细胞设为FE1.3组,采用qPCR实验检测各组miR-24的表达。将转染后的细胞分别接种于雌性Nod/Scid免疫缺陷小鼠的第4对乳腺脂肪垫,构建免疫缺陷鼠移植瘤模型,分别设为FE1.2-miR-24 hi组及FE1.2-v组,经免疫缺陷鼠移植瘤实验检测各组移植瘤生长及肺转移情况。结果qPCR实验结果显示,与FE1.2-v组及FE1.3组比较,FE1.2-miR-24 hi组miR-24表达水平显著升高(均P<0.01)。免疫缺陷鼠移植瘤实验结果显示,与FE1.2-v组比较,FE1.2-miR-24 hi组移植瘤体积和质量显著减小,肺部转移明显减少(均P<0.01)。结论miR-24能显著抑制Nod/Scid免疫缺陷小鼠中乳腺癌FE1.2细胞移植瘤生长和肺转移。

凋亡素对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长抑制作用

目的研究VP3(凋亡素)基因真核质粒对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法构建pCDbNA—VP3真核表达栽体。人卵巢癌(COC1)细胞裸鼠异种移植瘤模型治疗实验，观察pCDbNA-VP3质粒的体内抗肿瘤作用。实验裸小鼠分为4组，每组3只。高剂量实验组pCDbNA-VP3，瘤内注射，100μg/只)；低剂量实验组(pCDNA—VP3，瘤内注射，50μg/只)；空载体对照组(pCDMA3．1(+)，瘤内注射，100μg/只)脂质体对照组(脂质体，瘤内注射，0．2mL／只)。每3天测量皮下移植瘤长、宽径，按标准公式V(m)=L(mm)×W(mm)^2×0.52计算移植瘤体积。12d后处死裸鼠，称取瘤重。RT—PCR检测皮下移植瘤组织凋亡素基因表达状况。TUNEL法观察凋亡素对皮下移植瘤细胞凋亡程序的影响。结果(1)成功构建了pCDbNA-VP3真核表达栽体；(2)pCDbNA-VP3高剂量组和低剂量组卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长明显受到抑制，高剂量实验组肿瘤生长抑制率为76％(P<0．05)，瘤重抑制率为70％(P<0．05)。低剂量组肿瘤生长抑制率为52％(P<0．05)，瘤重抑制率为49．5％(P<0．05)。(3)TUNEL试验结果表明凋亡素蛋白在体内以凋亡方式诱导肿瘤细胞死亡。结论应用凋亡素基因对卵巢癌裸鼠移植瘤具有良好的抑制作用。

丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的作用及对P53蛋白表达的影响

子宫内膜癌是女性生殖道三大恶性肿瘤之一,近年发病率逐渐上升,在发达国家及我国的经济发达地区已经逐渐成为最常见的妇科恶性肿瘤。绝经前期患者约占15%~25%[1,2],40岁以下患者占2.1%~14.4%[3],子宫内膜癌标准的治疗方法为全子宫+双侧附件切除+淋巴结清扫术(LH+BSO+LN)。近年来,子宫内膜癌发病年龄逐渐年轻化,且患者往往未完成生育,因而有着强烈的保留生育功能的愿望。

靶向肿瘤血管内皮细胞抑制人肝癌移植瘤生长的功能性抗体的研制

肿瘤的生长依赖于新生血管形成，阻断其血管形成可有效治疗肿瘤。笔者用人新鲜人肝癌组织中分离、鉴定、培养的人肝癌血管内皮细胞免疫10只BALB／c小鼠。免疫小鼠脾细胞与SP2／O细胞融合后采用甲基纤维素培养，使用活细胞免疫荧光、细胞增殖、内皮成管实验及“人源化血管”动物模型体内抑瘤实验筛选和鉴定有治疗潜力的功能性抗体。

大蒜素与顺铂单独及联合应用对子宫颈癌裸鼠移植瘤生长的影响

宫颈癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，是引起妇女癌症相关死亡的重要原因。顺铂作为治疗肿瘤的首选化疗药物之一对于宫颈癌的疗效是肯定的。肿瘤化疗失败的主要原因是严重的副作用及肿瘤对化疗药物产生耐药反应。理想的化疗应是最大限度地杀伤肿瘤细胞，同时对正常细胞的毒性最低。大蒜素具有多种生物活性，实验研究证实其中的活性物质具有抗癌作用，本研究的前期实验已证实大蒜素能抑制宫颈腺癌HeLa细胞的生长，同时能够增加其对顺铂的敏感性J。本研究旨在探讨大蒜素与顺铂单独及联合应用对HeLa细胞裸鼠移植瘤生长的影响，以期寻求更有效的对宫颈腺癌的药物治疗方法。

Bcl-XL反义寡核苷酸转染对食管癌细胞增殖及裸鼠体内人食管癌移植瘤生长的抑制作用

目的探讨Bcl-XL反义寡核苷酸转染后,对食管癌细胞增殖及裸鼠体内人食管癌移植瘤生长的影响。方法采用阳离子脂质体介导的反义寡核苷酸转染、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western蛋白印迹杂交、四甲基偶氮唑盐光吸收法(MTT法)、流式细胞术及凋亡的原位末端标记(TUNEL)检测等方法观察了Bcl-XL反义寡核苷酸转染对食管癌细胞增殖、凋亡的影响及裸鼠体内人食管癌移植瘤生长的影响。结果MTT法检测显示,Bcl-XL反义寡核苷酸可显著抑制食管癌细胞的增殖(P<0.05);对Bcl-XLmRNA表达抑制率为57.3%,可显著下调Bcl-XL的蛋白表达;应用流式细胞术和TUNEL检测技术,反义寡核苷酸组的凋亡率分别为(31.1±5.8)%和35.0%,与相关对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。反义寡核苷酸组裸鼠体内人食管癌移植瘤的生长受到显著抑制(P<0.05)。Bcl-XLmRNA及蛋白表达亦受到明显抑制,并且移植瘤组织中凋亡细胞明显增加。结论Bcl-XL反义寡核苷酸可有效抑制食管癌细胞增殖及裸鼠体内人食管癌移植瘤的生长。通过反义寡核苷酸下调Bcl-XL的表达,达到治疗食管癌的目的,为食管癌的基因治疗提供实验依据。

经沉默免疫负调控基因技术处理的树突状细胞联同细胞毒性T淋巴细胞抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的研究

我们2014年1至2014年5月进行经沉默免疫负调控基因（iAPA）技术处理的树突状细胞（DC）联同细胞毒性T淋巴细胞（iAPA-DC/CTL）抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究,现报道如下.

重组人白细胞介素-24对裸鼠人胃癌移植瘤生长的抑制作用

白细胞介素（IL）-24对多种人肿瘤细胞的生长均有抑制作用，可诱导肿瘤凋亡、抑制肿瘤细胞生长和血管生成，对正常细胞没有影响，还具有抑制裸鼠人移植瘤生长的作用。苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室成功构建了真核表达载体pcDNA3．0-IL-24和原核表达载体PET21a（＋）IL-24，并分别在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞和大肠杆菌BL-21中稳定表达。我们在此研究基础上，将两种质粒的表达产物重组人白细胞介素（rhIL）-24蛋白直接注入裸鼠人胃癌皮下移植瘤瘤体内，观察对裸鼠胃癌移植瘤生长的影响，并初步探讨其可能的作用机制。

TRAIL蛋白与顺铂联合应用对卵巢上皮性癌裸鼠腹腔移植瘤生长的抑制作用

卵巢上皮性癌（卵巢癌）被发现时多为晚期，且治疗效果较差，寻找新的、有效杀灭肿瘤细胞的治疗方法迫在眉睫。肿瘤坏死因子（TNF）相关的凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL）是导致细胞凋亡的重要的细胞因子，TRAIL能选择性地诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常组织和细胞没有明显的毒性。本研究建立了人卵巢癌细胞系SKOV3的裸鼠腹腔移植瘤模型，探讨TRAIL蛋白与顺铂（DDP）联合应用对肿瘤生长的抑制作用，以及DDP对TRAIL受体的影响，为TRAIL应用于卵巢癌的生物治疗提供实验依据。

Dpc4基因转染胰腺癌细胞株对裸鼠胰腺癌移植瘤生长的影响

目的探讨Dpc4基因转染胰腺癌细胞株HS766T对裸鼠移植瘤生长的影响。方法按pcDNA3．1-DOe4是否转染人胰腺癌细胞株HS766T将细胞分为pcDNA3．1-Dpc4转染组、pcDNA3．1空载体组和未转染组，RT—PCR鉴定目的基因的表达；将3组细胞分别接种于裸鼠，比较Dpc4基因对裸鼠胰腺癌移植瘤的生长抑制作用，

转染内皮抑素基因联合放射治疗对肝癌移植瘤生长的影响

实体瘤的生长和转移依赖于血管生成.用抗血管生成剂靶向肿瘤血管生成是新的肿瘤治疗方法之一.观察转染内皮抑素基因联合放射治疗对人肝癌BEL7402细胞株裸鼠移植瘤生长的影响,以探索内皮抑素联合放射治疗对肿瘤的治疗作用.

TPX2-siRNA对裸鼠体内移植瘤生长及TPX2表达的影响

我们通过建立裸鼠食管鳞癌细胞EC9706的移植瘤模型，观察TPX2干扰前后对移植瘤的影响和肿瘤组织中TPX2的表达水平。