假单胞菌产壳聚糖酶突变菌株的筛选

以假单胞菌Y1为出发菌株 ,分别通过亚硝基胍 (NTG) ,Co6 0 ,UV(紫外 )诱变 ,采用透明圈法筛选 ,获得了产壳聚糖酶较好的突变菌株假单胞菌Y8,其所产酶活力达到 3.0U·ml- 1,酶活力提高近 6倍 ,并具有较好的遗传稳定性。 3种诱变方法中 ,UV诱变效果最好。

离子束注入技术选育胶质芽孢杆菌KNP414的解磷突变菌株(英文)

利用离子束注入对胶质芽孢杆菌KNP414进行诱变,获得可降解植酸的突变菌株。离子束注入效应表明,菌株KNP414的存活率显著受离子束剂量及菌体荚膜的影响,但与所研究的离子种类及其能量没有相关性。经离子束N＋（20keV,5×10^15-5×10^16ions cm^-2）诱变后,筛选到14个植酸降解突变株,它们对植酸的降解率为15%-35%。其中的3个突变株（KNP414-04,KNP414-05,KNP414-12）分解矿物磷和钾的能力也明显提高,分别增加14.7%-27.5%和16.2%-26.4%。在优化培养基中,突变菌株KNP414-12对植酸的降解率达到57.3%,且在连续培养及保藏过程中保持稳定。植酸降解突变株KNP414-12的成功选育表明离子束为胶质芽孢杆菌的性状改良提供了有效途径。

霉菌酸性蛋白酶高产突变菌株9169的选育

对一株宇佐美曲霉进行紫外光、微波和60 Co的逐级诱变育种 ,使酸性蛋白酶产量从 2 80 0U/mL提高到 72 0 0U/mL .突变株传代多次 ,产酶性能保持稳定 ;对突变株与出发株的发酵过程进行了比较研究 ,发现突变株最大产酶时间提前 10h以上 ,而培养基

基于^(60)Co-γ射线辐照的木糖乙醇发酵差异性突变菌株筛选及其发酵特性

本研究利用60Co-γ辐射源对树干毕赤酵母CICC1960进行辐照诱变,获取木糖乙醇发酵优良菌株和差异性突变菌株群体,为进一步利用比较基因组学方法深入研究木糖乙醇代谢机制提供菌种材料。经筛选获得7株木糖乙醇转化差异性突变菌株,以乙醇木糖比为指标,可将各突变菌株的发酵能力由高到低排列为:a1、X4、i11、K2、X21、CICC1960、a11、c10,乙醇木糖比均值分别为0.3143、0.3037;0.2911、0.2678、0.2578、0.2311、0.2230、0.1220。其中菌株a1、X4、i11为优良菌株,菌株a1在发酵72h时乙醇产量达到顶峰15.6 g·L-1,高出出发菌株140%,乙醇木糖比高出出发菌株37.9%;菌株X4在发酵60h时乙醇产量达到顶峰15.4 g·L-1,高出出发菌株234.8%,乙醇木糖比高出出发菌株33.1%;菌株i11在发酵60h时乙醇产量达到顶峰14.8 g·L-1,高出出发菌株221.7%,乙醇木糖比高出出发菌株29%。

金属盐对红曲霉突变菌株代谢生成黄色素的影响

在本文中,研究了四种金属盐对红曲霉突变菌株代谢生成黄色素的影响。研究发现,氯化钙和硫酸锰比较有利于红曲霉突变菌株代谢生成黄色素,但本文中所用的四种金属盐对红曲霉突变菌株代谢生成桔霉素没有明显的促进或消除效果,在整个实验当中,发酵液中一直没检测到桔霉素的存在。

木聚糖酶高产突变菌株——黑曲霉AN497的正交试验研究

黑曲霉 (Aspergillusniger)A3经离子注入后选育出高产木聚糖酶突变株AN497,通过摇瓶液态发酵产酶培养基的L16 ( 4 4)正交实验 ,得到了优化的培养基配方 (g/L) :玉米芯粉 80 ,蔗糖 6,复合氮源 (NH4 )SO4 +NaNO3(质量比为 1∶2 ) 1 2 ,吐温 2 0 3 ,用无氮的Mandels氏无机盐溶液配制。同时对产酶菌株的发酵过程进行了试验 ,发酵 84h达产酶高峰 ,木聚糖酶活力可达 646IU/mL ,比培养基未优化前 ( 5 84 8IU/mL)提高了 1 0 5 %。

高效离子交换色谱法分析青枯雷尔氏菌Tn5转座子突变菌株的异质性

【目的】研究青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)Tn5转座子突变菌株的异质性,筛选出无致病力高效生防菌株。【方法】利用已构建的青枯雷尔氏菌致病力参考指标"弱化指数(attenuation index,AI)"和接种番茄植株的生物测定法对60株供试的青枯雷尔氏菌Tn5转座子突变菌株进行致病力测定;利用高效离子交换色谱法研究不同致病力突变菌株的色谱行为异质性;构建色谱效价指数(chromatography titer index,CTIi),CTIi=Si/(S1+S2+S3)×100%(i=1、2或3;S1、S2和S3分别对应P1、P2和P3的峰面积),测定不同致病力青枯雷尔氏菌突变菌株的CTIi值,用皮尔逊相关系数(Pearson correlation coefficient,PCC)分析色谱效价指数与突变菌株的致病力和青枯病害防治效果的相互关系。【结果】基于AI值和生物测定结果,青枯雷尔氏菌Tn5转座子突变菌株具有3种不同致病力类型:强致病力、无致病力和中间型。强致病力菌株共33株,其AI值介于0.49—0.63,接种番茄15 d,植株发病率为66.33%—100%;无致病力菌株共有20株,其AI值介于0.78—0.89,接种番茄15 d,植株发病率为0;中间型菌株共有7株,其AI值介于0.68—0.73,接种番茄15 d,植株发病率为24.17%—45.92%。20株无致病力突变菌株对番茄青枯病的防治效果测定结果显示,防治效果介于16.68%—92.45%,菌株T831防治效果最好,达91.74%,其次是菌株T780,防治效果为87.51%,菌株T497防治效果最差,为16.68%。不同致病力青枯雷尔氏菌的高效离子交换色谱分离结果显示,青枯雷尔氏菌经高效离子交换色谱可以分离出P1(出峰时间为0.6 min)、P2(出峰时间为4.4或4.5 min)和P3峰(出峰时间为5.9或6.0 min);强致病力菌株和无致病力菌株均具有3种不同峰类型:单峰、双峰和3个峰,强致病力菌株的主峰为P3峰,无致病力菌株的主峰为P1峰,中间型菌株有双峰和3个色谱峰两种类型;强致病力菌株中CTI3为100%的菌株,致病力最强,诱导番茄植株发病率均达85%以上,CTI3<100%的菌株,接种后番茄植株发病率介于66.33%—84.14%;无致病力菌株中CTI1达100%的菌株,其防治效果高,均达到80%以上,CTI1<90%的菌株,其防治效果低,介于16.68%—63.62%;CTI3与突变菌株致病力呈极显著正相关,相关系数PCC值为0.62;CTI1与无致病力突变菌株的防治效果呈极显著正相关,相关系数PCC值为0.80。【结论】青枯雷尔氏菌Tn5转座子突变菌株具有3种致病力类型,不同致病力菌株的色谱行为不同。构建的色谱效价指数CTI1可用于快速筛选出无致病力高效生防菌株,CTI3可作为青枯雷尔氏菌致病力的参考指标。

BALB/c鼠口服免疫猪水肿病大肠杆菌基因突变菌株的免疫效果

为了研究猪水肿病(ED)大肠杆菌SLT-Ⅱe基因突变菌株作为口服疫苗的免疫效果,本实验用已构建的猪ED大肠杆菌SLT-Ⅱe基因突变菌株口服免疫BALB/c小鼠,检测其血清中的IgG抗体及粪便和肠黏液中的sIgA抗体水平,并进行淋巴细胞增殖检测及攻毒保护实验。结果表明该基因突变菌株具有良好的免疫性,能诱导小鼠体内产生IgG和sIgA抗体,并且能引起T淋巴细胞增殖反应。攻毒保护实验结果显示,口服免疫突变菌株能对小鼠提供良好的保护,保护率为75%(15/20)。本研究结果证明,该大肠杆菌基因突变菌株在小鼠体内能激发体液免疫和细胞免疫反应,可作为猪ED口服疫苗的候选菌株。

深黄被孢霉突变菌株发酵制备花生四烯酸工艺研究

在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化深黄被孢霉突变菌株发酵制备花生四烯酸工艺,确定最优发酵工艺条件为:接种量15.66%,发酵温度28.29℃,发酵时间6.58 d,发酵p H 5.96。花生四烯酸产量为3.12 g·L-1,在最优发酵工艺条件下,可提高产量,同时减少接种量,缩短发酵时间,降低生产成本。

金顶侧耳不同交配型营养缺陷突变菌株的制备

以金顶侧耳的营养缺陷突变菌株为供试菌株,在确认其交配型的基础上,配制杂交株,利用其减数分裂中基因的高频率重组性制备不同交配型的营养缺陷突变菌株。结果表明:除突变型Ade2-、Ade5-、Pdx2-各自获得3种不同交配型的营养缺陷突变菌株外,其他突变型均获得4种不同交配型的营养缺陷突变菌株,共计获得具有不亲和性因子和营养缺陷型双重标记的金顶侧耳菌株(包括供试菌株)133株。

乳酸和乳酸钠对红曲霉突变菌株合成代谢色素及橘霉素的影响

主要研究了乳酸和乳酸钠对红曲霉突变菌株代谢合成红曲色素和橘霉素的影响。实验结果表明,添加一定量的乳酸和乳酸钠都有利于红曲色素(包括黄色素和红色素)的合成代谢,有利于黄色素合成代谢的最适乳酸或乳酸钠添加量在0.01～0.05mL/30mL之间,而有利于红色素合成代谢的最适乳酸或乳酸钠添加量在0.05～0.1mL/30mL之间,红曲霉突变菌株利用乳酸或乳酸根作为其生长的底物和红曲色素合成代谢的底物。乳酸或乳酸盐本身对红曲霉突变菌株合成代谢橘霉素没直接的影响,其形成的发酵pH环境直接影响了橘霉素的合成代谢。

放线菌SL-5链霉素耐药突变菌株的分离、活性筛选及发酵优化研究

【目的】为新型抗生素的开发研究提供有效途径。【方法】对放线菌SL-5在链霉素不同浓度下的耐药突变菌株进行分离和活性筛选,并采用单因素和正交试验对活性菌株进行发酵优化。【结果】从无活性放线菌SL-5的耐药菌株中得到1株活性突变菌株str-14,室内生测结果表明,其发酵液对蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的抑菌圈直径为17.5 mm。通过单因素和正交试验,确定该菌株的最佳摇瓶发酵培养基配方为:小米10 g/L,葡萄糖20g/L,酵母粉2 g/L,蛋白胨7 g/L,混合VB1.5 mg/L,NaCl 2.5 g/L,CaCO32.0 g/L。最佳培养条件为:初始pH为8.0,装液量70 mL(250 mL三角瓶),180 r/min培养7 d。【结论】通过引入链霉素耐药性突变获得抑菌活性物质,是创制新型抗生素的一条可行之路。

大肠杆菌胸腺嘧啶合成酶thyA缺失突变菌株的构建

大肠杆菌K 1 2DY330菌株的染色体上整合有一种新型的同源重组系统———缺陷型λ原噬菌体同源重组系统。以DY330为出发菌 ,通过同源重组构建大肠杆菌thyA- 株DY330 TI,其基因组特点是 :thyA基因除保留N端的1～ 4 9氨基酸残基相对应的必需核苷酸序列外 ,将其余部分全部缺失 ;此外 ,还敲除了DY330 TI中与缺陷型λ原噬菌体同源重组功能相关的基因 ,从而尽可能避免了通过同源重组产生回复突变的可能性。通过大肠杆菌thyA基因对该突变株的转化实验 ,检测转化子的回复突变率 ,进一步证实该突变株的突变性状稳定 ,为构建以thyA为选择标志的大肠杆菌染色体

定向筛选组氨酸营养缺陷型突变菌株的研究

从机理上探讨了青霉素浓缩法中关键参数确定的依据。确定饥饿培养至菌浓不再增加为止。青霉素作用前培养至细胞生长进入对数期。当 5 0 %～ 6 0 %细胞转变为原生质球时 ,停止青霉素的作用。在此条件下 ,组氨酸营养缺陷型突变菌株的获得率达 8%。

粗糙脉孢菌突变菌株合成漆酶的发酵条件研究

研究了影响粗糙脉孢菌突变菌株合成漆酶的一些摇瓶发酵条件,包括通气量、培养温度、甲醇浓度、Cu2+浓度等。结果表明,在500m L三角瓶中装入含150μm olL/C u2+浓度的发酵培养基B M M Y 50m L,接种后于30℃,200rm/in培养7d,用0.5%甲醇诱导,在第5天时漆酶酶活最高可达3.88u m/L。

小麦重要抗源和后备品种对条锈菌突变菌株抗性的进一步研究

用小麦条锈菌集中２９号的７个突变菌株测定了我国４２个重要抗源品种和５２个衍生品种及４７个区（预）试品种。结果表明，８个抗源品种对野生菌系和突变菌株仍保持免疫到中抗反应，以长穗偃麦草和６８２８－０－６－１－１为抗源的品种抗锈稳定性较好，４个区试和３个预试品种抗锈稳定性也较好。并对这些抗源的利用和后备品种的推广应用前景提出了建议。

转座子挽救法对转座子突变菌株中插入位点的定位分析

为寻找谷氨酸棒杆菌转座子插入突变菌株中的转座子插入位点 ,采用了转座子挽救法对转座子及其插入位点附近的序列进行分离 ,并测定插入位点相邻DNA序列 ,获得了三个转座子插入位点DNA序列 ,其中一个是柠檬酸合成酶基因 ,另两个为目前未知基因 ,暂命名为orfA和orfB。该方法简便易行 。

绣球菌突变菌株液体发酵条件的研究

采用摇瓶培养法和正交试验对绣球菌突变菌株P1的液体发酵条件进行研究,实验得出最佳配方为:玉米淀粉2%、酵母浸膏0.5%、KH2PO40.1%、MgSO4.7H2O 0.3%。最适发酵时间是6 d,而优化发酵条件得出最佳的发酵条件为:温度28℃,转速130 r/min、装液量150 mL/250 mL,在最适条件下绣球菌P1菌丝体生物量(干)及胞外多糖最高产量分别为10.3 g/L、1 790 mg/L。

不产生胞外多糖的假单胞菌突变菌株E_（16）

在适宜培养条件下，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ３１２６０能将木糖转化为酸性胞外多糖（ＥＰＳ），用甲基磺酸乙醋（ＥＭＳ）诱变处理 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ３１２６０得到一株完全不产生胞外多糖的突变菌株Ｅ＿（１６）。

庆大霉素突变菌株天然色素提取及理化性质

介绍了庆大霉素绛红小单孢菌突变株产生的天然色素的提取方法 ,并对该色素的重要理化性质进行了初步研究 .该色素的最大吸收峰在 5 0 0 nm和 5 1 0 nm,对光不太敏感 ,在强酸性环境和氧化剂中、较高温度、Na Cl和蔗糖条件下均显示红色 ,但在还原剂中和碱性条件下显示蓝色 ,可能是一种性能较好的天然色素 。