中年男性精子DNA碎片率对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的探讨中年男性精子DNA碎片率(DFI)与精液质量和体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法共收集180例接受常规体外受精-胚胎移植治疗且男性年龄>38岁的精液标本。根据DFI的阈值分成(<30%和≥30%)两组。主要测量指标包括:常规精液参数、激素水平、DFI、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率等。结果通过比较分析发现,DFI与男性卵泡刺激素(FSH)、精子活力、精子形态密切相关,且精子活力随着DFI水平的升高而下降(P<0.05);当DFI≥30%时,优质胚胎率下降(P<0.05),但两组的临床妊娠率差异无显著性(P>0.05)。结论DFI可以作为中年男性精液常规分析的重要参考指标,虽然DFI影响优质胚胎率,但与辅助生殖治疗的临床妊娠结局无关。

死精子症不同诊断方法的探讨及其程度与DFI相关性分析

目的:探讨伊红-苯胺黑试验(E-N试验)和低渗膨胀试验(HOST)诊断死精子症的价值,并分析精子坏死程度与精子DNA碎片指数(DFI)、精子高可染性指数(HDS)的相关性。方法:采用CASA检测2023年5月至2024年7月在湖南省妇幼保健院就诊的7 333例男性精子活力,选择弱精子症男性行E-N试验、HOST评估精子存活率,再筛选死精子症男性行计算机辅助精子分析(CASA)测精子DFI、HDS。根据精子PR%(20%~<30%、10%~<20%、<10%)分组,探讨两种方案对死精子症的诊断价值及精子坏死程度与DFI、HDS的相关性。结果:7 333例男性中弱精子症1374例(18.74%)。轻度、中度、重度弱精子症患者死精子症发生率:E-N试验为0.55%(5/913)、3.80%(12/316)、35.86%(52/145)、总发生率0.94%(69/7 333);HOST试验为0.99%(9/913)、6.96%(22/316)、46.21%(67/145)、总发生率为1.34%(98/7 333)。两种诊断方案无统计学差异(χ^(2)=0.97,P>0.5)。两种方法确定的死精子症病例均显示精子DFI与精子存活率呈负相关(r=-0.366,r=-0.333,P<0.05),精子HDS与精子存活率亦呈负相关,但无统计学意义。结论:当男性精子PR%<30%时应进行精子存活率检测,优先推荐E-N试验诊断死精子症。精子坏死可能与精子核染色质损伤互为危险因素。

不育患者精子DNA碎片指数、血清25-羟化维生素D与精液常规参数的相关性分析

目的 探讨男性不育患者精子DNA碎片指数(DFI)、血清25-羟化维生素D [25(OH)VD]总量与精液常规参数的相关性。方法 回顾性分析2021年11月至2022年7月在空军军医大学第一附属医院生殖医学中心就诊的627名男性不育患者的检查数据,采用计算机辅助精子分析系统分析精液常规参数,手工法检测正常形态精子百分率,流式细胞仪分析精子DFI,液相色谱-串联质谱检测系统检测血清25(OH)VD总量,采用SPSS 25.0数据分析软件分析精子DFI与精子总数、浓度、前向运动率(PR)、总活动率、正常形态精子百分率的相关性,以及血清25(OH)VD总量与精子总数、浓度、PR、总活动率、正常形态精子百分率、精子DFI的相关性。结果 精子DFI与精子总数、浓度呈负相关,但其相关系数绝对值均<0.1,临床价值较小(r=-0.082、-0.094,P均<0.05),与精子PR、总活动率、正常形态精子百分率呈负相关(r=-0.519、-0.534、-0.327,P均<0.001),差异均具有统计学意义;血清25(OH)VD总量与精子总数、浓度、PR、总活动率无相关性(r=-0.009、-0.020、0.059、0.054,P>0.05),与正常形态精子百分率呈正相关(r=0.147,P<0.001),与精子DFI呈负相关(r=-0.294,P<0.001),差异均具有统计学意义。结论 精子DFI与精子PR、总活动率、正常形态精子百分率呈明显负相关,可以在一定程度上反映精子质量,精子DFI检测与精液常规参数可以互为补充,为全面、客观评估男性生育力提供有效信息;血清25(OH)VD总量与正常形态精子百分率呈正相关,与精子DFI呈负相关,可作为评估男性生育力的参考指标。

关于少弱畸形精子症蛋白组学的研究进展

少弱畸形精子症(OAT)是导致男性不育的常见疾病,特征为精子数量减少及活力降低。该疾病的发病机制复杂,涉及生活方式、遗传异常、环境因素等。近年来,精子蛋白组学的研究取得显著进展,尤其是在OAT患者中的应用。本文综述了OAT患者精子及精浆蛋白组的研究进展,描述了与精子活力和数量相关的潜在差异蛋白,旨在深入理解OAT的病理机制,提高诊断准确性,并探索新的生物标记物。

左旋肉碱虾青素治疗对弱精子症患者精子浓度及总数的影响研究

目的分析左旋肉碱虾青素治疗对弱精子症患者精子浓度及总数的影响。方法非随机选取济南市第二妇幼保健院于2021年3月—2023年10月收治的80例弱精子症患者,按治疗方法不同分成两组,对照组与研究组各40例;其中对照组接受复方氨基酸胶囊治疗,研究组则接受复方氨基酸胶囊联合左旋肉碱虾青素治疗,对两组的精液检测结果进行观察比较。结果研究组治疗后的精子总数、精子浓度、精液量均高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。与对照组治疗后相比较,研究组的各项指标均更高,差异有统计学意义(P均<0.05)。研究组治疗后的精子DNA碎片指数为(12.16±3.51)%,低于对照组的(16.65±4.18)%,差异有统计学意义(t=5.203,P<0.05)。结论选择左旋肉碱虾青素对弱精子症患者进行治疗,能让其精子浓度及总数显著提高,对其精液质量进行显著改善,有临床价值意义。

精子染色质完整性对功能的影响及其检测方法研究进展

精子染色质不仅携带父系DNA等遗传信息,还携带有结构蛋白、表观遗传信息、高级染色质结构(如基质附着区和端粒)等众多信息,这些信息在胚胎发育过程中均发挥着重要作用。本文主要综述了精子染色质携带的这些不同信息对精子功能和胚胎发育的影响及其相关检测方法的研究进展,以期为临床不育、胚胎停育和反复流产的病因筛查提供理论依据和科学的诊疗策略,改善自然受孕和辅助生殖助孕的妊娠结局。

精子相关参数与体外受精受精率的相关性研究

目的探讨精子参数与体外受精(IVF)受精率的相关性。方法回顾性分析2020年4月至2023年4月在郴州市第一人民医院生殖医学中心进行IVF助孕的符合纳入、排除标准的327例病例。依据我中心胚胎实验室质控数据考核标准分为低受精组(受精率<30%,n=19)和正常受精组(受精率≥30%,n=308)。收集男方的基本信息与精子相关参数以及胚胎信息。用Pearson相关性分析各参数与精子受精率的相关性,Logistic回归分析精子受精率的影响因素,采用ROC曲线分析预测价值。结果精子顶体酶活性、正常形态精子百分率、精子DNA碎片指数(DFI)是影响受精率的相关因素,相关系数(r)分别为0.168、0.306、-0.243(P均<0.05)。Logistic回归分析确定三者均是影响IVF受精率的独立因素,并得出多因素回归方程式:受精率预估值=-2.561+0.035×精子顶体酶活性+2.066×正常形态精子百分率-1.51×精子DFI。精子顶体酶活性、正常形态精子百分率、精子DFI及三因素联合预测低受精率的ROC曲线下面积(AUC^(ROC))分别为0.806、0.889、0.827、0.899,其Yuden指数对应的cut-off值分别为61.2μIU/10^(6)精子、2.98%、27.50%、-21.32,敏感性分别为95.70%、76.90%、68.40%、64.30%,特异性分别为43.50%、94.70%、87.70%、100.00%,表明3个指标联合预测受精率的效能较好。结论精子顶体酶活性、正常形态精子百分率、精子DFI是预测IVF受精率的独立影响因素;可以用多因素回归方程式预测IVF的受精率。

部分型圆头精子症患者精子超微结构研究

目的:探讨部分型圆头精子患者中圆头精子和正常精子形态与超微结构差异及辅助生殖结局。方法:收集2023年3月至2024年3月山西省妇幼保健院及山西省人民医院生殖中心6例确诊为部分型圆头精子症患者的临床信息及精液样本,对样本行Diff-Quik染色、铀铅染色,在光学显微镜和透射电子显微镜下观察精子形态,对比圆头精子与正常精子的超微结构区别,分析临床治疗结局。结果:光学显微镜下正常精子头部形态规则,为光滑的椭圆形,顶体区域清晰可见,头、尾部衔接流畅;圆头精子头部无顶体结构,呈圆形,可伴有尾部异常;透射电子显微镜下正常精子头部质膜完整,顶体发育正常,尾部轴丝微管排列整齐;圆头精子头部质膜溶解、顶体缺失或小顶体、核质颗粒化、核区巨大空泡,颈部线粒体肿胀、缺失、排列紊乱,尾部“9+2”微管结构排列混乱且缺失。6例部分型圆头精子症患者均接受了卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)助孕治疗,其中1例获得妊娠结局。结论:通过形态学分析,对比正常精子与圆头精子的超微结构差异,部分型圆头精子患者其精子细胞器结构存在显著损伤和超微结构异常,可能是导致其不育问题的一个关键因素,ICSI可以帮助部分圆头精子症患者实现生育愿望。

基于中医证候与精液质量相关参数构建精子DNA碎片预测模型与验证

背景:中医证候与精液质量相关参数相结合,共同预测精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)异常增高的发生并绘制列线图,能显著提高临床的实操性与应用效能,为临床全面评估精液质量,采取积极干预措施以改善临床结局及制定个体化医疗方案提供依据。目的:探讨基于中医证候与精液质量相关参数构建精子DNA碎片的预测模型与验证。方法:回顾性分析2019年7月至2021年7月在广西壮族自治区南溪山医院中医男科接受中医证候诊断及精子DNA碎片率检查的不育患者共420例,据《人类精液检查与处理实验室手册》(第6版),将其中137例精子DFI>30%患者纳入精子DFI异常增高组,将283例精子DFI≤30%作为对照组;首先采用单因素分析筛选精子DFI异常增高的影响因素,然后采用套索算法(LASSO)校正因子共线性问题并筛选出最佳匹配因子后,将其纳入多因素向前逐步Logistic回归找出其独立影响因素并绘制列线图,最后采用受试者工作曲线、校准曲线、临床决策曲线、临床影响曲线对该预测模型进行区分度与准确度及临床应用效能验证。结果与结论:①单因素分析结果显示,年龄、体质量指数、前向运动率、精子总活率、精子浓度、精子形态学、肾阳虚衰证、湿热下注证、肾精不足证为引发精子DFI异常增高的影响因子(P<0.05);②通过LASSO回归进一步筛选出的最佳匹配因素为年龄、体质量指数、精子总活率、精子浓度、精子形态学、肾阳虚衰证、湿热下注证、肾精不足证(P<0.05);③多因素向前逐步Logistic回归结果显示年龄、体质量指数、精子浓度、精子总活率、湿热下注证、肾阳虚衰证共6项为引发精子DFI异常增高的独立影响因素;④受试者工作曲线显示,模型组曲线下面积为0.760(0.713,0.806),验证组曲线下面积为0.745(0.714,0.776),说明该预测模型具有较好的区分度;⑤校准曲线平均绝对误差0.040,Hosmer-Lemeshow检验P>0.05,表明该模型预测发生精子DFI异常增高的概率与实际发生精子DFI异常增高的概率无显著统计学差异,证实该模型具有较好的准确度;⑥临床决策曲线与临床影响曲线显示,模型组与验证组分别在阈概率值为0.08-0.84与0.09-0.78时具有临床最大净获益,且在该阈概率范围内具有较好的临床应用效能;⑦结果表明,年龄、体质量指数、精子浓度、精子总活率、湿热下注证、肾阳虚衰证为引发精子DFI异常增高的独立影响因素,通过其构建的临床预测模型列线图具有较好的临床预测价值与临床应用效能,可为临床全面评估精液质量、预后与干预及个体化医疗服务提供依据。

中医药调控细胞自噬治疗少弱精子症研究进展

少弱精子症(OAS)是引起男性不育症的主要因素。目前病因及发病机制仍不明确。研究显示自噬与男性生殖密切相关,尤其是精子发生和成熟过程中的生物合成和分解代谢。尽管如此,自噬在这些过程中是起到保护或是有害作用,这一问题仍不清楚。中医药治疗OAS临床疗效确切,其作用机制可能与细胞自噬及其相关标志物或通路关系密切。本文将系统总结细胞自噬在精子发生和成熟过程中的作用,并从中医药调控细胞自噬过程,进而对OAS发挥治疗作用进行综述,以期深入挖掘中医药治疗OAS潜在作用机制,为进一步提升中医药治疗OAS的临床疗效提供参考。

时差成像胚胎培养系统观察精子DNA碎片化指数对卵胞浆内单精子显微注射的胚胎发育及临床结局的影响

目的使用时差成像(time-lapse imagining,TLI)胚胎培养系统观察精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)对卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的胚胎发育指标及临床结局的影响。方法选取2023年1月至6月在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院辅助生殖科接受ICSI技术助孕的392对夫妇为研究对象,分为常规培养组284周期和TLI组108周期,再根据DFI≤15%、>15%~<30%、≥30%进一步分为正常组、临界组、异常组。比较各组的临床资料以及临床妊娠结局。统计学方法采用t检验、单因素方差分析、χ^(2)检验或Fisher确切概率法。结果6组的女方年龄、基础促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、身体质量指数(body mass index,BMI)及获卵数比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05);男方精液常规指标中,浓度和正常形态率比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05);常规正常组、常规临界组、常规异常组、TLI正常组、TLI临界组和TLI异常组的前向运动精子率分别为(46.5±16.5)%、(31.0±14.2)%、(14.8±8.4)%、(41.6±16.2)%、(32.5±14.4)%、(19.3±11.1)%,常规异常组和TLI异常组的前向运动精子率分别低于常规正常组、常规临界组、TLI正常组和TLI临界组(P值均<0.05)。6组的卵裂率和囊胚形成率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。常规正常组、常规临界组、常规异常组、TLI正常组、TIL临界组和TLI异常组的受精率分别为(77.3±18.6)%、(78.6±17.1)%、(68.3±22.7)%、(77.4±14.5)%、(74.5±13.1)%、(63.1±25.4)%;常规异常组的受精率低于常规正常组、常规临界组、TLI正常组(P值均<0.05);TLI异常组的受精率低于常规正常组、常规临界组、TLI正常组、TLI临界组(P值均<0.05)。常规正常组、常规临界组、常规异常组的妊娠率分别为57.4%(39/68)、54.5%(24/44)、27.3%(6/22),异常组低于正常组和临界组(P值均<0.05)。TLI正常组、TLI临界组和TLI异常组3组的妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。常规组3组之间以及TLI 3组之间的早期流产率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论精子DFI值的升高会影响精子前向运动率,还会影响胚胎的受精率,高DFI精子进行ICSI助孕时使用TLI胚胎培养系统可以获得稳定的妊娠率。

坏死精子症诊疗进展

坏死精子症是弱精子症的一类特殊类型,其精子通常大量死亡,发病率为0.2%~0.4%。有关坏死精子症的报道尚十分稀少,其病因冗杂,诊断与治疗也相当棘手。本文将综述坏死精子症的主要病因、病理生理机制、诊断方法及治疗策略,以期能为男科医师及辅助生殖医师提供参考,为坏死精子症患者行辅助生殖技术治疗提供理论指导。

回族及维吾尔族圆头精子症患者的基因诊断、精子超微结构观察和辅助生殖结局分析

目的探讨2例少数民族(P1回族、P2维吾尔族)圆头精子症患者的临床表型、精子特点、遗传学病因以及辅助生殖结局。方法分析2例少数民族圆头精子症患者的临床资料和各种精液检查参数,观察精子超微结构,并利用全外显子检测技术和qPCR检测分析患者的遗传学病因,采用卵胞质内单精子注射联合卵母细胞激活技术(ICSI+AOA)进行辅助生殖治疗,并观察其助孕结局。结果2例患者均存在DPY19L2基因109681 bp纯合缺失,其中P2患者的DPY19L2基因缺失来源于近亲结婚的父母。P1患者精子活力低下,精子DNA碎片率高,精子形态为100%圆头精子,电镜下发现精子顶体缺失,同时存在质膜、线粒体和微管等超微结构缺陷;P2患者精子活力及精子DNA碎片率均正常,精子形态为100%圆头精子,电镜下观察发现精子主要缺陷为头部小而圆伴随顶体缺失,质膜、线粒体和微管等细胞器结构损伤与超微结构缺陷少见。2例患者夫妇均接受ICSI+AOA助孕,ICSI受精率P1患者夫妇为62.5%,P2患者夫妇为75%,均成功获得临床妊娠。结论DPY19L2基因异常在不同民族背景的圆头精子症患者中都是主要的致病遗传学原因。圆头精子可同时存在质膜、线粒体和微管等细胞器结构损伤与超微结构缺陷。ICSI+AOA是圆头精子症患者的有效辅助生殖治疗。

1695例不同程度少精子症、无精子症患者的染色体遗传学差异分析

目的分析不同程度少精子症、无精子症患者的染色体遗传学特征,探讨染色体核型分析及Y染色体微缺失检查与少精子症、无精子症严重程度及男性不育的关系。方法选取2018年1月至2023年12月首都医科大学附属北京妇产医院收治的1695例少精子症、无精子症男性患者作为研究对象,抽取外周血进行高分辨染色体核型分析,其中590例中度、重度、极度少精子症及无精子症患者同时筛查Y染色体微缺失。结果1695例筛查染色体核型异常355例,占22.36%;其中染色体结构异常44例,数目异常22例,多态性289例。590例中度、重度、极度少精子症及无精子症患者Y染色体微缺失17例(2.88%)。138例无精子症中克氏征11例(7.97%),Y染色体微缺失17例(12.32%)。结论少精子症、无精子症患者出现染色体异常比例高于一般人群。少精子症、无精子症的发生可能与某些常见的染色体核型多态性相关;随着测序技术的展开,基因病可能是少精子症、无精子症的第一遗传因素。

分阶段聚焦护理模式对重度少弱精子症患者焦虑抑郁和卵胞浆内单精子显微注射结局的影响

目的探讨分阶段聚焦护理模式对患者焦虑抑郁和卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)结局的影响。方法选取2020年6月至2022年6月在福建省妇幼保健院接受ICSI助孕的140例重度少弱精子症患者作为研究对象。采用随机数字表法,将患者分为对照组(70例)和试验组(70例)。对照组接受常规模式护理,试验组采用分阶段聚焦模式护理。比较两组在情绪变化、满意度和ICSI结局方面的差异。结果试验组护理后的抑郁自评量表(SDS)和焦虑自评量表(SAS)评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组护理总满意度高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组的临床妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论分阶段聚焦护理模式能够显著提升重度少弱精子症患者治疗满意度,有利于积极改善情绪状态,且不会影响ICSI的妊娠结局。

哺乳动物精子编码与非编码RNAs的研究进展

在哺乳动物中,精子发生意味着圆形精子进行细胞分化,会导致其大部分细胞质的流失,之后变成从生精上皮向附睾移动的精子,在附睾发生进一步的成熟变化,包括核基因组的压缩,这导致人们最初普遍认为,精子RNA是精子发生过程中产生的残余物,其在受精和早期胚胎发育中的作用十分有限。而通过对比马的精子和睾丸表明,精子RNA的所有组成部分不是随机的精子发生残余物,而是选择性保留和功能一致的RNA集合。成熟的精子携带数千种RNA,包括信使RNA(mRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)、微小RNA(miRNA)、转移RNA(tRNA)、核糖体RNA(rRNA)和小非编码RNA(sncRNA)等,人们也逐渐发现精子RNA可能在精子发生与功能、受精、胚胎发育、建立和维持有活力的父系基因组、激活卵母细胞基因组、调节父系基因在雌性生殖系统中的表达,以及在妊娠过程中发挥积极作用,还可能影响后代的表型。

小豆蔻明对精液中的巨噬细胞及抗精子抗体影响的研究

目的研究精液中的巨噬细胞及抗精子抗体阳性对精子质量的影响,探索小豆蔻明能否通过作用于精液中的巨噬细胞及抗精子抗体而发挥保护精子的作用。方法用Percoll梯度离心法得优质精子,将其与不同浓度的巨噬细胞共培养,筛选出对精子有损伤的巨噬细胞浓度范围;再将含有该损伤浓度范围的巨噬细胞、抗精抗体阳性的精子悬液,分别单独及两者均有与一定量的小豆蔻明共培养,观察结果。结果加有巨噬细胞且浓度达0.6×106/ml及以上的精子悬液组(高浓度组)精子的存活时间明显比空白组(精子悬液组)短;含有高浓度巨噬细胞的抗精子抗体阳性精子悬液组与空白组比较,精子的存活时间显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。小豆蔻明对巨噬细胞、抗精子抗体及两者结合对精子的损伤有保护作用,可提升精子存活率(P<0.01)、减少精子DNA碎片率及畸形率(P<0.05)。结论一定浓度巨噬细胞、抗精子抗体及两者共存可以明显降低精子存活数目;初步研究表明,小豆蔻明可逆转巨噬细胞及抗精子抗体对精子的损伤作用。

Y染色体AZFc区缺失患者使用睾丸取精精子与射出精子行ICSI的结局比较

目的 比较Y染色体长臂无精子症因子(AZF)c区缺失患者使用新鲜射出精子与睾丸取精精子行卵胞浆内单精子注射(ICSI)后的受精情况和妊娠结局。方法 采用回顾性队列研究,分析2017年1月至2022年12月因AZFc区缺失于西北妇女儿童医院行自精ICSI助孕患者的临床资料。根据女方取卵日男方不同取精方式分为两组:男方行睾丸手术取精的患者纳入睾丸取精组(n=68),男方新鲜射出精子的患者纳入对照组(n=242),比较两组的一般资料和ICSI结局。结果 睾丸取精组的男方LH水平显著高于对照组(P<0.05)。两组间的卵裂数、双原核(2PN)数、可用胚胎数、优质胚胎数比较均无显著性差异(P>0.05);睾丸取精组的囊胚形成数显著低于对照组(P<0.05)。睾丸取精组、对照组的首个新鲜移植周期数分别为30个周期和125个周期,睾丸取精组的受精率、正常受精率、卵裂率、可用胚胎率、囊胚形成率均显著低于对照组(P<0.05),两组间的种植率、临床妊娠率、流产率及活产率比较均无显著性差异(P>0.05)。单因素Logistic分析结果显示,取精方式与受精率、正常受精率、可用胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率、种植率、临床妊娠率、流产率及活产率不具有显著关联性(P>0.05),但会显著影响卵裂率[OR=2.62,95%CI(0.87,4.36),P=0.003];多因素Logistic回归分析显示,在校正囊胚形成数及男方LH水平这两个混杂因素后,对照组的卵裂率仍显著高于睾丸取精组[OR=-3.002,95%CI(-5.182,-0.821),P=0.007]。结论 对于AZFc区缺失患者,相较于新鲜射出精子,采用睾丸取精精子行ICSI时的卵裂率明显降低,虽然二者的妊娠结局没有明显差异,但考虑到手术取精的风险及经济成本,仍建议优先选择射精精子来进行ICSI。

己酮可可碱对冷冻前后精子的影响

目的分析不同浓度的己酮可可碱对体外精液中精子的活力、活率、运动功能等的影响,为体外受精技术提供依据。方法将30例精液标本进行分组,添加不同浓度的己酮可可碱,终浓度分别为0、0.6、1.2、2.4、3.6 mmol/L,通过程序降温仪冷冻精子后转移到液氮中保存24 h,然后进行复苏操作。用计算机辅助精子分析仪检测精子冷冻前和复苏后的各项参数。结果添加己酮可可碱后不会对精液的浓度产生影响,能够显著提高精子复苏率、精子活力、活率、运动功能,并且各项的增幅随着己酮可可碱浓度的增加而逐渐提高。这种提高作用在精子冷冻前后均有体现。结论己酮可可碱的终浓度为3.6 mmol/L时,改善精液各项参数作用效果最好,临床应用时可以此浓度作为参考依据。

疏肝补肾毓麟汤通过Keap1/Nrf2/GPX4通路抑制睾丸细胞铁死亡改善肝郁肾虚型少弱精子症小鼠的精子质量

目的探讨疏肝补肾毓麟汤改善肝郁肾虚型少弱精子症小鼠生精功能和精子质量的作用及其可能机制。方法60只雄性KM小鼠,随机分为空白组、模型组、疏肝补肾毓麟汤高、中、低剂量组和司他丁-1(Ferrostatin-1,Fer-1)组(Fer-1是铁死亡抑制剂)。除空白组外,其余组以1.25 g·kg^(-1)腺嘌呤灌胃(Intragastrical administration,ig.)+慢性束缚刺激构建肝郁肾虚型少弱精子症小鼠模型。给予相应药物干预后:精密天平称取小鼠体质量、睾丸质量、附睾质量计算睾丸指数、附睾指数;苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察睾丸组织病理变化并对睾丸生精功能进行评分;全自动精子分析仪检测精子密度和活动率;苯胺蓝染色法观察精子成熟度;布鲁斯蓝染色法观察睾丸组织铁沉积;免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)检测睾丸组织谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(Recombinant Solute Carrier Family 7 Member 11,SLC7A11)蛋白表达;生化法检测睾丸组织超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测睾丸组织Kelch-样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein-1,Keap1)、核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、GPX4、SLC7A11蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠睾丸指数、附睾指数、睾丸生精功能、精子密度及活动率、精子成熟度均显著下降(P<0.05,P<0.01);经疏肝补肾毓麟汤及Fer-1干预后,上述指标均有显著改善(P<0.05,P<0.01),且睾丸组织铁沉积显著降低,Keap1表达显著降低,Nrf2、SLC7A11、GPX4表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论疏肝补肾毓麟汤能明显改善肝郁肾虚型少弱精子症,其机制可能与调控Keap1/Nrf2/GPX4信号通路抑制睾丸细胞铁死亡有关。